冠心病患者血清中微小RNA-206和组蛋白去乙酰化酶4水平与冠状动脉病变严重程度的关系

目的探讨冠心病(CHD)患者血清中微小RNA(miR)-206和组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)水平与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法纳入北京市大兴区人民医院2021年5月至2022年10月诊治的124例CHD患者进行研究,根据Gensini评分将患者分为轻度病变组(Gensini评分<20分,86例)、重度病变组(Gensini评分≥20分,38例)。Spearman相关分析法分析CHD患者血清miR-206及HDAC4水平与Gensini评分的相关性;多因素Logistic回归分析CHD患者冠状动脉病变程度的影响因素;ROC曲线分析血清miR-206及HDAC4水平对CHD患者冠状动脉病变程度的预测效能。结果冠状动脉重度病变组CHD患者低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平及高血压所占比例高于轻度病变组,差异有统计学意义(χ^(2)/t=2.203、4.965,P<0.05);重度病变组患者血清miR-206和HDAC4水平均高于轻度病变组,差异有统计学意义(t=3.035、4.121,P<0.05);血清miR-206和HDAC4水平与Gensini评分均呈正相关(r=0.908、0.950,P<0.05);高血压、LDL-C、miR-206和HDAC4为CHD患者冠状动脉重度病变的影响因素(OR=2.116、2.216、3.209、2.669,P<0.05);血清miR-206、HDAC4以及LDL-C、高血压预测CHD患者冠状动脉病变程度的曲线下面积(AUC)分别为0.662、0.695、0.692、0.607,而联合检测的AUC为0.825,优于各自单独预测(均P<0.01)。结论CHD患者冠状动脉病变程度增加血清miR-206、HDAC4水平升高,并且联合检测对CHD患者冠状动脉病变程度有较好的预测效能。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞microRNA-206表达水平的变化及意义

目的：探讨外周血单个核细胞microRNA-206在类风湿关节炎发生中的作用。方法收集2012年12月-2013年11月确诊的类风湿关节炎患者27例及25例健康对照外周血标本，分离 PBMCs。采用实时定量 PCR（qRT-PCR）方法检测PBMCs中microRNA-206及锌指样转录因子4（KLF4）、孤儿核受体γt（RORγt）mRNA相对表达量。统计学处理采用非配对t检验和 Spearman相关分析。结果类风湿关节炎患者外周血单个核细胞 microRNA-206表达的水平显著低于健康对照组（0.056±0.019 vs 0.138±0.057，t＝3.103，P＜0.01），KLF4 mRNA和RORγt mRNA表达水平显著高于健康对照组（0.604±0.183 vs 0.098±0.027，t＝6.651，P＜0.01；0.583±0.271 vs 0.069±0.018，t＝7.438，P＜0.01），类风湿关节炎患者外周血单个核细胞microRNA-206表达水平与 KLF4及 RORγt相对表达量均呈负相关（r＝-0.639，P＜0.01；r＝-0.842，P＜0.01）。结论类风湿关节炎患者外周血单个核细胞 microRMA-206表达的水平下降，与疾病的发生发展关系密切。

下肢动脉硬化闭塞症患者介入手术后血清微小RNA-206水平变化及临床意义

目的分析下肢动脉硬化闭塞症(LEASO)患者介入手术后血清微小RNA-206(miRNA-206)水平的变化情况及临床意义。方法选取2019年9月至2021年9月于北京清华长庚医院接受手术治疗的83例LEASO患者作为LEASO组,同时选取同期80例健康体检者作为对照组。根据预后的不同将LEASO组患者分为再狭窄组(n=39)和非再狭窄组(n=44),比较LEASO组和对照组术前(入院时)血清血小板活化因子(PAF)、C反应蛋白(CRP)、miRNA-206水平,比较再狭窄组和非再狭窄组患者术后6个月时的临床特征、不同时间(术前、术后24 h、术后1个月、术后6个月)miRNA-206水平,分析LEASO患者介入手术后发生再狭窄的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNA-206对LEASO患者介入手术后1个月发生再狭窄的预测价值。结果LEASO组的术前血清PAF、CRP、miRNA-206水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。术后6个月,再狭窄组患者血清PAF、CRP水平均明显高于非再狭窄组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。术后1、6个月,再狭窄组患者的miRNA-206水平均高于非再狭窄组患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05);术前、术后24 h,再狭窄组与非再狭窄组患者的miRNA-206水平比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。多因素分析结果显示,miRNA-206高表达、PAF高表达、CRP高表达均是LEASO患者介入手术后发生再狭窄的独立危险因素(P﹤0.05)。ROC曲线分析结果显示,miRNA-206诊断LEASO患者术后1个月发生再狭窄的AUC为0.831(95%CI:0.803~0.942),灵敏度为91.13%,特异度为76.08%。结论miRNA-206表达水平的升高与LEASO患者介入手术后发生再狭窄有关,可以作为预测LEASO患者介入手术后发生再狭窄的标志物。

