lncRNA-TNFRSF13C调控miR-1246对牙周细胞低氧诱导因子1α的作用

背景:LncRNA-TNFRSF13C是B细胞发育和功能中的一个重要因子,在牙周炎患者牙周组织中高表达,但具体机制还不清楚。目的:探讨lncRNA-TNFRSF13C调控miR-1246对牙周细胞低氧诱导因子1α的作用机制。方法:人牙周膜细胞经过脂多糖处理后分为7组:A组(无转染的人牙周膜细胞株)、B组(人牙周膜细胞株转染TNFRSF13C NC-siRNA)、C组(人牙周膜细胞株转染TNFRSF13C-siRNA)、D组(人牙周膜细胞株转染miR-1246 mimics)、E组(人牙周膜细胞株转染miR-1246 siRNA)、F组(人牙周膜细胞株转染TNFRSF13C-siRNA+miR-1246 mimics)及G组(人牙周膜细胞株转染TNFRSF13C-siRNA+miR-1246 siRNA)。采用qRT-PCR检测各组细胞lncRNA-TNFRSF13C、miR-1246相对表达;CCK-8检测细胞活性;流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫印迹检测细胞中低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子蛋白的表达;Pearson分析lncRNA-TNFRSF13C与miR-1246相关性,双荧光素酶分析靶向关系。结果与结论:①A、B两组人牙周膜细胞活性、凋亡率及蛋白指标比较差异均无显著性意义(P>0.05),与B组相比,C组细胞活性升高、凋亡率及低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子蛋白降低(P<0.05),与C组相比,D组细胞活性降低,凋亡率及低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子蛋白均升高(P<0.05),D组相比,E组细胞活性升高(P<0.05),F组细胞活性低于E组,E、F组细胞凋亡率降低(P<0.05),与F组相比,G组细胞活性升高、凋亡率及低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子蛋白降低(P<0.05)。②lncRNA-TNFRSF13C与miR-1246呈现正相关(P<0.05)。③TNFRSF13C-siRNA组与TNFRSF13C-NC组在miR-1246-wt荧光活性降低(P<0.05);与miR-1246-NC组相比,miR-1246 mimics组低氧诱导因子1α-wt、血管内皮生长因子-wt荧光活性升高(P<0.05)。④结果说明,下调lncRNA-TNFRSF13C对脂多糖处理的牙周细胞具有促进活性、降低凋亡的作用,同时也可抑制低氧诱导因子1α、血管内皮生长因子的表达,其机制与调控miR-1246活性相关。

miR-595、miR-1246在溃疡性结肠炎血清中的表达及其与肠道菌群相关性研究

目的:探讨miR-595、miR-1246在溃疡性结肠炎血清中的表达及其与肠道菌群相关性。方法:选取溃疡性结肠炎病人160例作为观察组,并根据疾病活动性分为活动期(aUC组)和缓解期(rUC组),各80例。同期选取健康体检者158名作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测各组血清中miR-595、miR-1246表达水平;采用ELISA法检测各组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-22水平;采集各组新鲜粪便,使用梯度稀释法对菌群进行培养。结果:aUC组和rUC组病人miR-595、miR-1246表达和TNF-α、IL-6、IL-22水平均高于对照组(P<0.05),aUC组亦均高于rUC组(P<0.05)。aUC组和rUC组乳酸杆菌、双歧杆菌数量均低于对照组(P<0.05),aUC组亦均低于rUC组(P<0.05);aUC组肠球菌、大肠埃希菌数量均明显高于对照组和rUC组(P<0.05)。Pearson相关分析显示,miR-595、miR-1246表达水平和TNF-α、IL-6、IL-22水平与乳酸杆菌、双歧杆菌数目均呈负相关关系(P<0.05),而以上指标与肠球菌、大肠埃希菌数目均呈正相关关系(P<0.05)。结论:溃疡性结肠炎病人血清中miR-595、miR-1246表达上调,且与肠道菌群数量存在相关关系。

