槲皮素PLGA-TPGS纳米粒在荷HCa-F细胞小鼠体内肝靶向性的研究

目的评价槲皮素(QT)/香豆素6(C6)乳酸羟基乙酸共聚物-水溶性维生素E纳米粒(QCPTN)在荷肝癌细胞HCa-F异位实体瘤小鼠体内的分布及对小鼠肝脏的靶向性。方法建立RP-HPLC法测定QT在荷肝癌细胞HCa-F异位实体瘤小鼠血浆及肝、实体瘤、脾、肺、肾和心的浓度。将QCPTN和QT溶液(QTS)经小鼠尾静脉注射后,测定不同给药时间后小鼠血浆及各组织中的QT浓度。采用相对靶向效率(Re)和靶向效率(Te),同时通过对各组织进行冰冻切片、荧光倒置显微镜下观察荧光纳米粒QCPTN在各组织的分布,定性、定量地全面评价QCPTN对肝脏的靶向性。结果 QCPTN在血浆、实体瘤、脾、肺、肾、心中的Te均>3,表明QT在肝脏比血浆和其他组织匀浆中的曲线下面积(AUC)高3倍以上。冰冻切片图可见在1 h的QCPTN组小鼠各组织中,肝中荧光分布面积最大。结论 QCPTN对荷肝癌细胞HCa-F异位实体瘤小鼠肝脏有良好的靶向作用。

从细胞自噬角度探讨紫草多糖抑制H22肝癌实体瘤细胞增殖的作用机制

目的:探讨紫草多糖是否通过诱导自噬而抑制H_(22)肝癌实体瘤细胞的增殖。方法:将40只KM小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组(阳性药物,30 mg/kg,ip,每4 d给药1次)和紫草多糖低、高剂量组(100、300 mg/kg,ig,每天给药1次),每组10只。各组小鼠均腋下接种H_(22)细胞株复制H_(22)肝癌实体瘤模型,造模同时各给药组小鼠给予相应药物,模型组小鼠ig等体积生理盐水。末次给药后,记录并测定小鼠体质量、瘤质量系数和胸腺、脾脏指数;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法测定小鼠瘤组织中自噬相关基因Atg5、Beclin1 m RNA表达水平;Western blot法测定瘤组织中自噬微管相关蛋白1轻链3A/B(LC3A/B)蛋白表达水平。结果:紫草多糖可显著降低H_(22)实体瘤小鼠的瘤质量系数,抑瘤率达34.7%;可显著上调瘤组织中自噬相关基因Atg5、Beclin1 m RNA的表达和LC3A/B蛋白的表达,较模型组差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:紫草多糖通过促进肝癌细胞的自噬,从而抑制H_(22)肝癌实体瘤细胞的增殖、延缓肿瘤生长。

克癌临对荷肝癌(H_(22))小鼠IL-2和NK细胞活性的影响

目的 :研究和探讨中药复方克癌临对荷肝癌 (H2 2 )小鼠的免疫调节作用。方法 :建立荷实体型肝癌(H2 2 )小鼠模型 ,观察经克癌临治疗对其IL - 2和NK细胞活性的影响。结果 :克癌临能显著提高荷瘤小鼠IL - 2和NK细胞活性 ,且其IL - 2活性及NK细胞活性和模型组或阳性对照组 (5 -Fu组 )比较有非常显著性差异 (p<0 0 0 1)。结论 :克癌临方药可显著提高荷瘤机体的抗肿瘤免疫功能。

癌肿宁对荷肝癌(H_(22))小鼠的抑瘤作用及其对IL-2和NK细胞活性的影响

目的:探讨中药复方癌肿宁治疗实验性肝癌的疗效和机理。方法:建立荷实体型肝癌(H_(22))小鼠模型,观察经癌肿宁治疗对其肿瘤生长、NK细胞活性和IL-2活性的影响。结果:癌肿宁能显著抑制肿瘤的生长,其最高抑瘤率达56.66％,并可明显增强IL-2和NK细胞活性。结论:癌肿宁有明显的抗肝癌作用,并显著提高荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫功能。