重症脑梗死患者血清中miR-206和miR-210的表达变化及临床意义

目的探究重症脑梗死患者血清中微小RNA-206(miR-206)和微小RNA-210(miR-210)的表达变化及临床意义。方法选取2021年6月至2022年6月在黄河三门峡医院收治的重症急性脑梗死(ACI)患者96例为重症ACI组,同期收集治疗的轻型ACI患者90例为轻型ACI组,体检健康的志愿者94例为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组血清miR-206和miR-210的表达水平;采用Pearson法分析重症ACI患者血清miR-206和miR-210表达的相关性;ROC曲线分析血清中miR-206和miR-210的表达水平对重症ACI的诊断价值;多因素Logistic回归分析重症ACI发生的影响因素。结果与轻型ACI组相比,重症ACI组NIHSS评分、脑梗死体积显著升高(P<0.05)。重症ACI组miR-206的表达水平显著低于轻型ACI组及对照组,轻型ACI组显著低于对照组;重症ACI组miR-210的表达水平显著高于轻型ACI组及对照组,轻型ACI组显著高于对照组(P<0.05)。相关性分析显示,重症ACI患者血清中miR-206和miR-210表达水平呈负相关关系(r=-0.366,P<0.001)。二者联合诊断重症ACI的AUC高于miR-206和miR-210单独诊断的AUC值(Z=21.203,P<0.001;Z=35.634,P<0.001)。Logistic回归分析显示,NIHSS评分、脑梗死体积、miR-206和miR-210表达是重症ACI发生的影响因素(P<0.05)。结论重症ACI患者血清中miR-206表达水平呈异常降低,miR-210呈异常升高,两者是重症ACI发生的影响因素。

急性呼吸窘迫综合征新生儿微小RNA-206表达水平与炎症因子的相关性分析

目的探讨急性呼吸窘迫综合征新生儿微小RNA-206(miR-206)表达水平与血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)水平的相关性,为临床治疗提供参考依据。方法回顾性分析2019年9月至2021年9月潍坊市益都中心医院收治的73例急性呼吸窘迫综合征新生儿的临床资料,将其作为观察组,并根据其病情轻重程度分为轻度组(27例)、中度组(25例)、重度组(21例);另回顾性分析同期48例进行健康体检的新生儿的体检资料作为对照组。比较对照组、观察组研究对象及不同病情程度观察组患儿血浆miR-206表达量及血清PCT、CRP、IL-6、IL-17水平;并分析血浆miR-206表达水平与血清PCT、CRP、IL-6、IL-17的相关性。结果观察组研究对象血浆miR-206表达量低于对照组,血清PCT、CRP、IL-6、IL-17水平均高于对照组;重度组患儿血浆miR-206水平低于中度组、轻度组,且中度组均低于轻度组;重度组患儿血清PCT、CRP、IL-6、IL-17水平均高于中度组、轻度组,且中度组均高于轻度组;血浆miR-206表达量与血清PCT、CRP、IL-6、IL-17水平均呈负相关关系(r值=-0.415、-0.413、-0.478、-0.473,均P<0.05)。结论急性呼吸窘迫综合征新生儿miR-206表达量异常降低,血清PCT、CRP、IL-6、IL-17水平异常升高,且随病情进展变化显著,miR-206表达量与血清PCT、CRP、IL-6、IL-17水平存在一定关系。