姜黄素通过调控MicroRNA-1246激活P53蛋白对膀胱癌T24细胞进行放疗增敏的作用机制研究

目的探讨姜黄素对膀胱癌化疗增敏作用机制。方法对经过姜黄素和放射处理的T24细胞进行microRNA表达(miRNA芯片测序)、细胞活力(细胞增殖试验试剂盒)、集落形成、凋亡(AnnexinV-F)分析、ITC/7-AAD流式细胞计数(ITC/7-AAD)、miR-1246和p53mRNA(实时PCR)和蛋白质(Westernblot)表达的分析。结果芯片测序分析鉴定出17个差异表达的miRNA,在姜黄素处理的细胞中,与对照组相比,姜黄素显著降低T24细胞活力,并呈现浓度依赖性。miR-1246在T24细胞中的表达显著高于SV-HUC-1细胞,且高浓度的姜黄素(10或20μg·mL^(-1))可显著下调T24细胞miR-1246的表达。20μg·mL^(-1)浓度的姜黄素组和放疗处理联合应用对抑制miR-1246的表达、细胞活力和集落形成的作用优于姜黄素或者进行单独放疗处理组。通过与对照组相比,抑制miR-1246显著降低T24细胞的存活率。转染antagomiR-1246可显著提高T24细胞处于G0/G1期细胞比例,而转染antagomiR-NC细胞则诱导细胞凋亡。荧光素酶试验显示,miR-1246的过表达会抑制p53 3‘-UTR基因的荧光素酶活性。结论 miR-1246通过靶向抑制p53基因在膀胱癌细胞中的表达,参与到姜黄素和放疗的抗肿瘤治疗中。

miR-1246通过靶向GSK3β促进食管癌转移的机制

目的:探讨miRNA-1246(miR-1246)促进食管癌细胞转移的作用及其机制。方法:Realtime-PCR法检测miR-1246在癌旁组织、食管癌组织、正常食管上皮和食管癌细胞系中的表达差异。Transwell侵袭实验观察转染miR-1246 mimics或inhibitors对食管癌细胞EC109转移能力的影响;裸鼠尾静脉转移实验观察稳定表达miR-1246对食管癌转移能力的影响;生物信息学分析miR-1246的候选靶基因为GSK3β,荧光素酶报告基因实验检测过表达miR-1246后EC109细胞中野生型和突变型GSK3β的荧光素酶活性。Western blot检测miR-1246对GSK3β蛋白表达的影响。结果:食管癌组织中的miR-1246表达显著高于癌旁组织(P<0.05);多个食管癌细胞中miR-1246的表达比正常食管上皮细胞Het-1A明显增高(P<0.05)。与阴性对照相比,miR-1246 mimics显著促进EC109细胞的侵袭能力(P<0.05)。反之,miR-1246 inhibitors明显抑制EC109细胞的侵袭能力(P<0.05);体内实验发现稳定过表达miR-1246明显升高EC109细胞的肺转移能力。荧光素酶报告基因结果证实miR-1246能够抑制GSK3β的3'-UTR区荧光素酶活性;转染miR-1246后,EC109细胞中的GSK3β蛋白水平明显低于对照组;miR-1246过表达显著抑制GSK3β-wt,而不能抑制GSK3β-mut的蛋白表达。结论:miR-1246能够通过靶向GSK3β促进食管癌转移,抑制miR-1246的表达或增加GSK3β的表达可能是抑制食管癌转移的有效手段。

miR-1246在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响

目的观察微小RNA-1246(mi R-1246)在肝癌组织中的表达及其对人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其在肝癌发生发展中的作用和意义。方法应用实时定量PCR(q RT-PCR)方法检测mi R-1246在肝癌以及癌旁组织的表达;对人肝癌细胞株(BEL7402、SMMC7721)转染mi R-1246抑制剂后,采用MTT法观察肝癌细胞的增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡的变化。结果 mi R-1246在肝癌组织中表达显著高于癌旁组织[(65.39±8.77)vs(10.23±2.58),P=0.002]。MTT和凋亡实验结果显示,与阴性对照组相比,转染mi R-1246抑制剂后,BEL7402细胞增殖能力下降,凋亡增加(P均<0.05);SMMC7721细胞也出现增殖能力下降,凋亡增加(P均<0.05)。结论 mi R-1246在肝癌组织中高表达,并且与肝癌细胞的增殖及凋亡有关,其表达的上调可能与肝癌的发生发展有关。

