血清中microRNA-106b对宫颈癌患者的早期诊断及预后预测价值

目的探究宫颈癌(cervical cancer,CC)组织中microRNA-106b的表达与患者临床病理特征及总体生存率(overall survival,OS)的关系。方法选取2017年9月~2019年11月西安市第四医院妇产科收治的经病理学确诊的CC患者150例为研究对象,比较microRNA-106b在CC组织和癌旁正常组织中的相对表达量,并分析不同水平microRNA-106b与CC患者临床病理特征和OS之间的关系。结果microRNA-106b在CC组织中的相对表达量为0.075,显著高于癌旁正常组织中的相对表达量0.003(P=0.0186)。不同水平microRNA-106b与CC患者的年龄、肿瘤直径、FIGO分期无关(P>0.05),与淋巴结转移和分化程度有密切关系,差异有统计学意义(χ2=13.95,7.21,P<0.05)。microRNA-106b高表达组患者的OS显著低于microRNA-106b低表达组,其差异具有统计学意义(P=0.036)。结论microRNA-106b与CC的发生、发展有密切关系,其对CC的诊治及预后有关键作用。

彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性。方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平。以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19)。比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径>10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平。应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值。并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析。结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径>10 cm所占比例分别为80.39%、76.47%、74.51%、78.43%,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80%、11.76%、29.41%、45.10%),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P<0.05)。ROC曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p和miR-106b以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用。侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P<0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P<0.05)。结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广。

高危型急性肺血栓栓塞症患者血清miR-34a-3p和miR-106b-5p的表达及意义

目的探讨高危型急性肺血栓栓塞症(APTE)患者血清微小RNA(miR)-34a-3p和miR-106b-5p的表达和意义。方法选取该院2022年2月至2023年2月收治的85例高危型APTE患者作为研究组;选择同期在该院就诊的80例非高危型APTE患者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有研究对象血清miR-34a-3p和miR-106b-5p水平。采用Pearson相关分析高危型APTE患者血清中miR-34a-3p与miR-106b-5p水平的相关性。采用多因素Logistic回归分析高危型APTE发生的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-34a-3p与miR-106b-5p对高危型APTE的诊断价值。结果与对照组比较,研究组血清miR-34a-3p、miR-106b-5p水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。高危型APTE患者血清miR-34a-3p水平与miR-106b-5p水平呈正相关(r=0.764,P<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示,miR-34a-3p与miR-106b-5p水平升高是发生高危型APTE的保护因素(P<0.05)。血清miR-34a-3p、miR-106b-5p水平单独及二者联合检测诊断高危型APTE的曲线下面积(AUC)分别为0.810、0.772和0.828,二者联合检测诊断高危型APTE的AUC明显大于血清miR-106b-5p单独检测(Z=2.231,P=0.030),与miR-34a-3p单独检测诊断高危型APTE的AUC比较,差异无统计学意义(Z=1.156,P=0.248)。结论高危型APTE患者血清中miR-34a-3p、miR-106b-5p水平明显降低,二者可能对高危型APTE具有较高的临床诊断价值。

男性不育症患者精浆miR-106b水平变化及意义

目的检测男性不育症患者精浆全基因组微小核糖核酸（miRNAs）表达谱，筛选差异表达的miR-106b，探讨其作为男性不育症分子诊断指标的可行性。方法收集163例男性不育症患者及126例正常生育男性精浆，分别混合；用Solexa测序技术分别检测弱精症、非梗阻性无精症和正常生育男性的混合精浆中592种miRNAs的表达，用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）对表达异常的miR．106b在单个样本中逐一进行验证。结果Solexa测序结果显示，19种miRNAs在不育症患者精浆中的表达量与健康男性相比变化〉2倍，miR．106b在弱精症和无精症患者中分别上调了6．89倍和2．6l倍。qRT-PCR结果表明，弱精症组miR．106b含量[中位数（四分位数）]为719．35（518．49，1183．39）fmol／L，与正常生育组的291．35（148．83，421．56）fmol／L比较，明显升高（U=91．00，P〈0．01）；无精症患者miR-106b的含量则明显降低，为60．07（18．38，292．52））fmol／L（U=195．00，P〈0．01）。ROC曲线分析显示，miR-106b诊断弱精症和无精症的曲线下面积（AUCROC）分别为0．844（95％CI，0．734～0．954）和0．720（95％CI，0．575～0．864）；鉴别弱精症和无精症的AUCROC为0．902（95％CI，0．822～0．982）。结论男性不育症患者精浆miR．106b表达水平与正常生育男性存在明显差异，有望成为男性不育症诊断和鉴别诊断的辅助指标。