LncRNA MIAT靶向miR-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用研究

目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)MIAT靶向微小RNA(miR)-206促进食管鳞状细胞癌细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用。方法 将食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞分为ctrl组(正常培养的ESCC细胞)、si-NC组、si-MIAT组、si-MIAT+miR-NC组和si-MIAT+miR-206 inhibitor组。实时qRT-PCR检测各组细胞MIAT、miR-206表达;CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移能力;流式细胞术分析细胞凋亡情况;蛋白质印迹技术检测PCNA、MMP-9蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证MIAT和miR-206的关系。结果 与ctrl组、si-NC组比较,si-MIAT组ESCC细胞中miR-206表达、细胞凋亡率升高,MIAT、OD_(450)值(24、48、72 h)、划痕愈合率、PCNA和MMP9蛋白表达降低(P<0.05);干扰LncRNA MIAT表达能降低ESCC细胞增殖、迁移、侵袭能力,提高细胞凋亡能力,MIAT靶向调控miR-206表达。结论 干扰LncRNA MIAT表达能够阻滞ESCC细胞增殖、迁移、侵袭,并促进ESCC细胞凋亡。

PTH、Lp-PLA2、miR-206对择期PCI术后冠心病患者出现PMI的预测价值

目的研究择期经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的冠心病患者出现围手术期心肌损伤(PMI)的危险因素及血甲状旁腺激素(PTH)、脂蛋白相关磷脂酶A2(LP-PLA2)、微小RNA-206(miRNA-206)对PMI的预测价值。方法选择2019年6月至2022年12月确山县人民医院择期PCI冠心病患者98例作为研究对象,根据PMI情况分为NC组(无PMI,n=52)和PMI组(发生PMI,n=46)。统计导致PMI的危险因素,观察并分析血PTH、Lp-PLA2、miR-206对PMI预测价值。结果NC组和PMI组年龄、多支病变、支架植入个数、支架植入总长度比较,差异有统计学意义(P<0.05),PCI治疗后出现PMI危险因素包括:年龄>60岁、支架植入个数≥2个、支架植入总长度≥35 mm(P<0.05)。NC组PTH、Lp-PLA2含量低于PMI组,而miR-206含量高于PMI组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示:血PTH、Lp-PLA2、miR-206及指标联合预测择期PCI治疗冠心病患者出现PMI概率AUC值依次为0.703、0.694、0.743、0.855。结论冠心病患者择期进行PCI治疗后围手术期出现PMI与患者年龄、支架植入个数及植入总长度有关,血清PTH、Lp-PLA2、miR-206与冠心病择期PCI术后出现PIM密切相关,三者联合对PIM发生评估具有重要意义。

糖尿病肾病患者血清microRNA-21含量及其与氧化应激指标的相关性

目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清micro RNA-21(mi R-21)含量及其与氧化应激指标的相关性。方法选择在该院接受治疗的DN患者82例作为观察组,根据病情严重程度分为轻度DN组(47例)、中重度DN组(35例),另取同期体检健康人60例作为对照组。检测各组患者的血清mi R-21含量,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)等氧化应激指标水平,进一步分析两者之间的相关性。结果 1早期DN组、中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于对照组,中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于早期DN组;2早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于对照组,中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于早期DN组;3血清mi R-21含量与SOD、MDA、AOPP等氧化应激指标水平呈负相关。结论 DN患者的血清mi R-21含量降低,且与患者的氧化应激指标水平相关,有望成为诊断及指导疾病治疗的有效指标之一。

红景天苷通过micro RNA-370改善2型糖尿病小鼠糖代谢的作用机制

目的观察红景天苷改善2型糖尿病小鼠血糖作用,探讨红景天苷改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的分子机制。方法采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,检测血糖相关指标、血清和肝脏micro RNA-370表达,以及肝组织糖异生关键酶(PEPCK/G6Pase)蛋白表达水平,观察红景天苷对2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的改善作用。分离培养小鼠原代肝细胞,采用瞬时转染技术将micro RNA-370沉默或过表达,观察micro RNA-370对糖代谢的影响及红景天苷调节糖代谢的分子机制。结果与模型对照组比较,红景天苷各剂量组小鼠血糖相关指标均明显改善(P<0.05);血清和肝组织micro RNA-370表达水平以及肝组织PEPCK/G6Pase蛋白相对表达水平均不同程度降低,且呈剂量依赖性,中、大剂量组降低较明显(P<0.05),小剂量组有降低趋势,但差异无统计学意义。细胞实验中,与空白对照组比较,红景天苷组和micro RNA抑制剂组PEPCK/G6Pase表达均被抑制(P<0.05),micro RNA-370激动剂组PEPCK/G6Pase表达明显促进(P<0.05),红景天苷与micro RNA-370激动剂联用能逆转micro RNA-370激动剂所致PEPCK/G6Pase蛋白表达增高(P<0.05)。结论红景天苷能明显改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱,且该作用至少部分通过抑制micro RNA-370实现。

