骨骼肌微损伤自体修复中超微结构变化与蛋白质组学研究

目的：从蛋白质组代谢角度分析骨骼肌微损伤自体修复过程中不同功能蛋白质组与肌纤维超微结构恢复的同步变化机制。方法：Wistar雄性大鼠36只随机分为安静对照组（D组）、运动后即刻组（0 h组）、运动后24 h组（24 h组）、运动后48 h组（48 h组）、运动后72 h组（72 h组）及运动后168 h组（168 h组）每组6只。运动方案：跑台下坡跑,坡度-16度,速度18 m/min,运动持续60 min,运动后相应时间处死。超薄切片、染色,用JEM-1200EX透射电镜分析不同组别骨骼肌的超微结构。以D组电泳图谱作参考,进行特异蛋白质表达量分析并对表达受到激活或者抑制的蛋白质进行进一步质谱鉴定。特异蛋白质按照功能不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ类。结果：运动后即刻,参与细胞损伤修复的蛋白质（Ⅱ类）包括膜联蛋白A5、维生素D结合蛋白、α1抗胰蛋白酶前体、DJ-1蛋白、免疫球蛋白、热休克蛋白β1、着丝粒关联蛋白E表达先于超微结构变化;运动后24--72 h,损伤修复过程中能量代谢相关蛋白质（Ⅰ类）如辅酶Q9、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶、乙酰基转移酶、异柠檬酸脱氢酶、磷酸甘油-3脱氢酶受到显著激活,可能促进了线粒体自身修复进而加快肌纤维再生速度;运动后48 h组和72 h组内Trim72蛋白、角蛋白、核糖体蛋白、肌球蛋白、载脂蛋白和内质网驻地蛋白29参与骨骼肌构成的结构蛋白质（Ⅲ类）表达出现显著上升,这与超微结构恢复具有一定的同步性。结论：骨骼肌微损伤后0～48 h之内细胞损伤修复蛋白表达先于超微结构变化;在损伤修复后24～72 h之内线粒体酶系统及能量代谢相关蛋白表达先于超微结构修复,这可能促进了线粒体自身修复进而加快肌纤维再生速度;在损伤修复后24～48 h之内,骨骼肌结构蛋白表达与超微结构恢复具有一定的同步性。