miR-106b-25基因簇在小鼠肝泡型包虫病中的表达

目的探讨miR-106b-25基因簇(miR-93,miR-106b)在肝泡型包虫病中的表达及靶基因预测。方法Balb/c小鼠40只随机分为实验组24只(注射0.1 ml泡球蚴组织匀浆液)、对照组15只(注射0.1 ml生理盐水),正常组1只(不作任何处理)。分别收集实验组和对照组小鼠1月、3月和6月肝脏标本,提取RNA并定量测定miR-93和miR-106b的相对表达量,预测miR-93和miR-106b的靶基因。结果在感染3月实验组小鼠的肝内miR-93和miR-106b相对表达量分别为3.704±1.776和5.901±2.921,明显高于对照组和正常组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组1月和6月的相对表达量与对照组和正常组比较,差异均无统计学意义(P>0.05);经生物信息数据库比对后可知p21可能是miR-93、miR-106b共同的目的基因,主要发挥调控细胞周期及参与细胞凋亡等功能。结论miR-93和miR-106b在肝泡型包虫病中的表达差异可能与靶基因p21有关。miR-106b-25基因簇可能参与泡球蚴肝损伤的过程。

miR-106b在阿尔茨海默病中的作用机制

目的探讨miR-106b在阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）发病中的作用。方法取3月龄和6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR检测3、6、9月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织中miR-106b的表达,对芯片检测结果进行验证;通过构建miR-106b稳定转染细胞系和miR-106b knockdown研究miR-106b与TGFBR2表达之间的关系;构建TGFBR2 3’UTR-荧光素酶报告载体,验证miR-106b是否可以直接调控TGFBR2蛋白的表达;采用Western blot的方法检测APPswe/ΔPSΔE9小鼠和对照小鼠脑组织中TGFBR2蛋白的表达情况。结果 miR-106b在3月龄和6月龄AD模型小鼠脑组织中表达升高,在9月龄模型小鼠脑组织中表达降低;通过体外实验,我们发现miR-106b与TGFBR2蛋白的表达呈负相关;荧光素酶报告实验表明TGFBR2 3’UTR序列中包含miR-106b的结合位点;TGFBR2蛋白在3、6、9、12月龄AD模型小鼠脑组织中表达均降低。结论 miR-106b可能通过调控TGFBR2蛋白的表达影响TGF-β信号通路,从而参与AD的发病。