哈巴苷通过抑制miR-1246表达对LPS诱导的人牙周膜细胞损伤的影响

目的:探讨哈巴苷对LPS诱导的人牙周膜细胞(hPDLCs)损伤的影响及分子机制。方法:hPDLCs分为Con组、LPS组、哈巴苷低、中、高浓度组(LPS+HG-L、M、H)、LPS+anti-miR-NC组、LPS+anti-miR-1246组、LPS+HG+miR-NC组、LPS+HG+miR-1246组。ELISA检测TNF-α、IL-1β水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测蛋白表达;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-1246表达水平。结果:LPS诱导的hPDLCs中TNF-α、IL-1β水平升高,细胞凋亡率升高,Bcl-2表达水平降低,Bax表达水平升高,miR-1246表达水平升高(P<0.05)。哈巴苷低、中、高浓度处理后,LPS诱导的hPDLCs中TNF-α、IL-1β水平降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低,miR-1246表达水平降低,且呈浓度依赖性(P<0.05)。抑制miR-1246表达后,LPS诱导的hPDLCs中TNF-α、IL-1β水平降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2表达水平升高,Bax表达水平降低(P<0.05)。miR-1246过表达逆转了哈巴苷对LPS诱导的hPDLCs损伤的作用。结论:哈巴苷通过抑制miR-1246表达保护hPDLCs免受LPS诱导的损伤。

miR-1246在疾病上的研究进展

miRNAs是一类具有转录调控功能的小分子非编码RNA,参与了组织代谢和细胞增殖、分化、凋亡及基因表达,在许多生理和病理过程中扮演着重要的角色。目前,研发有效的miRNA激活剂或抑制剂来挽救和诊断病理状态,已成为医学研究领域的新方向和切入点。最新发现的miR-1246受P53调控,并与产生疾病的分子机制息息相关。综述了miR-1246序列结构特点及分子作用机制,对近年来miR-1246在癌症、埃博拉病毒传染病、唐氏综合症等疾病上的应用潜能进行了总结,并对该领域今后的发展前景作了展望,旨为医学研究提供理论参考。

miR-1246和miR-1261在模拟失重48 h后人肺微血管内皮细胞中的表达及生物信息学分析

目的:检测模拟失重48 h人肺微血管内皮细胞(HMVEC-L)miR-1246和miR-1261表达的改变,利用生物信息学方法分析预测其靶基因。方法:以回转器行模拟失重效应48 h的HMVEC-L为模拟失重组,同时设正常重力对照组,比较两组细胞miRNA表达谱的变化,应用Real-time PCR检测HMVEC-L细胞miR-1246和miR-1261的表达,通过Target Scan、miRDB和miRanda对miR-1246和miR-1261的靶基因进行预测以及功能注释和通路富集分析。结果:与正常重力对照组比较,模拟失重48 h可引起HMVEC-L细胞中29种miRNA呈现显著差异性表达,miR-1246和miR-1261显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);生物信息学分析显示miR-1246和miR-1261的靶基因涉及生物过程、分子功能及细胞组成等多种功能,主要参与了磷酸化通路、凋亡相关通路和细胞骨架等相关分子的调控。结论:模拟失重48 h后可引起HMVEC-L细胞miR-1246和miR-1261的表达降低,提示其可能参与了模拟失重后内皮细胞功能异常的调控。

