肝癌患者外周循环囊泡中microRNA分子群的临床诊断意义

肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上常见的恶性肿瘤之一,因起病隐匿,既往的筛检手段有限,其早期诊断非常困难。细胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)是由细胞释放到体液中的膜源性小泡。有研究证实在肝癌发生早期即有肿瘤来源囊泡装配释放入血,且能被捕捉到,这为肝癌的早期诊断提供了思路。该文分析总结了关于肝癌患者外周循环囊泡中microRNA分子群来源、分离方法和临床诊断意义等的相关文献,以期为外周循环囊泡中microRNA分子群在肝癌临床早期诊断中的应用提供参考。

巨型艾美耳球虫Th1类细胞因子刺激性分子EmARM-β对鸡PBMC和T细胞亚群免疫功能的影响

[目的]本文旨在探讨巨型艾美耳球虫Th1类细胞因子刺激性分子Armadillo/β-catenin样重复序列蛋白(EmARM-β)对鸡免疫细胞功能的影响。[方法]利用密度梯度离心法和免疫磁珠分选法分别分离出鸡外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)、CD8^(+)T细胞和CD4^(+)CD25^(-)T细胞,之后将EmARM-β重组蛋白(rEmARM-β)分别与上述细胞进行体外共孵育6 h,利用CCK-8试剂和qPCR法分别检测并分析其对上述细胞增殖能力及相关细胞因子分泌水平的影响。[结果]经免疫磁珠分选后,流式细胞术检测鸡CD8^(+)T细胞和CD4^(+)CD25^(-)T细胞的纯度分别为93.01%和88.88%。与对照组相比,rEmARM-β显著促进鸡PBMC的增殖能力,显著上调Th1类细胞因子(ifn-γ和il-2)和促炎性细胞因子(il-1β、il-6和il-17a)mRNA水平;显著促进CD8^(+)T细胞的增殖能力,显著上调其ifn-γ、il-2和tnf-α mRNA水平,显著上调穿孔素、fasl(Fas配体)和fas mRNA水平;能显著促进CD4^(+)CD25^(-)T细胞的增殖能力,显著上调其ifn-γ和il-2 mRNA水平,下调il-4和il-10 mRNA水平。[结论]EmARM-β可以有效促进鸡PBMC和T细胞亚群(CD8^(+)T细胞和CD4^(+)CD25^(-)T细胞)的增殖能力,提升其Th1类细胞因子和促炎性细胞因子的分泌水平,提示EmARM-β具有研发鸡球虫病新型疫苗候选抗原的潜力。

低分子量酶解灵芝硒多糖对小鼠肠道菌群的影响

目的研究低分子量灵芝硒多糖对肠道菌群紊乱小鼠的改善调节作用。方法利用生物发酵法培养富集灵芝硒多糖,采用热水浸提法提取灵芝硒多糖,并进一步酶解为低分子量多糖,以水解率为响应值,在单因素基础上,用响应面法优化酶解工艺条件。随后使用超滤膜截取10 kDa以下多糖,以头孢克肟诱导建立肠道紊乱小鼠模型,灌胃低分子量灵芝硒多糖,并测定小鼠体重及肠道内容物短链脂肪酸含量,利用16S rRNA高通量测序分析小鼠肠道菌群变化。结果灵芝硒多糖的富硒量为(327±26)mg/g,多糖含量为(6.14±0.18)%,低分子量多糖的酶解最优工艺为温度50℃、pH 5.5、时间121 min,该条件下的水解率为62.8%。研究表明低分子量多糖对小鼠体重无影响,高通量测序结果显示低分子量灵芝硒多糖能有效改善肠道菌群失调症状,调节肠道菌群的物种组成,显著上调厚壁菌门(Firmicutes)丰度,降低拟杆菌门(Bacteroidetes)丰度,上调产酸菌乳杆菌属(Lactobacillus)、布劳特氏菌属(Blautia)、链球菌(Streptococcus)、样棒菌属(Allobaculum)、颤螺菌属(Oscillospira)等丰度,增加乙酸、丁酸含量,下调普雷沃氏菌(Prevotella)、拟杆菌属(Bacteroides)、梭菌属(Clostridium)、粪球菌属(Coprococcus)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)丰度,抑制丙酸分泌。结论低分子量灵芝硒多糖具有改善小鼠肠道菌群失调作用,可能是通过调整菌群组成来影响短链脂肪酸分泌达到保护肠道健康的目的。

