小鼠S_(180)肉瘤细胞热损伤的机制研究

目的 通过测定肿瘤细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)及细胞膜脂流动性的变化 ,探讨肿瘤细胞热损伤的机制。方法 对体外培养的小鼠S180 肉瘤细胞进行高温 (4 3℃、60min)处理后 ,利用激光粘附式细胞仪测定肿瘤 [Ca2 + ]i的荧光强度及膜脂扩散系数 ,并观察细胞的形态学变化。结果 受热损伤的肿瘤 [Ca2 + ]i荧光强度为 (10 3 80± 14 0 9) ,比对照组的荧光强度 (94 3 4± 13 99)升高 (P <0 0 1) ;膜脂流动性为 (7 40± 6 84)× 10 -5cm2 /s ,比对照组的 (10 5 3± 6 92 )× 10 -5cm2 /s下降 (P <0 0 1) ;经高温处理后细胞形态学改变明显 ,肉瘤细胞变形、膜皱缩、不规整 ,胞质不均 ,有颗粒状物 ,细胞核散乱、有大量空泡 ,与对照组有明显区别。结论 高温使肿瘤细胞形态发生变化 ,改变了细胞膜的结构 ,导致[Ca2 + ]i升高 ,提示 [Ca2 +

桑黄多糖对肉瘤S180细胞体内外的抑瘤作用

目的:研究桑黄多糖对肉瘤S180细胞体内外的抑瘤作用。方法:选用对数生长期肉瘤S180细胞,加入0(空白对照)、2、4、8 mg/m L的桑黄多糖溶液,分别培养12、24、36、48 h,MTT法测定细胞体外增殖抑制率,荧光染色法观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡率。建立S180细胞荷瘤小鼠模型并随机分为对照组和桑黄多糖高、中、低剂量组(400、200、100 mg/kg),每组10只,每天ig相应药物1次,连续12 d;末次给药24 h后处死小鼠,称瘤质量,计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤组织中抑癌基因PTEN与癌基因C-myc蛋白表达。结果:与空白对照比较,桑黄多糖能增高S180细胞的增殖抑制率,促进其凋亡率升高(P<0.05或P<0.01),且具有浓度与时间依赖性。与对照组比较,桑黄多糖各剂量组小鼠的抑瘤率明显升高(P<0.01),PTEN蛋白表达增强(P<0.05或P<0.01),C-myc蛋白表达减弱(P<0.05)。结论:桑黄多糖具有体内外抑瘤作用,并能上调抑癌基因PTEN和下调癌基因C-myc的蛋白表达。

自然肿瘤红细胞花环试验的建立及临床应用

作者通过对红细胞在无补体存在情况下能直接与Ｓ１８０发生免疫粘附的机理及实验方法进行了研究，从而建立了自然肿瘤红细胞花环试验（ＮＴＥＲＴ）。通过临床应用，该方法具有简便、快速、实用、准确、易于观察等优点，有辅助诊断恶性肿瘤以及其与良性肿瘤的鉴别等作用，适宜于各级医疗单位和科研单位应用。

复方小柴胡汤对荷瘤小鼠NK细胞功能的影响

目的探讨复方小柴胡汤(XCHT)对EAC荷瘤小鼠的免疫功能的影响。方法用3种不同浓度的复方小柴胡汤对EAC荷瘤小鼠灌胃10d,观察其肿瘤生长情况以及用乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞的活性。结果高、中和低浓度组NK细胞活性分别为(44.21±3.10)%,(51.09±4.94)%和(37.30±2.02)%,与空白对照组(31.26±2.79)%比较,NK细胞活性升高(P<0.05),而阴性对照组(26.90±1.84)%NK细胞活性显著降低(P<0.05);高、中和低浓度组的肿瘤质量为(300.6±48.9)mg,(226.5±36.4)mg和(445.9±60.2)mg,与阴性对照组(661.5±102.8)mg比较,均能抑制肿瘤的生长(P<0.05),其中以中浓度组效果最为明显。结论经过复方小柴胡汤灌胃的EAC荷瘤小鼠NK细胞活性均升高,3种不同浓度的复方小柴胡汤均使肿瘤生长减慢。

