肝癌患者外周循环囊泡中microRNA分子群的临床诊断意义

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上常见的恶性肿瘤之一,因起病隐匿,既往的筛检手段有限,其早期诊断非常困难。细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是由细胞释放到体液中的膜源性小泡。有研究证实在肝癌发生早期即有肿瘤来源囊泡装配释放入血,且能被捕捉到,这为肝癌的早期诊断提供了思路。该文分析总结了关于肝癌患者外周循环囊泡中microRNA分子群来源、分离方法和临床诊断意义等的相关文献,以期为外周循环囊泡中microRNA分子群在肝癌临床早期诊断中的应用提供参考。

5种microRNA分子在白血病细胞系中的差异表达

目的探讨miR-106a、miR-376c、miR-377、miR-92a和miR-130在5种白血病细胞系中的表达水平及其临床意义。方法分别提取5种白血病细胞系small RNA,利用miRNA特异性的茎环引物进行反转录,合成c DNA,利用Real-Time PCR检测各白血病细胞系miRNA分子的表达情况。结果与对照组比较,5种miRNAs在NAML^(-1)细胞系中表达均上调(P<0.05);在KOCL-33细胞系、KOCL-44细胞系、KOPB-26细胞系和KOCL-50细胞系中,miR-106a表达均上调,miR-92a表达均下调(P均<0.05);miR-376c在KOCL-33、KOCL-44细胞系中表达上调,在其余2种细胞系中表达下调(P<0.05);miR-377在3种细胞系中表达均上调(P<0.05),在KOCL-33细胞系中表达差异无统计学意义(P>0.05);miR-130在KOCL-33、KOCL-44和KOCL-50细胞系中表达均下调(P均<0.05)。结论 miR-106a、miR-376c、miR-377、miR-92a和miR-130在KOCL-33、KOCL-44、KOPB-26、KOCL-50及NAML^(-1) 5种白血病细胞系中表达量均有变化,表明这些miRNAs在此类白血病发生、发展过程中可能发挥一定作用。

调控CD147基因表达的MicroRNA分子鉴定及其抗膀胱癌转移研究

目的 探讨调控CD147基因表达的Micro RNA对膀胱癌的增殖、迁移和浸润的关联性。方法 选取自2015年1月~2016年5月在我院接受治疗的膀胱癌患者50例,分别取膀胱癌组织以及癌旁组织采用免疫组化进行CD147阳性检测,构建CD147 si RNA重组腺病毒（Ad-CD147 si RNA）载体转染膀胱癌细胞,将CD147阳性表达的膀胱癌组织随机分为Ad-CD147 si RNA转染的干扰组,腺病毒颗粒转染的阴性对照以及未加处理的对照组,采用MTT检测肿瘤细胞增殖能力、采用划痕实验检测肿瘤细胞迁移能力、采用明胶酶谱实验检测MMP-2和MMP-9含量、采用Transwell小室法检测肿瘤细胞浸润能力。结果 CD147在膀胱癌组中阳性率90.00%（45/50）显著高于癌旁组织12.00%（6/50）,差异有统计学意义（P〈0.05）。不同性别和不同年龄间CD147阳性表达比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;而不同的TNM分期及肿瘤细胞分化程度与CD147阳性表达比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。空白组及对照组的膀胱癌细胞迁移距离、侵入基底胶数量、MMP-2以及MMP-9含量明显高于干扰组,体外膀胱癌细胞在490 nm处吸收值显著低于干扰组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 CD147基因所表达的Micro RNA能够通过促进MMP-2和MMP-9的分泌而加速膀胱癌组织的血供形成,加速增殖、迁移以及浸润。

上皮-间质转化及相关microRNA分子与肿瘤的恶性行为的研究进展

上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是上皮细胞表型向间质细胞表型转变的过程,是一种重要的病理生理现象,与肿瘤侵袭、转移及耐药等恶性行为密切相关;microRNA作为一种与基因转录调控有关的重要小分子RNA,在EMT过程中有着举足轻重的作用。本研究就EMT现象及相关microRNA分子与肿瘤恶性行为的研究进展作一综述。