芪蟾口服结肠靶向片初步药效学研究

目的:观察芪蟾口服结肠靶向片浸膏对小鼠的急性毒性反应,以评价其安全性;研究芪蟾口服结肠靶向浸膏对H22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用。方法:采用经典的急性毒性试验方法测定芪蟾口服结肠靶向浸膏的半数致死量(LD50),观察急性毒性症状,记录死亡数;建立H22荷瘤小鼠模型,随机分成6组,分别给予芪蟾口服结肠靶向浸膏高、中、低剂量灌胃,临床汤剂组灌胃,化疗药物5—Fu腹腔注射单独应用,生理盐水灌胃。正常饲养,给药10天后,摘眼球取血,处死小鼠,分别取出肿瘤组织、小鼠脾脏、胸腺,进行抑瘤率、脾指数、胸腺指数的检测。采用酶联免疫法测定TNF-α、IFN-γ细胞因子水平。结果:芪蟾口服结肠靶向片浸膏小鼠口服LD50为43.26g.kg-1,相当于人临床日用量的19.6倍,;芪蟾口服结肠靶向浸膏各剂量组均可有效抑制肿瘤生长,5-Fu腹腔注射单独应用的抑瘤率为40.52%,芪蟾靶向浸膏3个剂量组的抑瘤率分别为37.41%、33.21%、31.85%。与5-Fu组比较,芪蟾口服结肠靶向浸膏各剂量组能显著提高小鼠脾脏、胸腺的重量(P<0.05)。与模型对照组相比,能明显提高细胞因子TNF-α,IFN-γ的水平(P<0.05)结论:芪蟾靶向浸膏各剂量组均可不同程度抑制肿瘤的生长,以芪蟾靶向浸膏低剂量组效果最为明显,其作用机制与增加小鼠免疫器官重量、增加细胞因子TNF-α,IFN-γ水平等有关。提示芪蟾靶向浸膏有抗肿瘤作用,为临床应用提供科学的实验数据,对临床有实际的指导意义。

新疆阿魏乙酸乙酯部位对小鼠S180实体瘤的抑制作用

目的:研究新疆阿魏药材乙酸乙酯部位对小鼠S180实体瘤的抑制作用。方法:将60只小鼠随机分为正常对照组,肿瘤模型组,阿魏乙酸乙酯部位低、中、高剂量组(1.0、2.0、3.0g/kg,ig),顺铂对照组(阳性药物,5mg/kg,iv),每组10只。除正常对照组外,其余各组小鼠接种经S180实体瘤侵染的小鼠的腹水以复制S180实体瘤动物模型。造模次日,各给药组小鼠给予相应药物,正常对照组、肿瘤模型组小鼠ig等体积生理盐水,每天1次,连续10 d。观察并测定各组小鼠体质量、脏器(脾、胸腺)指数、肿瘤体积变化趋势、实体瘤块体积和质量、肿瘤抑制率和病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)测定小鼠血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。结果:与正常对照组比较,肿瘤模型组小鼠脾指数、TNF-α水平显著升高,IL-2、IFN-γ水平显著降低(P<0.05);肿瘤组织异型细胞呈团块状分布,伴有一定数量的缺血性坏死。与肿瘤模型组比较,顺铂对照组小鼠体质量、脾指数、胸腺指数、实体瘤块体积和质量显著降低,IL-2、TNF-α水平显著升高;阿魏乙酸乙酯部位各剂量组小鼠脾指数、TNF-α水平显著升高,实体瘤块体积和质量显著降低(P<0.05);病理观察肿瘤组织受到不同程度抑制,且顺铂对照组抑制程度最为显著,肿瘤细胞数量减少,伴有少量坏死和细胞浸润;顺铂对照组和阿魏乙酸乙酯部位低、中、高剂量组小鼠的肿瘤抑制率分别为(73.26±4.55)%、(40.34±3.45)%、(50.86±9.34)%、(58.20±3.70)%。结论:阿魏药材乙酸乙酯部位对小鼠S180实体瘤有抑制作用。