^(177)Lu-DOTMP在荷瘤小鼠体内的生物分布和兔SPECT显像研究

以1,4,7,10-四氮杂环十二烷和亚磷酸为原料合成了1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四甲撑膦酸(DOTMP),并对其进行了177 Lu标记;观察了177 Lu-DOTMP在骨转移癌模型鼠体内的生物分布,并对日本大耳白兔进行显像。荷瘤鼠体内的生物分布结果显示:177 Lu-DOTMP可以选择性地在骨组织吸收,具有良好的靶向性,而且在血中清除较快,在其它脏器只有少量的摄取。日本大耳兔显像结果显示:177 Lu-DOT-MP主要聚集于膀胱组织,即177 Lu-DOTMP主要通过肾排泄;注射后22h骨骼放射性摄取明显,46h骨骼中放射性积聚更多。以上结果表明,177 Lu-DOTMP具有良好的骨靶向性,值得进一步研究。

五味子多糖对S180荷瘤小鼠红细胞免疫抗肿瘤的作用

目的:探讨五味子多糖(FSCP)增强荷瘤小鼠红细胞结构稳定性与红细胞免疫黏附功能的抗肿瘤作用及其红细胞免疫调节机制。方法:实验动物随机分为正常对照组、生理盐水组、环磷酰胺(CP)组及FSCP高、中、低3个剂量组。用药7d后,眼球取血,获得红细胞悬液。采用激光共聚焦技术检测荷瘤小鼠红细胞Ca2+含量的变化;采用分光光度法检测红细胞膜唾液酸(SA)含量、红细胞膜封闭度;采用荧光偏振法检测红细胞膜脂流动性(LFU);采用花环法检测红细胞天然免疫黏附能力。结果:与生理盐水组比较,FSCP各组能降低荷瘤小鼠红细胞Ca2+的浓度(P<0.01),增加红细胞膜表面SA含量(P<0.01)以及红细胞膜自我封闭度(P<0.05或P<0.01)。高剂量FSCP可提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性(P<0.05);增强S180荷瘤小鼠红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力(P<0.05),FSCP高剂量组免疫花环率达到24.17%。结论:FSCP可能通过改善S180荷瘤小鼠红细胞膜的功能状态,提高膜的稳定性,增强红细胞免疫黏附肿瘤细胞的能力,从而发挥其抗肿瘤作用。

藏药雪灵芝粗多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的观察藏药雪灵芝粗多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。方法建立S180荷瘤小鼠模型,将其随机分为对照组,环磷酰胺(CTX)组,AKCP高(AKCP-H)、中(AKCP-M)、低剂量(AKCP-L)组,连续给药10 d后处死,取瘤称重并计算抑瘤率;HE染色法观察瘤组织形态;荧光定量PCR及Western blot法检测瘤组织中增殖相关因子Cyclin D1、PCNA、Ki67,凋亡相关因子Bcl-2、Bax的m RNA和蛋白的表达。结果 CTX、AKCP-H、AKCP-M、AKCP-L组瘤体质量低于对照组(P<0.05),抑瘤率分别为58.033%、25.574%、31.803%、23.279%;HE染色显示,CTX组及AKCP各剂量组肿瘤组织出现不同程度坏死区及间质增多现象;与对照组比较,各实验组Cyclin D1、PCNA、Ki67、Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax的m RNA及蛋白表达无显著差异(P>0.05)。结论雪灵芝粗多糖在一定程度上抑制了S180荷瘤小鼠肿瘤生长,可能具有抑瘤作用。

兴安升麻总苷抗肿瘤药效研究

目的观察升麻总苷对小鼠移植性肿瘤和人肿瘤细胞裸鼠移植瘤的体内抗肿瘤作用,以及体外对人肿瘤细胞株的抑瘤活性,并对其抑瘤机制进行初步探讨。方法MTT法检测体外升麻总苷对人肿瘤细胞的增殖抑制作用;体内实验观察其对小鼠S180和裸鼠体内移植人肺腺癌A549的抑制作用;同时采用流式细胞仪和肿瘤病理切片对接种的A549肿瘤细胞凋亡进行观察。结果升麻总苷对A549、HepG2、HL60、Eca-109、MDA-MB231肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为20.3、27.1、21.2、23.4和32.7μg/mL。小鼠口服升麻总苷100mg/kg和200mg/kg可明显抑制S180移植瘤(抑瘤率分别为42.8%和54.6%)和裸鼠移植人肺腺癌A549的生长(T/C值分别为58.1%和52.2%),肿瘤组织病理切片和流式细胞仪对A549肿瘤细胞凋亡的检测显示,升麻提取物可诱导体内肿瘤细胞凋亡。结论升麻体内体外均具有抗肿瘤活性,其体内抑制肿瘤生长可能与诱导细胞凋亡相关。