miR-106b在非小细胞肺癌细胞A549中的表达变化及意义

目的观察miR-106b在非小细胞肺癌细胞A549中的表达变化,并探讨其对细胞迁移、侵袭的影响及可能机制。方法采用荧光定量PCR法检测非小细胞肺癌细胞A549及正常肺表皮细胞系HPL-1中miR-106b相对表达量。将非小细胞肺癌细胞A549分为miR-106b模拟物组、miR-106b抑制物组和阴性对照组,采用Lipofectamine2000转染法分别转染miR-106b mimics、miR-106b inhibit及scramble。培养24 h,采用荧光定量PCR法检测miR-106b相对表达量,进行细胞划痕试验、Transwell细胞侵袭试验检测细胞迁移和侵袭能力(分别以划痕愈合率、穿膜细胞数表示),采用荧光定量PCR法和Western blotting法检测墨角藻糖基转移酶6(FUT6)mRNA及蛋白表达。结果非小细胞肺癌细胞A549及正常肺表皮细胞HPL-1中miR-106b相对表达量分别为5.37±0.42、1.00,二者比较P<0.01。miR-106b模拟物组、miR-106b抑制物组及阴性对照组miR-106b相对表达量分别为8.94±0.73、0.21±0.03、1.00,组间两两比较P均<0.05。miR-106b模拟物组、阴性对照组划痕愈合率、穿膜细胞数均高于miR-106b抑制物组,FUT6 mRNA及蛋白相对表达量均低于miR-106b抑制物组,但miR-106b模拟物组变化更明显(P均<0.05)。结论非小细胞肺癌细胞A549中miR-106b表达升高;过表达miR-106b可能通过下调FUT6表达而促进非小细胞肺癌细胞的迁移与侵袭。

免疫性血小板减少症患儿 T淋巴细胞亚群、甲状腺自身抗体、微小RNA-106b-5p 和微小RNA-181a-5p表达水平检测及临床意义

目的:分析免疫性血小板减少症(ITP)患儿T淋巴细胞亚群、甲状腺自身抗体、微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)和微小RNA-181a-5p(miR-181a-5p)表达水平及临床意义。方法:以158例ITP患儿为ITP组,依据临床分型不同分为慢性ITP组(34例)、持续性ITP组(60例)和新诊断ITP组(64例)。另选取同期健康儿童102例为对照组。所有患儿均给予静脉滴注人免疫球蛋白及口服醋酸泼尼松片等常规治疗,均治疗5 d。比较ITP组与对照组全血T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+))细胞及血清甲状腺自身抗体[甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)]、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。比较慢性ITP组、持续性ITP组和新诊断ITP组患儿全血T淋巴细胞亚群及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。比较ITP患儿治疗前、治疗5 d后全血T淋巴细胞亚群及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平。结果:与对照组比较,ITP组全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平更低,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平更高(均P<0.05)。慢性ITP组全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平低于持续性ITP组和新诊断ITP组,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平高于持续性ITP组和新诊断ITP组(均P<0.05)。与治疗前比较,治疗5 d后ITP患儿全血CD3^(+)、CD4^(+)细胞及血清miR-181a-5p水平升高,全血CD8^(+)细胞及血清TGAb、TPOAb、miR-106b-5p水平降低(均P<0.05)。结论:ITP患儿存在T淋巴细胞亚群失衡、甲状腺自身抗体和miR-106b-5p高表达以及miR-181a-5p低表达情况。治疗期间积极检测患儿全血T淋巴细胞亚群及血清甲状腺自身抗体、miR-106b-5p、miR-181a-5p水平,有助于患儿的疗效评估。

低剂量超声造影联合血清微小RNA-106b鉴别肝脏良、恶性占位性病变的价值

目的探讨低剂量超声造影联合血清微小RNA-106b(microRNA-106b,miR-106b)在肝脏良、恶性占位性病变诊断中的价值。方法对2017年2月至2019年10月在乐山市人民医院治疗的肝脏占位性病变患者120例进行回顾性分析,根据患者的病理结果分为良性病变组(57例)和恶性病变组(63例)。所有患者均给予低剂量超声造影检查,并采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-106b的相对表达量。采用受试者工作特征(receiver operator characteristic,ROC)曲线分析低剂量超声造影联合血清miR-106b对肝脏良、恶性病变的鉴别价值。结果恶性病变组患者血清miR-106b相对表达量为2.01±0.72,显著高于良性病变组的1.06±0.41,差异有统计学意义(t=8.988,P <0.001)。恶性病变患者超声造影特征中早增强[89.47%(51/57)vs 19.05%(12/63)]、高增强[70.18%(40/57)vs 33.33%(21/63)]和快消退[73.68%(42/57)vs6.35%(4/63)]比例均显著高于良性病变组(χ~2=59.518、16.252、57.397,P均<0.001)。低剂量超声造影联合血清miR-106b鉴别诊断肝脏良、恶性病变的ROC曲线下面积为0.959,显著高于血清miR-106b及低剂量超声造影的0.868、0.877(z=7.495、7.115,P均<0.001)。结论低剂量超声造影联合血清miR-106b水平在肝脏良、恶性占位性病变的诊断中有较好的应用价值。

