微小RNA-221和组织金属蛋白酶抑制物-2在妊娠期高血压患者中表达

探讨微小RNA-221(miR-221)、组织金属蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)在妊娠期高血压(PIH)患者血清、胎盘组织中的表达水平及意义。方法 选取2018年7月~2020年10月于本院分娩的PIH孕产妇65例为PIH组,并纳入同期正常妊娠分娩的孕产妇65例为健康妊娠组。比较两组临床资料;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定孕产妇产前血清及胎盘组织miR-221、TIMP-2表达水平;Pearson法分析PIH患者血清、胎盘组织中miR-221表达水平与TIMP-2水平的相关性;利用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清、胎盘组织miR-221、TIMP-2表达水平对PIH的诊断价值。结果 PIH组收缩压、舒张压及血清、胎盘组织TIMP-2表达水平均明显高于健康妊娠组(P<0.05),血清及胎盘组织中miR-221表达水平明显低于健康妊娠组(P<0.05);PIH患者血清、胎盘组织中miR-221表达水平与TIMP-2水平均呈负相关(P<0.05);血清、胎盘组织miR-221诊断PIH的曲线下面积(AUC)分别为0.867、0.852,截断值分别为0.81、0.82;血清、胎盘组织TIMP-2诊断PIH的AUC分别为0.894、0.884,截断值分别为1.55、1.52;血清、胎盘组织中miR-221、TIMP-2联合诊断PIH的AUC分别为0.954、0.952,敏感度分别为87.7%、86.2%,对应特异性分别为90.8%、92.3%。结论 PIH患者血清、胎盘组织miR-221表达水平降低,TIMP-2表达水平升高,两者呈负相关,且miR-221、TIMP-2联合可提高对PIH的诊断效能,有利于临床诊断PIH。

血清微小RNA-221联合前列腺特异性抗原检测对前列腺癌的诊断及预后评估价值

目的探讨血清微小RNA-221(miR-221)联合前列腺特异性抗原(PSA)检测对前列腺癌的诊断价值,分析血清miR-221与前列腺癌临床病理特征及预后的关系。方法收集2019年1月至2020年6月在宜春市第三人民医院行前列腺穿刺活检术的患者60例,其中病理结果为前列腺癌(前列腺癌组)患者34例、前列腺增生(前列腺增生组)患者26例,测得2组患者的血清miR-221相对表达量及PSA水平,分析miR-221联合PSA检测对前列腺癌的诊断价值,探讨前列腺癌组血清miR-221与患者年龄、前列腺体积、临床分期、分化程度及Gleason评分等临床病理特征的关系。以前列腺癌患者的内分泌治疗去势抵抗时间为指标,分析血清miR-221与前列腺癌患者预后的关系。结果不同Gleason评分、临床分期及分化程度患者血清miR-221相对表达量比较差异有统计学意义(t=7.387,P<0.001;t=7.897,P<0.001;t=7.212,P<0.001)。血清miR-221相对表达量与患者内分泌治疗后的去势抵抗时间呈负相关(r=0.58,P<0.001)。血清miR-221联合PSA检测对前列腺癌的诊断具有一定价值,曲线下面积为0.835(95%CI:0.725~0.945,P<0.001),敏感性为0.78,特异性为0.85。结论血清miR-221联合PSA检测对前列腺癌具有一定的诊断价值,有助于提高单纯PSA检测的特异性;不同临床分期、Gleason评分及分化程度的前列腺癌患者血清miR-221相对表达量存在显著差异;miR-221高表达的前列腺癌患者内分泌治疗去势抵抗时间缩短,预示患者的预后可能较差。

