micoRNA与心血管疾病

mico RNA是一类高度保守的非编码小RNA,通过与靶基因的3'端非编码区域(3'UTR)互补配对后降解mico RNA分子的稳定性和翻译抑制两种方式参与靶基因表达。生物信息学分析表明人类全部基因的1/3的基因都受到mico RNA调控。最新研究表明,mico RNA在心血管病理、生理过程中起了十分重要的调控作用。它参与了心脏发育、心脏重塑、心律失常、血管生成、血管病变等过程。因此,研究mico RNA在心血管疾病的发病过程中的作用机制具有重大的理论及临床意义。

MicroRNA在抑郁症中作用的研究进展

微小RNA(miRNA)是一类近年发现的在生物体内广泛分布的长约22个核苷酸的非编码新型微小RNA。它通常是通过与靶mRNA的3'UTR结合,抑制mRNA翻译或介导mRNA降解来调控生物体内一系列的生理、病理过程。近年来研究显示miRNA在抑郁症的发生、发展中扮演着重要的角色。文章就miRNA与抑郁症的相关性及在抑郁症发病机制和治疗等方面的研究进展进行综述,以期对深入认知和最终治愈抑郁症带来新的启示。

miR-1抑制SDF-1表达和分泌调控HMSC-bm向肝癌细胞迁移

目的明确肿瘤抑制性micro RNA-1(miR-1)能否通过抑制SDF-1的表达和分泌,调控骨髓间充质干细胞(HMSC-bm)向肿瘤组织的转移。方法 (1)分别利用miR-1表达质粒pSuper-miR-1和miR-1反义寡核苷酸,在肝癌细胞系HepG2中过表达或下调miR-1,Western blot和酶联免疫吸附实验分别检测肝癌细胞蛋白裂解物和培养上清液中SDF-1的表达和分泌水平;(2)构建融合SDF-1 3'UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因载体,将其与pSuper-miR-1共转染HEK293细胞,利用双萤光报告基因检测系统检测重组萤光素酶的表达情况。(3)利用pSuper-miR-1或miR-1反义寡核苷酸转染接种于Transwell下层小室的HepG2细胞过表达miR-1或下调miR-1水平,检测Transwell上层小室HMSC-bm向下层小室HepG2肝癌细胞的迁移情况。结果 (1)在肝癌细胞,HepG2过表达miR-1能够显著抑制SDF-1蛋白表达和分泌,而下调miR-1水平则能够诱导SDF-1的表达和分泌。(2)miR-1能够抑制携带SDF-1 3'UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因活性。(3)在Transwell下层小室的HepG2细胞中过表达miR-1后,上层小室中HMSC-bm向下层小室迁移细胞数量显著减少,而下调下层小室HepG2细胞中miR-1表达水平,则明显增加HMSC-bm向HepG2肝癌细胞的迁移。结论 miR-1能够直接抑制肝癌细胞SDF-1的表达和分泌,并藉此降低肝癌细胞对HMSC-bm的趋化作用。

常染色体显性多囊肾病的发病机制与相关治疗研究进展

常染色体显性多囊肾病(ADPKD)是一种常见的单基因遗传病,由基因PKD1或PKD2突变引起,PKD1突变约占85%,PKD2突变约占15%。ADPKD患者表现为肾囊肿呈进行性生长,伴有囊性液体产生,最终导致终末期肾病和肾功能衰竭。研究表明ADPKD与生长因子、信号通路、细胞增殖与凋亡、表观遗传机制、micoRNA等有关。目前关于多囊肾的研究取得了许多进展,但由于本病发病机制复杂,临床治疗此病仍缺少行之有效的药物,因此需要进行更加深入的研究。