血瘀证的microRNA分子机制及中药干预作用

microRNA是一类长约22个核苷酸的小分子非编码RNA,对基因表达具有转录后调控作用,因可同时调控多个靶基因,microRNA显示出广泛的生理作用,是多种疾病病理生理过程中的关键分子,也是药物治疗的新靶点。血瘀证主要特征表现为血液黏滞度增加、血小板黏附/聚集增强和微循环障碍,通常导致血管内皮功能不同程度受损。单个microRNA可调控多个靶基因表达,因而显示出多效性,呈现网络式调控作用,可能是现代中医药创新发展的突破点之一。目前研究显示,microRNA既是血瘀证诊断的重要客观参考,又是活血化瘀中药临床取效的重要作用靶点。应用现代医学新技术,研究microRNA在血瘀证患者辨病辨证中的临床应用可行性,从转录后水平寻找中医辨证诊断客观依据,探索microRNA与中医证型相关内在机制,可以提高临床辨证准确性,为治疗和改善预后提供更多干预目标,并为中医药理论发展提供更多支持。

影响骨骼肌生长发育的microRNA分子的系统鉴定

MicroRNAs是一类具有调控作用的非编码小RNA分子，并且已有大量实验证据表明一些microRNAs分子在成肌细胞的增殖和分化过程中发挥重要的调控作用。我们利用蛋鸡和肉鸡的骨骼肌作为研究模型，通过高通量测序的方法得到小RNA的转录组数据。根据小RNA的转录组数据，系统鉴定影响骨骼肌生长发育的microRNA分子。随后通过结合microRNA靶基因预测的结果，研究这些microRNA分子在肌肉发生过程中的作用，从而对一些人类的肌肉退行性疾病提供重要的参考价值。

microRNA分子miR-151与肝癌转移

据2010年3月21日在线《自然-细胞生物学》报道,上海交通大学肿瘤研究所癌基因及相关基因国家重点实验室研究人员获得了microRNA与肝癌转移的最新研究成果。

癌症干细胞的靶点MicroRNA分子-let-7

过去的几年间，干细胞研究已成为了癌症研究中最热门的研究领域之一。然而，在干细胞中，研究较多的并非胚胎干细胞，而是癌症干细胞（cancer stem cell；tumor stem cell；也有译作肿瘤干细胞）。这些突变的细胞，可以无限期地生长，同时还可引发新的肿瘤。癌症干细胞被认为是导致许多（如果不是全部的话）癌症发生的真正诱因。更为可怕的是，化疗或者其他现有的治疗手段在这些持续生长的细胞身上几乎毫无功效。它们的存在也解释了为何肿瘤在治疗后会复发或是转移。因此，越来越多的研究者将快速有效治疗癌症的希望寄托在如何彻底消灭这些干细胞上。然而，事情远远没有想象中的那么简单，因为这些癌症干细胞在肿瘤，即便是大肿瘤中，也是微乎其微，对于它们的研究也因此遇到了巨大障碍。 现在，研究者们开发出了一种在小鼠身上大量增殖人类乳腺癌干细胞的方法，并且还发现了一个调控癌症干细胞的遗传开关（genetic switch）。这个调控因子属于一个称作微小RNAs（microRNAs）的分子家族，它可以通过关闭一些特异性的基因，促使干细胞朝分化的方向发育。