miRNA-106b-5p表达水平与急性ST段抬高型心肌梗死患者心室重构的关系

目的分析急性ST段抬高型心肌梗死(ST segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者外周血微小核糖核酸-106b-5p(microRNA-106b-5p,miR-106b-5p)水平与梗死后出现心室重构(ventricular remodeling,VR)和发生主要心脏不良事件(major adverse cardiac events,MACE)的相关性。方法选取2018年1月~2020年2月我院就诊的STEMI患者90例作为STEMI组,同期临床及冠脉造影证实为稳定型冠心病(stable coronary heart disease,SCAD)90例作为对照组。使用荧光实时定量法(real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测两组入院时外周血miR-106b-5p水平,根据STEMI组术后及出院6个月的心脏彩超结果,判断STEMI组VR的情况。以STEMI最佳诊断阈值为分界,分析STEMI组不同miR-106b-5p水平与VR的关系。采用Kaplan-Meier生存曲线分析STEMI组不同miR-106b-5p水平患者出院后12个月的MACE发生情况。结果低表达组较高表达组CK.CK-MB和CTnI显著增大(P<0.01),CK、CK-MB和CTnI与miRNA-0.6-5P呈负相关关系(均P<0.05)。高表达组(miR-106b-5p≥0.41,58例)出院后6个月出现VR 1例(2%),显著低于低表达组(miR-106b-5p<0.41,32例)5例(16%),(P<0.05);高表达组随访12月2例(3%)发生MACE(心肌梗死1例和卒中1例),显著低于低表达组5例(16%)(心肌梗死3例和卒中2例)(Log-rankχ^2=4.725,P<0.05)。出院后6个月外周血miRNA-106-5p水平与左室舒张末内径(LVEDd)呈负相关(r=-0.437,P<0.05),与左室射血分数(LVEF)呈正相关(r=0.414,P<0.05)。结论外周血miR-106b-5p水平与心梗后VR及MACE存在相关性。

肾透明细胞癌患者血清微小RNA-106b的表达水平及其临床意义

目的探讨肾透明细胞癌患者血清微小RNA(miR)-106b的表达水平及其临床意义。方法选择肾透明细胞癌患者45例(肾透明细胞癌组)及健康正常人30例(对照组),收集肾透明细胞癌患者术前、术后1周、1个月及对照组的血清样本,利用实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测血清miR-106b相对表达水平。比较两组血清miR-106b表达水平,分析血清miR-106b表达水平与肾透明细胞癌患者临床病理特征的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-106b对肾透明细胞癌的诊断效能。结果肾透明细胞癌组术前和术后1周的血清miR-106b表达量高于术后1个月及对照组(P<0.05);肾透明细胞癌组术后1个月与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不同性别、年龄段、肿瘤直径、Fuhrman分级患者的血清miR-106b表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-106b诊断肾透明细胞癌的曲线下面积为0.876(P<0.05),最佳诊断阈值为2.08,敏感度为86.7%,特异度为80.0%。结论血清miR-106b的高表达与肾透明细胞癌密切相关,可作为肾透明细胞癌的潜在生物标记物。