雷公藤对荷肝癌(H_(22))小鼠的抑瘤作用的实验研究

目的:探讨中药雷公藤治疗实验性肝癌的疗效。方法:建立荷实体型肝癌(H22)小鼠模型,观察经雷公藤治疗对其肿瘤生长的影响。结果:雷公藤能显著抑制肿瘤的生长,其抑瘤率达35.46%。结论:雷公藤有明显的抗肿瘤作用。

小鼠树突状细胞介导CT-26实体肿瘤凋亡研究

目的研究负载树突状细胞诱导实体肿瘤凋亡作用,为其用于临床生物治疗提供依据。方法从小鼠骨髓诱导培养树突状细胞,以CT-26肿瘤细胞冻融液为DC负载抗原,测定此负载的DC体内诱导CT-26实体肿瘤凋亡效果。结果诱导的树突状细胞形态典型;CT-26细胞冻融液负载的DC诱导实体瘤外周细胞凋亡明显,而内部细胞罕见凋亡。结论负载DC治疗体积较大的实体瘤作用有限,可能更适合微瘤治疗。

荷癌小鼠与正常小鼠组织中抑癌因子活性观察研究

目的观察癌鼠的实体瘤和肝脏、肌肉以及正常小鼠的肝脏、肌肉组织中抑癌因子的活性。方法(1)制作肝癌、S180肉瘤小鼠实体瘤模型。(2)分别将两癌鼠的实体瘤和肝脏、肌肉组织以及正常小鼠的肝脏、肌肉组织用生理盐水制成匀浆并提取纯化抑癌因子G50制品。用HepA细胞作为鉴定抑癌因子活性的指示细胞。用台酚兰染色法鉴定抑癌因子的活性。结果抑癌因子只存在癌鼠的实体瘤组织且活性高,而两种癌鼠和正常小鼠的肝脏、肌肉几乎未检出抑癌因子的活性。结论抑癌因子具有特异性强、敏感性高、只由肿瘤组织产生、不存在正常组织和非癌组织、能与正常组织相区别等特点。

中药白花蛇舌草提取物对人体癌细胞及小鼠实体瘤的抑制作用研究

目的探讨中药白花蛇舌草提取物(HD-1)对人体癌细胞及小鼠实体瘤的抑制作用。方法对人体癌细胞采用MTT法进行体外实验,检测白花蛇舌草提取物HD-1对人肝癌细胞HepG2和人直结肠癌细胞株HCTI 16生长的抑制作用;对S180实体瘤小鼠模型进行体内实验,对比高、低剂量的白花蛇舌草提取物HD-1对荷瘤小鼠体质量、抑瘤率、胸腺指数、脾指数等指标的影响。结果体外实验显示,中药白花蛇舌草提取物对HepG2和HCTI16的抑制率和给药浓度、药物作用时间相关。体内实验显示,与模型对照组相比,高HD-1组、低HD-1组瘤质量均减轻,抑制率分别为13.28%,26.47%,脾脏指数明显升高(P<0.05)。CTX组与CTX+HD-1组比较,小鼠胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数、肺脏指数均有显著性差异(P均<0.05)。结论中药白花蛇舌草提取物体外能够明显抑制人肝癌细胞HepG2和人直结肠癌细胞株HCTI 16的生长,能够明显抑制小鼠体内实体瘤的生长。