短期综合干预对单纯性肥胖儿童体循环miR-142-5p、miR-133b表达的影响

目的观察短期综合干预(EONPS)对单纯性肥胖儿童体循环微小RNA(miR)-142-5p及miR-133b表达变化的影响,探讨其与体格数据、生化指标变化的关系及意义。方法对12例8~10岁的单纯性肥胖儿童进行为期3周的综合干预,对比干预前后体格数据、生化指标及miRNA-142-5p、miRNA-133b的表达水平变化,并分析其相关性。结果经过3周EONPS,12例单纯性肥胖儿童未观察到明显不适及不良事件,其体质量、腰围、腰围/身高、BMI、空腹胰岛素、总胆固醇、甘油三酯、胰岛素抵抗指数水平下降,胰岛素敏感指数增大(P均<0.05),而血压、空腹血糖、HDL-C、非HDL-C(non-HDL-C)等指标无明显变化。其体循环miR-142-5p表达值上升(P<0.05),其变化值与腰围/身高、血压、BMI差值呈正相关,与甘油三酯、LDL-C差值呈负相关(P均<0.05);miR-133b表达值上升不明显(P>0.05),其与体格测量数据及生化指标的变化无明显相关性。结论EONPS能有效降低肥胖儿童体质量、改善其体成分,提高胰岛素敏感性及体循环中miR-142-5p的表达水平,miR-142-5p或可作为肥胖儿童脂代谢紊乱的分子标志物。

miR-7靶向IGF-1R信号通路对癫痫大鼠海马组织的保护作用

目的探讨微小RNA-7(miR-7)靶向胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号通路对癫痫大鼠海马组织的保护作用。方法选择雄性SD大鼠40只,随机选择10只为正常大鼠,剩余30只为癫痫模型大鼠,癫痫模型大鼠腹腔注射戊四氮(40 mg·kg^(-1)·d^(-1)),28 d后记录两组大鼠Racine等级评分。造模成功后将30只癫痫模型大鼠随机分为模型组、阴性对照组(转染agomir NC)、miR-7过表达组(转染miR-7 agomir),采用苏木精-伊红染色观察各组大鼠脑海马组织病理形态学改变,qRT-PCR检测各组大鼠脑组织miR-7和IGF-1R mRNA表达水平,双荧光素酶报告实验验证miR-7与IGF-1R的靶向关系,TUNEL法检测各组大鼠脑海马神经元细胞凋亡数,Western blot检测各组大鼠脑组织IGF-1R、磷酸化胰岛素样生长因子-1受体(p-IGF-1R)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平。结果癫痫模型大鼠Racine等级评分显著高于正常大鼠,证明癫痫模型建立成功。正常对照组大鼠海马组织神经元细胞结构形态正常,排列整齐,细胞核饱满,与正常对照组比,模型组和阴性对照组大鼠海马组织神经元细胞减少,排列紊乱松散,细胞核破裂,细胞呈空泡状,miR-7表达水平下降,IGF-1R mRNA表达水平升高,细胞凋亡数目增多,Bax、IGF-1R、p-IGF-1R蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与阴性对照组比,miR-7过表达组大鼠海马组织神经元细胞增多,排列较为整齐,细胞核破裂缓解,细胞结构形态趋于正常,miR-7表达水平升高,IGF-1R mRNA表达水平下降,细胞凋亡数目减少,Bax、IGF-1R、p-IGF-1R蛋白表达水平下降(P<0.05),双荧光素酶实验结果表明IGF-1R是miR-7的靶基因。结论miR-7可能通过靶向IGF-1R信号通路抑制癫痫大鼠海马组织神经元细胞凋亡,从而对癫痫大鼠起到保护作用。

microRNA对肺癌诊断和治疗作用的研究进展

microRNA是由20-25个核苷酸的组成的非编码小分子RNA,它具有癌基因和抑癌基因的作用,与肿瘤的诊断、分期、进展、预后以及治疗有密切的关系。研究显示,microRNA在肺癌组织中具有特定的表达谱,参与了肺癌发生发展的整个过程。本研究主要就microRNA在肺癌诊断和治疗作用上的最新进展进行综述。

膀胱癌组织中UCA1、miR-141的表达及临床意义

目的研究膀胱癌组织中尿路上皮癌抗原1(UCA1)、micoRNA-141(miR-141)的表达及临床意义。方法以2013年2月~2015年2月山东省临沂市肿瘤医院收治的膀胱癌患者83例为研究对象。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测UCA1、miR-141表达情况,并分析UCA1、miR-141表达与患者临床病理特征的关系。此外,对所有患者均进行为期3年的随访,将其按照生存状况的不同分为存活组(n=39)与死亡组(n=44),比较两组UCA1、miR-141表达情况。结果膀胱癌组织中UCA1、miR-141阳性率相比癌旁正常组织较高(均P<0.05)。病理分级为G1、临床分期T1~T2期、无淋巴结转移的膀胱癌组织中UCA1阳性率相比病理分级为G2~G3、临床分期T3~T4期、有淋巴结转移较低(均P<0.05)。临床分期T1~T2期、无淋巴结转移的膀胱癌组织中miR-141阳性率相比临床分期T3~T4期、有淋巴结转移较低(均P<0.05)。存活组膀胱癌组织中UCA1、miR-141阳性率相比死亡组较低(均P<0.05)。结论膀胱癌组织中UCA1、miR-141均存在明显高表达,临床工作中可通过上述两项指标的检测进行膀胱癌患者病情判断以及预后评估。

