miRNA-30c-5p与急性冠脉综合征PCI术后发生对比剂肾病的相关性

目的分析miRNA-30c-5p与急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)经皮冠状动脉介入术(percutaneous coronary intervention,PCI)后发生对比剂肾病(contrast-induced nephropathy,CIN)的相关性。方法选择2020年10月—2021年12月济南市第八人民医院心内科、CCU及ICU住院的急性冠脉综合征并行PCI患者553例。根据PCI术后对比剂肾病发生情况将患者分为非CIN组(499例)和CIN组(54例)。比较两组患者miRNA-30c-5p表达差异。采用Pearson相关分析miRNA-30c-5p与sCr、eGFR的关系。绘制ROC曲线评价miRNA-30c-5p对PCI术后CIN的预测价值。结果术前两组患者miRNA-30c-5p血清表达水平差异无统计学意义(t=0.171,P=0.864)。术后非CIN组患者miRNA-30c-5p血清表达水平(1.15±0.46)pg/mL明显低于CIN组患者(3.19±0.71)pg/mL,差异有统计学意义(t=29.084,P<0.01)。miRNA-30c-5p与sCr呈正相关(r=0.657,P<0.01),与eGFR呈负相关(r=-0.812,P<0.01)。miRNA-30c-5p预测ACS患者行PCI术后发生CIN的ROC曲线下面积为0.883。结论miRNA-30c-5p与急性冠脉综合征PCI术后发生CIN具有相关性,可以预测CIN的发生。

2型糖尿病患者血清hsa-miR-30c-5p水平表达对微血管并发症的预测价值研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者血清人微小核糖核酸(homo sapiensmicroRNA,hsa-miR)-30c-5p表达对微血管并发症的预测价值。方法选取2021年5月~2022年9月巴中市中心医院收治的T2DM患者205例为糖尿病组,并根据患者微血管并发症情况将糖尿病组进一步分为并发组(n=124)和未并发组(n=81),另选取同期健康体检者205例为对照组,均采用逆转录-聚合酶链反应(reverse transcriptionpolymerasechain reaction,RT-PCR)检测受试者血清hsa-miR-30c-5p表达并进行比较。采用多因素Logistic回归分析影响微血管并发症的因素,绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线预测血清hsa-miR-30c-5p表达对T2DM患者发生微血管并发症的价值。结果并发组、未并发组的血清hsa-miR-30c-5p表达分别为0.58±0.06,0.72±0.08,均低于对照组(0.89±0.21),差异具有统计学意义(t=16.038,7.079,均P=0.001);并发组低于未并发组,差异具有统计学意义(t=14.289,P=0.001)。糖尿病病程[OR(95%CI):3.873(2.976~4.770)]、尿酸[OR(95%CI):2.125(1.211~3.040)]、糖化血红蛋白[OR(95%CI):2.680(1.745~3.616)]均为T2DM患者发生微血管并发症的独立危险因素(均P<0.05),葡萄糖目标范围内时间[OR(95%CI):0.491(0.135~0.846)]、血清hsa-miR-30c-5p[OR(95%CI):0.532(0.146~0.817)]均为T2DM患者发生微血管并发症的保护因素(均P<0.05)。血清hsa-miR-30c-5p表达预测T2DM患者发生微血管并发症的敏感度、特异度、曲线下面积(95%置信区间)分别为81.45%,85.19%,0.802(0.741~0.854)。结论T2DM患者血清hsa-miR-30c-5p表达异常降低,且血清hsa-miR-30c-5p为T2DM患者发生微血管并发症的保护因素,对T2DM患者发生微血管并发症具有一定的预测价值。

长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2/微小RNA-30c-5p/丝裂原活化蛋白激酶1轴在食管癌细胞紫杉醇耐药中的作用机制实验研究