慢性牙周炎患者唾液中miR-1246的表达及其临床意义

目的探讨慢性牙周炎(CP)患者唾液中miR-1246的表达及其临床意义。方法选取2017年1月~2019年5月保定市第二中心医院收治的94例CP患者作为CP组和50例体检正常者作为对照组。CP患者分为轻度牙周炎组(n=23),中度牙周炎组(n=37)和重度牙周炎组(n=35),检测各组唾液中miR-1246的表达水平。对CP患者进行牙周基础治疗,分别检测治疗前和治疗6周后患者唾液中miR-1246的表达水平,并检查牙周探诊深度(PD),附着丧失(AL),菌斑指数(PLI)和出血指数(BI)各项牙周临床指标。采用Pearson相关分析CP患者miR-1246表达水平与PD,AL,PLI及BI的相关性。结果CP组唾液中miR-1246表达水平明显高于对照组(7.28±2.56 vs 3.52±1.14),差异有统计学意义(t=16.294,均P<0.01)。重度组唾液中miR-1246表达水平均明显高于中度组和轻度组(10.47±3.38 vs 7.38±2.70,4.24±1.30),差异有统计学意义(t=13.516,21.482,P<0.01)。CP患者治疗后唾液中miR-1246表达水平明显低于治疗前(4.75±1.61 vs 7.28±2.56),差异有统计学意义(t=10.490,P<0.01)。CP患者治疗后PD(2.84±0.72mm vs 5.16±1.30 mm),AL(3.08±0.64mm vs 5.62±1.15 mm),PLI(1.13±0.28 vs 2.62±0.41)及BI(2.95±0.58 vs 1.64±0.47)均明显低于治疗前,差异均有统计学意义(t=8.742~10.873,均P<0.01)。相关分析显示,治疗前后CP患者miR-1246表达水平与PD,AL,PLI及BI均呈正相关(r=0.592~0.874,均P<0.01)。结论CP患者唾液中miR-1246表达水平明显升高,治疗后明显下降,其表达水平与CP严重程度和牙周炎临床指标密切相关,有望为CP的防治提供新的思路。

高级别浆液性卵巢癌患者血清miR-1246和miR-2278检测水平的临床诊断价值

目的研究高级别浆液性卵巢癌(high-grade serous ovarian cancer,HGSOC)患者血清miR-1246和miR-2278检测水平的临床诊断价值。方法选取西安高新医院妇科收治的55例HGSOC患者为试验组,另选取同期51例体检健康者为对照组,采用实时荧光定量PCR(rt-qPCR)检测血清中miR-1246和miR-2278的水平,用受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)分析血清中糖类抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125),miR-1246和miR-2278单独和联合检测的诊断效能。结果试验组患者的CA125,miR-1246和miR-2278水平均显著高于对照组,差异具有统计学意义(t=7.39~9.35,均P<0.05)。ROC曲线分析显示,CA125,miR-1246和miR-2278联合检测的敏感度和特异度分别为98.7%和79.5%,高于单一检测指标。血清miR-1246和miR-2278上调在FIGO分期、有无淋巴结转移和有无复发比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.07~1.97,均P>0.05),血清miR-1246和miR-2278上调在远处转移患者中的比例显著高于无远处转移患者,差异具有统计学意义(χ^(2)=12.31,P=0.00)。结论血清miR-1246和miR-2278联合CA125水平检测对诊断HGSOC有潜在的应用价值。

LINC01089下调miR-1246对胰腺癌细胞增殖和迁移侵袭的影响

目的阐明长基因间非蛋白质编码RNA 1089(LINC01089)调控微小RNA-1246(miR-1246)在胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测LINC01089和miR-1246在人胰腺癌细胞(CFPAC-1、PANC-1、AsPC-1、SW1990、BxPC-3)的表达。选择BxPC-3细胞并分为对照组、pcDNA3.1组、LINC01089过表达组(转染pcDNA3.1-LINC01089)和LINC01089+miR-1246过表达组(转染pcDNA3.1-LINC01089和miR-1246模拟物mimics)。活细胞计数试剂盒-8、划痕和Transwell小室实验评价细胞增殖、迁移和侵袭能力。双荧光素酶报告基因实验和qPCR验证miR-1246与LINC01089和囊性纤维化跨膜传导调节因子(CFTR)的靶向关系,qPCR和Western blot检测基质金属蛋白酶(MMP)3、Snail和CFTR的表达情况。结果与人正常胰腺导管细胞HPDE相比,胰腺癌细胞的LINC01089低表达而miR-1246高表达(P<0.05)。与对照组相比,LINC01089过表达组细胞的增殖、迁移和侵袭能力均受到抑制,且MMP3和Snail表达水平降低(P<0.05)。与LINC01089过表达组相比,LINC01089+miR-1246过表达组细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,且MMP3和Snail表达水平升高(P<0.05)。LINC01089可靶向调控miR-1246的表达而CFTR为miR-1246的靶基因。结论LINC01089可能通过miR-1246介导CFTR表达下调来抑制胰腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭,LINC01089/miR-1246轴有望成为胰腺癌防治的靶点。