古草生机汤对H22荷瘤小鼠体内抑瘤及免疫调节作用的初步研究

目的:探究古草生机汤对H22荷瘤小鼠体内实体瘤的抑瘤功效和对机体的免疫调节作用机制。方法:本研究采用H22实体瘤动物模型,随机分为空白组、模型组、阳性药组、古草生机汤低、高剂量组,灌胃给药7 d,计算各组小鼠的体质量增长率、肿瘤抑制率、胸腺及脾指数,小鼠实体瘤病理切片苏木精-伊红(HE)染色观察瘤体组织和细胞形态,酶联免疫吸附试验法检测小鼠血清中γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、Fas、Fas配体、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量,实时荧光定量PCR测量小鼠瘤组织中Bax和Bcl-2mRNA的相对表达量。结果:古草生机汤有促进H22荷瘤小鼠体质量增长、抑制体内实体瘤增长和促进肿瘤凋亡坏死的作用,可提高小鼠的胸腺指数同时降低脾脏指数,可显著提高小鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2的含量并降低Fas、Fas配体、AST、ALT的含量(均P<0.01),能够上调小鼠瘤组织中Bax mRNA的表达并下调Bcl-2mRNA的表达。结论:古草生机汤具有明显的体内抗肝肿瘤药效,在抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞凋亡、调节机体免疫方面有一定作用。

HSVtk/GCV自杀基因系统治疗小鼠实体瘤的实验研究

目的：研究单纯疱疹病毒胸苷激酶基因联合丙氧鸟苷（ Ｈ Ｓ Ｖｔｋ／ Ｇ Ｃ Ｖ） 系统对实体瘤的治疗作用。方法：以感染法建立携带 Ｈ Ｓ Ｖｔｋ 基因的 Ｐ３８８ｔｋ 细胞，用 Ｘ Ｔ Ｔ、动物实验、透射电镜和流式细胞仪（ Ｆ Ｃ Ｍ） 方法研究 Ｇ Ｃ Ｖ 对 Ｐ３８８ｔｋ 细胞的杀伤作用及其机制。结果： Ｐ３８８ｔｋ 细胞对 Ｇ Ｃ Ｖ 的敏感性明显增强，约为其亲本 Ｐ３８８ 细胞的３７ 倍，且当 Ｐ３８８ｔｋ 细胞与 Ｐ３８８ 细胞或 Ｓ 细胞混合培养经５ μｇ·ｍｌ－ １ Ｇ Ｃ Ｖ 处理后， Ｐ３８８ｔｋ 细胞占总细胞的１０ ％ ，可杀伤５０ ％ 的混合细胞。动物实验中， Ｐ３８８ｔｋ 细胞或 Ｐ３８８ｔｋ 细胞与 Ｐ３８８ 细胞等量混合所致的荷瘤鼠在以 Ｇ Ｃ Ｖ 治疗后与对照组相比，肿瘤生长受到明显抑制，小鼠生存期明显延长；细胞死亡的机制可能与凋亡有关。结论： Ｈ Ｓ Ｖｔｋ（ ＋ ） 的 Ｐ３８８ｔｋ 细胞能被 Ｇ Ｃ Ｖ 有效杀伤，且对其邻近的 Ｈ Ｓ Ｖｔｋ（ － ） 的细胞产生旁观者效应。

积雪草酸抗肿瘤机制初步研究

目的探讨积雪草酸的抗肿瘤机制。方法制备0.2 mL瘤细胞悬液,分别接种于小鼠左下腹腹腔及右上肢腋部皮下以复制腹水瘤及实体瘤小鼠模型,建模成功后,均随机分为模型组(等体积生理盐水)、5-氟尿嘧啶组(123.3 mg/kg)及积雪草酸高、中、低剂量组(100,75,50 mg/kg)。灌胃生理盐水或相应药物(每10 g体质量0.2 mL),每天1次,连续10 d。记录腹水瘤模型实验中小鼠体质量增长情况,生存时间,计算体质量增长率及生命延长率;记录实体瘤模型实验中小鼠体质量、瘤体质量、脏器质量,计算抑瘤率(IR)、脾脏指数、肝脏指数及胸腺指数;苏木素-伊红染色,观察小鼠瘤体及脾脏组织病理形态,分别采用免疫组织化学法和Western blot法检测小鼠瘤体中热休克蛋白90(Hsp90)、血管内皮生长因子C(VEGF-C)、淋巴管内皮透明质酸受体1(LYVE-1)蛋白表达水平。结果腹水瘤小鼠模型实验中,与模型组比较,各给药组小鼠体质量增长均较缓慢、生存时间均显著延长(P<0.05),积雪草酸高剂量组尤为显著。实体瘤模型小鼠实验中,与模型组比较,5-氟尿嘧啶组和积雪草酸高剂量组小鼠脾脏质量均显著减轻,脾脏指数均显著降低,IR均超过70.00%,瘤体Hsp90,VEGF-C,LYVE-1蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);各给药组小鼠瘤体质量均显著减轻(P<0.01);5-氟尿嘧啶组和积雪草酸高剂量组小鼠脾脏髓质结构完整,实体瘤细胞胞核固缩、胞质减少,可见凋亡、坏死的瘤细胞。结论积雪草酸具有一定的抗肿瘤作用,其机制与调控Hsp90、LYVE-1、VEGF-C蛋白表达相关。

