microPET-CT显像监测叶酸受体靶向放射性药物药代动力学的实验研究

目的制备叶酸受体靶向的^(68)Ga-1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7,10-四乙酸-赖氨酸-叶酸(^(68)Ga-DOTA-lysFA),用小动物正电子发射计算机体层摄影术(microPET)-CT动态显像考察其间质给药后体内药代动力学。方法合成^(68)Ga-DOTA-lys-FA,考察其理化特性。用人卵巢癌细胞(SKOV3)和人肺癌细胞(A549)测定受体结合实验。荷人卵巢癌细胞裸鼠模型33只,雌性,体质量18~20 g,鼠龄8~10周;瘤体直径0.6~0.8 cm;荷人肺癌细胞裸鼠模型4只,雌性,体质量18~20 g,鼠龄8~10周。通过尾静脉注射^(68)Ga-DOTA-lys-FA后不同时间点处死荷瘤鼠,解剖分离重要脏器称质量和用γ计数仪进行放射性测定,分析其体内生物学分布。抽签法随机分为^(68)Ga-DOTA-lys-FA尾静脉注射组(Ⅳ组)、肿瘤间质注射组(IT组),荷人肺癌细胞模型(A549)作为阴性对照组(ITC组),在给药后不同时间点行microPET-CT显像,勾画肿瘤及脏器感兴趣区并计算其放射性摄取(%ID和%ID/cm^3),对比分析^(68)Ga-DOTA-lys-FA给药后不同时间体内生物学分布。结果 ^(68)Ga-DOTA-lys-FA标记率为(97.80±2.11)%。3 h内体外稳定性好,尾静脉注射后microPET-CT获得的60 min肿瘤/肺部放射性摄取比值为5.36±1.03,明显高于生物学分布结果 (4.13±1.25,t=4.97,P=0.001)。基于microPET-CT定量,IT组60 min、180 min肿瘤放射摄取量分别为(125.60±18.40)%ID/cm^3、(91.80±14.50)%ID/cm^3,明显高于ITC组[(42.30±11.46)%ID/cm^3、(12.82±3.86)%ID/cm^3](P<0.001、0.001),也明显高于IV组。结论 ^(68)Ga-DOTAlys-FA microPET-CT动态显像可更有效评价其体内生物学分布,瘤内注射可明显增加其瘤内生物半减期,为治疗性核素标记叶酸靶向治疗提供数据支持。

静脉移植人脐血单个核细胞治疗脑出血大鼠疗效的microPET-CT评价及抗炎机制

背景:脐血中分离出的单个核细胞含有丰富的细胞类型,在细胞替代治疗、基因治疗以及组织工程学中具有重要的研究和应用价值。目的:通过micro PET-CT及Longa评分评估人脐血单个核细胞治疗大鼠脑出血的疗效,同时探讨其部分治疗机制。方法:采用二次注血/退针法制作脑出血大鼠模型,造模成功大鼠随机分为移植组与对照组,将从人脐血中分离出的单个核细胞经尾静脉注入移植组大鼠体内,对照组大鼠造模成功后不予治疗。各组大鼠均于移植前及移植后的第3,7,14,21天,通过micro PET-CT及Longa评分对大鼠脑代谢变化及神经功能恢复情况进行评估;通过ELISA法检测大鼠血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的水平。结果与结论:(1)人脐血单个核细胞移植治疗后第7,14,21天,与对照组相比,移植组大鼠血肿中心及血肿周围脑代谢水平均显著升高(P<0.05),血肿及其周围缺血组织体积及Longa评分显著降低(P<0.05);(2)人脐血单个核细胞移植后第3,7,14天,移植组两种因子水平均较对照组显著降低(P<0.05),移植后第21天,两组血清中血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平均降至正常水平;(3)结果说明,人脐血单个核细胞移植可促进大鼠脑出血的神经功能恢复,其机制可能与其能够减少炎性因子表达及抑制炎性反应有关。