MicroRNA调节免疫性血小板减少症CD4^(+)T细胞亚群免疫功能的研究进展

MicroRNA(miRNA)是一种小分子非编码单链RNA,可广泛参与多种生物学过程,对调节机体的免疫功能具有重要作用。免疫性血小板减少症(ITP)是一种自身免疫性疾病,其发生和进展与miRNA介导CD4^(+)T细胞亚群的异常免疫调节密切相关。ITP患者miRNA的不同表达情况可影响CD4^(+)T细胞亚群的免疫功能,导致Th1/Th2、Th17/Treg的调节失衡和TFH的过度分化,引起细胞因子分泌异常。本文就ITP中miRNA介导的CD4^(+)T细胞亚群免疫功能失衡机制进行总结,以期为探索ITP的免疫机制和免疫治疗提供启发。

SNP分子育种标记与肠道菌群互作研究进展

中国拥有丰富的地方猪种资源,地方猪种作为宝贵的遗传资源,是发展现代畜牧业和实现农业可持续发展的基本要素之一,是畜产品品质升级的重要保障。由于我国在1978年后开始大量引进国外猪种生产瘦肉型商品猪,导致我国很多优秀地方猪种处于品种保种数量少或濒临灭绝的状态。与引进猪种相比,我国地方猪种普遍具有产仔多、肉质好、耐粗饲等优点,且肉质具有肉色鲜红、系水力强、肌内脂肪含量高等特点,符合当前人们对于“高端肉”的要求。但许多地方猪的生长速度慢、育肥周期长等缺陷是其保种保育和推广工作中的难点问题。

基于单分子实时测序技术分析平坝窖酒小曲微生物菌群多样性

该研究利用单分子实时测序技术(SMRT)对平坝窖酒小曲中的微生物菌群多样性进行分析。结果表明,平坝窖酒小曲微生物的Chao1指数、Shannon指数、InvSimpson指数值分别为507、4.58、6.06,表明平坝窖酒小曲微生物的菌落组成及结构较为复杂。微生物菌群以霉菌为主,细菌次之,酵母菌相对丰度较低。在相对丰度排名前15的微生物中平坝窖酒小曲细菌类群相对丰度最高(属水平为38.73%,种水平为40.39%),远高于酵母菌和霉菌,其优势细菌为食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)、融合魏斯氏菌(Weissella confusa)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),优势霉菌为米根霉(Rhizopus oryzae)、小孢根霉(Rhizopus microsporus)和横梗霉(Lichtheimia ramosa),优势酵母菌为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和扣囊腹膜孢酵母(Saccharomycopsis fibuligera)。

低分子肝素和达比加群酯在非瓣膜性房颤患者抗凝治疗中的效果与安全性对比

目的:对比低分子肝素和达比加群酯在非瓣膜性房颤患者抗凝治疗中的效果与安全性。方法:选取2022年1—12月重庆市酉阳县人民医院收治的60例非瓣膜性房颤患者,入组后,采用单双号法对其进行分组,30例分到单号者纳入对照组,30例分到双号者纳入观察组,观察组患者予以低分子肝素行抗凝治疗,对照组患者予以达比加群酯行抗凝治疗。对比两组患者治疗前后的凝血酶时间(thrombin time,TT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、D-二聚体(D-dimer,D-D)、药物相关不良反应发生率、治疗期间的不良事件发生率及治疗总有效率。结果:治疗前,两组TT、APTT、D-D水平对比,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后,观察组TT、APTT长于对照组,D-D水平低于对照组,药物相关不良反应发生率低于对照组,治疗期间的不良事件发生率低于对照组,治疗总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:非瓣膜性房颤患者应用低分子肝素进行抗凝治疗的效果和安全性均高于达比加群酯。

低分子肝素联合黄体酮与叶酸对复发性流产患者T淋巴细胞亚群、性激素及妊娠结局的影响

目的 观察低分子肝素联合黄体酮与叶酸对复发性流产患者T淋巴细胞亚群、性激素及妊娠结局的影响。方法 回顾性选取2022年2月—2023年2月湖北科技学院附属浠水医院收治的复发性流产患者90例,根据治疗方案不同分为研究组和对照组,各45例。研究组应用低分子肝素联合黄体酮、叶酸治疗,对照组应用黄体酮、叶酸治疗,2组均治疗至孕12周或超过自然流产月份。比较2组临床疗效,治疗前后T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、血清性激素[人绒毛膜促性腺激素(HCG)、雌二醇(E_(2))、孕酮(P)]水平、妊娠结局及不良反应。结果 研究组总有效率为95.56%,高于对照组的80.00%(χ^(2)=5.075,P=0.024)。治疗后,2组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于治疗前,CD8^(+)低于治疗前,且研究组高/低于对照组(P均<0.01);2组血清HCG、E_(2)、P水平高于治疗前,且研究组高于对照组(P均<0.01)。研究组妊娠成功率高于对照组,早期流产率、胎儿生长发育受限率、早产率低于对照组(P<0.05或P<0.01);研究组与对照组不良反应总发生率比较差异无统计学意义(8.89%vs.22.22%,χ^(2)=3.045,P=0.081)。结论 低分子肝素联合黄体酮、叶酸治疗复发性流产,可调节患者T淋巴细胞亚群、性激素水平,改善妊娠结局,且安全性较高。