宫颈鳞癌患者血清miR-1246的表达及其临床意义

目的探讨miR-1246在宫颈鳞癌患者血清中的表达并分析其在宫颈鳞癌诊断、术后恢复及复发监测中的价值。方法采用RT-qPCR法检测宫颈鳞癌、鳞状上皮内病变(CIN)患者以及健康体检妇女血清miR-1246的表达,分析其与肿瘤临床病理特征的相关性。随访60例手术治疗的宫颈鳞癌患者及8例复发患者(复发组)血清miR-1246含量,评估其作为术后恢复、术后复发监测的肿瘤标志物的意义。结果宫颈鳞癌患者血清中miR-1246含量明显高于CIN患者与健康体检妇女(P<0.001)。miR-1246的高表达与宫颈鳞癌患者的FIGO分期、肿瘤大小、淋巴结转移、脉管浸润密切相关(均P<0.05)。宫颈鳞癌患者血清中miR-1246的表达水平,从术后1周(0.60±0.46)到术后1月(0.42±0.28)逐渐下降(P<0.001),并于术后1月恢复到健康妇女水平;8例宫颈鳞癌术后复发患者,血清中miR-1246的表达水平较健康体检妇女明显升高(P<0.05)。结论血清miR-1246有助于宫颈鳞癌早期诊断和术后恢复监测,并可作为宫颈鳞癌术后复发的辅助判断指标。

miR-1246对人宫颈癌上皮-间质转化及其增殖、侵袭和迁移能力影响的初步研究

目的探讨miR-1246水平变化对人宫颈癌SiHa细胞上皮-间质转化(EMT)及其增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法体外向SiHa细胞分别转染miR-1246模拟物(miR-1246-mimics组)及阴性对照(mimics-NC组)、miR-1246抑制物(miR-1246-inhibitor组)及阴性对照(Inhibitor-NC组),以未作处理的SiHa细胞为空白对照组。通过流式细胞术和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转染效率。采用Western blotting检测转染后细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)及Twist-2蛋白的表达水平。通过CCK-8法、流式细胞术、Transwell小室实验和划痕实验检测转染后SiHa细胞的增殖、凋亡、侵袭和迁移能力。结果流式细胞术结果显示,各组细胞转染效率均在90%以上。qRT-PCR结果显示,与空白对照组和阴性对照组比较,miR-1246-mimics组miR-1246的相对表达量显著增高,而miR-1246-inhibitor组明显降低(P<0.05)。Western blotting结果显示,与阴性对照组比较,miR-1246-mimics组E-cadherin蛋白表达水平降低而N-cadherin、Vimentin和Twist-2蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而miR-1246-inhibitor组E-cadherin蛋白表达水平增加而N-cadherin、Vimentin和Twist-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与阴性对照组比较,miR-1246-mimics组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著提高(P<0.05),而细胞凋亡率显著降低(P<0.05);与阴性对照组比较,miR-1246-inhibitor组细胞增殖、侵袭和迁移能力均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率显著提高(P<0.05)。结论过表达miR-1246可能通过EMT促进宫颈癌SiHa细胞的增殖、侵袭及迁移并诱导细胞凋亡。