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)/微小RNA(miR)-30c-5p/丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)轴在食管癌细胞紫杉醇(PTX)耐药中的作用机制。方法:构建EC109/PTX细胞,检测食管癌组织和癌旁正常组织,以及食管癌细胞EC109和KYSE150细胞、食管上皮细胞SHEE和EC109/PTX细胞DLEU2、miR-30c-5p、MAPK1 mRNA表达。取生长良好的EC109/PTX细胞,分为沉默(siRNA)DLEU2组、阴性对照(siRNA NC)组、siRNA DLEU2+miR-30c-5p抑制剂(inhibitor)组、siRNA DLEU2+inhibitor NC组、siRNA DLEU2+过表达(pcDNA)MAPK1组、siRNA DLEU2+pcDNA NC组和空白组。验证miR-30c-5p与DLEU2、MAPK1的靶向关系。检测各组EC109/PTX细胞DLEU2、miR-30c-5p、MAPK1 mRNA表达水平。检测EC109/PTX细胞活性、凋亡情况及对PTX的耐药性。检测谷胱甘肽S-转移酶π(GST-π)、MAPK1、P-蛋白(P-gp)蛋白表达水平。结果:食管癌组织和EC109/PTX细胞miR-30c-5p表达降低,DLEU2、MAPK1 mRNA表达增加(均P<0.05)。DLEU2靶向调控miR-30c-5p,miR-30c-5p靶向调控MAPK1。siRNA DLEU2组miR-30c-5p表达和细胞凋亡率较siRNA NC组、空白组增加,DLEU2和MAPK1 mRNA表达、细胞增殖率、药物半数抑制浓度(IC 50)以及GST-π、MAPK1、P-gp蛋白表达降低(均P<0.05)。siRNA DLEU2+miR-30c-5p inhibitor组miR-30c-5p表达和细胞凋亡率较siRNA DLEU2+inhibitor NC组降低,MAPK1 mRNA表达、细胞增殖率、IC 50以及GST-π、MAPK1、P-gp蛋白表达增加(均P<0.05)。siRNA DLEU2+pcDNA MAPK1组细胞凋亡率较siRNA DLEU2+pcDNA NC组降低,MAPK1 mRNA表达、细胞增殖率、IC 50以及GST-π、MAPK1、P-gp蛋白表达增加(均P<0.05)。结论:干扰lncRNA DLEU2可减弱EC109/PTX细胞对PTX的耐药性,可能与调控miR-30c-5p/MAPK1轴有关。

血清miR-30c-5p和NLGN1联合检测对腹腔镜结直肠癌根治术患者术后复发转移的预测价值

目的:探讨血清微小核糖核酸-30c-5p(miR-30c-5p)和神经角质蛋白1(NLGN1)联合检测对腹腔镜结直肠癌根治术后复发转移的预测价值。方法:选取2021年8月—2022年8月进行腹腔镜结直肠癌根治术的结直肠癌患者112例为病例组,并根据患者术后12个月内是否复发转移分为复发组(n=28)和未复发组(n=84);另选同期进行体检的正常志愿者92例为对照组。qRT-PCR检测血清miR-30c-5p、NLGN1 mRNA水平,多因素Logistic回归分析患者术后复发转移的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-30c-5p、NLGN1 mRNA对患者术后复发转移的预测价值,Pearson法分析miR-30c-5p与NLGN1 mRNA相关性。结果:病例组miR-30c-5p水平显著低于对照组(P<0.05),NLGN1 mRNA水平显著高于对照组(P<0.05);与未复发组相比,复发组miR-30c-5p水平显著降低(P<0.05),NLGN1 mRNA水平显著升高(P<0.05),且未复发组与复发组的组织分化程度之间差异有统计学意义(P<0.05);组织低分化、NLGN1 mRNA水平升高为术后复发转移的危险因素(P<0.05),miR-30c-5p水平升高为术后复发转移的保护因素(P<0.05);血清miR-30c-5p、NLGN1 mRNA及联合预测患者术后发生复发转移的AUC为0.823、0.823、0.902,联合预测显著优于miR-30c-5p(Z=2.031,P=0.042)、NLGN1 mRNA(Z=2.239,P=0.025)单独预测;miR-30c-5p与NLGN1 mRNA水平具有负相关性(r=-0.436,P<0.05)。结论:在腹腔镜结直肠癌根治术后复发转移患者中,miR-30c-5p水平降低,NLGN1 mRNA水平升高,对患者术后复发转移具有一定的辅助预测价值。

miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响

目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p mimics)、NC-mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-mimics)、miR-30c-5p inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p inhibitor)、NC-inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-inhibitor)。qRT-PCR检测各组细胞miR-30c-5p表达;Transwell小室检测细胞侵袭数目;划痕试剂盒检测细胞划痕愈合率;相关试剂盒检测ROS水平;免疫印记检测PEG10、Parkin、PINK1蛋白水平。结果空白组、低氧组、miR-30c-5p mimics组、NC-mimics组、miR-30c-5p inhibitor组及NC-inhibitor组的miR-30c-5p表达分别为1.00±0.00、1.00±0.00、1.61±0.15、1.03±0.13、0.75±0.08及0.96±0.10,差异有统计学意义(F=45.750,P<0.05);与空白组相比,低氧组HTR-8/SVneo细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧组与NC-mimics组、NC-inhibitor组比较上述指标,差异均无统计学意义(P>0.05);与低氧组相比,miR-30c-5p mimics组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05),miR-30c-5p inhibitor组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1升高,ROS降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-30c-5p可加快低氧状态下的人绒毛滋养层细胞侵袭及迁移,并通过促进线粒体自噬降低ROS表达,机制与抑制PEG10水平相关。

LINC00707靶向miR-30c-5p对ox-LDL诱导的人血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症因子的影响

目的探讨LINC00707对氧化型低密度脂蛋白(oixidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的人血管平滑肌细胞功能障碍的影响及其作用机制。方法采用ox-LDL诱导人血管平滑肌细胞HVSMCs建立动脉粥样硬化细胞模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-30c-5p mimic分别转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞,si-LINC00707和anti-miR-NC、si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor分别共转染至HVSMCs后,加入100 mg·L-1 ox-LDL处理细胞;qRT-PCR法检测LINC00707、miR-30c-5p的表达量;CCK-8法、Transwell实验分别检测细胞增殖及迁移;ELISA法检测IL-6、TNF-α、IL-10的水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00707与miR-30c-5p的靶向关系;Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达量。结果ox-LDL诱导的HVSMCs中LINC00707的表达量升高(P<0.05),miR-30c-5p的表达量降低(P<0.05);转染si-LINC00707或miR-30c-5p mimic后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平降低(P<0.05),迁移细胞数减少(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平升高(P<0.05);LINC00707可靶向结合miR-30c-5p;共转染si-LINC00707和miR-30c-5p Inhibitor后,细胞存活率、N-cadherin蛋白水平和IL-6、TNF-α的水平升高(P<0.05),迁移细胞数增多(P<0.05),E-cadherin蛋白水平和IL-10的水平降低(P<0.05)。结论下调LINC00707导致miR-30c-5p表达升高从而抑制ox-LDL诱导的HVSMCs增殖、迁移及炎症反应。

miR-30c-5p通过调节Notch1的表达抑制人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移、侵袭和管状形成