MALAT1靶向微小RNA-206对乳腺癌细胞三苯氧胺敏感性的影响

目的探讨长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)靶向调控微小RNA-206(miR-206)表达及对乳腺癌细胞三苯氧胺(TAM)敏感性的影响。方法采用实时定量PCR(QPCR)检测乳腺癌细胞MCF-7及其TAM耐药株MCF-7/TAM的MALAT1水平;脂质体法向MCF-7/TAM细胞转染3条靶向MALAT1的小干扰RNA(si-MALAT1),经QPCR筛选干扰效果最佳的si-MALAT1片段进行后续实验。将MCF-7/TAM细胞分为转染si-MALAT1片段的干扰组、转染无关序列的阴性对照(NC)组和未转染的空白对照(Blank)组,MTT比色法、划痕实验和Transwell小室实验检测5μg/ml TAM处理后的增殖活力、划痕愈合率和穿膜细胞数,Western blotting检测基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9水平,采用荧光素酶报告实验验证MALAT1对miR-206的靶向调控作用。结果MCF-7/TAM细胞的MALAT1水平高于其亲本MCF-7细胞(P<0.05)。与Blank组和NC组相比,干扰组的MALAT1水平降低至0.372±0.045(P<0.05)。干扰组MCF-7/TAM细胞转染48、72 h的增殖活力低于Blank组和NC组(P<0.05);干扰组的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(28.399±2.032)%和(296.367±10.118)个,低于Blank组的(69.674±4.337)%和(463.062±18.159)个及NC组的(67.526±3.185)%和(472.675±20.941)个(P<0.05);与Blank组和NC组相比,干扰组的MMP-2和MMP-9水平均降低(P<0.05)。Blank组和NC组上述指标的差异无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶活性检测结果显示,miR-206 mimics能抑制MALAT1野生型荧光素酶活性(P<0.05),但对突变型无影响(P>0.05)。结论MALAT1在乳腺癌TAM耐药株中表达升高,而下调MALAT1水平可增加耐药株的TAM敏感性并抑制侵袭和迁移,可能通过靶向miR-206来发挥促癌作用。

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。

microRNA-133a拮抗苯肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的利用心肌细胞肥大体外模型研究mi R-133a抗心肌肥大的作用机制。方法构建mi R-133a腺病毒表达载体,导入293细胞并收获高表达mi R-133a的病毒;取12只出生1~3 d内的小鼠心脏,采用酶消化及梯度离心法获得心肌细胞,分为对照组和模型组,模型组加入苯肾上腺素（PE）诱导;将高表达mi R-133a的腺病毒感染模型组的心肌细胞,观察细胞面积的变化,RTPCR检测Acta1、Actc1、Actb、Myh6、Myh7、BNP基因的表达。结果模型组心肌细胞加入PE培养后,较对照组面积增大3倍以上,Acta1等基因表达显著增高;肥大后模型组的心肌细胞采用mi R-133a病毒感染后较未加入mi R-133a病毒的模型组的心肌细胞的面积缩小,Acta1等基因表达显著降低。结论 mi R-133a是心肌肥大的重要调节因子,有拮抗心肌肥大的作用。

microRNA-155在类风湿关节炎外周血中的表达及临床意义

目的通过研究micro RNA-155(mi R-155)在类风湿关节炎(RA)患者外周血的表达水平,分析mi R-155与疾病临床特征的相关性,探讨其在RA发病及疾病进展中的意义。方法抽取50例初发RA患者及36例健康对照组外周血分离PBMC(外周血单个核细胞),提取和纯化mi RNA,实时定量PCR检测mi R-155的表达,以小分子RNA U6作为内对照,对mi R-155的表达量进行相对定量分析。同时收集RA患者有关的临床参数,统计分析mi R-155的表达水平与RA合并临床参数的相关性。对RA活动组中,随机分为甲氨蝶呤(MTX)单药治疗组,肿瘤坏死因子(TNF)-α抑制剂单药治疗组,两组随访观察12周,收集患者治疗前后外周血。实时荧光定量PCR法检测RA患者治疗前后外周血mi R-155的表达水平变化。结果RA患者中PBMC中mi R-155的表达水平较健康对照组明显升高,(P<0.01);同时RA患者mi R-155的表达与患者活动度有关,与肺间质病变等无明显相关,RA患者TNF-α抑制剂单药治疗组中,mi R-155的表达较治疗前下降,而在甲氨蝶呤治疗组中无明显下降。结论 mi R-155在RA的PBMC中异常高表达,且与RA的活动度相关,提示mi R-155可能可作为RA诊断及RA活动的一个预测指标。mi R-155在RA的发病机制中可能参与了TNF-α的致炎过程。

