目的:探讨粪菌移植对Th17/Treg平衡的调控及帕金森病(PD)小鼠的神经保护作用。方法:将18只小鼠均分为正常对照组、粪菌移植对照组及粪菌移植组,后两组采用—方法建立PD模型;粪菌移植组小鼠在建立PD模型后、以正常对照组小鼠的粪便菌悬...目的:探讨粪菌移植对Th17/Treg平衡的调控及帕金森病(PD)小鼠的神经保护作用。方法:将18只小鼠均分为正常对照组、粪菌移植对照组及粪菌移植组,后两组采用—方法建立PD模型;粪菌移植组小鼠在建立PD模型后、以正常对照组小鼠的粪便菌悬液灌胃,粪菌移植对照组和正常对照组予生理盐水灌胃;爬杆实验评价小鼠的行动能力,牵引实验评价小鼠肌肉力量及平衡能力;Real-time PCR、Western blot检测小鼠黑质致密部(SNpc)RORγt、Foxp3 m RNA及蛋白表达;免疫荧光双染检测小鼠SNpc中Th17细胞(RORγt+CD4+)及Treg细胞(Foxp3+CD4+)的表达;ELISA检测小鼠纹状体中DA、5-HT的表达以及外周血与SNpc中IL-17A、IL-22、TGF-β、IL-10的表达。结果:与粪菌移植对照组比较,粪菌移植组小鼠爬杆实验中返回到杆底部的时间明显缩短(P<0.01),牵引实验中得分明显增加(P<0.01),小鼠SNpc中RORγt m RNA和蛋白的表达明显下调(P<0.01),粪菌移植组小鼠Foxp3 m RNA及蛋白表达明显上调(P<0.01),小鼠纹状体内DA及5-HT的含量明显升高(P<0.01),小鼠外周血与SNpc中IL-17A与IL-22的含量明显下调(P<0.01),IL-10与TGF-β明显上调(P<0.01),小鼠SNpc中Th17细胞(RORγt+CD4+)的数量有所下调,而Treg细胞(Foxp3+CD4+)的数量有所上调。结论:粪便移植对PD小鼠有神经保护作用,其机制可能与调节Th17/Treg平衡、DA与5-HT含量有关。展开更多
目的研究自噬相关基因Atg5在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠纹状体和脑干中的表达情况,探讨Atg5与ALS发病的关系。方法分别取ALS转基因小鼠和同窝野生型小鼠95d、108d和122d的纹状体和脑干,应用免疫荧光技术检测Atg5在纹状体和脑干中...目的研究自噬相关基因Atg5在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠纹状体和脑干中的表达情况,探讨Atg5与ALS发病的关系。方法分别取ALS转基因小鼠和同窝野生型小鼠95d、108d和122d的纹状体和脑干,应用免疫荧光技术检测Atg5在纹状体和脑干中的表达及与神经元的共定位关系,应用q RT-PCR技术检测Atg5 m RNA表达情况,应用Western blot技术检测蛋白表达的改变。结果免疫荧光双标染色检测发现,ALS转基因小鼠和野生型小鼠纹状体和脑干中Atg5阳性细胞与β-tubulinⅢ标记的神经元共表达;与野生型小鼠比较,ALS转基因小鼠纹状体和脑干内舌下神经核和面神经核中Atg5免疫反应性降低;q RT-PCR分析显示,ALS转基因小鼠纹状体内Atg5 m RNA表达水平在95d、108d和122d时均显著低于同窝野生型小鼠纹状体内Atg5 m RNA表达水平;脑干内Atg5 m RNA表达水平在108d和122d时均显著低于同窝野生型小鼠脑干内Atg5 m RNA表达水平;Western bot分析显示,与野生型小鼠比较,ALS转基因小鼠纹状体和脑干内Atg5蛋白表达水平在108d和122d时显著降低。结论 ALS转基因小鼠纹状体和脑干中Atg5的表达降低,提示Atg5调控的自噬改变与ALS发病关系密切。展开更多