目的:探讨miR-30c-5p通过调节Notch1表达对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo迁移、侵袭和管状形成调控的机制,确定其在子痫前期发病中的潜在作用。方法:在体外对人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo进行培养,慢病毒系统构建miR-30c-5p过表达及敲低稳转HTR-8/SVneo细胞系。分为对照组、导入miR-30c-5p过表达质粒组和导入miR-30c-5p敲低质粒组。通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-30c-5p和Notch1基因的表达量,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中Notch1蛋白的表达量,划痕愈合实验、Transwell侵袭实验和管状形成实验分别检测各组细胞的迁移、侵袭和管状形成能力。结果:与对照组比较,miR-30c-5p过表达质粒组中细胞的miR-30c-5p基因表达水平升高(P<0.0001),细胞Notch1蛋白表达水平下降(P<0.01),细胞迁移(P<0.01)、侵袭(P<0.001)和管状形成能力(P<0.05)均受到抑制。反之,miR-30c-5p敲低质粒组中细胞的miR-30c-5p基因表达水平下降(P<0.01),细胞Notch1蛋白表达升高(P<0.001),细胞的迁移(P<0.01)、侵袭(P<0.05)以及细胞的管状形成能力(P<0.01)增强。结论:miR-30c-5p能够通过抑制Notch1的表达降低人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SVneo的迁移、侵袭和管状形成能力,参与子痫前期的发病。

circ_POLA2靶向miR-30c-5p对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

目的:探讨circ_POLA2对胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其可能作用机制。方法:qRT-PCR法检测胃癌组织与癌旁组织中circ_POLA2、miR-30c-5p的表达量;Pearson法分析circ_POLA2与miR-30c-5p在胃癌组织中表达量的相关性;体外培养人胃癌细胞HGC-27,根据转染物不同进行分组:si-NC组、si-circ_POLA2组、miR-NC组、miR-30c-5p组、si-circ_POLA2+NC-inhibitor组、si-circ_POLA2+miR-30c-5p-inhibitor组;CCK-8法、Transwell实验依次检测细胞增殖及迁移、侵袭;双荧光素酶实验检测miR-30c-5p与circ_POLA2的靶向关系;免疫印迹法检测蛋白PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、MMP-2、MMP-9表达。结果:与癌旁组织比较,胃癌组织中circ_POLA2的表达量升高,miR-30c-5p的表达量降低;circ_POLA2与miR-30c-5p的表达呈负相关;与si-NC组比较,si-circ_POLA2组miR-30c-5p的表达量升高,细胞存活率、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均降低;miR-30c-5p过表达可抑制野生型circ_POLA2的荧光素酶活性;与miR-NC组比较,miR-30c-5p组的细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均降低;与si-circ_POLA2+NC-inhibitor组比较,si-circ_POLA2+miR-30c-5p-inhibitor组的细胞存活率、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平和p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值以及迁移、侵袭细胞数均升高。结论:干扰circ_POLA2可通过靶向上调miR-30c-5p表达,抑制PI3K/AKT通路的激活,进而抑制胃癌细胞增殖、迁移及侵袭。

miR-30 c-5p在肿瘤中表达和功能的研究进展

miR-30 c-5p是miR-30家族的重要成员,研究表明其在肺癌、乳腺癌、前列腺癌、子宫内膜癌等多种肿瘤组织以及患者血浆、血清中表达异常,并且其作用于肿瘤的增殖、侵袭和迁移以及多种肿瘤相关基因和通路等,暗示其在肿瘤诊断、治疗、监测和预后预测等方面有一定的应用价值。本文就miR-30 c-5p在肿瘤中表达和功能的研究进展进行简要综述。

