miRNA-625*在膀胱尿路上皮癌中的表达

目的探讨miRNA-625*在膀胱尿路上皮癌中的差异表达。方法常规提取新鲜膀胱尿路上皮癌与正常膀胱黏膜组织中总RNA;使用分光光度计测定RNA在260 nm、280 nm和230 nm的吸光值,以计算浓度并评估纯度;用琼脂糖凝胶电泳检测RNA纯度及完整性;以RT-PCR方法检测标本中miRNA-625*的表达情况。结果 RNA质量检测合格后,miRNA-625*经RT-PCR验证与miRNA芯片分析结果一致。与正常膀胱黏膜上皮组织相比,膀胱尿路上皮癌中miRNA-625*表达显著上调(P<0.05)。结论 miRNA-625*在膀胱尿路上皮癌中表达上调,可作为膀胱尿路上皮癌诊断和预后判断的分子标志物。

血浆miRNA-155和miRNA-625用于非小细胞肺癌诊断的临床评价

目的:探讨测定患者血浆miRNA-155和miRNA-625表达水平用于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)临床诊断的可行性。方法:应用荧光定量RT-PCR法检测49例NSCLC患者及55例肺部良性疾病患者血浆中miRNA-155和miRNA-625的表达水平。构建受试者工作特征(ROC)曲线,根据这两个miRNAs的ROC曲线下面积判断其诊断NSCLC的效能,并与血清癌胚抗原比较,评价它们在NSCLC诊断中的临床价值。结果:NSCLC患者血浆中miRNA-155的表达水平明显高于肺良性疾病患者(P=0.000),miRNA-625的表达水平则明显低于肺良性疾病患者(P=0.000)。NSCLC患者血浆miRNA-155和miRNA-625的表达水平与肿瘤的临床分期明显相关(P=0.008,0.025),miRNA-625亦与患者性别相关(P=0.024),而与其他临床特征无明显相关性。根据ROC曲线取miRNA-155和miRNA-625用于诊断NSCLC的临界值分别为2.736和0.699,获得诊断的敏感性分别为75.5%和73.4%,特异性分别为74.5%和70.9%。血清癌胚抗原含量诊断NSCLC的敏感性低于血浆miRNA-155和miRNA-625(P=0.004,0.007),特异性相似。结论:血浆miRNA-155和miRNA-625可作为分子标志物用于临床诊断NSCLC。

AKT2 3'-UTR荧光素酶报告基因载体构建及与miRNA-625靶向关系验证

目的:通过构建荧光素酶报告基因重组质粒验证miRNA-625与AKT2基因的靶向调控关系。方法:通过生物信息学软件预测AKT2为miRNA-625靶基因;构建野生型AKT2基因3'端非翻译区荧光素酶报告基因载体及miRNA-625靶序列突变型载体;将HEK-293T细胞株随机分为野生型+miRNA-625组、野生型+miRNA内参组、突变型+miRNA-625组、突变型+miRNA内参组;Lipofectamine 2000转染相应的质粒与miRNA,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性。结果:构建野生型及突变型荧光素酶报告载体鉴定正确,双荧光素酶报告基因检测系统显示野生型+miRNA-625组相对荧光素酶活性较野生型+miRNA内参组明显降低(t=14.176 4,P<0.05)。结论:miRNA-625对野生型AKT2重组质粒荧光活性有明显的抑制作用,证实miRNA-625能够靶向调控AKT2基因。

血浆miRNA-155和miRNA-625测定诊断非小细胞肺癌的临床评价

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)诊断中血浆miRNA-155、miRNA-625测定的临床价值。方法采用回顾性分析,研究对象为2018年1月至2020年1月首都医科大学附属北京世纪坛医院收治的98例NSCLC患者与110例肺部良性疾病患者,分别设定为研究组与对照组。比较2组血浆miRNA-155、miRNA-625表达水平与血清癌胚抗原水平,分析研究组患者血浆miRNA-155、miRNA-625表达与临床病理特征(性别、年龄、TNM分期、分化程度、组织学类型、吸烟)相关性,并比较miRNA-155、miRNA-625、血清癌胚抗原诊断NSCLC的准确性、阴性预测值、阳性预测值、特异度及敏感度。结果研究组血浆miRNA-155、血清癌胚抗原水平为(5.76±3.81)、(6.62±5.41)μg/L,高于对照组[(1.98±1.71)、(3.94±1.53)μg/L],血浆miRNA-625(0.53±0.43)水平低于对照组(1.08±0.61),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组Ⅰ、Ⅱ期患者的血浆miRNA-155表达水平(4.87±3.46)显著低于Ⅲ、Ⅳ期患者(8.52±3.70)(P<0.05);研究组男性患者的血浆miRNA-625表达水平(0.58±0.48)显著高于女性患者(0.34±0.20),且Ⅰ、Ⅱ期患者的血浆miRNA-625表达水平(0.83±0.40)显著高于Ⅲ、Ⅳ期患者(0.45±0.47),差异均有统计学意义(P<0.05)。血浆miRNA-155、miRNA-625诊断NSCLC的敏感度(75.51%、73.47%)显著高于血清癌胚抗原(46.94%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论NSCLC诊断中血浆miRNA-155、miRNA-625测定具有较高的临床价值。