旋毛虫A200711蛋白对裸鼠H7402细胞实体瘤的抑制作用

为了探讨旋毛虫A200711蛋白对BALB/c裸鼠皮下人肝癌H7402细胞实体瘤的抑制作用。本试验将BALB/c裸鼠右侧腋下注射人肝癌H7402细胞,建立裸鼠实体瘤模型。成瘤后,每2d向实体瘤中间部位多点注射0.2mL质量浓度为7.5mg/L的旋毛虫A200711蛋白,观察裸鼠一般临床症状及实体瘤生长情况;每3d称量裸鼠体质量,测量肿瘤直径,计算肿瘤的体积,绘制肿瘤生长曲线;3周后处死裸鼠,小心剥离肿瘤组织,称量肿瘤的重量,计算抑瘤率。20d后裸鼠腋部皮下均长出肿瘤结节,成瘤率为100%,平均直径3~5 mm;与模型对照组比较,注射A200711蛋白12d后裸鼠实体瘤体积明显缩小,抑瘤率达到39.67%。结果表明,旋毛虫A200711蛋白对裸鼠人肝癌细胞实体瘤的生长具有明显的抑制作用。

苯并(a)芘诱发小鼠实体瘤及其对机体IL-2、IL-6的影响

目的探索苯并(a)芘诱发小鼠实体瘤的情况及其对小鼠血清IL-2、IL-6的影响。方法 SPF级昆明种小鼠60只,雌雄各半,体重(20±2)g。随机分为三组:对照组、苯并(a)芘10 mg/kg组、苯并(a)芘20 mg/kg组(n=20),各组分别腹腔注射DMSO、10 mg/kg、20 mg/kg苯并(a)芘(注射体积0.1 ml/kg·bw),每日一次,连续10次。三个月后取血,ELISA测定血清IL-2及IL-6。取肝、肾、胃、肺,进行病理组织学检查。结果苯并(a)芘10 mg/kg组和20 mg/kg组,肝癌发生率为26.3%(5/19)和35.3%(6/17),胃癌发生率为0%(0/19)和41.2%(7/17);肾癌发生率为0%(0/19)和11.8%(2/17);癌前病变发生率,肝脏为73.7%(14/19)和64.7%(11/17),胃为68.4%(13/19)和29.4%(5/17),肾脏为47.4%(9/19)和58.8%(10/17)。实验各组癌前病变率均显著高于对照组(P<0.05);苯并(a)芘20 mg/kg组肝癌、胃癌、肾癌发生率均显著高于对照组(P<0.05);实验组肺脏未见明显损害。苯并(a)芘10 mg/kg组和20 mg/kg组血清IL-2、IL-6水平均显著低于对照组(P<0.01)。结论苯并(a)芘可诱发肝脏、胃、肾脏发生癌变或癌前病变,使小鼠血清IL-2、IL-6水平降低。