microRNA-933对LX-2细胞凋亡和增殖的影响及其分子机制

目的 探讨microRNA-933(miRNA-933)对人肝星状细胞系LX-2细胞凋亡和增殖的调控作用及其机制。方法 首先以人肝组织为研究对象,利用基因芯片技术,检测肝硬化与慢性乙型肝炎肝组织相较于正常肝组织中差异表达的基因,并从中筛选差异表达显著的miRNA,从而确定研究对象为miRNA-933。进而以人肝星状细胞系LX-2为研究对象,利用mi RNA-933分子模拟剂(mi RNA-933 mimic)与抑制剂(mi RNA-933 siRNA),构建LX-2过表达与敲减模型,并以转染mimic-NC(过表达)或si RNA-NC(敲减)的细胞作为阴性对照。使用实时荧光定量PCR(q PCR)和Western Blot技术,检测mi RNA-933与活化标志蛋白的表达水平;随后采用细胞增殖实验、流式细胞术等技术,检测mi RNA-933对细胞凋亡、增殖和活化的影响,并探讨其机制。计量资料两组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,并经过Bonferroni校正。结果 基于基因芯片检测结果,最终筛选出18个显著差异表达的mi RNA,其中mi RNA-933表达显著下调(P<0.05)。mi RNA-933 mimic与siRNA转染LX-2细胞后,结果显示,与阴性对照组相比,miRNA-933 siRNA显著下调miRNA-933的表达(P=0.000 7),而mi RNA-933 mimic显著上调mi RNA-933的表达(P=0.000 3);Western Blot和q PCR检测结果表明,mi RNA-933 siRNA显著上调胶原蛋白Ⅰ(CollagenⅠ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达(P值均<0.001),而mi RNA-933 mimic显著抑制CollagenⅠ和α-SMA的表达(P值均<0.05)。流式细胞术检测结果显示,与阴性对照组相比,miRNA-933 siRNA显著下调LX-2细胞凋亡率(P=0.031 9),miRNA-933 mimic显著上调LX-2细胞凋亡率(P=0.005 5);Western Blot检测结果表明,与阴性对照组相比,miRNA-933 siRNA可以抑制LX-2细胞中胱天蛋白酶3(Caspase-3)和多聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)的表达(P值分别为0.006 7、0.003 0),上调B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达(P=0.002 0),而miRNA-933 mimic可显著上调Caspase-3(P=0.011 8)和PARP-1(P=0.049 5)的表达,下调Bcl-2的表达(P=0.002 1)。细胞增殖实验结果显示,与阴性对照组相比,miRNA-933siRNA可促进LX-2细胞增殖(P=0.011 5);相反miRNA-933 mimic可抑制LX-2细胞增殖(P=0.001 2)。Western Blot和qPCR检测显示,mi RNA-933 siRNA显著抑制Kruppel样因子6(KLF6)的表达,进而下调活化转录因子4(ATF4)、活化转录因子3(ATF3)、C/EBP同源蛋白(CHOP)蛋白的表达,而miRNA-933 mimic会促进以上蛋白的表达(P值均<0.05)。结论 miRNA-933可能通过促进LX-2细胞中KLF6/ATF4/ATF3/CHOP/Bcl-2信号轴的激活,进而促进细胞凋亡,抑制细胞的活化和增殖。

基于核酸酶辅助信号放大的2’-O-甲基修饰分子信标用于高灵敏和特异性外泌体肿瘤microRNA分析

外泌体是新兴的重要癌症生物标志物。有效检测外泌体和外泌体内容物,特别是microRNA (miRNA),对于癌症的诊断和治疗是迫切且具有挑战性的。基于双链特异性核酸酶(Duplex specific nuclease, DSN)的特异性识别和消化能力,我们设计了一个2’-O-甲基修饰的分子信标(2’-O-methyl-modified molecular beacon, omMB),并开发了一个高灵敏度和特异性分析外泌体miRNA的信号放大检测平台。该方法以A375细胞分泌的外泌体为模型,以microRNA-21 (miR-21)为模型miRNA分子,可以检测到低至37.9 pM的miRNA和2 μg/mL的裂解外泌体。同时,与许多已开发的DSN辅助信号放大方法相比,新方法具有较高的特异性,可以区分错配miRNA。总之,这项工作为医学分析、临床应用和疾病诊断中的外泌体检测提供了一种有效的分析策略。

microRNA介导雨生红球藻在高光胁迫下次级细胞壁形成和虾青素积累的分子机制

雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)是天然虾青素的最佳来源,它可以在高光胁迫等不利条件下转变成厚壁细胞并积累大量虾青素。然而,目前从微小RNA(microRNA,miRNA)层面来揭示在高光胁迫下雨生红球藻次级细胞壁形成和虾青素合成的机理研究尚未见报道。对高光处理下三个时间点的雨生红球藻样品进行microRNA测序,共鉴定出342个已知miRNA和283个新miRNA。在这625个miRNA中,其中有206个miRNA的表达量受高光影响,这些差异表达的miRNA的靶基因参与了淀粉与蔗糖代谢、甘露糖与果糖代谢、糖酵解和萜类骨架生物合成等重要代谢通路。结合转录组结果发现,高光胁迫下有6个miRNA调控了3个和次级细胞壁形成相关靶基因的表达,有5个miRNA调控了5个和虾青素生物合成相关靶基因的表达。以上结果揭示了雨生红球藻在高光下miRNA调控次级细胞壁形成和虾青素生物合成的潜在机制,为雨生红球藻虾青素的代谢工程奠定了理论基础。