基于分子对接和步进序列群的蓖麻毒素核酸适配体序列优化

目的有效结合分子对接预测和表面等离子体共振实验评价技术,获得亲和力更强、序列最短的最优适配体。方法针对前期筛选出的靶向蓖麻毒素的3条80 nt单链DNA适配体(L14、P3、L7),在明确各自二维随机区茎环序列与靶蛋白结合能力的基础上,以H-DOCK分子对接为指导,分别确定蓖麻毒素适配体随机区的最短结合单元,从而构建两端延长步进序列群,以表面等离子体共振技术测定序列群序列的亲和力和动力学参数,明确适配体的结合关键结构,从而筛选得到最优适配体。结果3条全长适配体的随机区适配体L14r、P3r、L7r均可形成一定的茎环结构,其中L14r较L14的亲和力增强9倍、L7r增强2倍、P3r基本不变。对随机区适配体和蓖麻毒素进行分子对接,结果显示,L14r、P3r、L7r的对接分数值皆优于阴性序列40T,结合关键氨基酸个数分别为11、8、9个,存在距离小于5?的预测结合位点分别为20、12、15个,具有良好的与蓖麻毒素的结合能力。进一步明确了蓖麻毒素活性口袋所容纳的适配体最短结合单元L14rm、P3rm、L7rm的序列构成,在此基础上构建出两端延长步进序列群。针对该步进群,基于结合关键氨基酸个数、结合位点个数、对接得分等参数的变化和表面等离子体共振测定结果筛选出最优适配体。所获得的最优适配体L14rm、L7rm-2亲和力继续增强了1~2倍。结论随机区适配体能有效地与蓖麻毒素结合,较之全长适配体亲和力更强,分子对接结合步进序列群设计,仅使用17条序列,便有效获得了3条最优适配体并明确其结合作用。3条结合蓖麻毒素的最优适配体——L14rm、P3r、L7rm-2的KD值分别为(64±30)、(167±19)、(120±1)nmol/L,亲和力提高到全长适配体的14、1、4倍。

43个玉米自交系遗传多样性分析及其杂种优势群划分

利用SSR标记对43个玉米自交系进行遗传多样性分析,从100对SSR引物中筛选20对扩增带清晰且具有稳定多态性的引物。结果表明,20对引物在供试材料中共检测出71个等位基因变异,平均每对引物检测到等位基因数3.55个,变幅在2~5个之间;每个标记位点的多态性信息含量(PIC)变幅为0.335~0.796,平均多态性信息量为0.533;表明43个自交系具有较为丰富的遗传多样性。43个自交系之间的遗传相似系数变幅为0.441~0.938。UPGMA聚类分析结果表明,43个自交系被划分为四大类群,聚类结果与系谱分析基本一致。

发挥高职院校党外知识分子作用 助力高水平专业群建设——以商洛职业技术学院为例

高职院校党外知识分子肩负着培养社会主义高技能人才的重要职责及多重使命。文章分析了高职院校党外知识分子的现状及特点,总结了高职院校党外知识分子在新时代的责任和担当,从开展教学改革促进人才培养、开展教科研活动促进教师队伍发展、发挥专业特长开展社会服务等三方面探讨了高职院校开展高水平专业群建设过程中党外知识分子的助力作用。