芝莲化癥颗粒对荷瘤小鼠的免疫功能效应研究

目的:对芝莲化癥颗粒影响荷瘤小鼠的免疫功能进行科学的实验研究,为确定该制剂的功能主治和临床疗效提供依据。方法:制备H22肝癌实体瘤荷瘤小鼠模型,选取主要指标:巨噬细胞吞噬百分率、吞噬指数,溶血素、溶血空斑的形成,外周血淋巴细胞转化率,进行各项对比实验。结果:芝莲化癥颗粒以30 g·kg-1、15 g·kg-1、7.5 g·kg-1的剂量给荷瘤小鼠连续10天灌服,中剂量组可显著提高荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,大剂量组可显著促进荷瘤小鼠溶血素及溶血空斑的形成,可显著提高荷瘤小鼠外周血淋巴细胞转化率。结论:芝莲化癥颗粒能够显著提高感染H22肝癌实体瘤小鼠的肌体免疫力,其功能主治项可以描述为:能够显著提高肌体免疫力,缓解肝细胞癌对肝脏的损害,延长生存期。

人喉癌细胞系Hep-2中CD133阳性肿瘤干细胞的分离及意义

目的:研究喉癌细胞系Hep-2中CD133的表达;比较CD133^+细胞、未分选细胞、CD133^-细胞的体外增殖、克隆形成能力及其在裸鼠体内的成瘤能力;探讨喉癌肝细胞对化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)的抵抗作用。方法:采用流式细胞仪检测CD133在Hep-2细胞系中的表达;免疫磁珠分选技术纯化CD133阳性肿瘤细胞;使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和平板克隆形成实验检测分选所得各细胞亚群细胞以及未分选细胞的体外增殖能力和克隆形成能力;将CD133阳性肿瘤细胞和CD133阴性肿瘤细胞以一定的数量级注入重症联合免疫缺陷小鼠腹部皮下,比较其成瘤差异性;此外,使用DDP干预分选所得各细胞亚群细胞,检测比较CD133阳性肿瘤细胞和CD133阴性肿瘤细胞的体外增殖能力与体内成瘤能力。结果:流式细胞仪示CD133在Hep-2细胞系中呈微量恒定表达,表达概率为40.12±1.32%;CD133阳性肿瘤细胞的体外增殖能力显著强于CD133阴性肿瘤细胞的增殖能力(P<0.05),且其克隆形成能力也强于CD133阴性肿瘤细胞;体内成瘤实验结果显示CD133阳性肿瘤细胞较CD133阴性细胞、未分选细胞在重症联合免疫缺陷小鼠体内具有更强的成瘤性(P<0.05);在DDP的干预下,相对于CD133阴性肿瘤细胞,CD133阳性肿瘤细胞表现出更强的抵抗力。结论:喉癌Hep-2细胞系中,CD133阳性癌细胞具有强的体外增殖能力、体内成瘤能力且对化疗药物具有较强的抵抗性,可作为喉癌肿瘤干细胞的标志之一。

注射用姜黄素温敏凝胶体内外抗肿瘤实验研究

目的:研究注射用姜黄素温敏凝胶体外对小鼠腹水型肝癌高淋巴道转移细胞株(HCA-F)增殖的抑制作用和体内对移植瘤模型小鼠的保护作用。方法:培养HCA-F细胞株,MTT法测定10、25、50、75、100μg/ml注射用姜黄素温敏凝胶、氟尿嘧啶、姜黄素混悬液对HCA-F细胞增殖的抑制作用。抽取腹水型肝癌模型小鼠腹水接种于小鼠腋下以复制小鼠移植瘤模型。50只小鼠随机均分为模型(等容生理盐水)组、空白温敏凝胶(ETH,0.05 ml/cm3))组、无水乙醇(0.05 ml/cm3)组、姜黄素混悬液(0.05 ml/cm3)组、注射用姜黄素温敏凝胶(0.05 ml/cm3)组,瘤内注射给药,每隔5 d1次,连续2次。测定小鼠瘤体增长体积、瘤质量、抑瘤率,HE染色检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:培养细胞48 h时,25、50、75、100μg/ml注射用姜黄素温敏凝胶对HCA-F细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05);培养细胞72 h时,10、25、50、75、100μg/ml注射用姜黄素温敏凝胶对HCA-F细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05)。与模型组比较,注射用姜黄素温敏凝胶组小鼠瘤体体积增长程度明显减小,瘤质量明显减轻,抑瘤率明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);注射用姜黄素温敏凝胶组小鼠肿瘤细胞凋亡情况明显改善。结论:注射用姜黄素温敏凝胶在体外对HCA-F增殖具有一定的抑制作用,且体内效果与无水乙醇相当,但小鼠的顺应性较无水乙醇好。