柴胡疏肝散改善肝气郁结型大鼠抑郁症的机制:基于microPET/CT方法

目的观察柴胡疏肝散对肝气郁结型抑郁症大鼠行为改善,并探索其临床疗效机制是否是通过改善脑葡萄糖代谢发挥抗抑郁作用。方法雄性Wistar大鼠40只,按体质量匹配原则随机分为对照组、模型组和柴胡疏肝散高、低剂量组,10只/组,运用慢性束缚应激结合孤养法建立肝气郁结型大鼠模型,柴胡疏肝散高、低剂量组分别用1.04 g/mL及0.52 g/mL的浓缩药液灌胃,对照组与模型组用生理盐水灌胃,灌胃从实验开始之日起,1次/d,持续21d。观察旷场实验和糖水偏好实验变化,使用小型正电子发射断层显像与CT摄影融合术观察大鼠感兴趣脑区的脑葡萄糖代谢变化。结果行为学提示:与对照组相比,模型组大鼠糖水偏好程度下降(P<0.05),旷场实验不动时间延长(P<0.05)。脑代谢提示:模型组代谢增高脑区:双侧延髓、左侧小脑(P<0.05),代谢减低脑区:双侧胼胝体、双侧M1、双侧M2、左侧纹状体、右侧丘脑、右侧海马、右侧前额叶皮质、右侧扣带皮质、右侧S1、右侧S2、右侧岛叶皮质(P<0.05)。与模型组相比,高、低剂量组糖水偏好程度增高(P<0.05),旷场实验不动时间减少(P<0.05);低剂量组代谢增高脑区:双侧纹状体、双侧海马、双侧胼胝体、双侧前额叶皮质、左侧下丘、左侧M2、右侧听觉皮质、右侧丘脑、右侧M1、右侧S1、右侧S2、右侧岛叶皮质(P<0.05),代谢减低脑区:左侧延髓、左侧视觉皮质、左侧小脑(P<0.05);高剂量组代谢增高脑区:右侧前额叶皮质(P<0.05);其它感兴趣脑区二者的差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝气郁结证发病机制为慢性应激结合孤养法降低情绪认知和行为调节相关脑区葡萄糖代谢,使之失代偿,同时使左脑纹状体、小脑脑区发生葡萄糖摄取竞争,柴胡疏肝散可改善肝气郁结型抑郁症大鼠行为,其主要通过改善与情绪认知、行为等相关脑区及改善左脑纹状体、小脑脑区葡萄糖摄取竞争从而发挥抗抑郁效应。

^(18)F-6-L-多巴自动化合成及其初步PET/CT显像

^(18)F-6-L-多巴(^(18)F-FDOPA)作为多巴胺神经递质显像剂,已广泛应用于帕金森病、脑肿瘤以及神经内分泌疾病正电子发射断层(PET)显像诊断和疗效评估。本文使用进口多功能合成仪及其配套卡套和试剂盒,经氟化、还原、碘化、烷基化和水解多步反应,以及HPLC分离纯化,再经无菌过滤器传入产品瓶,得到^(18)F-FDOPA注射液,实现^(18)F-FDOPA自动化生产。并对获得的^(18)F-FDOPA注射液进行质量检测与分析:^(18)F-FDOPA注射液无色、澄清,pH为4~5.5,放化纯度>98%,放射性核纯度>99%,比活度>1.9 GBq/μmol,K2.2.2含量<50 mg/L,甲醇含量<0.01%,乙醇含量<0.01%,二氯甲烷含量<0.01mg/L,二甲基甲酰胺含量<15 mg/L,细菌菌内毒素<0.100 EU/mL,无菌检查结果为0cfu/mL,异常毒性实验为阴性。正常Wistar大鼠腹腔注射卡比多巴30 min后,尾静脉注射^(18)FFDOPA,100min后行microPET/CT扫描,图像显示双侧纹状体可见对称性放射性摄取。进口多功能合成仪可高效、稳定地自动化合成^(18)F-FDOPA,合成时间约80min,校正放化产率为(63.1±3.8)%(n=10),放化纯度大于98%,产品质量达到动物和人体PET显像要求。