老年原发性肝癌病人血清微小RNA-200a、微小RNA-221表达与介入术后感染的相关性分析

目的探究老年原发性肝癌病人血清微小RNA(miR)-200a、miR-221表达与介入术后感染的相关性。方法选取2017年5月至2020年4月武汉市汉口医院45例老年原发性肝癌介入术后感染病人作为观察组,另自同期住院的老年原发性肝癌介入术后未出现感染病人中通过SPSS 21.0统计软件采取随机数字表法抽取45例作为对照组。比较两组临床资料、血清miR-200a、miR-221表达,分析老年原发性肝癌病人介入术后感染影响因素及血清miR-200a、miR-221表达与影响因素的关系,绘制受试者操作曲线(ROC曲线),评价血清miR-200a、miR-221表达对老年原发性肝癌病人介入术后感染的预测价值,并绘制卡普兰-迈耶曲线(KM),对比不同血清miR-200a、miR-221表达病人死亡情况。结果观察组腹水、白蛋白<30 g/L、异位栓塞、部分脾脏栓塞比例高于对照组(P<0.05);术后,观察组血清miR-200a表达(2.84±0.74)低于对照组(4.69±1.14),miR-221表达(12.37±3.02)高于对照组(9.05±2.43)(P<0.05);logistic回归分析,结果显示腹水、白蛋白<30 g/L、异位栓塞、部分脾脏栓塞、术后血清miR-200a、miR-221表达均为老年原发性肝癌病人介入术后感染影响因素(P<0.05);老年原发性肝癌介入术后感染病人术后血清miR-200a表达与腹水、异位栓塞、部分脾脏栓塞呈负相关关系,与白蛋白呈正相关关系(P<0.05);术后血清miR-221表达与腹水、异位栓塞、部分脾脏栓塞呈正相关关系,与白蛋白呈负相关关系(P<0.05);绘制ROC曲线,评价血清miR-200a、miR-221表达对老年原发性肝癌病人介入术后感染的预测价值,发现,二者联合预测AUC最大,预测效能良好;以ROC曲线中截断值为界,将原发性肝癌病人分为血清miR-200a、miR-221高表达与低表达组,miR-200a高表达组术后3个月病死率低于低表达组,miR-221高表达组病死率高于低表达组(P<0.05)。结论老年原发性肝癌介入术后感染病人血清miR-200a表达明显下调,miR-221显著上调,临床检测其水平,可早期诊断感染,合理制定治疗方案,有助于改善预后。

过敏性紫癜患儿外周血B淋巴细胞中微小RNA-221与磷酸酶和张力蛋白同源物对肾损伤的预测价值

目的研究旨在探讨过敏性紫癜(Henoch-Schönlein purpura,HSP)患儿外周血B淋巴细胞中微小RNA-221(microRNA-221,miR-221)与磷酸酶和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)对肾损伤的预测价值。方法回顾性选取2021年1—12月于徐州医科大学附属医院就诊的97例HSP患儿作为研究组,并纳入同期在徐州医科大学附属医院进行体检的100例健康儿童作为对照组。同时将97例HSP患儿根据是否有肾损伤分为肾损伤组(39例)和无肾损伤组(58例)。收集所有研究对象性别、年龄、体重指数,评估HSP患儿的症状总积分值。测定所有研究对象的外周血B淋巴细胞miR-221、PTEN mRNA表达水平和血清中的肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-17表达水平。结果研究组外周血B淋巴细胞中miR-221的相对表达量显著高于对照组(t=5.214,P<0.001);研究组外周血B淋巴细胞中PTEN mRNA相对表达量显著低于对照组(t=6.352,P<0.001)。HSP患儿外周血B淋巴细胞中miR-221与PTEN相对表达量间呈显著负相关关系(r=-0.718,P<0.001);HSP患儿外周血B淋巴细胞中miR-221水平与症状总积分值、血清TNF-α、IL-6、IL-17表达水平均呈显著正相关关系(P<0.05)。PTEN表达水平与症状总积分值、血清TNF-α、IL-6、IL-17表达水平均呈显著负相关关系。肾损伤组外周血B淋巴细胞中miR-221的表达显著高于无肾损伤组(t=3.814,P<0.001)。肾损伤组外周血B淋巴细胞中PTEN mRNA的相对表达量显著低于无肾损伤组(t=4.256,P<0.001);肾损伤组症状总积分值、TNF-α、IL-6和IL-17水平均显著高于无肾损伤组(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,外周血B淋巴细胞中miR-221和PTEN表达水平对HSP患儿肾损伤预测的曲线下面积分别为0.871(95%CI 0.795~0.947,P<0.001)和0.884(95%CI 0.817~0.951,P<0.001),灵敏度和特异度分别为74.4%和87.9%、84.6%和79.3%。结论HSP患儿外周血B淋巴细胞中miR-221表达水平升高,PTEN表达水平降低,并对HSP患儿的肾损伤有一定预测价值。