壳寡糖对S180肉瘤细胞凋亡、细胞周期以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的影响

目的探讨壳寡糖对S180肉瘤细胞的生物学效应,为其治疗肿瘤提供新的理论基础。方法体外实验:用流式细胞仪测壳寡糖作用下S180肉瘤细胞周期、细胞凋亡情况。体内实验:建立S180肉瘤小鼠皮下移植瘤模型,给予壳寡糖后,测瘤体积,并用免疫组化法测瘤组织Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果体外实验:高浓度壳寡糖作用后S180肉瘤细胞阻滞于G0/G1期,同时S180肉瘤细胞凋亡增加。体内实验:壳寡糖对小鼠S180肉瘤有明显的抑制作用并能提高促凋亡基因Bax的表达,降低抑凋亡基因Bcl-2的表达。结论壳寡糖可抑制S180肉瘤细胞的生长,使S180细胞阻滞于G0/G1期并诱导其发生凋亡,其机制可能与Bcl-2蛋白下调而Bax蛋白上调有关。

扶正抑瘤饮抑瘤作用的实验研究

目的 :观察扶正抑瘤饮对人胃癌细胞株体外增殖的影响 ,及其对小鼠移植性肉瘤的抑制作用 .方法 :应用MTT比色法 ,检测不同浓度扶正抑瘤饮 (简称中药ZY)对不同分化程度的 3株人胃癌细胞增殖的影响 .并以小鼠移植性肉瘤180为模型 ,随机分空白对照组 ,ELF化疗方案组 (ELF) ,扶正抑瘤饮组 (ZY) .观察其对小鼠移植性肉瘤的抑制作用 .结果 :中药对 3株胃癌细胞均呈现一定程度的抑制作用 ,但其对不同细胞株敏感性有差异 .中药浓度在 1× 10 -2 ～ 1× 10 3mg·L-1之间 ,对SGC 790 1,880 1细胞株增殖的抑制作用与剂量无明显相关 ,而对MGC 80 3细胞株增殖的抑制作用随浓度升高而增强 ,当浓度为 1× 10 3 mg·L-1时 ,抑制率最大 (4 1.1±5 .4 ) % .中药对小鼠移植性肉瘤 (91.0 % )与ELF组肿瘤生长抑制率 (93.1% ) ,ZY组平均瘤重 (0 .131± 0 .0 18)g与ELF组(0 .0 10± 0 .0 0 8)g相比 ,均无显著性差异 (P >0 .0 5 ) .ZY组小鼠体质量变化量 (6 .80± 0 .5 4 )g与空白对照组 (5 .5 0± 2 .2 7)g相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但ELF组小鼠体质量变化量(0 .4 3± 0 .15 )g明显小于空白对照组和ZY组 (P <0 .0 5 ) .结论 :扶正抑瘤饮对人胃癌细胞株SGC 790 1,880 1的抑瘤作用与浓度无明显关系 ,但对MGC 80 3细胞株的抑?

马尾松树皮提取物抗肿瘤作用的研究

研究马尾松树皮提取物(MPBE)体外和体内的抗肿瘤作用。采用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法观察MPBE对人结肠腺癌细胞株LoVo的体外抑制作用,采用小鼠移植性肿瘤模型考察MPBE对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用和艾氏腹水癌(EAC)小鼠的生命延长作用。结果表明:MPBE对Lo-Vo细胞的生长有较强的抑制作用,在质量浓度为500 mg/L时,MPBE对LoVo细胞作用24、48和72 h时的抑制率分别为19.83%、33.06%和58.15%;MPBE对小鼠S180肉瘤生长表现出明显的抑制作用,MPBE 50、100和200 mg/kg 3个剂量的抑瘤率分别为30.3%、37.8%和42.3%,MPBE达到200 mg/kg剂量时,反映免疫功能的胸腺指数和脾指数也明显增加;但MPBE对EAC腹水癌小鼠的生存时间没有明显的延长作用。

复方金蟾胶囊对移植性小鼠肉瘤及细胞周期的抑制作用

目的观察复方金蟾胶囊对小鼠移植性肉瘤S180的抑制作用并探讨其作用机制。方法采用移植性肉瘤S180模型进行抑制肿瘤的实验,并应用流式细胞仪检测S180肿瘤细胞增殖周期。结果复方金蟾胶囊对S180肉瘤的抑制率大于40%,生命延长率大于39%,其促进S180肿瘤细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0G1期,减少增殖细胞在S期的分布,且呈明显量效关系。结论复方金蟾胶囊具有良好的抗肿瘤作用,且有明显量效关系。

阿拉伯——甘露聚糖制剂对小鼠腹水癌细胞抑制作用的研究

观察了不同剂量的阿拉伯—甘露聚糖制剂对小鼠 S_(180)腹水癌细胞生长的影响.结果表明,对肿瘤的抑制作用与其使用剂量有密切关系。较适当的剂量范围可明显抑制肿瘤细胞的生长,加大剂量时效果反而不好.

