微量全血彗星实验法的建立及在生物监测中的初步应用

目的 建立一种简捷、实用的末梢血样直接用于彗星实验的新技术。方法 按随机、对照及重复的实验原则 ,于早、中、晚时段分别采集 6只昆明种雄性小鼠的尾血 ,每次取血样 3 μl/只进行彗星实验。电泳条件设置为电压 2 5V ,电流 13 0mA ,DNA碱性解旋与电泳各 3 0min。并以小样本人群对新建方法的有效性进行了初步验证。结果 ①小鼠尾全血彗星图像清晰、对比度高 ,阳性与阴性对照组的拖尾率总体差异明显 ,重现性良好 ;②本方法可用于检测吸烟人群的DNA断裂损伤 ,并能在损伤程度上 (拖尾率与尾长 2项指标明显 )与非吸烟人群相鉴别。结论 基本建立了微量全血彗星实验法 。

心肌梗死急诊经皮冠状动脉介入治疗前后全血中miR-92a的表达

目的观察急性心肌梗死患者行急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)前后静脉血中miR-92a的表达及其变化,探讨miR-92a在急性心肌梗死中的临床意义。方法采用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)技术检测11例健康者静脉血及21例急性心肌梗死患者行PCI前后静脉血中miR-92a的表达。结果急性心肌梗死患者全血中的miR-92a水平高于健康人,PCI术后的miR-92a表达明显比术前下降。结论 miR-92a可能参与了急性心肌梗死的发生发展及转归的过程,抑制miR-92a的表达可能是未来治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的靶点。

超微速溶制剂与传统汤剂的药理比较——超微速溶理中汤

目的:通过对寒凝血瘀型慢性胃炎大鼠及小鼠肠推进运动的研究,比较了理中汤超微速溶制剂与传统汤剂的药理作用与剂量关系。结果:超微速溶理中汤1.2、0.6、0.3g生药/kg剂量,即相当于临床用量的1/2、1/4、1/8倍剂量组大鼠的全血黏度、卡松黏度均有不同程度的显著性差异,1/16倍剂量也显示了降低的趋势;1/4、1/8倍剂量对血浆黏度有明显改变;1/2、1/4、1/8倍剂量组大鼠的红细胞电泳时间均有不同程度的显著性差异,1/2倍剂量组红细胞集聚、血液屈服力有显著性差异,且对大鼠胃、十二指肠病变有显著改善;超微速溶理中汤1.2g生药/kg剂量,即相当于临床用量的1/2倍剂量组小鼠的肠推进率有显著性差异.其他剂量组有改善脾虚小鼠肠推进率增加的趋势。结论代表“温法”的理中汤治疗脾胃虚寒时剂量可小,其超微速溶制剂的剂量可减致1/8;治疗胃痛胃炎时剂量可大,其超微速溶制剂的剂量以1/2为宜。

维持性血液透析患者微量元素与微炎症状态的相关性分析

目的探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者全血微量元素与微炎症状态(micro-inflammatory state)之间的关系。方法采用单中心横断面研究,纳入2019年9月暨南大学附属广州红十字会医院血液净化中心行规律MHD的患者,收集受试者的人口学和临床资料,测定透析前血常规、血清生化指标和全血微量元素铜、锌、锰、铅、硒(电感耦合等离子体质谱仪法)。根据血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平分为微炎症状态组(hs-CRP 3~15mg/L)和对照组(hs-CRP<3mg/L),比较2组临床特征。应用Spearman相关分析和二元Logistic回归评价与MHD患者微炎症状态相关的因素。结果共纳入128例MHD患者,其中微炎症状态组65例,对照组63例,Spearman相关分析提示hs-CRP、IL-6与全血铜水平呈正相关(r=0.530、0.427,均P<0.001)。在校正相关混杂因素后,多因素二元Logistic回归显示全血铜升高(OR=1.008,95%CI:1.004~1.012,P<0.001)和全血铜≥810.60μg/L组(OR=7.406,95%CI:3.080~17.807,P<0.001)是MHD患者微炎症状态的独立相关因素。结论MHD患者全血铜水平升高与微炎症状态独立相关,值得引起临床工作者的重视并有必要加强对该患者全血铜水平的随访监测。

微量全血诱生γ-干扰素的酶免疫测定法

建立了一种微量全血诱生γ-干扰素(IFN-γ)的酶免疫测定法.将抗凝全血、脂多糖(LPS)、植物血凝素(PHA)、RPMI 1640培养基和HRP标记的抗IFN-γ单克隆抗体,同置于用抗IFN-γ多克隆抗体包被的反应板微孔中.此法IFN-γ最小检出量为0.5ng/ml,特异性、重复性均较好,适于临床应用.

微量全血法高通量彗星试验方法的研究与应用

目的建立一种简易快捷,适合大样本人群生物监测的微量全血法高通量彗星试验技术方法。方法选择1名不吸烟男性,探索微量全血法的彗星试验条件,建立了微量全血法的高通量彗星试验方法。并在柴油机尾气(diesel engine exhaust,DEE)暴露人群中进行验证。结果经过对铺胶量和细胞上样量的探索,发现30μl细胞悬液能够均匀铺设到彗星玻片的小孔中,胶片表面比较平整,细胞基本为单层,经裂解液处理后也不易脱落。上样量中发现5μl抗凝全血与200μl琼脂糖凝胶混合,细胞分散均匀,间距适当,电泳后无细胞重叠,图像清晰容易分辨,对比度较高。在方法学的验证中,高通量彗星试验的结果显示,在DEE暴露组较对照组的彗星尾长、尾矩和尾部DNA百分含量均明显增加,板间及板内变异度小于10%。结论全血法高通量彗星实验适用于化学致癌物和污染物遗传损伤的检测。