miR-1246增强宫颈癌细胞辐射敏感性的分子机制研究

目的:探讨微小RNA-1246(miR-1246)过表达增强宫颈癌细胞放疗敏感性的分子机制。方法:运用脂质体2000将miR-1246模拟物(miR-1246 mimic)转染4种宫颈癌细胞系He La、Ca Ski、C33A和Si Ha,以阴性对照模拟物(NC-mimic)为阴性对照。Real-time PCR检测宫颈癌组织、正常组织、子宫内膜上皮细胞系ESC和4株宫颈癌细胞中miR-1246的表达水平;转染的细胞经电离辐射照射后运用MTT法和Transwell法分别测定细胞活力和细胞迁移能力;运用免疫荧光法检测γH2AX表达水平;Western blot检测细胞中γH2AX、ATM、p-ATM和p-p53的蛋白水平。结果:miR-1246在正常组织和ESC细胞中高表达,而在4株宫颈癌细胞和宫颈癌组织中低表达;转染miR-1246 mimic后miR-1246表达水平显著高于NC-mimic组细胞(P <0. 05)。相同条件下,辐照后miR-1246过表达组宫颈癌细胞活力显著低于NC-mimic组,细胞迁移率明显降低(P <0. 05)。免疫荧光结果显示,miR-1246过表达显著增强电离辐射诱导的γH2AX激活(P <0. 05);Western blot结果显示,与NC-mimic组比较,miR-1246过表达显著促进电离辐射诱导γH2AX蛋白的表达,减低p-ATM和p-p53的蛋白水平(P <0. 05)。结论:miR-1246在正常组织和子宫内膜上皮细胞中高表达,而在宫颈癌组织和宫颈癌细胞系中低表达;miR-1246过表达抑制宫颈癌细胞活力和迁移能力,并可能通过阻断ATM通路、抑制DNA损伤修复而增强宫颈癌细胞的辐射敏感性。

miR-1246和NFIB在肝癌组织中的表达及其与肝癌预后的关系

目的:探讨微小核糖核酸-1246(miR-1246)和核因子I/B(NFIB)在肝癌组织中的表达水平,分析二者与预后的关系。方法:纳入我院2017年3月至2019年3月收治的肝癌患者160例,均获得癌组织及癌旁组织,检测癌组织、癌旁组织中miR-1246和NFIB的表达情况,分析二者与临床病理特征的关系。根据患者24个月的累积生存情况分成生存组、死亡组,比较两组癌组织中miR-1246、NFIB表达情况,经Cox多元回归模型分析预后的危险因素。结果:肝癌组织中miR-1246表达量高于癌旁组织,NFIB高表达率高于癌旁组织(P<0.05)。miR-1246、NFIB高表达组临床分期Ⅲ期、肿瘤直径≥5 cm、多发性肿瘤比例高于低表达组,且NFIB高表达组ALT>40 U·L^(-1)比例高于低表达组(P<0.05)。生存组miR-1246、NFIB高表达率低于死亡组(P<0.05)。Cox多元回归分析显示临床分期Ⅲ期、肿瘤直径≥5 cm、多发性肿瘤以及miR-1246、NFIB高表达是预后的危险因素(P<0.05)。结论:肝癌组织中miR-1246表达量以及NFIB高表达率较癌旁组织增高,二者对患者预后影响较大,有望成为评估预后的指标。