血清外泌体miRNA-30a-5p在人脑胶质瘤诊断及预后评价中的作用

目的探讨胶质瘤病人血清外泌体miRNA-30a-5p的表达水平,及其在胶质瘤诊断及预后评估中的价值。方法选取2014年1月至2015年12月收治的胶质瘤60例为研究对象,另选取健康体检者40例为对照。RT-PCR检测血清外泌体miRNA-30a-5p表达水平。用受试者工作特性(ROC)曲线分析miRNA-30a-5p诊断胶质瘤的价值。用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用log-rank检验;多因素Cox比例风险回归模型分析预后危险因素。结果胶质瘤病人血清外泌体miRNA-30a-5p表达水平明显高于健康人(P<0.001)。ROC曲线分析显示,血清外泌体miRNA-30a-5p诊断胶质瘤的曲线下面积为0.901(95%CI0.812~0.986),最佳截断值为0.601,此时miRNA-30a-5p诊断胶质瘤的灵敏度和特异度分别为78.05%和93.55%。术后60例均得到有效随访,随访时间平均(28.39±3.25)个月。Kaplan-Meier分析结果显示,血清外泌体miRNA-30a-5p低表达病人总体生存时间高于高表达病人(P<0.001)。多因素Cox比例回归风险模型分析结果显示血清外泌体miRNA-30a-5p高表达是胶质瘤病人不良预后的独立影响因素(P<0.05)。结论血清外泌体miRNA-30a-5p对胶质瘤的诊断和预后评价均有一定价值。

急性缺血性脑卒中患者血清miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平表达检测的诊断价值研究

目的探究急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平表达检测的诊断价值。方法选取西安医学院第一附属医院急诊科2019年5月~2020年3月收治的65例AIS患者为病例组,另选同期50例体检健康者为对照组。比较两组的糖尿病史、高血压史和高血脂史,采用实时灾光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a的水平。采用美国国立卫生院卒中量表(NIH stroke scale,NIHSS)评估AIS患者的神经功能缺损程度。采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)计算miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a的AIS诊断价值。结果两组的糖尿病史、高血压史和高血脂史比较差异无统计学意义(P>0.05)。相比于对照组,病例组血清中miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平均升高,其差异具有统计学意义(t=20.700,25.997,23.629,均P=0.000)。Pearson相关性分析结果显示,血清中miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a水平与NIHSS评分均呈显著正相关,其差异具有统计学意义(r=0.272,P<0.001;r=0.142,P=0.005;r=0.171,P=0.013)。miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a联合检测诊断AIS的灵敏度和特异度分别为71.2%和76.4%,高于三项单独和两两联合检测。结论miRNA-181c-5p,miRNA-340-5p和miRNA146a三者联合检测可进一步提高AIS患者的诊断率,为临床应用提供了可靠的理论基础。

CRP cTnT TSLP miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛患者冠状动脉病变严重程度关系

目的:探讨C反应蛋白(CRP)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛(SAP)患者冠状动脉病变严重程度的关系。方法:回顾性分析2016年5月至2019年5月间医院收治的经冠状动脉造影(CAG)证实的90例SAP患者的临床资料,根据SYNTAX评分分为轻度组(0~22分,41例)、中度组(23~32分,32例)、重度组(≥33分,17例)。收集三组患者的临床资料,采血检测三组患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平,三组患者的冠状动脉病变严重程度用SYNTAX评分评估,用Pearson相关性分析CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平与SYNTAX评分的关系。结果:三组患者的CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平及SYNTAX评分比较,差异均具有统计学意义(P均<0.05),两两对比LSD-t检验,差异均具有统计学意义(P均<0.05)。Pearson相关性分析显示,CRP、cTnT、TSLP与SYNTAX评分均呈显著正相关(P<0.01),而miR-30c-5p与SYNTAX评分呈显著负相关(P<0.01)。结论:CRP、cTnT、TSLP、miR-30c-5p水平与稳定型心绞痛患者冠状动脉病变严重程度存在相关性,早期检测以上生物学标志物有助于判断稳定性心绞痛患者的冠状动脉病变严重程度。

