miRNA-495及其成熟体调控恶性肿瘤生物学行为研究进展

近年来许多学者对微小RNA(miRNA)作用于肿瘤细胞的效应进行了研究,其中,许多研究表明多种肿瘤细胞中miR-495及其成熟体miR-495-3p或miR-495-5p异常表达,通过调控下游信使RNA、受竞争内源性RNA调控、影响胞内信号通路等多种方式调控肿瘤细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭等多种生物学行为以及影响肿瘤细胞耐受放化疗能力。此外,部分学者表明miR-495及其成熟体与疾病诊断以及预后具有密切关系。因此,本研究对miR-495及其成熟体调控不同肿瘤研究进展作一综述。

过表达miRNA-495联合替莫唑胺对神经胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨过表达微小RNA(miRNA)-495联合替莫唑胺(TMZ)对神经胶质瘤细胞增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将miRNA-495类似物(miRNA-495 mimics)以及阴性对照序列(miRNA-495 NC)应用LipofectamineTM2000转染至神经胶质瘤U251、A172细胞中,并设空白对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测转染后miRNA-495、高迁移率族核小体结合域5(HMGN5)mRNA的相对表达量;Western blot法检测HMGN5及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达水平;CCK-8检测神经胶质瘤细胞的增殖能力。miRNA-495 mimics和TMZ单独或联合作用于U251细胞后,应用CCK-8、流式细胞术检测神经胶质瘤细胞增殖及凋亡情况。结果在神经胶质瘤U251、A172细胞中,与空白对照组和miRNA-495 NC组比较,miRNA-495 mimics组miR-495相对表达量升高,HMGN5mRNA相对表达量及HMGN5、MMP-9蛋白表达量均降低;且细胞增殖能力明显减弱(P<0.05)。在神经胶质瘤U251细胞中,与TMZ组和miRNA-495 mimics组比较,TMZ+miRNA-495 mimics组细胞增殖能力明显被抑制,细胞凋亡明显增加。结论过表达miRNA-495与化疗药物TMZ联合应用可协同抑制神经胶质瘤细胞增殖、促进细胞凋亡;其机制可能是通过抑制HMGN5/MMP-9信号通路实现的。

miRNA-495靶向STYX调节MLL-AF9的急性髓系白血病细胞的增殖和凋亡

目的探究miRNA-495对混合谱系白血病基因(mixed lineage leukemia,MLL)基因重排的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)增殖和凋亡的影响。方法收集2017年8月至2019年5月于宁夏医科大学总医院血液科就医确诊为AML的10例MLL-AF9白血病患者[男性6例,女性4例,年龄(39.37±2.71)岁];10例急性髓系白血病患者[男性5例,女性5例,年龄(41.12±1.92)岁];同时间段于外科门诊就医患者10例[男性6例,女性4例,年龄(42.31±3.21)岁]。根据是否转染miRNA-495 mimic分组为miRNA-495组和Control组,通过RT-qPCR检测各组miRNA-495的表达;CCK-8检测各组转染THP-1细胞的增殖情况;RT-qPCR和Western blot检测各组转染THP-1细胞增殖相关因子(Ki-67和PCNA)和细胞凋亡相关因子(Bcl-2、Bax和Caspase-3)的表达;Target Scan预测miRNA-495的靶基因并用双荧光素酶报告实验验证;RT-qPCR和Western blot检测miRNA-495组(转染miRNA-495)、Control组、丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸相互作用蛋白(Serine/threonine/tyrosine interacting protein,STYX)组(转染STYX)和miRNA-495+STYX组(转染miRNA-495和STYX)中STYX的表达。结果 miRNA-495在MLL-AF9的AML患者中表达下调[MLL-AF9患者相对表达量(0.25±0.08),95%CI:-0.86~-0.65,P<0.01,P<0.001];miRNA-495可以抑制THP-1细胞增殖(P <0.05,P <0.01,P <0.001);miRNA-495可以诱导THP-1细胞的凋亡(P<0.05,P<0.001);miRNA-495靶向结合STYX(P<0.01,P<0.001);STYX过表达可以逆转miRNA-495对THP-1细胞增殖和凋亡的作用(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论 miRNA-495通过靶向STYX调控MLL基因重排的急性髓系白血病细胞的增殖和凋亡。