血清miR-1246、HE4、YKL-40对浆液性卵巢癌级别的诊断价值及与预后的关系

目的探讨血清miR-1246、人附睾蛋白4(HE4)、甲壳质酶蛋白-40(YKL-40)对浆液性卵巢癌级别的诊断价值及与预后的关系。方法将安徽省庐江县人民医院2019年1月至2020年7月收治的浆液性卵巢癌患者87例纳入研究。根据病理检查确定的浆液性卵巢癌级别,将纳入研究的患者分为低级别组(30例)与高级别组(57例),比较两组血清miR-1246、HE4、YKL-40水平,分析各血清指标与浆液性卵巢癌级别的关系及诊断价值。对纳入研究的患者进行2年随访,统计2年生存率,对比不同血清miR-1246、HE4、YKL-40水平患者2年生存率。结果高级别组血清miR-1246、HE4、YKL-40水平高于低级别组(P<0.05)。Spearman相关分析显示,血清miR-1246、HE4、YKL-40与浆液性卵巢癌级别呈正相关(r=0.625、0.714、0.703,P<0.001)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清miR-1246、HE4、YKL-40联合诊断浆液性卵巢癌级别的曲线下面积(AUC)为0.938(95%CI:0.865~0.979),约登指数为0.775,灵敏度为84.21%,特异度为93.33%,优于三者单独诊断。2年随访过程中,有4例患者失访,剩余的83例浆液性卵巢癌患者2年生存率为67.46%(56/83)。以通过绘制ROC曲线获取的最佳截断值作为患者各指标高、低水平的判断标准,血清miR-1246、HE4、YKL-40高水平患者2年生存率分别低于各指标低水平患者(P<0.05)。结论血清miR-1246、HE4、YKL-40与浆液性卵巢癌级别呈正相关,3项指标联合诊断的价值最高,且与生存预后联系紧密,可为临床诊治提供参考。

血清miR-1246、CXCL12和CXCR4水平预测非小细胞肺癌患者术后预后的效能

目的观察血清miR-1246、趋化因子基质细胞衍生因子-1(CXCL12)和CXC趋化因子受体4(CXCR4)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者术后预后中的预测价值。方法选择2019年1月至2020年6月在该院手术治疗的98例NSCLC患者为NSCLC组。选择同期该院肺部良性疾病患者75例和健康体检者75例分别纳入肺良性疾病对照组和健康对照组。比较3组血清miR-1246、CXCL12和CXCR4水平,比较不同特征及不同预后NSCLC患者血清miR-1246、CXCL12和CXCR4水平,分析3项指标预测NSCLC术后两年内发生预后不良的效能。结果NSCLC组术前血清miR-1246水平明显低于肺良性疾病对照组和健康对照组,肺良性疾病对照组也明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组中,术后miR-1246水平较术前明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组术前血清CXCL12和CXCR4水平较肺良性疾病对照组和健康对照组明显升高,肺良性疾病对照组明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组中,术后血清CXCL12和CXCR4水平较术前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化、Ⅲ+Ⅳ期和有淋巴结转移的NSCLC患者血清miR-1246水平明显低于高中分化、Ⅰ+Ⅱ期和无淋巴结转移的NSCLC患者,差异有统计学意义(P<0.05);而低分化、Ⅲ+Ⅳ期和有淋巴结转移的NSCLC患者血清CXCL12和CXCR4水平明显高于高中分化、Ⅰ+Ⅱ期和无淋巴结转移的NSCLC患者,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良者血清miR-1246水平明显低于预后良好者,而预后不良者血清CXCL12和CXCR4水平明显高于预后良好者,差异有统计学意义(P<0.05)。3项指标联合检测的灵敏度为82.1%,特异度为84.7%,曲线下面积为0.910,其AUC明显高于miR-1246(Z=3.131,P=0.002)、CXCL12(Z=2.998,P=0.003)和CXCR4(Z=3.022,P=0.003)单独检测。结论miR-1246、CXCL12和CXCR4参与了NSCLC的发生、发展过程,联合检测miR-1246、CXCL12和CXCR4预测NSCLC术后两年内发生预后不良具有较高的效能。