miRNA-221-3p和IGF-1在妊娠期糖尿病患者血清中的表达及与妊娠结局的相关性

目的探究微小RNA-221-3p(miR-221-3p)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达水平及其与妊娠结局的关系。方法收集2020年5月至2022年5月于濮阳市妇幼保健院足月分娩的血糖控制良好的80例GDM患者为GDM1组,血糖控制不良的80例GDM患者为GDM2组,另选取同期足月分娩的糖代谢正常的80例健康孕妇为健康人对照组。qRT-PCR和ELISA法检测各组血清miR-221-3p、IGF-1的表达水平;Pearson法分析GDM患者血清miR-221-3p、IGF-1水平的相关性以及二者与稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)的相关性;进一步分析GDM患者血清miR-221-3p、IGF-1表达水平与妊娠结局的关系。结果GDM1组、GDM2组患者血清IGF-1、FBG、FINS、HOMA-IR水平及产后出血、羊水过多、胎膜早破、巨大儿、胎儿窘迫发生率显著高于健康人对照组(P<0.05),而血清miR-221-3p的表达水平低于健康人对照组(P<0.05);且GDM2组患者除血清miR-221-3p水平低于GDM1组(P<0.05)外,其余上述指标高于GDM1组。GDM1组和GDM2组患者血清miR-221-3p水平与IGF-1呈负相关(P<0.001),血清FBG、FINS、HOMA-IR与miR-221-3p水平均呈负相关(P均<0.001),而与IGF-1水平呈正相关(P均<0.001)。与未发生产后出血、羊水过多、胎膜早破、巨大儿、胎儿窘迫的GDM患者相比,发生以上不良妊娠结局的GDM患者血清miR-221-3p的表达水平降低(P<0.001),而IGF-1的表达水平升高(P<0.001)。结论GDM患者血清miR-221-3p水平较低,IGF-1水平升高,且与不良妊娠结局密切相关。

十溴联苯醚暴露通过胞外囊泡装载miR-221促进三阴性乳腺癌细胞转移

目的:探讨环境污染物十溴联苯醚(BDE-209)暴露促进三阴性乳腺癌(TNBC)恶性进展的机制。方法:将TBNC细胞分为空白对照组和BDE-209暴露组。超速离心法提取胞外囊泡,分别应用扫描电子显微镜和蛋白质印迹法对提取的胞外囊泡进行鉴定,采用纳米颗粒跟踪技术检测胞外囊泡生成量,细胞划痕实验和Transwell小室实验检测与胞外囊泡共培养后TNBC细胞的迁移能力和扩散能力,定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测囊泡中的miR-221表达水平,蛋白质印迹法检测共培养后TNBC细胞中基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达水平。结果:与空白对照组比较,2.00、20.00和200.00 ng/mL BDE-209暴露可显著增加胞外囊泡的生成(均P<0.05),其中200.00 ng/mL BDE-209暴露诱导释放的胞外囊泡共培养的细胞迁移率较空白对照组提高86%,穿膜细胞数提高至1.32倍,miR-221表达水平提高至2.71倍,MMP9表达水平提高至1.62倍(均P<0.05)。转染抗miR-221抗体能降低BDE-209暴露诱导生成的胞外囊泡内miR-221表达水平,使BDE-209促进MDA-MB-231细胞迁移的能力被显著抑制。结论:BDE-209暴露可通过增加胞外囊泡的生成及装载miR-221增强TNBC细胞的迁移能力,促进TNBC细胞转移。