TPT1-AS1靶向调控微小RNA-30c-5p及对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA肿瘤蛋白翻译调节因子1反义RNA 1(TPT1-AS1)对微小RNA-30c-5p(miR-30c-5p)的靶向调控作用及对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测结直肠癌组织相较于癌旁组织及结直肠癌细胞(DLD-1、HCT116、SW480和LoVo)相较于人正常结肠上皮细胞HCoEpiC的TPT1-AS1水平。脂质体法向LoVo细胞转染TPT1-AS1特异性siRNA(si-TPT1-AS1组)并设转染si-NC的阴性对照组和未转染的空白对照组,qPCR检测TPT1-AS1和miR-30c-5p水平,MTT比色法、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞活性、划痕愈合率和穿膜细胞数,qPCR和Western blotting检测基质金属蛋白酶3(MMP-3)和信号转导和转录激活因子3(STAT3)及其磷酸化形式p-STAT3的水平,在线预测并结合双荧光素酶报告实验验证miR-30c-5p与TPT1-AS1的相互作用关系。结果与癌旁组织相比,结直肠癌组织的TPT1-AS1水平升高至2.020±0.080,而miR-30c-5p水平降低至0.597±0.044(P<0.05),且结直肠癌组织的TPT1-AS1水平与miR-30c-5p水平呈负相关(r=-0.801,P<0.001)。4株结直肠癌细胞的TPT1-AS1水平均表现为异常高表达(P<0.05),功能验证实验选择TPT1-AS1表达最高的LoVo细胞。与空白对照组和阴性对照组相比,si-TPT1-AS1组LoVo细胞活力减弱,TPT1-AS1水平降低而miR-30c-5p水平升高(P<0.05)。si-TPT1-AS1组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(18.650±3.346)%和(108.326±17.383)个,均低于空白对照组的(90.963±4.328)%和(275.675±21.078)个及阴性对照组的(93.165±4.317)%和(281.431±23.880)个(P<0.05)。与空白对照组和阴性对照组相比,si-TPT1-AS1组的STAT3水平无显著变化,而p-STAT3和MMP-3水平降低(P<0.05)。MiR-30c-5p模拟物降低了野生型TPT1-AS1的荧光素酶活性(P<0.05),而不影响突变型TPT1-AS1的荧光素酶活性。空白对照组和阴性对照组上述指标的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论结直肠癌中TPT1-AS1高表达,且增强了结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,TPT1-AS1可能通过靶向miR-30c-5p来发挥促癌作用。TPT1-AS1的发现为结直肠癌的诊治和预后评估及下一步的转化研究提供了新的思路。

CircRNA EZH2通过调控miR-30c-5p促进前列腺癌细胞增殖和迁移

目的探究circRNA EZH2通过调控miR-30c-5p对前列腺癌细胞的增殖和迁移的影响及其相关作用机制。方法通过TCGA数据库分析circRNA EZH2在前列腺癌组织中的表达差异及生存曲线;转染siRNA敲降前列腺癌LNCaP细胞中的circRNA EZH2表达后,CCK-8实验和划痕实验观察LNCaP细胞增殖和迁移,RT-qPCR和Western blot法测定miR-30c-5p、JAK1和PI3K蛋白的表达。结果在前列腺癌组织中circRNA EZH2的表达显著上调(P<0.0001),且高表达circRNA EZH2的患者生存率降低;沉默circRNA EZH2的LNCaP细胞较正常LNCaP细胞的增殖和迁移能力下降(P<0.0001),miR-30c-5p表达增高(P<0.0001),JAK1表达降低(P<0.0001),PI3K信号受抑制。结论EZH2在前列腺癌中高表达,通过调控miR-30c-5p激活PI3K信号通路促进前列腺癌LNCaP细胞的增殖和迁移。