M2巨噬细胞来源的外泌体miR-1246调控胃癌细胞的生长和侵袭

目的探讨M2巨噬细胞来源的外泌体miR-1246对胃癌AGS细胞增殖,凋亡和侵袭的影响。方法采用IL-4和IL-13诱导M2巨噬细胞后,分离其外泌体,并通过透射电镜和免疫印迹法进行鉴定。M2巨噬细胞分别转染NC inhibitor和miR-1246 inhibitor后,分离对应外泌体与AGS细胞共培养,并采用CCK-8,Annexin V-FITC/PI和Transwell分别检测AGS细胞增殖,凋亡和侵袭。TargetScan数据库预测miR-1246下游靶标,并通过双荧光素酶报告基因实验对miR-1246和GSK3B的靶向关系进行验证。结果M2巨噬细胞中分离的外泌体大小为50~150 nm,且表达ALIX,CD63和TSG101。M2巨噬细胞来源外泌体增加AGS细胞活力(P<0.05)和侵袭细胞数(P<0.01),并降低其凋亡比例(P<0.01)。敲低外泌体中miR-1246的表达,AGS细胞的表型变化得到回复(P<0.01)。外泌体miR-1246靶向GSK3B,并调控β-catenin和c-Myc的表达,M2巨噬细胞来源外泌体miR-1246靶向GSK3B促进胃癌细胞增殖和侵袭、并抑制其凋亡(P<0.001)。结论M2巨噬细胞来源外泌体miR-1246靶向GSK3B介导Wnt通路激活促进胃癌细胞增殖和侵袭,并抑制其凋亡。

姜黄素调控MicroRNA-1246及对膀胱癌T24细胞的放疗增敏机制探究

目的:研究在膀胱癌化疗中使用姜黄素的增敏功能原理。方法:在T24细胞经过姜黄素及放射处理后,探讨分析其细胞活力(细胞增殖试验试剂盒)、microRNA表达(miRNA芯片测序)、集落形成、凋亡(AnnexinV-F)分析、miR-1246及p53 mRNA及蛋白质(Westernblot)表达、ITC/7-AAD流式细胞计数(ITC/7-AAD)。结果:通过测试,发现17个异常microRNA表达,细胞在经过姜黄素处理后,T24细胞活力相较于常规组明显下降,并出现浓度依赖性的现象。在T24细胞中,miR-1246相较于人膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1细胞)表达明显较高。姜黄素的浓度较高时,T24细胞miR-1246的表达会受其影响并明显下降。研究组使用浓度为20μg/mL的姜黄素,并结合放疗处理的方式,与常规组相比,研究组在控制miR-1246的表达、集落形成及细胞活力方面,效果更为显著,T24细胞比例会因转染antagomiR-1246而增加,细胞死亡现象一般发生于转染antagomiR-NC细胞时期。结论:膀胱癌细胞中,姜黄素和放射治疗都可促进microRNA-1246表达下调,在对肿瘤的治疗中可以使姜黄素及放疗结合,共同产生抗肿瘤作用。

血清肿瘤标志物联合microRNA-1246检测对局部晚期非小细胞肺癌同步放化疗敏感性的评估价值

目的探究血清肿瘤标志物联合微RNA1246(miR-1246)检测对局部晚期非小细胞肺癌(NSCLC)同步放化疗(CCRT)敏感性的评估价值。方法收集2019年3月至2022年3月如皋市人民医院收治的110例NSCLC患者基本资料,所有患者均进行CCRT,根据治疗结束1个月后的疗效将患者分为敏感组47例(疾病完全或部分缓解)及不敏感组63例(疾病稳定或进展)。收集2组患者入院时的临床资料,比较2组患者入院时和治疗后血清肿瘤标志物及miR-1246表达水平,采用Logistic回归分析影响NSCLC患者CCRT敏感性的因素,并根据受试者操作特征(ROC)曲线分析血清肿瘤标志物联合miR-1246检测对NSCLC患者CCRT敏感性的预测价值。结果治疗结束1个月后,110例NSCLC患者中,47例患者疗效为完全或部分缓解(敏感组),63例患者疗效为疾病稳定或进展(不敏感组);不敏感组血清神经元烯醇化酶(NSE)、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)及miR-1246水平均高于敏感组(P<0.05);Logistic回归分析显示,NSE、CEA、CA125及miR-1246是CCRT敏感性的独立危险因素(P<0.05);ROC曲线分析显示,NSE、CEA、CA125及miR-1246评估CCRT敏感性的曲线下面积(AUC)分别为0.790,0.816,0.800及0.795,95%CI为分别0.702~0.862,0.731~0.884,0.713~0.870及0.711~0.869,四者联合评估的AUC为0.923,95%CI为0.857~0.965。结论血清肿瘤标志物及miR-1246水平对评估NSCLC患者CCRT敏感性均有一定的参考价值,联合评估的价值更高。