用于多通道单分子定位的高精度图像配准方法

单分子定位技术可以绕过光学系统的衍射限制,在生物样品的单粒子追踪和超分辨显微成像中得到了广泛应用.多通道单分子定位采用多个成像通道,可以实现对不同目标的同时追踪或多色超分辨成像,也可以提升单粒子追踪的轴向深度或实现更高的定位精度和密度.但各通道图像间的差异会影响协同定位或定量分析,因此图像配准是其图像数据预处理的关键环节;且由于单分子定位精度高,其对多通道图像配准精度的要求也很高.现有技术一般采用基于控制点的配准方法,且多采用复杂而精密的方式来获取基准物网格图像用于定位得到控制点对,以实现高精度图像配准,对样品或实验设备要求高,难以直接推广.为此,本文基于局部非线性变换和误匹配点剔除,发展了一种可以直接采用随机分布荧光珠样品作为基准物的高精度图像配准方法,通过在特征匹配和变换模型参数估计的过程中对控制点进行监测和迭代筛选,以剔除因单分子定位不准确或精度差而导致未精确匹配的控制点对,从而消除以随机分布荧光珠样品作为基准物时对于控制点准确获取和精确匹配所带来的不良影响,同时采用基于局部加权平均的二阶多项式拟合进行变换模型参数估计,以更好地适用于不同通道间存在局部非线性形变的情形.结果表明,采用该方法只需要3次迭代,就可以将未准确定位和精确匹配的控制点对找到并剔除,从而实现更准确的变换模型参数估计,将配准精度提高一个数量级,在图像局部非线性形变情况严重的正交像散双通道单分子定位成像系统中实现了约6 nm的配准精度.

血清microRNA-155、microRNA-21、趋化素、瘦素与糖尿病肥胖患者胰岛素抵抗的相关性

目的 探讨糖尿病肥胖患者血清microRNA-155(miR-155)、microRNA-21(miR-21)、趋化素、瘦素水平与胰岛素抵抗(IR)的相关性。方法 选取2022年1月—2023年4月山东中医药大学第二附属医院收治的138例2型糖尿病(T2DM)患者为研究对象,其中肥胖患者73例(肥胖组),非肥胖患者65例(非肥胖组)。肥胖组中有IR 45例(IR组),无IR 28例(非IR组)。收集患者一般资料,包括性别、体质量指数(BMI)、年龄、颈围(NC)、腰围(WC)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、空腹胰岛素(FINS)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、miR-155、miR-21、趋化素、瘦素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平;通过多因素逐步Logistic回归模型分析T2DM肥胖患者发生IR的危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的效能;Pearson法分析miR-155、miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR的相关性。结果 肥胖组miR-155相对表达量低于非肥胖组(P <0.05),miR-21、趋化素、瘦素、HOMA-IR高于非肥胖组(P <0.05)。IR组miR-155相对表达量低于非IR组(P <0.05),NC、WC、miR-21、趋化素、瘦素水平高于非IR组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:NC [O^R=1.416(95%CI:1.038,1.932)]、WC [O^R=1.227(95%CI:1.049,1.435)]、miR-155 [O^R=1.763(95%CI:1.205,2.579)]、miR-21[O^R=1.932(95%CI:1.356,2.753)]、趋化素[O^R=2.074(95%CI:1.492,2.883)]、瘦素[O^R=1.628(95%CI:1.246,2.127)]是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素(P <0.05)。ROC曲线分析结果显示,miR-155、miR-21、趋化素、瘦素诊断T2DM肥胖患者IR的曲线下面积分别为0.865、0.909、0.874和0.871;敏感性为77.8%(95%CI:0.614,0.825)、86.7%(95%CI:0.792,0.917)、95.6%(95%CI:0.713,0.965)和80.0%(95%CI:0.692,0.917);特异性为85.7%(95%CI:0.647,0.903)、82.1%(95%CI:0.732,0.914)、75.0%(95%CI:0.675,0.928)和89.3%(95%CI:0.656,0.944)。miR-155与HOMA-IR呈负相关(r=-0.573,P=0.000),miR-21、趋化素、瘦素与HOMA-IR均呈正相关(r=0.531、0.558和0.568,均P=0.000)。结论 T2DM肥胖患者中IR较多,且miR-155、miR-21、趋化素、瘦素是T2DM肥胖患者发生IR的危险因素。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。