肺动脉高压病人血清miR-221、miR-222水平与预后的相关性

目的:探讨血清微小RNA-221(miR-221)、微小RNA-222(miR-222)评估先天性心脏病(CHD)合并肺动脉高压(PAH)病人预后的临床价值。方法:选取2018年6月—2020年7月我院收治的208例CHD病人,其中无PAH病人88例(CHD无PAH组),合并PAH病人120例(CHD合并PAH组);另选取同期健康体检者100名作为对照组。对120例CHD合并PAH病人随访,根据预后情况分为死亡组(43例)和存活组(77例)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清miR-221、miR-222表达水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-221、miR-222对CHD合并PAH病人死亡的预测价值;Logistic回归分析CHD合并PAH病人不良预后(死亡)的影响因素。结果:CHD无PAH组、CHD合并PAH组血清miR-221、miR-222表达水平高于对照组(P<0.05);CHD合并PAH组血清miR-221、miR-222表达水平高于CHD无PAH组(P<0.05)。与存活组比较,死亡组肺动脉收缩压、左室舒张末期内径(LVEDD)、血肌酐(Scr)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、miR-221、miR-222水平升高,左室射血分数(LVEF)及6 min步行距离(6MWD)降低,差异均有统计学意义(P<0.001)。血清miR-221预测CHD合并PAH病人死亡的敏感度为72.09%,特异度为84.42%,截断值为3.81,ROC曲线下面积(AUC)为0.817;血清miR-222预测CHD合并PAH病人死亡的敏感度为76.74%,特异度为79.22%,截断值为4.03,AUC为0.824;miR-221联合miR-222预测CHD合并PAH病人死亡的敏感度为81.40%,特异度为87.01%,AUC为0.889。Logistic回归分析显示,肺动脉收缩压、miR-221、miR-222是CHD合并PAH病人不良预后的危险因素(P<0.05),LVEF是CHD合并PAH病人不良预后的保护因素(P<0.05)。结论:血清miR-221、miR-222水平升高与CHD合并PAH病人不良预后有关。

基于PI3K/Akt信号通路探究下调miR-221对肝癌大鼠的干预效果

目的 探究基于磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路下调微小RNA-221(miR-221)对肝癌大鼠的干预效果。方法 选取43只大鼠,10只作为空白组,其余33只建立肝癌模型,最终有30只建模成功,将建模成功大鼠分为模型组、上调组、下调组各10只。上调组做miR-221过表达慢病毒转染、下调组做miR-221沉默慢病毒转染,空白组、模型组注射生理盐水,观察大鼠变化。结果 与空白组相比,模型组、下调组、上调组miR-221、PI3K、Akt表达量、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血清癌胚抗原(CEA)、血清甲胎蛋白(AFP)水平显著上升(P<0.05);与模型组相比,上调组miR-221、PI3K、Akt表达量、VEGF、bFGF、CEA、AFP水平显著上升,下调组miR-221、PI3K、Akt表达量、VEGF、bFGF、CEA、AFP水平显著下降(P<0.05)。结论 下调miR-221可抑制肝癌大鼠血管内皮生长因子水平,优化肿瘤标志物水平,其机制可能与PI3K/Akt信号通路被抑制有关。

外周血微小RNA-221和D-二聚体对冠心病PCI术后支架内再狭窄的影响

目的探讨外周血微小RNA-221(miRNA-221)和D-二聚体(D-D)对冠心病PCI术后支架内再狭窄(ISR)的影响。方法选取2017年5月至2019年5月在新密市第一人民医院行经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术的100例冠心病患者作为研究对象,根据术后1年内有无出现ISR分为ISR组(n=30)和无ISR组(n=70),并选取同期于我院行健康体检的50例正常人群作为对照组。收集各组外周血miRNA-221和D-D结果;绘制受试工作者曲线(ROC)探讨miRNA-221和D-D在冠心病PCI术后ISR发生中的诊断价值;先后通过单因素分析和Logistic多因素回归分析探讨导致冠心病患者PCI术后ISR的影响因素。结果ISR组、无ISR组和对照组外周血miRNA-221和D-D水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中ISR组高于无ISR组(P<0.05),无ISR组高于对照组(P<0.05)。绘制ROC曲线,外周血D-D在冠心病PCI术后ISR发生中具有诊断价值(P=0.043),曲线下面积(AUC)为0.612(95%CI:0.547~0.661),敏感度为68.4%,特异度65.5%;外周血miRNA-221在冠心病PCI术后ISR发生中具有诊断价值(P=0.021),AUC为0.721(95%CI:0.687~0.789),敏感度为72.5%,特异度76.4%;两者联合在冠心病PCI术后ISR发生中具有诊断价值(P=0.009),AUC为0.801(95%CI:0.737~0.835),敏感度和特异度明显提高,分别为83.5%和86.4%。ISR组和无ISR组在性别、年龄、行PCI原因、血管狭窄个数、狭窄部位、支架数量、TC、TG和HDL-C上比较,差异无统计学意义(P>0.05);但ISR组支架长度、LDL-C、HCY和PCI术后未规范用药者高于无ISR组,ISR组支架直径低于无ISR组,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。将“miRNA-221和D-D”和“2.3中P<0.05”者纳入Logistic多因素回归分析,发现miRNA-221、HCY、支架直径和PCI术后规范用药情况均是导致冠心病PCI术后ISR发生的重要影响因素(P<0.05)。结论外周血miRNA-221和D-D在冠心病PCI术后支架内ISR患者中明显升高,两者联合可提高ISR的诊断效能,其中miRNA-221也是导致ISR发生的重要危险因素,值得关注。