miRNA-30e-5p抑制骨肉瘤细胞增殖、转移的机制研究

目的观察miRNA-30e-5p对骨肉瘤U2OS细胞增殖和转移能力的影响及其分子机制。方法 qRT-PCR检测骨肉瘤组织和癌旁正常组织、人成骨h FOB细胞和骨肉瘤U2OS、Saos-2、MG-63细胞中miRNA-30e-5p的表达水平。通过脂质体转染构建U2OS细胞miRNA-30e-5p过表达模型和miRNA-30e-5p敲低模型,用克隆形成和CCK-8实验检测不同处理组细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞转移能力。Targetscan网站在线预测miRNA-30e-5p的下游靶基因并通过Western blot验证。Western blot检测miRNA-30e-5p对E-cadherin和N-cadherin蛋白表达的影响。结果与癌旁正常组织比较,miRNA-30e-5p在骨肉瘤组织中低表达(P<0.05);与人成骨h FOB细胞相比,miRNA-30e-5p在骨肉瘤细胞中低表达(P<0.05)。过表达miRNA-30e-5p降低骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力(P<0.05)。敲低miRNA-30e-5p表达增加骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力(P<0.05)。生物信息学预测USP22为miRNA-30e-5p的下游靶基因。过表达miRNA-30e-5p抑制USP22蛋白表达,敲低miRNA-30e-5p促进USP22蛋白表达。miRNA-30e-5p能降低E-cadherin蛋白表达、升高N-cadherin蛋白表达。结论 miRNA-30e-5p能够抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、转移能力,其机制可能与抑制USP22蛋白表达相关。

结直肠癌患者血清miRNA-497、miRNA-30a-5p的表达及临床意义

目的探讨结直肠癌患者血清miRNA-497、miRNA-30a-5p的表达及临床意义。方法选取120例结直肠癌患者作为观察组,另选取120例同时期进行健康体检的健康者作为对照组,检测两组研究对象血清miRNA-497、miRNA-30a-5p相对表达量,分析其相对表达量与临床特征的关系。采用Pearson相关分析法分析临床特征与血清miRNA-497、miRNA-30a-5p相对表达量的相关性。结果观察组患者血清miRNA-497、miRNA-30a-5p相对表达量均明显低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移情况结直肠癌患者血清miRNA-497相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01);不同分化程度、TNM分期、浸润深度及淋巴结转移、脉管浸润情况结直肠癌患者血清miRNA-30a-5p相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-497相对表达量与淋巴结转移、TNM分期、分化程度、浸润深度均呈负相关(P﹤0.05),miRNA-30a-5p相对表达量与淋巴结转移、TNM分期、分化程度、脉管浸润、浸润深度均呈负相关(P﹤0.05)。结论结直肠癌患者血清miRNA-497、miRNA-30a-5p呈异常表达,其水平高低可反映病情严重程度和肿瘤恶性情况,可作为临床诊断的指标。

子痫前期miR-30c-5p和Notch1的表达及相关性

目的探讨miR-30c-5p和Notch1在子痫前期(PE)患者胎盘中的表达及其相关性。方法选取中国人民解放军联勤保障部队第九六〇医院产科2021年1月至12月行剖宫产分娩的产妇60例,正常妊娠组20例,中度PE组20例,重度PE组20例。采用荧光定量PCR和免疫组织化学分别检测胎盘组织中miR-30c-5p和Notch1的表达水平;采用SPSS 25.0统计学软件分析数据;采用Pearson相关性分析检测miR-30c-5p与Notch1的相关性;采用ROC曲线分析miR-30c-5p与Notch1对疾病诊断的特异性。结果与正常妊娠组比较,中度PE组和重度PE组miR-30c-5p表达水平均显著升高(P<0.05),重度PE组miR-30c-5p表达水平较中度PE组有升高趋势。与正常妊娠组比较,中度PE组和重度PE组胎盘组织中Notch1表达水平均显著降低(P<0.05);且PE越重,胎盘组织中Notch1表达水平越低。miR-30c-5p与Notch1的表达呈明显负相关(r=-0.484,P<0.001)。miR-30c-5p诊断PE的AUC为0.625,诊断性能较好,但差异无统计学意义;Notch1诊断PE的AUC为0.914,诊断效能为优,其表达值对PE的诊断有意义。结论胎盘滋养细胞中miR-30c-5p负向调控靶基因Notch1,从而抑制滋养细胞的增殖、浸润,导致胎盘灌注不足,从而参与并加重PE的发生。

