深山含笑叶片的挥发油成分及其生物活性研究

采用水蒸气蒸馏法及GC-MS联用技术提取并分析了深山含笑(Michelia maudiae Dunn)叶片的挥发油成分,并用杯碟法和Alamar blue法检测了其抑菌和抗肿瘤生物活性。从深山含笑挥发油中共分离出45种化合物,并鉴定出其中37种化合物,占挥发油总相对含量的97.8%;挥发油主要成分有莰烯(16.575%)、β-蒎烯(15.857%)、D-柠檬烯(12.653%)、丁香烯(11.923%)、1R-α-蒎烯(6.855%)及橙花叔醇(5.199%)等。该挥发油对金黄色葡萄球菌(Staphalococus aureus Rosenbach)和红酵母(Rhodotorula glutinisTrans.)有一定的抑制能力;对人非小细胞肺癌细胞(NCI-H460)有较强的抑制作用,浓度为100 mg.L-1,抑制率可达98.89%以上。

深山含笑和乐昌含笑的抗寒性测定

以3年生和6年生深山含笑和乐昌含笑为试材,通过低温处理,用电导法测定含笑叶片相对电导率,并用Logistic方程拟合求拐点值来估计其半致死温度,探讨其抗寒性。结果表明,经过冬季低温锻炼,除3年生乐昌含笑的半致死温度略高于-10℃外,其余均低于-11℃。深山含笑的抗寒性大于乐昌含笑,且随着树龄的增大、生长地气温的下降,抗寒性增加。在南京地区引种这两个树种成功的可能性较大。

深山含笑的组织培养和快速繁殖

组织培养深山含笑的实验结果表明：利用休眠芽和种子萌发时实生苗的上胚轴及下胚轴为外植体均能诱导出愈伤组织和不定芽，其中无菌实生苗的上胚轴最易诱导出不定芽，无菌实生苗的下胚轴最易诱导出愈伤组织。外植体在 ＭＳ＋ １．０—２．０ ｍ＋ Ｌ－１ ２，４－Ｄ培养基上只产生愈伤组织；在ＭＳ＋３．０ ｍｇ Ｌ－１ ＢＡ＋０．２ ｍｇ Ｌ－１ ＮＡＡ培养基上产生较多的不定芽和较多的愈伤组织；在ＭＳ＋２．０ ｍｇ Ｌ－１２，４－Ｄ＋３．０ ｍｇ Ｌ－１ ＢＡ＋０．２ ｍｇ Ｌ－１ ＮＡＡ培养基上易产生愈伤组织和大量的不定芽。愈伤组织在ＭＳ＋２．０ ｍｇ Ｌ－１ ＢＡ＋０．２ ｍｇ Ｌ－１ ＮＡＡ培养基上能产生大量的不定芽，不定芽在此培养基上增殖速度快，增殖速度可达 ６．３０倍。试管内小苗在 １／２ＭＳ ＋０．５ ｍｇ Ｌ－１ ＮＡＡ培养基上生根壮苗效果较好。试管苗移栽成活率为９２％。

深山含笑传粉生物学研究

为明确深山含笑（Michelia maudiae）的传粉生物学特性,该文以西华师范大学校园内的深山含笑为研究材料,采取野外观察法记录了深山含笑的开花动态、访花者及访花频率;用游标卡尺法,测定了深山含笑的异交指数（OCI）;用醋酸洋红法,测定了花粉胚珠比（P/O）;用套袋和人工授粉法,测定了深山含笑的繁育系统。结果表明：（1）深山含笑为早春开花植物,其种群花期为2~3月,持续30d左右,单花花期5-6d;在单花开放初期,最内层的花瓣未绽开,是适应潮湿或多雨的环境而保护花药与柱头免受雨水的冲刷,提高雌雄性适合度,确保繁殖成功的一种策略;（2）深山含笑的有效传粉者为蜜蜂,访花时间集中在晴朗天气的中午;（3）深山含笑的异交指数（OCI）等于5,花粉胚珠比（P/O）为2 933±50;（4）深山含笑为雄蕊先熟,柱头可授性在开花第2~3天达到最高;（5）套袋和人工授粉表明深山含笑为兼性自交和异交授粉,其中异交授粉的座果率和结籽率显著高于自交授粉。早春开花的深山含笑,其传粉者为单一的蜜蜂,繁育系统为异交,部分自交亲和,结果为引种栽培、良种选育等提供依据更好地利用和保护此资源奠定基础。