超声引导下细针穿刺细胞学检查结合miR-221、miR-222表达对甲状腺结节性质的鉴别效能

目的探讨超声引导下细针穿刺细胞学检查(US-FNAB)结合微小RNA-221(miR-221)、微小RNA-222(miR-222)表达对甲状腺结节性质的鉴别效能。方法选择2020年3月—2023年2月在本院拟行手术治疗的136例甲状腺结节患者作为研究对象,所有患者术前均行US-FNAB及miR-221、miR-222检测。以术后病理学诊断结果作为金标准将患者分为恶性组和非恶性组,比较两组患者miR-221、miR-222表达,并分析US-FNAB、miR-221、miR-222单项及联合对甲状腺结节性质的鉴别效能。结果136例甲状腺结节患者术后病理结果显示55例为非恶性,81例为恶性;136例甲状腺结节患者经US-FNAB诊断非恶性67例(经术后病理结果证实有50例为非恶性),恶性69例(经术后病理结果证实有64例为恶性);恶性组miR-221、miR-222表达均高于非恶性组(P<0.05);US-FNAB+miR-221+miR-222鉴别甲状腺结节性质的敏感度、特异度、曲线下面积(AUC)分别为95.59%、87.27%、0.940,三项联合鉴别的敏感度均高于单项指标鉴别(P<0.05),与US-FNAB+miR-221或miR-222鉴别比较,差异均无统计学意义(P>0.05);三项联合鉴别的特异度与单项指标、US-FNAB+miR-221或miR-222鉴别比较,差异均无统计学意义(P>0.05);三项联合鉴别的AUC均高于单项指标、US-FNAB+miR-221或miR-222鉴别。结论US-FNAB结合miR-221、miR-222鉴别甲状腺结节性质能够减少漏诊率、误诊率,提高鉴别效能。

miRNA-221和miRNA-222对前列腺癌细胞PC-3的增殖、迁移及SIRT1表达的调控

目的：观察前列腺癌PC-3细胞中微小RNA（microRNA，miRNA）-221和miRNA-222对细胞增殖和迁移的作用，以及对沉默信息调节因子1（SIRT1）表达的影响。方法设立无处理细胞组（简称control组）、转染空载质粒pEX-5组（简称pEX-5组）、转染miRNA-221反义抑制质粒组（简称miRNA-221抑制组）、转染miRNA-222反义抑制质粒组（简称miRNA-222抑制组），应用细胞计数试剂盒（CCK-8法）检测miRNA-221和miRNA-222对前列腺癌细胞增殖的影响；采用细胞划痕修复实验检测miRNA-221和miRNA-222对细胞迁移能力的影响；采用免疫印迹法和荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测SIRT1在蛋白水平和mRNA水平的变化；采用miRNAanda靶标进行预测分析。结果在成功抑制了PC-3细胞中miRNA-221或miRNA-222的表达后，连续7 d检测细胞活性，miRNA-221抑制组和miRNA-222抑制组的细胞活性（A450 nm值）较pEX-5组降低1．5～2．0倍，自第3天起两组之间即有明显差异（t＝6．7，P＜0．01；t＝5．3，P＜0．01）；划痕实验显示，miRNA-221抑制组和miRNA-222抑制组的迁移能力明显低于pEX-5组。miRNA-221抑制组、miRNA-222抑制组中SIRT1蛋白的相对表达量分别为（0．26±0．021）、（0．21±0．0058），与pEX-5组（0．14±0．017）比较差异均有统计学意义（t值分别为6．3、6．4，P均＜0．05）；而SIRT1 mRNA的表达水平3组之间差异无统计学意义（P＞0．05）。结论 miRNA-221和miRNA-222能促进前列腺癌PC-3细胞的增殖与迁移能力，影响SIRT1蛋白的表达。