基于miRNA-30b-5p/TLR4/NF-κB轴探究针灸改善大鼠膝骨关节炎损伤的实验研究

目的:探究基于miRNA-30b-5p/TLR4/NF-κB轴针灸治疗膝骨关节炎(KOA)损伤大鼠的疗效。方法:40只大鼠随机分为5组(n=8):正常组、模型组、单一针灸治疗组、针灸+miRNA-30b-5p-mimics联合治疗组以及针灸+siRNA-TLR4联合治疗组。经过4周的治疗后,采用HE染色观察膝关节软骨组织病理变化;ELISA法检测各组大鼠滑膜液中TNF-α、IL-1β、IL-6和MMP-13的分泌水平;qRT-PCR检测软骨组织中miRNA-30b-5p、TLR4和NF-κB的表达水平;Western blot检测软骨组织中TLR4、NF-κB、IL-6和MMP-13蛋白水平的表达;TUNEL染色检测各组大鼠膝骨关节软骨中软骨细胞凋亡情况;双荧光素酶报告试验检测miRNA-30b-5p与TLR4的靶向关系。结果:与模型组比较,单一针灸及联合治疗显著改善了KOA大鼠软骨组织的病理学变化;显著下调了滑膜液中TNF-α、IL-1β、IL-6和MMP-13的分泌水平(P<0.05,P<0.01);显著抑制软骨组织中TLR4、NF-κB、IL-6和MMP-13的表达水平(P<0.05,P<0.01);同时促进miRNA-30b-5p的表达(P<0.01);显著抑制了膝关节软骨中软骨细胞的凋亡。此外,双荧光素酶报告试验证实TLR4为miRNA-30b-5p的靶基因。结论:针灸能显著改善KOA大鼠膝关节软骨组织的病理学变化,缓解炎症反应,抑制膝骨关节中软骨细胞的凋亡,这可能与其对miRNA-30b-5p/TLR4/NF-κB轴的调控密切相关。

肾癌细胞株786-0通过miRNA-30a-5p调节其增殖凋亡及对XIAP表达的影响

目的:探讨miRNA-30a-5p在肾癌细胞中的作用及其机制。方法:将miRNA-30a-5p模拟物及抑制物转染至肾癌786-0细胞。检测miRNA-30a-5p在各组细胞中的表达、细胞增殖能力、细胞凋亡情况及凋亡抑制蛋白(XIAP)表达。结果:miRNA-30a-5p mRNA的表达:模拟物组明显上升,未转染组、抑制物组明显下降;细胞增殖能力:各组均有随时间延长而升高的趋势;模拟物组凋亡率高于抑制物组及未转染组,XIAP蛋白的相对表达量低于抑制物组及未转染组。结论:miRNA-30a-5p过表达并通过靶向XIAP抑制肾癌786-0细胞的增殖,促进细胞凋亡。

血清、尿液中miRNA-150及miRNA-30a-5P对儿童特发性肾病综合征的诊断价值

目的探讨特发性肾病综合征(INS)患儿血清及尿液中miRNA-150和miRNA-30a-5P作为临床诊断标志物的可能性。方法收集2017-01至2019-12在武警特色医学中心诊断的93例未经治疗的INS患儿为患儿组,另选取同期性别、年龄相同的常规健康体检儿童89例为对照组,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miRNA-150及miRNA-30a-5P两组血清及尿液中的含量;ROC曲线等评估其对INS患儿的诊断价值。结果与对照组相比,患儿组血清及尿液中miRNA-30a-5P及血清中miRNA-150水平明显偏高(P<0.05),尿液中miRNA-150水平,差异无统计学意义,其中46例在病情控制或缓解后血清及尿液中miRNA-30a-5P及血清中miRNA-150水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);血清miRNA-150和miRNA-30a-5P诊断INS的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.852、0.869;尿液中miRNA-150和miRNA-30a-5P诊断INS的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.825、0.833。结论INS患儿血清及尿液中miRNA-150及miRNA-30a-5P,可作为辅助诊断INS的分子标志物。