血清microRNA-375在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的：探讨micro RNA-375（mi R-375）在非小细胞肺癌（non small-cell lung cancer,NSCLC）患者血清中的表达水平及临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果：NSCLC组血清mi R-375表达水平显著低于对照组,并且其表达与临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）。血清mi R-375在ROC曲线下面积（area under the ROC curve,AUC）为0.905（95%CI：0.860~0.950）。当血清mi R-375临界值取0.995时,对NSCLC诊断的灵敏度为92.0%,特异度为78.0%。结论：血清mi R-375可能作为一种新型NSCLC诊断的分子标志物和潜在的基因靶向治疗靶点。

microRNA-21通过促进成纤维细胞的增殖和分化调节心肌梗死后的心脏重塑

目的探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型(心肌梗死组),以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR检测各组心肌组织miR-21的表达。利用miR-21的模拟物(miR-21 mimic)转染小鼠成纤维细胞(miR-21 mimic组),使其在细胞中呈过表达状态,然后标记5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU),通过荧光显微镜观察成纤维细胞的增殖情况,蛋白质印迹法检测成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和小鼠Smad同源物7(Smad7)的表达,并与随机对照组及空白对照组比较。结果与假手术组比较,心肌梗死组梗死交界区的miR-21的表达量明显上调[(6.043±0.231)×10-4vs(1.620±0.451)×10-4,P<0.01],miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达较随机对照组和空白对照组显著上调[(4.839±0.705)×10-4vs(1.143±0.064)×10-4vs(1.017±0.201)×10-4,P<0.01],miR-21mimic组成纤维细胞EdU染色阳性率较随机对照组和空白对照组显著增加[(27.892±1.645)%vs(12.553±1.227)%vs(13.946±1.550)%,P<0.01];同时,miR-21 mimic组成纤维细胞Smad7蛋白的表达明显下调,而α-SMA的表达显著上调。结论心肌梗死后,上调的miR-21可以通过调节转化生长因子(TGF)-β信号通路中Smad7的表达促进成纤维细胞的增殖和分化,进而调节心梗后的心脏重塑。

MicroRNA-146a与风湿性疾病

MicroRNAs（miRNAs）是一类短小（20～24nt）的非编码RNA,通过对基因表达的转录后调节参与很多生物学过程。越来越多的研究证明,miRNAs尤其miRNA-146a在免疫和自身免疫中发挥着重要作用。本文将miRNA-146a在风湿性疾病中的生物学功能及研究进展作一综述。

浸润性乳腺癌组织中miRNA-206表达与临床病理及预后的关系

目的探究浸润性乳腺癌组织中miRNA-206表达与临床病理及预后的关系。方法选择2014年3月~2016年5月的121例浸润性乳腺癌患者作为研究对象。采用RT-qPCR法检测癌组织中miRNA-206的表达情况,并分析其与临床病理及预后的关系。结果浸润性乳腺癌组织中miRNA-206的相对表达量高于癌旁组织[(0.75±0.23) vs (0.12±0.06)],差异有统计学意义(t=27.761,P<0.001)。浸润性乳腺癌组织中miRNA-206相对表达量与TNM分期和淋巴结转移个数有关(χ^2=12.861,2.309,均P<0.05)。miRNA-206高表达组1a,2a和3a生存率均低于miRNA-206低表达组(78.18%,67.27%和56.36%vs 89.39%,81.82%和75.76%)。miRNA-206高表达组患者平均生存时间低于低表达组[26.87个月(95%CI:23.80~29.95) vs 31.52个月(95%CI:29.34~33.69),差异有统计学意义(χ^2=5.570,P=0.018)。Cox单因素及多因素分析结果显示TNM分期、淋巴结转移及miRNA-206相对表达量与浸润性乳腺癌患者预后密切相关(P<0.05)。结论 miRNA-206在浸润性乳腺癌组织中高表达,检测其表达量有助于了解患者预后。