橄榄仁抗氧化肽的分离鉴定及分子对接

该研究利用酶解法结合凝胶色谱柱从橄榄仁中分离纯化得到6个抗氧化肽,采用分子对接模拟6种抗氧化肽与超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)的结合机制。采用酶解法从橄榄仁中提取抗氧化活性肽,以水解度、DPPH自由基清除率为指标,从6种商用酶中筛选出最适蛋白酶为木瓜蛋白酶,以底物浓度、酶底比、酶解时间、温度进行单因素试验,选取影响酶解反应的3个因素(酶底比>温度>时间)进行响应面法优化得出最佳工艺条件为底物质量浓度50 g/L、酶底比为3.3%(质量分数)、温度20℃、时间88 min。对最优条件下的粗肽液进行SephadexG-25和SephadexG-15分离纯化得到6个具有良好活性的抗氧化肽,分别为WLSF、TSVLR、LVYLVR、AGGKPFQ、YYPFKGFA、AFNVDERLAR。TSVLR显示出最高的DPPH自由基清除活性81.07%和羟自由基清除能力42.48%。分子对接研究表明,纯化的肽通过疏水效应和氢键与抗氧化相关的关键蛋白SOD有效结合。结果表明,橄榄仁可作为天然食物来源制取功能性食品的一个新的探究方向。

小麦条锈病抗性基因定位及分子标记技术研究进展

条锈病流行对小麦生产造成巨大损失,选育和种植持久抗性品种是防治小麦条锈病最经济有效的策略。为达到多基因聚合培育持久抗病品种的目标,必须不断发掘抗病种质、解析其抗病遗传机制并开发分子标记。基于文献,对条锈病抗性基因发掘涉及的抗病性、分子标记、基因定位方法和定位进展及其在育种中的应用进行了综述,明确了小麦条锈病基因定位涉及技术的现状、局限性及优势,从而为后续的条锈病抗性基因发掘、多基因聚合和持久抗性小麦品种的选育与生产布局提供技术指导,以降低西北麦区和小麦主产区条锈病流行的频率,进一步促进国家粮食安全。

基于网络药理学和分子对接探讨党参防治免疫性血小板减少症的分子机制

目的:采用网络药理学、差异基因分析、分子对接方法初步阐明党参治疗免疫性血小板减少症(ITP)的分子机制。方法:在传统中药系统药理学数据库(TCMSP)、传统中药综合数据库(TCMID)和中医药百科全书数据库(ETCM)中检索党参的主要成分和相应的蛋白质靶标。在GeneCards、OMIM、DisGeNET数据库收集ITP的靶点,构建韦恩图获得复合靶标和疾病的交集靶点,并将靶标导入STRING数据库,使用Cytoscape3.9.1构建PPI网络。接着对交集靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,以探索ITP与党参的相关信号通路,最后对关键靶点和活性化合物进行分子对接研究。结果:共获得党参的84种潜在活性化合物、2354个疾病靶点与257个药物靶点,并得到86个交集靶点。通过蛋白互相作用网络图(PPI)分析确定了15个关键靶点,Degree值排名前5位的靶点包括血管内皮生长因子A(VEGFA)、Src原癌基因(SRC)、白细胞介素2(IL2)、过氧化物酶体增殖激活受体γ(PPARG)、表皮生长因子受体(EGFR)。GO和KEGG分析表明,党参治疗ITP主要涉及ERK1和ERK2级联的正向调控、信号转导、蛋白质磷酸化等生物学过程,信号通路主要包括PI3K/Akt、癌症通路、T细胞信号通路。分子对接结果表明,SRC、PPARG与11-hydroxyrankinidine具有较高的结合活性。肉豆蔻酸、乙基α-d果糖呋喃糖苷、黄豆黄素是重要的活性化合物并通过分子对接模拟进行验证。结论:本研究从多个角度阐明党参可能通过调节多个靶点和多条途径对ITP产生治疗作用,可为进一步深入研究党参对ITP的作用提供科学依据。

利伐沙班和低分子肝素在老年粗隆间骨折患者围手术期的应用效果分析

目的分析利伐沙班和低分子肝素在老年粗隆间骨折患者围手术期的应用效果。方法选取2020年6月至2021年10月于厦门大学附属中山医院就诊的老年粗隆间骨折围手术期患者130例为研究对象。按随机数字表法分为观察组和对照组,每组65例。对照组采用低分子肝素皮下注射预防血栓,观察组采用利伐沙班口服预防血栓。比较2组患者术前及术后2周的凝血指标,术后2周内下肢深静脉血栓形成(DVT)和肺栓塞的发生率,术中出血量、术后引流量及住院时间,术后1 d炎症相关指标。结果2组患者术前、术后2周组间和组内凝血相关指标差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后观察组下肢DVT发生率显著低于对照组[4.6%(3/65)比15.4%(10/65)],差异有统计学意义(χ^(2)=4.188,P=0.041)。观察组与对照组术中出血量、术后引流量及住院时间差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后1 d观察组降钙素原和C反应蛋白水平显著低于对照组[(0.17±0.02)μg/L比(0.22±0.01)μg/L、(20.2±2.3)mg/L比(23.9±3.6)mg/L],差异均有统计学意义(均P<0.001)。结论利伐沙班与低分子肝素在老年粗隆间骨折患者围手术期均有良好的抗凝效果及安全性,但利伐沙班预防术后下肢DVT发生的效果更显著且口服用药更方便。