联合靶向阻断miR-29b/92b/106b抑制胃癌细胞生长及迁移

目的:本研究旨在寻找胃癌转移相关微小RNA(microRNA,miRNA,miR),揭示其对胃癌细胞生物学功能的影响,并探讨联合阻断候选miRNA在胃癌治疗中的临床应用价值。方法:收集发生淋巴结转移及无转移患者的胃癌标本各3例,采用miRNA表达芯片筛选转移相关的候选miRNA;将锁核酸修饰的候选miRNA的反义寡核苷酸转染BGC-823胃癌细胞株,运用CCK-8法、流式细胞术、划痕实验及Transwell迁移实验分析候选miRNA抑制前后胃癌细胞生物学功能的变化;构建多西环素诱导多重靶向候选miRNA的裸鼠移植瘤模型,观察联合靶向阻断候选miRNA后,肿瘤细胞体内生长情况。结果:miRNA表达芯片发现miR-29b、miR-92b及miR-106b在发生淋巴结转移患者的胃癌组织最高,并将它们确定为胃癌转移相关候选miRNA;分别在BGC-823细胞中抑制上述miRNA,可导致细胞活力减弱,凋亡诱导增加,迁移能力显著下降(P <0. 05);同时,体内联合阻断miR-29b/92b/106b,裸鼠移植瘤的形成较对照组显著减少。结论:miR-29b、miR-92b及miR-106b与胃癌细胞的迁移有关,联合阻断上述miRNA可明显抑制胃癌细胞体内外生长。这3个miRNA可能作为潜在的治疗靶点。

微小核糖核酸106b对肝细胞葡萄糖异生的影响及机制

目的:探讨微小核糖核酸106b(miR-106b)对肝细胞葡萄糖异生作用及其机制。方法:正常人L02肝细胞培养于含10%胎牛血清的DMEM中,利用miR-106b模拟物和抑制剂(mimics和antagomiR,分别20 nmol/L)处理L02肝细胞24 h,Western blot法检测蛋白和磷酸化蛋白的表达,定量RT-PCR检测mRNA的表达,葡萄糖试剂盒检测培养液中葡萄糖含量。结果:miR-106b模拟物可明显增加磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)的蛋白表达(P均<0.01)、增加磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)的mRNA表达(P<0.01)、降低葡萄糖激酶(GCK)的mRNA表达(P<0.01)。miR-106b抑制剂可显著降低PEPCK和G6Pase的蛋白表达(P均<0.01)、降低PCK1的mRNA表达(P<0.01)、增加GCK的mRNA表达(P<0.01)。此外,miR-106b模拟物或抑制剂可显著降低或增加信号转导和转录激活子3(STAT3)的蛋白表达(P均<0.01)。STAT3特异性抑制剂可显著拮抗miR-106b抑制剂对肝细胞葡萄糖异生的抑制作用。结论:miR-106b通过抑制STAT3信号通路而增加肝细胞葡萄糖异生。

食管癌患者miR-106b表达意义及与预后的关系

目的探讨食管癌组织中微小核糖核酸-106b(miR-106b)表达水平,分析其与预后的关系。方法选取我院2016年5月~2019年5月收治的139例食管癌患者为研究对象,采用实时逆转录聚合酶链反应法(qRT-PCR)检测食管癌、癌旁组织中miR-106b表达水平。绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析miR-106b诊断食管癌的曲线下面积(AUC),并分析其与病理特征的关系。在患者术后随访24个月,利用COX多元回归模型分析预后危险因素,并观察不同miR-106b表达患者的2年累积生存率。结果食管癌组织中miR-106b表达量低于癌旁组织,且miR-106b表达量诊断食管癌的AUC为0.758(P<0.05)。miR-106b低表达组临床分期III期、肿瘤直径≥5 cm、肿瘤低分化、淋巴结转移占比高于高表达组(P<0.05)。COX多因素回归性分析显示临床分期III期、肿瘤直径≥5 cm、肿瘤低分化、淋巴结转移、miR-106b低表达是预后危险因素,术后放/化疗是预后保护因素(P<0.05)。miR-106b低表达组2年累积生存率低于miR-106b高表达组(P<0.05)。结论食管癌患者miR-106b表达较癌旁组织降低,且与肿瘤分期、大小、分化程度、淋巴结转移有关,对食管癌诊断及预后有一定评估价值。