脂蟾毒配基PLGA-TPGS纳米粒对小鼠肝癌异位移植瘤抑制作用的研究

目的:考察脂蟾毒配基乙交酯丙交酯共聚物-维生素E聚乙二醇1000琥珀酸酯(PLGA-TPGS)纳米粒(RPTN)在体内对荷腹水型肝癌高淋巴道转移细胞HCa-F小鼠异位移植实体瘤的抑制作用。方法:为保证体内给药的安全性和确定给药剂量,考察RPTN和脂蟾毒配基溶液(RS)在小鼠体内静脉给药途径的半数致死量(LD50)。建立荷HCa-F细胞小鼠肝癌异位移植实体瘤模型后分为6组,分别为空白对照组、空白纳米粒组、5-氟尿嘧啶溶液(FS)组、RS组、脂蟾毒配基乙交酯丙交酯共聚物(PLGA)纳米粒(RPN)组、RPTN组,尾静脉给药,每天1次,连续给药7 d;在停药次日,处死小鼠后剥离实体瘤,称重并测量实体瘤体积,根据公式计算实体瘤体积增长量和抑瘤率;将实体瘤固定后进行常规石蜡切片包埋,苏木素&曙红(H&E)染色观察,全面评价RPTN在小鼠体内的抑瘤效果。结果:RPTN和RS小鼠静脉给药LD50分别为38.2 mg·kg-1和18.9 mg·kg-1,表明RPTN在一定程度上可减轻RBG在小鼠体内的毒性作用,相比RS更安全。小鼠体内抗肿瘤试验中给药7 d后,FS组、RPN组、RPTN组的实体瘤体积增长量与空白对照组相比明显减小(P<0.05或P<0.01),RPTN组抑瘤率为64.93%,明显高于RPN组(51.64%)、FS组(37.19%)、RS组(31.60%)的抑瘤率。H&E染色后镜下观察的结果也表明RPTN组对荷HCa-F细胞小鼠肝癌异位实体瘤抑制作用效果最好。结论:与RPN、RS和FS相比,在抑制荷HCa-F细胞小鼠肝癌异位移植实体瘤试验中RPTN具有良好的抗肿瘤作用。

靶向胰腺癌的嵌合抗原受体T细胞U87在荷瘤小鼠体内的临床前毒性评价

目的评价嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞U87在荷瘤免疫缺陷小鼠体内的临床前安全性。方法使用NCG小鼠皮下接种人原位胰腺癌细胞BxPC-3构建移植瘤模型,并在此基础上单次给予细胞U87(每只动物2×10^(6)个和10×10^(6)个细胞),持续观察至给药后第84天。考察小鼠肿瘤清除情况、存活率、临床症状、体质量变化、血液学指标、血清生化指标检测、淋巴细胞亚群分类、人源细胞因子指标和组织病理学变化特点。结果单次尾静脉给予荷瘤NCG小鼠U87可明显延长小鼠生存期,甚至可完全清除肿瘤负荷。作为其药效学作用,U87可导致人源IFN-γ水平升高,以及多组织/脏器的混合细胞聚集,未见与U87相关的局部刺激性和明显系统毒性。U87在高剂量下可导致过度免疫反应,对动物GLU、TG、TP、ALB、PLT及RET数值产生一定影响。当体内肿瘤消除后,上述异常指标有所恢复。每只动物给予2×10^(6)个CAR-T(自给予细胞后第8周起)和10×10^(6)个CAR-T(自给予细胞后第4周起)剂量下均可导致轻度GvHD相关的组织病理学改变,且该变化与T细胞增殖水平相关联。未见与U87相关的肿瘤形成。结论U87在BxPC-3荷瘤NCG小鼠体内未见明显免疫毒性和致瘤性的相关风险,且呈现一定药效学作用。本研究结果为靶向实体瘤的毒理学评价提供借鉴。