MECC-DAD和HPLC-FLD测定牛乳中5种黄曲霉毒素的方法比较研究

建立高效胶束电动毛细管色谱耦合二极管阵列检测器(micellar electrokinetic capillary chromatographydiodearraydetector,MECC-DAD)检测牛乳中痕量黄曲霉毒素的新方法,采用高效液相色谱-荧光检测器(high performance liquid chromatography-fluorescence detector,HPLC-FLD)法及MECC-DAD法检测牛乳样品中5种黄曲霉毒素的残留量,考察2种检测技术的特异性。牛乳样品经免疫亲和柱净化后,MECC-DAD法采用未涂层熔融石英毛细管柱进行分离,以7.5 mmol/L四硼酸钠、30 mmol/L十二烷基磺酸钠及体积分数5%乙腈体积比1∶1∶1的混合液(pH 8.5)为缓冲液,检测波长为214 nm;HPLC-FLD法采用C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,荧光检测器激发波长360 nm、发射波长440 nm。结果表明:MECC-DAD法的色谱图峰形更对称、平滑、尖锐,无拖尾现象;MECC-DAD和HPLC-FLD法的检出限分别为0.182~1.669、0.014~0.058μg/L,MECC-DAD法的检出限虽高于HPLC-FLD法,但也能满足牛乳中黄曲霉毒素的测定要求;HPLC-FLD法的精密度稍高于MECC-DAD法;MECC-DAD法的加标回收率为80.3%~137.0%,HPLC-FLD法的加标回收率为79.6%~134.0%,二者相当;2种方法对市售牛乳样品的定量检测结果偏差为P=0.900>0.05,没有显著性差异。MECC-DAD法分离快速、高效、经济,更适合牛乳样品中黄曲霉毒素残留量的检测。

胶束毛细管电泳-二极管阵列快速分离和检测5种“瘦肉精”类药物

建立了胶束毛细管电泳分离结合二极管阵列(DAD)检测"瘦肉精"的方法。以10mmol/L硼酸盐(Na2B4O7-NaOH)(pH10.5)为背景电解质,同时加入10mmol/L表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS)组成电泳运行缓冲液,分离和定量检测沙丁胺醇(Salbutamol,SAL)、特步他林(Terbutaline,TER)、西马特罗(Cimaterol,CIM)、莱克多巴胺(Ractopamine,RAC)和克伦特罗(Clenbuterol,CLB)5种"瘦肉精"类药物(β-兴奋剂)。考察了运行缓冲液的浓度和pH值、表面活性剂浓度、分离电压和毛细管柱温度等因素对分离和检测的影响并进行了优化。在最佳条件下,5种药物在14min内可实现良好的基线分离,检测限(S/N>3)均低于0.2μg/mL。以尿液样品为例进行了生物样品的初步检测,其回收率均高于97%,方法快速、简便、可靠。