不同光强下含笑叶绿素荧光特性研究

测定研究了不同光照强度下,含笑的最大量子效率(PSII)和实际量子效率(ΦPSII)等叶绿素荧光参数的变化规律,及其对光照强度的适应特征。结果表明,随着日间光强的增大,叶片PQ还原程度和非光化学猝灭(NPQ)增加,ΦPSII则下降,但后者午后随着光强的下降可得到完全恢复;叶片吸收光能分配于光化学反应的比例随着光强的增大而迅速减少;而天线色素耗散部分及反应中心过剩的光能则显著增加,在午后光强减弱后两者均可恢复到早晨的初始水平。在弱光条件下,其叶片PQ还原程度、NPQ以及ΦPSII均无明显变化,叶片吸收光能也主要用于光化学反应,热耗散及过剩光能比例均较低。

深山含笑引种苗期试验初报

育苗试验表明，原分布在中亚热带的深山含笑基本能适应北亚热带南京地区的气候，正常生长发育。其种子发芽出土、形成幼苗需要较高积温，在塑料薄膜棚内，约需４０ ｄ。苗期生长呈单峰“∧”字形，４～６ 月生长缓慢，生长量占全年１４－４ ％ ；７ ～９ 月速生，生长量占全年８１－６ ％ ；８ 月生长量呈现峰值，占全年３９－９ ％ ；１０ ～１１ 月生长趋于停滞。１ ａ 生苗高１１－５ ～２９－０ ｃｍ ，平均高２３－４ ｃｍ ；２ ａ生苗高６５ ～１０６ ｃｍ ，平均高９４－０ ｃｍ 。苗木不耐寒，在－ ４ ℃自然低温时，１ ａ 生苗寒害率达３０％ ，需采取防寒措施。叶面喷施硼、锌、锰、镁等微量元素和磷钾肥液，能显著促进生长，减轻寒害。苗木高生长与气温、日照、蒸发量关系密切，适当减少日照，降低蒸发，增温保湿是保障引种的关键。

脯氨酸、维生素C和CaCl_2处理对深山含笑抗寒性的影响

在模拟自然降温的过程中,分别对深山含笑喷施脯氨酸(Pro)、维生素C(VC)和CaCl2溶液,从渗透调节、清除活性氧和Ca2+调节3个方面研究其抗寒性。结果显示,喷施这3种物质能明显提高SOD酶活性和Pro含量,降低丙二醛(MDA)含量;说明Pro、VC和CaCl2均能提高深山含笑的抗寒性,但相对以Pro效果更为明显。

深山含笑叶挥发油的化学成分及生物活性测定

[目的]研究深山含笑叶挥发油的化学成分,进行体外抑菌是固体试验和抗肿瘤试验研究。[方法]深山含笑鲜叶经过水蒸汽蒸馏得1种淡黄色精油,采用气-质联用法对深山含笑水提物的化学成分进行了研究,用杯碟法和AlamarBlue法进行生物活性研究。[结果]经毛细管色谱分析分离,共确认出其中34种成分,所鉴定出化学成分的质量占总量的90.10%以上,应用色谱峰面积归一法分析各成分的质量分数,其主要化学成分是莰烯(10.030%)、(-)-β-蒎烯(8.826%)、柠檬油(7.935%)、丁子香烯(12.457%);并发现其化学成分对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用,对大肠杆菌、红酵母无明显作用。在浓度为100μg/ml对肺癌细胞有较强的抑制作用,抑制率为98.91%±7.90%。[结论]该研究为深山含笑作为优良生态保健树种和药源研究提供了科学依据。

深山含笑新品种‘锦绣含笑’

‘锦绣含笑’是从深山含笑实生变异中选育的新品种。该品种的主要特点为生长速度快,树冠呈尖塔形,主干通直,侧枝稍平展、分层,幼芽、幼枝及叶背面呈绿色,无白粉。主要采用嫁接繁殖;适合在长江、淮河以南地区园林绿化及山地造林中推广应用。