hsa_circ_0044556通过miR145/PD-L1介导NK细胞对肝癌细胞的杀伤作用

目的:探究hsa_circ_0044556在肝癌细胞免疫逃逸中的作用及其相关机制。方法:收集肝癌患者肿瘤组织及其癌旁组织,通过qRT-PCR检测hsa_circ_0044556和PD-L1表达水平并进行相关性分析。采用qRT-PCR检测正常肝上皮HL-02细胞和肝癌SMMC-7721、HCCLM3细胞hsa_circ_0044556及PD-L1表达水平。通过信息学预测和荧光素酶报告实验检测hsa_circ_0044556和miR145以及miR145和PD-L1的靶向关系。通过脂质体转染法将si-hsa_circ_0044556、si-miR145、si-NC转染至HCCLM3细胞,分组为:si-NC组、si-hsa_circ_0044556组、si-miR145组和si-hsa_circ_0044556+si-miR145组。比较各组细胞PD-L1表达水平、细胞增殖能力;通过NK细胞毒性试验检测对NK细胞杀伤的敏感性。结果:与癌旁组织相比,肿瘤组织hsa_circ_0044556和PD-L1表达水平升高(P<0.05),hsa_circ_0044556与PD-L1表达成正相关(r=0.5481)。在HL-02、SMMC-7721、HCCLM3细胞中,hsa_circ_0044556和PD-L1表达水平依次升高(P<0.05)。hsa_circ_0044556靶向抑制miR145表达;miR145靶向抑制PD-L1表达。与si-NC组相比,si-hsa_circ_0044556组miR145基因表达升高,PD-L1蛋白表达降低,细胞增殖能力减弱,对NK细胞杀伤的敏感性增加(P<0.05);与si-NC组相比,si-miR145组PD-L1基因和蛋白表达升高,细胞增殖能力增加,对NK细胞杀伤的敏感性降低(P<0.05);与si-hsa_circ_0044556组相比,si-hsa_circ_0044556+si-miR145组PD-L1表达水平增加,细胞增殖能力增加,对NK细胞杀伤的敏感性降低(P<0.05)。结论:在肝癌细胞中,hsa_circ_0044556通过miR145/PD-L1信号轴促进肝癌细胞增殖的同时抑制对NK细胞杀伤的敏感性,从而介导肿瘤细胞的免疫逃逸。

hsa-mir-96在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义

目的探讨hsa-mir-96在膀胱尿路上皮癌的表达及其与膀胱尿路上皮癌病理分级及临床分期的关系。方法采用Real-time PCR方法检测33例膀胱尿路上皮细胞癌及9例癌旁正常膀胱组织中hsa-mir-96的表达情况,并分析其与膀胱尿路上皮细胞癌病理分级及临床分期的关系。结果 hsa-mir-96在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达明显高于癌旁正常膀胱组织(P<0.01)。其表达与膀胱尿路上皮细胞癌的病理分级、临床分期密切相关,随病理分级、临床分期的增高其表达也升高,但与性别无关。结论 hsa-mir-96可能参与了膀胱尿路上皮细胞癌的发生、发展过程。

反义miR-155对人胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响

目的观察敲低微小RNA-155(miR-155)的表达对人胶质瘤细胞系U251细胞增殖和凋亡的影响。方法脂质体介导转染miR-155反义抑制序列(AS-miR-155)下调人胶质瘤U251细胞中miR-155的表达,同时设未转染组和无义序列转染组。实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测转染后细胞miR-155的表达,四甲基偶氨唑盐(MTT)实验检测转染后细胞增殖活性,流式细胞术(FCM)检测转染后细胞周期变化和凋亡情况。结果与未转染组和无义序列转染组相比,miR-155反义抑制序列转染组细胞miR-155表达下降;MTT实验结果显示细胞生长受抑;流式细胞术结果可见细胞出现G0/G1期阻滞,细胞凋亡率增高。结论反义miR-155可抑制U251胶质瘤细胞生长增殖,促进其凋亡。miR-155可能成为治疗胶质瘤的候选靶标。