miR-106b介导RANKL/RANK/OPG通路抗骨质疏松症的实验研究

目的:探讨微小核糖核酸106b(miR-106b)介导核因子κB受体激活因子配体(RANKL)/核因子κB受体激活因子(RANK)/骨保护素(OPG)通路抗骨质疏松症的作用。方法:取60只Wistar大鼠切除卵巢制备骨质疏松症大鼠模型,将建模成功的51只大鼠随机分为模型组、miR-106b mimics-NC组、miR-106b mimics组、miR-106b inhibitor-NC组、miR-106b inhibitor组,除模型组外其余各组分别转染miR-106b模拟物阴性对照、miR-106b模拟物、miR-106b抑制剂阴性对照和miR-106b抑制剂,另取10只大鼠仅切除卵巢附近脂肪作为假手术组。X线骨密度仪检测大鼠股骨骨密度;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠右侧股骨组织病理学变化;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)、免疫印迹(WB)分别检测大鼠右侧股骨组织miR-106b表达、RANKL、RANK、OPG信使核糖核酸(mRNA)表达和蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-106b和RANKL的靶向关系。结果:与模型组、miR-106b mimics-NC组比,miR-106b mimics组右侧股骨组织骨密度、miR-106b表达、OPG mRNA和蛋白表达升高(P<0.05),RNAKL mRNA和蛋白表达降低(P<0.05);与模型组、miR-106b inhibitor-NC组比,miR-106b inhibitor组右侧股骨组织骨密度、miR-106b表达、OPG mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05),RNAKL mRNA和蛋白表达升高(P<0.05);假手术组大量骨小梁排列紧密、厚度均匀;模型组、miR-106b mimics-NC组、miR-106b inhibitor-NC组骨细胞数减少,排列紊乱,骨小梁间隙大;miR-106b mimics组骨细胞数增多,排列紧密,骨小梁厚度增加;miR-106b inhibitor组骨细胞数缺失,排列紊乱,骨小梁间隙较大。双荧光素酶报告基因实验证实miR-106b靶向调控RANKL。结论:上调miR-106b表达可抑制RANKL表达,促进OPG表达,增加骨质疏松症大鼠股骨骨密度,减轻右侧股骨组织病理损伤。

长链非编码RNA alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1靶向微小RNA-106b-5p调控氧化型低密度脂蛋白诱导的人脑微血管内皮细胞损伤

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1(A2M-AS1)靶向微小RNA(miR)-106b-5p对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的影响。方法用ox-LDL诱导人脑微血管内皮细胞设为ox-LDL组,正常培养细胞为对照(Ctrl)组;A2M-AS1过表达(pcDNA-A2M-AS1组)、空载体(pcDNA组)、miR-106b-5p抑制剂(anti-miR-106b-5p组)、阴性对照(anti-miR-NC组)、pcDNA-A2M-AS1与对照mimic NC(miR-NC组)、pcDNA-A2M-AS1与miR-106b-5p模拟物(miR-106b-5p mimics组)转染细胞后加ox-LDL处理,n=9;Real-time PCR检测A2M-AS1与miR-106b-5p表达;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平;流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测A2M-AS1与miR-106b-5p靶向关系;Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达量。结果与Ctrl组比较,ox-LDL组A2M-AS1表达水平、SOD和CAT活性、Bcl-2蛋白水平降低,miR-106b-5p表达水平、MDA水平、凋亡率、Bax蛋白水平升高(P<0.05);过表达A2M-AS1或干扰miR-106b-5p降低ox-LDL诱导细胞后MDA水平、凋亡率与Bax蛋白水平,升高SOD、CAT活性和Bcl-2蛋白水平(P<0.05);A2M-AS1靶向miR-106b-5p;上调miR-106b-5p逆转过表达lncRNA A2M-AS1对ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的作用。结论A2M-AS1通过靶向miR-106b-5p减轻ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤。

