转染miRNA27a抑制物对卵巢癌耐药细胞系顺铂敏感性的研究

目的研究下调miRNA27a对卵巢癌细胞系skov3/DDP顺铂耐药性的影响。方法培养卵巢癌细胞系skov3,使用顺铂诱导,建立卵巢癌顺铂耐药细胞系skov3/DD,MTT法检测细胞耐药系数,Real-time RT-PCR检测miRNA27a在skov3/DDP及skov3中的表达情况,将miRNA27a抑制物转入skov3/DDP,Real-time RT-PCR检测MDR1基因的转录水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Western Blot检测P-gp蛋白表达水平。结果与skov3相比,skov3/DDP耐药系数为5.08;miRNA27a在skov3/DDP中的表达明显上升;转染miRNA27a抑制物之后,与阴性对照相比,skov3/DDP中的MDR1的转录水平无明显差异(P>0.05);但与SKOV3相比,SKOV3/DDP中p-gp蛋白的表达水平明显升高,约为SKOV3的1.5倍(P<0.05),而转染了miRNA27a抑制物之后,SKOV3/DDP中P-gp的蛋白表达水平明显降低,与SKOV3相比,表达量减少了32.7%(P<0.05)。结论 miRNA27a在skov3/DDP中高表达,导致了skov3/DDP对顺铂产生了明显的耐药性,其机制主要是通过在P-gp的翻译水平诱导其耐药性的产生。