MicroRNA-431-5p在胃癌组织中低表达:基于线粒体和Bax/Bcl-2/caspase3信号通路

目的探究microRNA-431-5p(miR-431-5p)在胃癌细胞的表达特点及其对胃癌细胞凋亡及线粒体功能的影响。方法荧光定量PCR检测miR-431-5p在50例胃癌组织及癌旁组织中的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系。采用脂质体转染技术构建miR-431-5p过表达组细胞(miRNAmimics)及对照组细胞(NCmimics),分别采用CCK-8、流式细胞术、荧光探针标记以及ATP检测试剂盒评估miR-431-5p对MKN-45细胞线粒体数量、膜电位完整性、通透性转换孔开放程度、活性氧生成水平以及ATP含量的影响,Westernblot检测MKN-45细胞内凋亡蛋白表达水平的变化。结果miR-431-5p在胃癌组织中的表达水平较癌旁组织明显下调(P<0.001),其表达水平与患者的肿瘤分化程度(P=0.0227)、T分期(P=0.0184)、N分期(P=0.0005)、TNM分期(P=0.0414)和血管侵犯(P=0.0107)密切相关。细胞功能实验显示:过表达miR-431-5p抑制MKN-45细胞增殖能力并诱导细胞凋亡,miR-431-5p过表达后MKN-45细胞内线粒体数量减少、膜电位完整性下降、通透性转换孔开放程度增加,ROS生成增多,ATP含量降低。Westernbot显示:miR-431-5p过表达后MKN-45细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,而促凋亡蛋白p53、Bax以及cleavedcaspase3表达上调。结论miR-431-5p低表达于胃癌组织,其可能通过介导Bax/Bcl-2/caspase3信号通路,继而抑制胃癌细胞线粒体功能并促进细胞凋亡,是胃癌潜在的治疗靶点。

微小核糖核酸-21和微小核糖核酸-431对肺结核病情发展及预后评估价值研究

目的分析支气管镜检标本微小核糖核酸(microRNA,miRNA)-21、miRNA-431对肺结核病情发展及预后评估价值。方法纳入陕西省结核病防治院2022年5月—2023年7月临床收治43例确诊肺结核患者为研究组,纳入同期43例肺炎患者为对照组,研究组中根据肺部病灶肺野数量分级轻度14例、中度19例、重度10例,根据预后情况分为预后不良和预后良好,比较研究组与对照组、研究组内不同病情严重程度以及研究组内不同预后患者miRNA-21、miRNA-431水平,采用logistic多因素分析影响肺结核疾病发展及预后的因素,建立影响肺结核病情发展及预后的预测模型,通过受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)分析模型预测价值。结果研究组miRNA-21、miRNA-431水平均显著高于对照组,组间差异统计学意义成立(P<0.05);研究组内,病情严重程度与患者miRNA-21、miRNA-431水平成正比,且重度肺结核患者miRNA-21、miRNA-431水平显著高于轻度、中度肺结核患者,组间差异有统计学意义(P<0.05);研究组内,预后不良肺结核患者miRNA-21、miRNA-431水平均显著高于预后良好肺结核患者,组间差异有统计学意义(P<0.05);以miRNA-21、miRNA-431表达为自变量,连续变量;将肺结核病情发展及预后作为因变量进行logistic回归分析。结果显示,miRNA-21、miRNA-431高表达均为肺结核病情发展及预后的影响因素(P<0.05);绘制ROC曲线结果显示,预测模型最佳临界值为0.0895,miRNA-21、miRNA-431和两项联合的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)为0.614(0.651~0.732)、0.671(0.686~0.811)、0.891(0.787~0.993)。结论肺结核患者miRNA-21、miRNA-431水平高表达,与病情发展密切相关,在一定程度上可预测肺结核患者预后,联合诊断综合应用价值高,建议临床推广使用。