高温对小鼠S_(180)肉瘤细胞膜损伤机制的研究——1.对瘤细胞膜电位的影响

通过对体外培养的小鼠Ｓ１８０肉瘤细胞进行１～４次的高温（４３℃、３０ｍｉｎ）处理后，用流式细胞技术测量肉瘤细胞膜电位的荧光强度，与对照组比较。结果表明，受热损伤的肉瘤细胞膜电位荧光强度明显增强（Ｐ＜００１），细胞膜发生去极化。提示，细胞膜去极化是肿瘤细胞热损伤的重要指标。

悬饮宁方对SPC-A-1细胞浸润及S_(180)腹水瘤小鼠腹膜病理形态的影响

目的:观察中药悬饮宁方抑制人肺腺癌细胞SPC-A-1浸润的作用及对S180腹水瘤小鼠腹膜病理形态学变化的影响。方法:在进行小鼠腹膜间皮细胞分离培养的基础上,将SPC-A-1人肺腺癌细胞调整加入复层培养,观察形成的克隆数。取出S180腹水瘤小鼠腹膜,用透射电镜观察悬饮宁方各剂量组小鼠腹膜病理形态学的变化。结果:体外实验显示加入含有悬饮宁生药的培养液(50μg/ml)后,SPC-A-1在琼脂培养皿背面形成的癌细胞克隆数明显减少。用悬饮宁治疗S180腹水瘤小鼠后,取出腹膜,在电镜下可观察到,从低剂量开始即可见小鼠腹膜间皮细胞排列整齐,随着剂量的递增这种现象更明显,间皮细胞排列更加整齐,增厚;而生理盐水组小鼠腹膜间皮细胞排列疏松,坏死。结论:中药悬饮宁方有抑制SPC-A-1细胞浸润的作用,悬饮宁还可以改变S180腹水瘤小鼠排列疏松的腹膜间皮细胞,从而控制腹水瘤小鼠癌性积液生长。

^(99)Tc^m-MAVGG-硝基咪唑硫嘌呤荷瘤小鼠乏氧显像

目的探讨有氧与乏氧条件下^(99)Tc^m-巯基乙酰基-缬氨酸-甘氨酸-甘氨酸(MAVGG)-硝基咪唑硫嘌呤在肿瘤细胞的摄取及其在荷瘤小鼠体内的生物学分布和显像特点。方法用^(99)Tc^m标记双功能螯合剂 MAVGG 偶联的硝基咪唑硫嘌呤。体外测定有氧与乏氧条件下标记物在 S180肉瘤细胞内的滞留率。观察荷瘤小鼠体内生物学分布及其γ显像。结果乏氧条件下标记物与 S180肉瘤细胞结合5 h 后,在 S180肉瘤细胞内的滞留率为0.59,高于有氧条件下的0.36。生物学分布显示肿瘤摄取率高,注射后3 h 肿瘤与肌肉和血液的摄取率比值分别为4.24和1.55。γ显像示肿瘤显影清晰。结论 ^(99)Tc^m-MAVGG-硝基咪唑硫嘌呤有望作为新的肿瘤乏氧显像剂。

二巯基丙磺酸钠体内外抗肿瘤作用研究

目的观察含有两个巯基的化合物-二巯基丙磺酸钠(DMPS)在体内外的抗肿瘤作用。方法在体外培养的人肺腺癌A549细胞株中,通过MTT实验,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞生长繁殖的抑制作用;通过荧光显微镜和细胞凋亡-Hoechst33258染色试剂盒,观察不同浓度的DMPS对肿瘤细胞凋亡的诱导作用。在体内小鼠S180肉瘤模型中,观察不同浓度的DMPS对肿瘤生长的抑制作用。结果体外实验中,终浓度为8 mmol/L和16 mmol/L的DMPS应用48h(P<0.01)和72h(P<0.01)后,显著地抑制肿瘤细胞的生长繁殖;终浓度为8 mmol/L和16 mmol/L的DMPS应用6h和9h后,肿瘤细胞凋亡数量显著地增多(P<0.05,P<0.01)。体内实验中,1.5%DMPS以0.2ml/10g体重腹腔注射,1次/d,连续2周,可显著地降低瘤体重量(P<0.05)。结论高浓度的DMPS显著地抑制体外A549细胞系、体内S180细胞系的生长繁殖。