糖尿病肾病患者血清microRNA-21含量及其与氧化应激指标的相关性

目的分析糖尿病肾病(DN)患者血清micro RNA-21(mi R-21)含量及其与氧化应激指标的相关性。方法选择在该院接受治疗的DN患者82例作为观察组,根据病情严重程度分为轻度DN组(47例)、中重度DN组(35例),另取同期体检健康人60例作为对照组。检测各组患者的血清mi R-21含量,超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)等氧化应激指标水平,进一步分析两者之间的相关性。结果 1早期DN组、中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于对照组,中晚期DN组患者血清mi R-21含量低于早期DN组;2早期DN组、中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于对照组,中晚期DN组患者血清SOD、MDA、AOPP水平高于早期DN组;3血清mi R-21含量与SOD、MDA、AOPP等氧化应激指标水平呈负相关。结论 DN患者的血清mi R-21含量降低,且与患者的氧化应激指标水平相关,有望成为诊断及指导疾病治疗的有效指标之一。

冠心病患者血浆微小RNA-221和微小RNA-222与侧支循环形成的相关性研究

目的观察冠心病患者血浆中微小RNA-221和微小RNA-222水平与冠状动脉侧支循环形成的关系。方法连续入选在首都医科大学附属北京安贞医院心内科接受选择性冠状动脉造影检查，证实左前降支、左回旋支或右冠状动脉中单支血管狭窄≥95％的冠心病患者120例，根据Rentrop分级将患者分成2组：侧支良好组（Rentropf〉2级）（n=64），侧支不良组（Rentrop≤1级）（n=56）。采用实时荧光定量-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测血浆微小RNA-221和微小RNA-222的表达水平，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测札清中c-kit和内皮源性-氧化氮合酶（eNOS）的浓度。采用Pearson相关分析和Logistic回归进行相关性分析。，结果侧支不良组血浆中微小RNA-221和微小RNA-222水平明显高于侧支良好组（0．25±0．04比0．13±0．03；0．21±0．06比0．12±0．02，P=0．001和P=0．003）。侧支不良组血清c-kit和eNOS水平低于侧支良好组[（3．8±1．3）μg／L比（6．2±2．3）μg／L；（18．7±5．5）μg/L比（24．9±8．0）μg／L，二者均P〈0．05]。侧支良好组和侧支不良组血液中微小tlNA-22l和微小RNA-222与c-kit和eNOS明显负相关[（侧支良好组微小RNA-221与c-kit：r=-0．581，P=0．012；微小RNA-221与eNOS：r=-0．534，P=0．019；侧支不良组微小RNA-221与c-kit：r=-0．653，P=0．021；微小RNA-221与eNOS：r=-0．061，P=0．028）、（侧支良好组微小RNA-222与c-kit：r=-0．495，P=0．004；微小RNA-222与eNOS：r=-0．483，P：0．022；侧支不良组侧支良好组微小RNA-222与c-kit：r=-0．638，P=0．035；微小ItNA-222与eNOS：r=-0．623，P=0．015]，而健康对照组中微小RNA-221／微小RNA-222与c-kit和eNOS没有明显相关性（微小IINA-221与c-kjt：r=-0．075，P=0．676；微小RNA-222与c-kit：r=-0．058，P=0．722；微小RNA-221与eNOS：r=-0．084，P=0．342；微小RNA-222与eNOS：r=-0．045，P=0．812）．，微小RNA-221和微小RNA-222是冠状动脉侧支循环形成的独立预测因子[比值比（OR）=2．246，P=0．012；OR=2．373，P=0．003）]。结论血浆微小RNA-221和微小RNA-222水平与冠状动脉侧支循环形成明显负相关，是冠状动脉侧支循环形成的独立预测因素。