microRNA-106b在甲状腺癌中表达的临床意义及生物学功能

目的研究microRNA-106b（miR-106b）在TC组织中的表达及其临床意义，并探讨其对TC细胞增殖及凋亡的影响。方法采用qRT-PCR检测51例TC及相应癌旁组织中miR-106b的表达并分析其与TC患者临床病理特征的相关性，并利用miR-106b过表达质粒及抑制质粒改变其在TC细胞中的表达，利用BrdU细胞增殖分析及流式细胞仪检测细胞增殖及凋亡的变化。结果miR-106b在TC组织中的表达水平显著低于相应癌旁组织（0.36±0.029 vs 0.98±0.034，P=0.004）。miR-106b表达与肿瘤大小（P=0.002）及肿瘤数目（P=0.041）有关。miR-106b抑制剂能显著降低miR-106b在TPC-1细胞的表达水平（0.96±0.025 vs 0.29±0.032，P=0.001），并能显著增强细胞增殖能力（89.33±5.67 vs 136.67±10.33，P=0.03），减少细胞凋亡（16.33±3.20 vs 7.67±2.45，P=0.04）；miR-106b类似物能显著增加miR-106b在TPC-1细胞的表达水平（0.99±0.02 vs 3.19±0.68，P=0.002），并能显著减弱细胞增殖能力（98.00±4.65 vs 76.33±2.87, P=0.03），增加细胞凋亡（22.54±2.13 vs 32.45±4.34，P=0.04）。结论miR-106b在TC组织中的表达水平显著低于相应癌旁组织，其表达降低与TC患者的不良临床病理特征相关；miR-106b能减弱细胞增殖能力，增加细胞凋亡。提示miR-106b在TC的发生发展中发挥重要作用。

血清miR-106b-5p、miR-760联合低剂量螺旋CT诊断早期肺癌的临床价值

目的探讨微RNA(miR)-106b-5p、miR-760在早期肺癌患者血清中的水平以及联合低剂量螺旋CT在诊断早期肺癌中的临床价值。方法收集2022年1月至2023年3月于河北省沧州市人民医院进行治疗的90例早期肺癌患者(肺癌组)作为研究对象, 同时选取同期90例经病理确诊为肺部良性病变(良性肺结节)的患者作为对照组。比较两组患者血清miR-106b-5p、miR-760水平, 对低剂量螺旋CT检查结果进行分析;绘制受试者操作特征曲线, 确定血清miR-106b-5p、miR-760的最佳截断值;四格表分析血清miR-106b-5p、miR-760联合低剂量螺旋CT对早期肺癌的诊断效能。结果肺癌组患者血清miR-106b-5p水平高于对照组(1.39±0.31比1.04±0.30), 血清miR-760水平低于对照组(0.75±0.24比1.02±0.26), 差异均有统计学意义(t=7.70, P<0.001;t=7.24, P<0.001)。miR-106b-5p、miR-760、低剂量螺旋CT诊断早期肺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.83、0.81、0.82, 准确率分别为76.67%、77.22%、81.67%, 敏感性分别为84.44%、81.11%、76.67%, 特异性分别为68.89%、73.33%、86.67%。血清miR-106b-5p、miR-760联合低剂量螺旋CT诊断早期肺癌的AUC为0.96, 准确率为90.00%, 敏感性为94.44%, 特异性为85.56%。三项联合诊断的准确率高于miR-106b-5p、miR-760、低剂量螺旋CT单独诊断(χ^(2)=11.52, P=0.001;χ^(2)=10.72, P=0.001;χ^(2)=5.14, P=0.023);三项联合诊断的敏感性高于miR-106b-5p、miR-760、低剂量螺旋CT单独诊断(χ^(2)=4.77, P=0.029;χ^(2)=7.46, P=0.006;χ^(2)=11.51, P=0.001);三项联合诊断的特异性高于miR-106b-5p、miR-760单独诊断(χ^(2)=7.11, P=0.008;χ^(2)=4.12, P=0.042)。结论早期肺癌患者血清miR-106b-5p水平显著升高, miR-760水平显著降低, miR-106b-5p、miR-760联合低剂量螺旋CT对早期肺癌具有较高的诊断价值。