反复呼吸道感染患儿外周血单个细胞中微小RNA-146a和微小RNA-155表达水平及其临床意义

目的探讨反复呼吸道感染(RRTI)患儿外周血单个核细胞(PBMC)中微小RNA(miR)-146a、miR-155表达水平及其临床意义。方法纳入100例RRTI患儿(研究组)及100例健康儿童(对照组)。采用实时荧光定量PCR测定PBMC中miR-146a、miR-155的表达水平,并测定血清C反应蛋白(CRP)、白细胞计数和IgG、IgA、IgM水平。分析RRTI患儿PBMC中miR-146a、miR-155表达水平与各感染指标、免疫指标的相关性。采用Logistic回归模型分析影响RRTI发病的危险因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-146a、miR-155以及两者联合对RRTI的诊断效能。结果与对照组比较,研究组CRP水平、白细胞计数升高,而PBMC中miR-146a、miR-155的相对表达水平、IgA、IgM、IgG水平较低(均P<0.05)。RRTI患儿PBMC中miR-146a、miR-155相对表达水平与白细胞计数均呈负相关,而与IgA、IgM、IgG均呈正相关,且miR-146a与miR-155相对表达水平呈正相关(均P<0.05)。miR-146a、miR-155相对表达水平和IgA、IgM、IgG水平降低均是RRTI发生的危险因素(均P<0.05)。miR-146a水平、miR-155水平、两者联合诊断RRTI的ROC曲线下面积分别为0.826、0.859、0.905,而两者联合诊断的曲线下面积大于单一指标诊断(均P<0.05)。结论RRTI患儿PBMC中miR-146a、miR-155表达降低,两者可能共同参与免疫炎症调控过程从而导致RRTI发生。联合检测miR-146a、miR-155水平对儿童RRTI有一定的临床诊断价值。

尿道下裂相关miRNA差异表达分析的初步探讨

目的通过筛选尿道下裂、术前经HCG治疗的尿道下裂以及正常包皮组织中miRNA差异表达,探究其与尿道下裂的发生以及术前HCG治疗影响预后的可能途径,为探究尿道下裂病因提供新思路。方法选取9例尿道下裂(其中3例术前进行HCG治疗)以及3例包茎患儿(对照组)为研究对象,分别取包皮组织抽提总RNA,利用芯片技术筛选各组差异性表达的miRNAs,并用RT-PCR技术对筛选结果进行验证。结果芯片筛选结果:与对照组比较,尿道下裂患儿的包皮组织里差异性表达的miRNAs中上调的19个,下调的15个。与术前行HCG治疗组的患儿相比,术前未行HCG治疗的尿道下裂患儿包皮组织里差异性表达的miRNA中上调的19个,下调的25个;RT-PCR验证结果:在差异性表达的miRNA中选择10个miRNA进行验证,其中5个miRNA与芯片结果相符,分别是let-7b-3p、miR-145-5p、miR-376a-3p、miR-377-3p和miR-1-3p。其中let-7b-3p、miR-145-5p、miR-376a-3p、miR-377-3p在尿道下裂组中低表达,在对照组和术前HCG治疗的尿道下裂组中高表达;miR-1-3p在术前HCG治疗的尿道下裂患儿中较未用药组中高表达。结论首次建立尿道下裂患儿miRNAs的基因表达谱,并筛选出在术前行HCG治疗尿道下裂、术前未行HCG治疗尿道下裂与包茎之间存在差异表达的miRNAs。根据筛选出的差异性表达的miRNAs,推测其与尿道下裂的关系,为今后疾病的预防以及提高治疗效果提供新的线索。