文摘目的:探讨粪菌移植对Th17/Treg平衡的调控及帕金森病(PD)小鼠的神经保护作用。方法:将18只小鼠均分为正常对照组、粪菌移植对照组及粪菌移植组,后两组采用—方法建立PD模型;粪菌移植组小鼠在建立PD模型后、以正常对照组小鼠的粪便菌悬液灌胃,粪菌移植对照组和正常对照组予生理盐水灌胃;爬杆实验评价小鼠的行动能力,牵引实验评价小鼠肌肉力量及平衡能力;Real-time PCR、Western blot检测小鼠黑质致密部(SNpc)RORγt、Foxp3 m RNA及蛋白表达;免疫荧光双染检测小鼠SNpc中Th17细胞(RORγt+CD4+)及Treg细胞(Foxp3+CD4+)的表达;ELISA检测小鼠纹状体中DA、5-HT的表达以及外周血与SNpc中IL-17A、IL-22、TGF-β、IL-10的表达。结果:与粪菌移植对照组比较,粪菌移植组小鼠爬杆实验中返回到杆底部的时间明显缩短(P<0.01),牵引实验中得分明显增加(P<0.01),小鼠SNpc中RORγt m RNA和蛋白的表达明显下调(P<0.01),粪菌移植组小鼠Foxp3 m RNA及蛋白表达明显上调(P<0.01),小鼠纹状体内DA及5-HT的含量明显升高(P<0.01),小鼠外周血与SNpc中IL-17A与IL-22的含量明显下调(P<0.01),IL-10与TGF-β明显上调(P<0.01),小鼠SNpc中Th17细胞(RORγt+CD4+)的数量有所下调,而Treg细胞(Foxp3+CD4+)的数量有所上调。结论:粪便移植对PD小鼠有神经保护作用,其机制可能与调节Th17/Treg平衡、DA与5-HT含量有关。
文摘目的:研究烟碱对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型小鼠不同脑区多巴胺(dopamine,DA)的影响及其机制。方法:应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)制备PD小鼠模型,应用爬杆实验检测小鼠运动功能,应用酪氨酸羟化酶免疫组化观察小鼠中脑黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNpc)多巴胺能神经元数目,应用高效液相色谱法检测小鼠不同脑区(纹状体、海马、皮质)DA的含量,应用蛋白质免疫印迹检测小鼠纹状体多巴胺转运体(dopamine transporter,DAT)的变化。结果:(1)烟碱可显著改善MPTP导致的野生型小鼠运动功能障碍;(2)烟碱可显著改善MPTP诱导的野生型小鼠中脑SNpc多巴胺能神经元的丢失;(3)烟碱可显著减轻MPTP所致的野生型小鼠纹状体DA含量的减少,烟碱对α7-烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)敲除型(knockout,KO)小鼠MPTP模型中纹状体DA含量的减少无明显恢复作用,烟碱对野生型小鼠或α7-nAChRs KO小鼠MPTP模型中海马和皮质中的DA含量无明显影响。(4)烟碱可显著增加野生型小鼠MPTP模型中纹状体DAT的含量,烟碱对α7-nAChRs KO小鼠MPTP模型中的纹状体DAT的减少无逆转作用。结论:烟碱可以激活α7-nAChRs抑制PD模型小鼠SNpc区多巴胺能神经元的死亡,提高纹状体DAT水平;促进纹状体DA含量增加,从而在PD模型小鼠中发挥神经保护作用。
文摘目的研究自噬相关基因Atg5在肌萎缩侧索硬化症(ALS)转基因小鼠纹状体和脑干中的表达情况,探讨Atg5与ALS发病的关系。方法分别取ALS转基因小鼠和同窝野生型小鼠95d、108d和122d的纹状体和脑干,应用免疫荧光技术检测Atg5在纹状体和脑干中的表达及与神经元的共定位关系,应用q RT-PCR技术检测Atg5 m RNA表达情况,应用Western blot技术检测蛋白表达的改变。结果免疫荧光双标染色检测发现,ALS转基因小鼠和野生型小鼠纹状体和脑干中Atg5阳性细胞与β-tubulinⅢ标记的神经元共表达;与野生型小鼠比较,ALS转基因小鼠纹状体和脑干内舌下神经核和面神经核中Atg5免疫反应性降低;q RT-PCR分析显示,ALS转基因小鼠纹状体内Atg5 m RNA表达水平在95d、108d和122d时均显著低于同窝野生型小鼠纹状体内Atg5 m RNA表达水平;脑干内Atg5 m RNA表达水平在108d和122d时均显著低于同窝野生型小鼠脑干内Atg5 m RNA表达水平;Western bot分析显示,与野生型小鼠比较,ALS转基因小鼠纹状体和脑干内Atg5蛋白表达水平在108d和122d时显著降低。结论 ALS转基因小鼠纹状体和脑干中Atg5的表达降低,提示Atg5调控的自噬改变与ALS发病关系密切。