红景天苷通过micro RNA-370改善2型糖尿病小鼠糖代谢的作用机制

目的观察红景天苷改善2型糖尿病小鼠血糖作用,探讨红景天苷改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的分子机制。方法采用高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病小鼠模型,检测血糖相关指标、血清和肝脏micro RNA-370表达,以及肝组织糖异生关键酶(PEPCK/G6Pase)蛋白表达水平,观察红景天苷对2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱的改善作用。分离培养小鼠原代肝细胞,采用瞬时转染技术将micro RNA-370沉默或过表达,观察micro RNA-370对糖代谢的影响及红景天苷调节糖代谢的分子机制。结果与模型对照组比较,红景天苷各剂量组小鼠血糖相关指标均明显改善(P<0.05);血清和肝组织micro RNA-370表达水平以及肝组织PEPCK/G6Pase蛋白相对表达水平均不同程度降低,且呈剂量依赖性,中、大剂量组降低较明显(P<0.05),小剂量组有降低趋势,但差异无统计学意义。细胞实验中,与空白对照组比较,红景天苷组和micro RNA抑制剂组PEPCK/G6Pase表达均被抑制(P<0.05),micro RNA-370激动剂组PEPCK/G6Pase表达明显促进(P<0.05),红景天苷与micro RNA-370激动剂联用能逆转micro RNA-370激动剂所致PEPCK/G6Pase蛋白表达增高(P<0.05)。结论红景天苷能明显改善2型糖尿病小鼠糖代谢紊乱,且该作用至少部分通过抑制micro RNA-370实现。

MicroRNA-126和血管内皮生长因子在胚胎停育绒毛组织中的表达及相关性研究

目的通过分析孕早期胚胎停育与正常胚胎绒毛组织中microRNA-126(miR-126)、血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异,探讨其在早期胚胎停育中的相关性。方法收集孕早期胚胎停育和正常胚胎绒毛组织各28例作为胚胎停育组和对照组,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组miR-126和VEGF mRNA表达水平的变化。结果 1两组绒毛组织中均有miR-126表达,胚胎停育组绒毛组织中miR-126的表达高于对照组,但差异无统计学意义。2胚胎停育组绒毛组织中VEGF的表达低于对照组,差异有统计学意义。3胚胎停育组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈负相关;对照组绒毛组织中miR-126与VEGF的表达呈正相关。结论 1胚胎停育绒毛组织中VEGF的表达低于正常胚胎。2VEGF的表达变化与胚胎停育的发生有一定的相关性。

microRNA-133a拮抗苯肾上腺素诱导的小鼠心肌肥大

目的利用心肌细胞肥大体外模型研究mi R-133a抗心肌肥大的作用机制。方法构建mi R-133a腺病毒表达载体,导入293细胞并收获高表达mi R-133a的病毒;取12只出生1~3 d内的小鼠心脏,采用酶消化及梯度离心法获得心肌细胞,分为对照组和模型组,模型组加入苯肾上腺素（PE）诱导;将高表达mi R-133a的腺病毒感染模型组的心肌细胞,观察细胞面积的变化,RTPCR检测Acta1、Actc1、Actb、Myh6、Myh7、BNP基因的表达。结果模型组心肌细胞加入PE培养后,较对照组面积增大3倍以上,Acta1等基因表达显著增高;肥大后模型组的心肌细胞采用mi R-133a病毒感染后较未加入mi R-133a病毒的模型组的心肌细胞的面积缩小,Acta1等基因表达显著降低。结论 mi R-133a是心肌肥大的重要调节因子,有拮抗心肌肥大的作用。