微小RNA-933靶向调控BDNF表达及对肝癌细胞迁移侵袭的影响

目的探讨微小RNA-933(miR-933)对脑源性神经营养因子(BDNF)的靶向调控作用及肝癌细胞迁移侵袭的影响。方法收集本院2017年1月至2017年12月经手术切除的30例肝癌组织及对应癌旁组织,采用实时定量PCR(QPCR)检测以上组织和肝癌细胞(Huh7、Hep G2和SK-Hep-1)中的miR-933水平;采用脂质体法向SK-Hep-1细胞分别转染miR-933模拟物(过表达组)和miR-933阴性对照(对照组),采用QPCR法检测转染48 h后各组的miR-933水平以评价转染效率;分别采用Transwell和划痕实验检测各组的侵袭和迁移情况;QPCR和Western blotting分别检测各组的BDNF mRNA和蛋白水平;双荧光素酶报告基因实验验证miR-933与BDNF之间靶向关系和结合位点。结果肝癌组织中的miR-933水平为0.351±0.026,低于癌旁组织的1.124±0.054,差异有统计学意义(P<0.05);Huh7、Hep G2和SK-Hep-1细胞系中miR-933水平分别为0.751±0.062、0.453±0.057和0.017±0.006,均低于健康肝细胞系L02,差异有统计学意义(P<0.05);过表达组转染48h后SK-Hep-1细胞的miR-933水平为3.197±0.354,高于对照组的1.019±0.079,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达组的愈合率和穿膜细胞数分别为(24.4±3.9)%和(57.6±6.8)个,均低于对照组的(62.5±4.7)%和(102.6±9.5)个(P<0.05)。过表达组的BDNF mRNA和蛋白水平均低于对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示,miR-933显著抑制野生型BDNF-3’UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型BDNF-3’UTR荧光素酶活性无影响(P>0.05)。结论 miR-933在肝癌组织和细胞中水平下调,且可抑制肝癌细胞的侵袭迁移,可能是通过靶向调控BDNF来实现,可作为肝癌的潜在治疗靶点。

右美托咪定对缺血性脑损伤大鼠神经功能及认知障碍恢复的影响研究

目的:探讨右美托咪定对缺血性脑损伤大鼠神经功能及认知障碍恢复的影响。方法:将缺血性脑损伤大鼠(n=45)随机平分为三组:模型组、地佐辛组与右美托咪定组。右美托咪定组在再灌注即刻腹腔注射右美托咪定40μg/kg,地佐辛组在再灌注即刻腹腔注射地佐辛40μg/kg,模型组在再灌注即刻腹腔注射相同容量0.9%氯化钠溶液,检测神经功能缺陷评分、血清白介素(IL)-1β、IL-6、micoRNA-329-3p表达水平及海马组织可调控cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、白介素-1受体拮抗剂(IL-1RA)蛋白相对表达水平。结果:地佐辛组与右美托咪定组再灌注后第1、3、7天逃避潜伏期、神经功能缺陷评分低于模型组(均P<0.05),右美托咪定组低于地佐辛组(P<0.05);地佐辛组与右美托咪定组再灌注后第7天IL-1β、IL-6表达水平、micoRNA-329-3p相对表达水平低于模型组(均P<0.05),右美托咪定组低于地佐辛组(P<0.05);地佐辛组与右美托咪定组再灌注后第7天的大脑海马组织CREB、IL-1RA蛋白相对表达水平高于模型组(均P<0.05),右美托咪定组高于地佐辛组(P<0.05)。结论:右美托咪定可通过协调micoRNA-329-3p/CREB/IL-1RA轴的表达,促进缺血性脑损伤大鼠神经功能及认知障碍恢复正常,具有很好的脑保护效果。

不同泌乳期人乳外泌体miRNA表达谱的研究

采用超高速离心法从人乳中提取出囊泡结构物质,从粒径、形态和外秘体特异性标记蛋白3个方面来确定提取的物质为外泌体。采用高通量测序得到不同泌乳期外泌体中microRNA(miRNA)的表达谱。对表达谱进行分析,在人乳外泌体中共检出852种miRNA,有283种miRNA在早、中、晚3个泌乳期中均有所表达。其中,表达量排名前10位的miRNA占到总量的50%以上。在外泌体中高表达的miRNA(占总外泌体miRNA表达量2%以上的)并没有受到泌乳期的显著影响;而在外泌体中低表达的一些miRNA(占总外泌体miRNA表达量0.01%以下的)容易受到泌乳期的显著影响。此外,发现在人乳外泌体中有88种miRNA与炎症相关,其中有65种在不同泌乳期均稳定表达。综上,人乳外泌体可能具有调控炎症的功能,本研究为更好地研究不同泌乳期人乳外泌体生理功能提供基础数据。