长沙市城市森林树种深山含笑光合特性研究

运用Li-6400便携式光合作用测定系统对自然条件下城市森林典型树种深山含笑的光响应特性、CO2响应特性及光合作用日变化进行了研究。结果表明:(1)深山含笑的光补偿点为85μmol·m-2·s-1,光饱和点为1333μmol·m-2·s-1,表观量子效率为0.023;(2)深山含笑的CO2补偿点为121μmol·mol-1,CO2饱和点为1728μmol·mol-1,羧化速率为0.028;(3)深山含笑的光合作用的日变化为双峰曲线,有明显的光合"午休"现象,其峰值出现在10︰00和16︰00。主要的生理生态影响因子为气孔导度、光合有效辐射和大气温度等。

深山含笑叶挥发油的化学成分研究

深山含笑为我国的珍贵稀有树种.深山含笑鲜叶经过用水蒸汽蒸馏得到一种淡黄色精油,得率为1.00％～1.13％.本文用经典方法测定了该挥发油的理化性质,并用毛细管气相色谱、红外光谱、核磁共振波谱和色谱-质谱-计算机联用技术等对该挥发油进行了系统的成分分析.在分出的62个色谱峰中,共鉴定出49个化合物,占精油总量的99.31％.其主要化学成分是α-(艹守)烯(17.03％),3,6.6-三甲基-2-降蒎烯(43.80％),6,6-二甲基-3-亚甲基降蒎烷(17.18％),α-龙脑烯(9.35％),芳樟醇(1.30％),β-石竹烯(2.87％)等.本研究为合理开发这一资源提供了科学评价和依据.

深山含笑人工林生长规律的初步研究

通过对深山含笑人工林试验观察,深山含笑人工林在幼林阶段树高生长较快,前5a的年均生长量在0.8m以上,生长高峰期出现在第3～4年,年生长量接近1m,从第6年开始逐渐减慢;胸径生长速生期为前10a,从第3年开始,即进入生长高峰,年生长量达到1cm以上,一直持续至第10年;在前18a,材积增长一直处于上升阶段,并随树龄增大而加快,18年生时,还未见有减慢现象。

深山含笑和乐昌含笑叶片挥发油的成分分析及性能测定

采用超临界二氧化碳萃取法提取深山含笑和乐昌含笑叶片挥发油,应用GC-MS技术测定挥发油的成分并对其DPPH自由基清除能力和还原能力等抗氧化指标进行测定。结果表明:深山含笑萜类为35.35%,酯类为15.12%,醇类为9.09%,其余37.02%为萜烯类含氧衍生物。乐昌含笑萜类为28.49%,酯类为11.12%,醇类为1.94%,其余54.55%为萜烯类含氧衍生物。两种含笑叶片挥发油质量浓度为50mg/L时DPPH自由基清除能力达到饱和,且挥发油质量浓度越大还原能力越强。通过与常用抗氧化剂进行比较,发现两种含笑叶片挥发油的抗氧化能力均强于植酸PA没食子酸丙酯PG和抗坏血酸Vc。

深山含笑叶片总酚超声波提取工艺的优化

采用单因素实验方法研究了超声波辅助提取过程中乙醇浓度、料液比、提取温度和提取时间对深山含笑(Michelia maudiae Dunn)叶片总酚提取率的影响,并采用正交实验方法确定了最佳提取工艺条件。结果表明,深山含笑叶片总酚超声波辅助提取的最佳提取工艺为:按1∶30(质量-体积比)的料液比加入体积分数70%的乙醇,于65℃条件下用超声波辅助提取30 min。采用最佳的超声波提取工艺,深山含笑叶片的总酚提取率可达到11.41%。定性分析结果显示,深山含笑叶片的总酚提取物具有典型的酚类化合物特性,并显示出鞣质类成分、黄酮类成分和香豆素类成分的定性反应特征。

不同提取方法对深山含笑花挥发性成分的影响

采用水蒸气蒸馏(SDE)和固相微萃取(SPME)提取深山含笑花挥发性成分,气相色谱-质谱(GC-MS)分析其组成,研究不同提取方法对深山含笑花挥发性成分的影响。结果表明,深山含笑花SDE法和SPME法提取物中分别鉴定出63个化合物,包括27个相同成分。其中,莰烯、石竹烯、石竹烯氧化物、α-蒎烯、斯巴醇、苧稀和芫荽醇在两种提取法的共有成分中含量较高,共占挥发性成分总量的37.97%(SDE)和50.14%(SPME)。SDE和SPME所得深山含笑花挥发性提取物的主要成分没有明显差别。其中,SPME法样品用量少,提取效率高,是提取深山含笑挥发性成分的理想方法。