microRNA-155在类风湿关节炎外周血中的表达及临床意义

目的通过研究micro RNA-155(mi R-155)在类风湿关节炎(RA)患者外周血的表达水平,分析mi R-155与疾病临床特征的相关性,探讨其在RA发病及疾病进展中的意义。方法抽取50例初发RA患者及36例健康对照组外周血分离PBMC(外周血单个核细胞),提取和纯化mi RNA,实时定量PCR检测mi R-155的表达,以小分子RNA U6作为内对照,对mi R-155的表达量进行相对定量分析。同时收集RA患者有关的临床参数,统计分析mi R-155的表达水平与RA合并临床参数的相关性。对RA活动组中,随机分为甲氨蝶呤(MTX)单药治疗组,肿瘤坏死因子(TNF)-α抑制剂单药治疗组,两组随访观察12周,收集患者治疗前后外周血。实时荧光定量PCR法检测RA患者治疗前后外周血mi R-155的表达水平变化。结果RA患者中PBMC中mi R-155的表达水平较健康对照组明显升高,(P<0.01);同时RA患者mi R-155的表达与患者活动度有关,与肺间质病变等无明显相关,RA患者TNF-α抑制剂单药治疗组中,mi R-155的表达较治疗前下降,而在甲氨蝶呤治疗组中无明显下降。结论 mi R-155在RA的PBMC中异常高表达,且与RA的活动度相关,提示mi R-155可能可作为RA诊断及RA活动的一个预测指标。mi R-155在RA的发病机制中可能参与了TNF-α的致炎过程。

血清microRNA-375在非小细胞肺癌中的表达水平及其临床意义

目的：探讨micro RNA-375（mi R-375）在非小细胞肺癌（non small-cell lung cancer,NSCLC）患者血清中的表达水平及临床意义。方法：采用实时荧光定量PCR方法检测82例非小细胞肺癌患者和对照组100例健康人血清的mi R-375的表达水平,分析其与临床病理参数之间的关系。结果：NSCLC组血清mi R-375表达水平显著低于对照组,并且其表达与临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）。血清mi R-375在ROC曲线下面积（area under the ROC curve,AUC）为0.905（95%CI：0.860~0.950）。当血清mi R-375临界值取0.995时,对NSCLC诊断的灵敏度为92.0%,特异度为78.0%。结论：血清mi R-375可能作为一种新型NSCLC诊断的分子标志物和潜在的基因靶向治疗靶点。

microRNA-21通过促进成纤维细胞的增殖和分化调节心肌梗死后的心脏重塑

目的探讨小鼠心肌梗死模型中microRNA-21(miR-21)对心脏成纤维细胞增殖和分化的影响。方法利用左前降支结扎法构建小鼠心肌梗死模型(心肌梗死组),以心电图及病理改变作为建模成功的观察指标。采用荧光定量PCR检测各组心肌组织miR-21的表达。利用miR-21的模拟物(miR-21 mimic)转染小鼠成纤维细胞(miR-21 mimic组),使其在细胞中呈过表达状态,然后标记5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU),通过荧光显微镜观察成纤维细胞的增殖情况,蛋白质印迹法检测成纤维细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和小鼠Smad同源物7(Smad7)的表达,并与随机对照组及空白对照组比较。结果与假手术组比较,心肌梗死组梗死交界区的miR-21的表达量明显上调[(6.043±0.231)×10-4vs(1.620±0.451)×10-4,P<0.01],miR-21 mimic组成纤维细胞miR-21基因表达较随机对照组和空白对照组显著上调[(4.839±0.705)×10-4vs(1.143±0.064)×10-4vs(1.017±0.201)×10-4,P<0.01],miR-21mimic组成纤维细胞EdU染色阳性率较随机对照组和空白对照组显著增加[(27.892±1.645)%vs(12.553±1.227)%vs(13.946±1.550)%,P<0.01];同时,miR-21 mimic组成纤维细胞Smad7蛋白的表达明显下调,而α-SMA的表达显著上调。结论心肌梗死后,上调的miR-21可以通过调节转化生长因子(TGF)-β信号通路中Smad7的表达促进成纤维细胞的增殖和分化,进而调节心梗后的心脏重塑。

MicroRNA-146a与风湿性疾病

MicroRNAs（miRNAs）是一类短小（20～24nt）的非编码RNA,通过对基因表达的转录后调节参与很多生物学过程。越来越多的研究证明,miRNAs尤其miRNA-146a在免疫和自身免疫中发挥着重要作用。本文将miRNA-146a在风湿性疾病中的生物学功能及研究进展作一综述。