抑制microRNA-21表达降低HCT-116细胞侵袭转移能力的实验研究

目的:探讨抑制人结肠癌细胞HCT-116 micro RNA-21表达降低结肠癌细胞侵袭转移能力作用机制。方法:应用表达反义micro RNA-21的质粒mi RZip21转染HCT-116细胞,检测micro RNA-21的变化,Target Scan和Pic Tar等工具筛选与侵袭转移相关的靶基因,实时定量PCR方法检测转染前后靶基因m RNA的变化,Western blot检测靶基因蛋白表达变化,平皿划痕和Transwell实验观察抑制micro RNA-21与否HCT-116细胞转移和侵袭能力。结果:筛选出4种与侵袭转移相关的micro RNA-21靶基因:TIMP-3,RECK,BMPRⅡ和PCDH17;mi RZip21质粒转染HCT-116后,micro-RNA 21表达水平下降约40%,靶基因TIMP-3和RECK的m RNA及靶蛋白表达上升明显,有统计学意义(P<0.05);平皿划痕和Transwell实验结果表明抑制micro RNA-21后,HCT-116细胞转移侵袭能力明显减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:抑制micro RNA-21的表达能够减弱HCT-116细胞的侵袭和转移能力。

MicroRNA-21对结直肠癌诊断价值的Meta分析

目的应用Meta分析评价血液(血清、血浆)及粪便标本中micro RNA-21(mi R-21)表达用于结直肠癌诊断的临床价值。方法联合应用Cochrane library、Pub Med、EMbase、Google学术、CNKI等检索micro RNA-21用于结直肠癌诊断的文献,按PRISMA声明的标准筛选文献以及进行QUADAS-2质量评价后,用固定效应模型或随机效应模型合并得到汇总的灵敏度(SEN)、特异度(SPE)、阳性似然比(PLR)、阴性似然比(NLR)和诊断优势比(DOR),受试者工作特征曲线(SROC)及曲线下面积(AUC)用于评价整体诊断效能。结果最终纳入14篇文献,包括1199例结直肠癌患者和784例正常对照者。Meta分析结果显示:血清mi R-21的汇总DOR、SEN和SPE分别为13.97(95%CI:8.56-22.81)、0.73(95%CI:0.69-0.77)、0.83(95%CI:0.76-0.89);血浆mi R-21的汇总DOR、SEN和SPE分别为8.03(95%CI:3.30-19.52)、0.67(95%CI:0.60-0.73)、0.76(95%CI:0.69-0.81);粪便mi R-21的汇总DOR、SEN和SPE分别为4.78(95%CI:1.46-15.69)、0.31(95%CI:0.27-0.36)、0.88(95%CI:0.84-0.91)。除此之外,血清、血浆和粪便mi R-21诊断结直肠癌的AUC分别为0.8701、0.8295和0.6991。结论血液标本mi R-21用于结直肠癌诊断具有良好的灵敏度和特异度,且血清标本的检测结果优于血浆标本;粪便mi R-21诊断结直肠癌灵敏度较差但特异性好。

胃癌组织中microRNA-224阳性表达与患者预后相关性分析

目的:探讨micro RNA-224于胃癌组织中的阳性表达与患者临床病理特征及预后的相关性。方法:应用原位杂交技术检测micro RNA-224在50例石蜡固定癌旁非肿瘤胃黏膜组织及112例石蜡胃肿瘤组织切片中的表达情况,分析其与肿瘤患者各病理参数及预后的相关性。原位杂交按照原位杂交试剂盒的说明书进行。结果:micro RNA-224在胃癌组织中阳性表达率49.1%(55/112),癌旁非肿瘤胃黏膜组织中阴性表达。其阳性表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移及浸润深度存在相关性(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤的部位、分化程度、Lauren分型无关(P>0.05)。micro RNA-224阴性表达比阳性表达者5年生存率高,差异有统计学意义(P<0.001)。经COX多因素分析显示:micro RNA-224的表达是影响胃癌患者预后的独立因素之一(P<0.05)。结论:micro RNA-224在肿瘤组织中阳性表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移及浸润深度密切相关,是影响胃癌患者预后的独立因素之一。