血浆外泌体miR-409-3p的异常表达与冠状动脉搭桥术围术期神经认知障碍的相关性分析

目的:分析血浆外泌体miR-409-3p与冠状动脉搭桥术围术期神经认知障碍(perioperative neurocognitive disorders,PND)的相关性。方法:共纳入76例冠状动脉搭桥术患者,于术前1 d和术后7 d进行神经心理测试评估,并根据评估结果将患者分为PND组(n=24)和非PND组(n=52)。提取所有患者血浆外泌体,分别采用透射电镜、粒径分析、Western blot对其进行鉴定。采用qRT-PCR检测外泌体miR-409-3p的表达水平。Logistic回归分析PND发生的危险因素。结果:两组在年龄、手术时间及教育年限方面差异有统计学意义。血浆外泌体miR-409-3p在PND组中的表达高于非PND组。年龄、手术时间及外泌体miR-409-3p为PND发生的独立危险因素。结论:高表达的血浆外泌体miR-409-3p可作为冠状动脉搭桥术PND的新型分子标志物。

微小RNA与DNA甲基化相互调控在胃癌中的作用

表观遗传修饰在胃癌发生发展及预后中起重要作用。微小RNA（miRNA）和DNA甲基化是表观遗传学的两个重要调控机制。miRNA抑制靶基因信使RNA的翻译，参与基因转录后水平调控。基闪启动予区CpG岛的异常甲基化与肿瘤的发生关系密切，可导致癌基因、抑癌基因或其他肿瘤相关基因的表达异常。胃癌中存在miRNA和DNA甲基化的相互调控，对其调控网络的研究为胃癌的诊治提供新的方向。

miR-155-5p靶向YWHAZ影响22RV1细胞的增殖和迁移

[目的]研究miR-155-5p是否靶向YWHAZ调控22RV1细胞的增殖和迁移。[方法]数据库筛选靶向YWHAZ的micRNA;过表达miR-155-5p后用RT-qPCR检测YWHAZ表达水平;CCK-8和划痕试验检测miR-155-5p是否靶向调控YWHAZ影响22RV1的增殖和迁移。在线数据库筛选miR-155-5p与YWHAZ 3'UTR的结合靶点,通过将YWHAZ的3'UTR插入双荧光素酶报告系统中进行互作位点的检测。[结果]miR-155-5p在多个数据库中均靶向YWHAZ且得分最高,且miR-155-5p的过表达,极显著抑制了YWHAZ的表达(P<0.01);CCK-8和细胞划痕结果表明,转染miR-155-5p的试验组,22RV1细胞增殖和迁移能力均显著低于NC组(P<0.05)。双荧光素酶试验结果表明转染miR-155-5p+pmriGLO-YWHAZ后22RV1荧光活性极显著低于转染NC+pmriGLO-YWHAZ组(P<0.01),说明miR-155-5p靶向结合YWHAZ的3'UTR区。[结论]miR-155-5p靶向结合YWHAZ的3'UTR区,极显著抑制了YWHAZ的表达(P<0.01)。最终显著抑制了22RV1细胞增殖和迁移能力(P<0.05),相关结果为研究前列腺癌症靶向药物提供理论基础和实验思路。

miRNA-30a-3p下调Atg3介导的自噬抑制肝癌细胞侵袭和转移

目的探讨miRNA-30a-3p通过靶向作用自噬相关蛋白3（Atg3）介导的自噬通路，对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法利用免疫组化检测人肝癌肝组织中miRNA-30a-3p、Atg3含量及其相关性：体外培养肝癌细胞，模拟饥饿环境诱导自噬，LC3自噬双标腺病毒转染肝癌细胞以检测自噬体形成情况。蛋白印迹实验（Western blot）检测自噬相关蛋白[自噬相关蛋白3（Atg3）、泛素结合蛋白（p62）、自噬微管相关蛋白轻链3（LC3）]和上皮-间充质转化（epithelial mesenchymal transition，EMT）相关蛋白[钙黏附分子N（N—cadherin）、波形蛋白（vimentin）、snail蛋白、胞质紧密粘连蛋白1（ZO-1）]表达水平。CCK-8试剂盒检测肝癌细胞活性。结果促进肝癌细胞中miRNA-30a-3p表达，可降低Atg3、LC3表达、增加p62表达，抑制自噬体形成；反之，可增加Atg3、LC3表达、降低p62表达，促进自噬体形成。抑制A邸表达，可使EMT相关蛋白表达降低。抑制miRNA-30a-3p表达，肝癌活性细胞数量在各个时间点呈升高趋势（F1=10．314，P〈0．05）；而抑制miRNA-30a-3p表达的同时抑制Atg3表达，肝癌活性细胞数量在各个时间点呈下降趋势（F2=6．599，P〈0．05）。结论miRNA-30a-3p能抑制Atg3介导的自噬通路，降低细胞自噬活性，从而抑制肝癌细胞增殖、侵袭和转移。