微小RNA-106b通过调控核因子-κB受体活化因子配体/骨保护素对胶原诱导的小鼠关节炎骨质破坏的作用

目的观察微小RNA(miRNA,miR)-106b对胶原诱导的小鼠关节炎(CIA)骨关节破坏的影响.方法实验分为4组:对照组(Sham组),慢病毒载体组(NC组),miR-106bmimic组(Mimic组)和miR-106b inhibitor组(Inhibitor组).采用牛Ⅱ型胶原免疫DBA/1小鼠建立CIA模型.显微CT (Micro-CT)检查评估骨组织破坏程度,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测成熟破骨细胞;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CIA小鼠膝关节中miR-106b的表达;酶联免疫吸附(ELISA)检测外周血中核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)的表达变化.应用SPSS 11.0统计软件分析,数据以均值±标准差(Mean±SD)表示,多样本间比较采用单因素方差分析,组间比较采用Tukeypost-hoc pairwise分析,统计运算前所有数据均进行方差齐性检验.结果 RT-PCR结果显示miR-106b在CIA小鼠膝关节中高表达.Micro-CT结果显示,降低miR-106b表达后,CIA小鼠骨关节破坏明显减轻;骨体积、骨体积分数、骨面积分数、骨小梁厚度分别为(6.85±0.24) mm3、(22.52±0.62)%、(9.46±2.02)/mm、(0.31±0.06) mm,与NC组[(5.61±0.35) mm3、(16.26±1.42)%、(13.32±1.85)/mm、(0.24±0.06)mm]比较,差异有统计学意义(P<0.01).TRAP染色结果显示CIA小鼠关节破坏局部有大片紫红色深染区域,Inhibitor组仅可见少量阳性染色区域,提示miR-106b inhibitor能够抑制破骨细胞活化.ELISA结果显示,miR-106b inhibitor能促进OPG的分泌,抑制RANKL的表达,使RANKL/OPG比值明显降低.结论抑制miR-106b能减轻CIA模型小鼠骨关节破坏.

长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因16对急性肺栓塞小鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因16(lncRNA SNHG16)通过微小RNA-106b-5p(miR-106b-5p)/核受体亚家族4组A成员3(NR4A3)对急性肺栓塞(APE)小鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖和凋亡的影响及机制。方法用颈总静脉注射自体血栓法建立APE小鼠模型,将小鼠随机分为假手术组和模型组,并制备小鼠PASMCs。随后,将空白质粒(设为pcNC组)、SNHG16过表达质粒(设为pc-SNHG16组)、阴性对照寡核苷酸(设为miR-NC组)和miR-106b-5p模拟物(设为miR-106b-5p mi组)分别转染至模型组小鼠PASMCs中。用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)染色实验检测PASMCs增殖能力;用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(TUNEL)法检测PASMCs凋亡率;用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PASMCs中miR-106b-5p的表达;用双荧光素酶报告基因实验验证miR-106b-5p与SNHG16之间的结合关系;用Western blot检测PASMCs中NR4A3蛋白的表达。结果假手术组、模型组、pc-NC组和pc-SNHG16组细胞增殖率分别为(29.57±2.86)%,(33.08±0.96)%,(32.85±2.41)%,(36.86±2.25)%;细胞凋亡率分别为(19.25±1.09)%,(17.04±1.33)%,(15.80±1.77)%,(10.93±1.40)%;以上指标,假手术组和模型组相比,pc-NC组和pcSNHG16组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达SNHG16可显著降低miR-106b-5p的表达,双荧光素酶报告基因实验证实miR-106b-5p与SNHG16可直接结合,过表达miR-106b-5p可显著降低NR4A3蛋白的表达。结论SNHG16通过调控miR-106b-5p/NR4A3轴促进APE小鼠模型PASMCs增殖,并抑制细胞凋亡。