发现濒危金斑喙凤蝶寄主植物——南方广布种深山含笑

金斑喙凤蝶（ Teinopalpus aureus）1985年列入IUCN红色名录，1989年列为我国一级保护种，其种群生存现状备受关注。以样线踏查法在研究区（12．61 km2）的小面积（2．74 km2）常绿阔叶林与周边非常绿阔叶林调查金斑喙凤蝶及其潜在寄主木兰科（ Magnoliaceae ）植物，区内海拔500 m以下为农田或人类居住区，500～1100 m常绿阔叶林区分布有深山含笑（Michelia maudiae）、金叶含笑（Michelia chapensis）、醉香含笑（Michelia macclurel），共调查到29株，其中深山含笑26株，占89．66％。金斑喙凤蝶成虫多在近山顶（＞1000 m）林区活动，见雌虫正午时刻产卵（n＝14）于深山含笑叶面，此时产卵叶面日照面积百分比为（92．9±11．72）％（变异系数为12．62％）。在L∶D＝16∶8、（24±1）℃条件下，初孵幼虫取食深山含笑，历经68 d（共6龄）与2 d预蛹期后进入蛹态，20 d后羽化出成虫。结果说明当地金斑喙凤蝶寄主植物为南方广布种深山含笑，并以此探讨该濒危蝴蝶的潜在分布范围与小生境保护。

木兰科四种植物种子油的提取及脂肪酸成分分析

采用超声波辅助提取法和微波辅助提取法同时提取白玉兰、凹叶厚朴、深山含笑和醉香含笑四种木兰科植物的种子油,种子油甲酯化后,运用气相色谱—质谱联用技术测定其脂肪酸成分。结果表明:四种植物种子油的提取率不同,白玉兰平均为27.35%、凹叶厚朴23.34%、深山含笑31.66%,醉香含笑9.27%。不同提取方法所得到的种子油脂肪酸成分和相对含量不同,但四种种子油的主要脂肪酸成分相同,包括油酸、亚油酸、硬脂酸和棕榈酸。

三种含笑属植物花挥发物的原位显微拉曼光谱检测

用油细胞原位拉曼光谱检测方法,直接获得了白兰花、深山含笑、黄花含笑油细胞的拉曼光谱,通过分析研究得出其主要挥发物。白兰花盛花油细胞中的主要挥发物为:芳樟醇、β-蒎烯、没药醇、香芹酮、α-松油烯、β-榄香烯。深山含笑盛花、花蕾油细胞中的主要挥发物为:甲氧基肉桂酸乙酯、对伞花烃、香茅醇。黄花含笑小花蕾、花蕾、盛花油细胞中的主要挥发物为:香芹酮、α-蒎烯、β-蒎烯、反式-反式-金合欢醇;对伞花烃、甲氧基肉桂酸乙酯、反式-反式-金合欢醇;甲氧基肉桂酸乙酯、反式-反式-金合欢醇。

我国木兰科含笑属一新变种

本文发表了我国木兰科含笑属一新变种,它被命名为M ichelia maudiaeDunn var.rubicundaY i et J.C.Fan。

深山含笑对酸雨胁迫的适应性研究

应用模拟酸雨溶液喷洒法和石蜡切片技术,研究了深山含笑幼苗在不同pH值(2.0,3.0,4.0,5.6(对照))的酸雨溶液胁迫下的生长情况(叶面积、苗高、根长等)和叶片解剖结构变化。结果表明:pH<3.0的酸雨溶液严重抑制幼苗的生长,植株出现明显的伤害症状,大量的苗木出现死亡;显微结构观察显示,叶表皮及叶肉细胞结构均受损或坏死。与对照相比,pH≥3.0的酸雨溶液处理对苗木的伤害较轻,可见性伤害症状不明显,显微观察结果显示仅表皮细胞受损。从生长指标来看,pH≥3.0的酸雨溶液对苗木生长有促进作用,呈正生物效应。