基于CNA35靶向液态氟碳纳米粒的超声分子成像检测糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化的实验研究

目的制备一种由胶原结合蛋白35(CNA35)介导的靶向液态氟碳纳米粒(PFP-NPs),探讨其在超声分子成像检测糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化中的应用价值。方法制备经荧光标记的非靶向PFP-NPs和CNA35靶向PFP-NPs,经转化生长因子-β诱导人肾小管上皮HK-2细胞间质转化,发生胶原沉积,然后分别将非靶向PFP-NPs和CNA35靶向PFP-NPs与细胞共同孵育,于倒置荧光显微镜下观察细胞上PFP-NPs荧光信号。建立DN大鼠模型,分为非靶向组和靶向组,每组各10只,分别静脉注射非靶向PFP-NPs与CNA35靶向PFP-NPs,应用超声分子成像检测两组DN大鼠静脉注射PFP-NPs后10 min、30 min肾脏超声分子成像信号强度;然后处死DN大鼠并取肾脏组织,检测肾脏组织PFP-NPs荧光信号强度及Ⅰ型胶原荧光信号强度;免疫组织化学检测肾脏组织Ⅰ型胶原染色面积占比,分析肾脏超声分子成像信号强度与Ⅰ型胶原染色面积占比的相关性。结果CNA35靶向PFP-NPs孵育的人肾小管上皮HK-2细胞上的荧光信号强度高于非靶向PFP-NPs孵育的细胞(388.21±15.28 vs.25.79±3.62),差异有统计学意义(P<0.05)。靶向组DN大鼠肾脏组织PFP-NPs荧光信号强度高于非靶向组(946.02±83.55 vs.73.69±21.72),差异有统计学意义(P<0.05);靶向组Ⅰ型胶原荧光信号强度与非靶向组比较差异无统计学意义(969.07±96.67 vs.943.39±106.18),且CNA35靶向PFP-NPs荧光信号与Ⅰ型胶原荧光信号区域重合。体内超声分子成像显示,靶向组DN大鼠静脉注射PFPNPs后10 min、30 min肾脏组织超声分子成像信号强度均高于非靶向组(8.37±1.27 vs.1.92±0.25、9.73±1.25 vs.2.08±1.32),差异均有统计学意义(均P<0.05)。相关性分析显示,DN大鼠肾脏超声分子成像信号强度与Ⅰ型胶原染色面积占比呈正相关(r=0.838,P<0.001)。结论成功制备了CNA35靶向PFP-NPs,其能够靶向结合大鼠肾脏胶原高表达部位,实现了对DN大鼠肾脏纤维化的靶向超声分子成像。

大豆花叶病毒抗性基因及分子标记研究进展

大豆花叶病毒(SMV,soybean mosaic virus)病是世界大豆主产区广泛存在且普遍发生的主要病害之一,对大豆的产量和品质均可造成严重危害。本文综合分析了近年来通过遗传定位发现的大豆花叶病毒抗性基因及其紧密连锁的分子标记,探讨了分子标记在提高大豆抗病育种中的应用,总结了R_(SC3(w))、R_(SC14-r)和R_(SC18)等抗大豆花叶病毒基因的物理位置及其候选基因。基于候选基因测序、实时荧光定量PCR、病毒介导基因沉默(VIGS,virus induced gene silencing)和基因编辑CRISPR/Cas9等技术梳理出GsCAD1、GmCAL和GmMLRK1等一系列直接或间接参与大豆花叶病毒抗性的相关基因,为大豆抗大豆花叶病毒基因调控网络的完善奠定了基础。本综述总结分析了大豆与大豆花叶病毒的相互作用机制,聚焦分析大豆抗性基因Rsv3等对大豆花叶病毒抗病机制研究进展,并对抗大豆花叶病毒育种的研究方向提出了展望,以期为大豆抗性基因分子标记的应用和分子调控机制的研究提供参考。