2022—2023年我国部分地区猪A群轮状病毒分子流行病学调查分析

【目的】探究我国部分地区猪A群轮状病毒(RVA)的分子流行病学特征,明确当前的优势基因型,为RVA科学防控与疫苗研发提供理论依据。【方法】2022年1月—2023年3月收集江苏、江西、福建、山西和贵州5省36个规模化猪场送检的434份腹泻仔猪粪便样品,采用RT-PCR检测样品RVA阳性情况,对部分RVA阳性样品的VP7和VP4基因进行扩增及测序,与各型参考序列进行多序列比对,使用MegAlign进行核苷酸序列同源比对分析,并采用MEGA 7.0的邻接法构建系统发育进化树。【结果】RT-PCR检测结果显示,434份腹泻仔猪粪便样品中RVA阳性样品为196份,阳性检出率为45.16%。2022年与2023年初的阳性检出率分别为40.37%(132/327)和59.81%(64/107)。根据样品来源地区,RVA阳性检出率最高的是江苏(57.70%),其次是江西(55.71%),福建、贵州和山西的RVA阳性检出率分别是35.66%、30.00%和22.23%。共获得各地区12株RVA的VP4和VP7基因序列信息,遗传进化分析结果表明,G型中G9为优势基因型(占83.4%),G4和G5分别占8.3%;而P型中P7为优势基因型(占75.0%),其次为P13和P23,分别占16.7%和8.3%;12株RVA分属4种基因型组合,分别为G9P[7](占75.0%)、G5P[13](占8.3%)、G9P[13](占8.3%)和G4P[23](占8.3%)。【结论】我国部分省份猪场RVA阳性检出率持续升高,猪群中RVA基因型复杂多样,优势基因型组合为G9P[7]。因此,今后有必要对猪群中RVA的流行情况进行持续监测,结合基因型致病性制定预防措施并开发针对性疫苗。

基于肠道菌群-宿主相关信号通路探讨湿热证的分子生物学机制

湿热证是临床多种疾病的常见证型之一,目前研究表明,肠道菌群与湿热证的关系密切,但肠道菌群和湿热证相关的具体分子生物学机制尚未明晰。本文以肠道菌群影响的宿主相关信号通路为切入点,探讨湿热证的分子生物学机制,为湿热证的证候本质及临床诊治提供思路。

火针联合308nm准分子光治疗稳定期白癜风的疗效观察及对T淋巴细胞亚群的影响

目的:观察火针联合308 nm准分子光治疗稳定期白癜风的临床疗效及对T淋巴细胞亚群的影响。方法:将60例局限型稳定期白癜风患者随机分成2组,观察组予火针联合308 nm准分子光治疗;对照组予他克莫司软膏联合308 nm准分子光治疗,2组疗程均为12周。疗程结束后根据《黄褐斑和白癜风的诊疗标准》进行疗效判定。结果:治疗12周后观察组和对照组总有效率分别为96.67%、86.67%,显效率分别为76.67%、53.33%,差异有统计学意义(P<0.05);疗程结束后,观察组CD3^(+)、CD4^(+)水平及CD4^(+)/CD8^(+)比值均上升,CD8^(+)水平下降,与治疗前及对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:火针联合308 nm准分子光治疗稳定期白癜风起效时间短、疗效肯定,并可促进T细胞增殖与分化,对患者的免疫功能有一定的调节作用,值得临床推广。

308 nm准分子激光联合复方甘草酸苷片对白癜风患者T细胞亚群及血清ICAM-1、SOD的影响

目的:探讨308 nm准分子激光联合复方甘草酸苷片对白癜风患者T细胞亚群及血清细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响。方法:选取2021年1月至2022年3月在我院诊治的白癜风患者106例,采用随机数表法分为研究组和对照组两组,每组各53例。对照组患者给予308 nm准分子激光治疗,观察组患者在对照组的基础上给予复方甘草酸苷片治疗。比较两组患者治疗前后的T细胞亚群,血清ICAM-1、SOD,以及临床治疗疗效、不良反应发生情况。结果:治疗后两组患者CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)较治疗前均升高(P<0.05),且研究组高于对照组(P<0.05)。治疗后两组患者血清ICAM-1水平较治疗前均降低(P<0.05),血清SOD水平较治疗前均升高(P<0.05),且研究组患者血清ICAM-1水平低于对照组(P<0.05),血清SOD高于对照组(P<0.05)。研究组患者治疗总有效率92.45%高于对照组的75.47%(P<0.05)。研究组患者不良反应发生率13.21%高于对照组的9.43%,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:308 nm准分子激光联合复方甘草酸苷片治疗对白癜风,可有效增强机体免疫功能,降低血清ICAM-1,升高血清SOD,临床治疗疗效好,且安全性高。

低分子量硫酸软骨素体外酵解特征及其对肠道菌群的调节作用

硫酸软骨素(Chondroitin sulfate,CS)具有调节肠道微生物的作用,但不同分子量对其益生活性的影响鲜有报道。该研究比较了硫酸软骨素(80 ku)及其光催化降解产物(Low Molecular Weight Chondroitin Sulfate,LWCS,4 ku)体外酵解特征及其对肠道代谢物的影响。通过化学法、气相色谱质谱联用、高通量测序等方法测定了不同时间发酵液中pH值、CS和LWCS含量、还原糖含量、短链脂肪酸浓度以及肠道微生物的变化。结果显示,在发酵48 h内,CS、LWCS以及还原糖含量均显著降低(P<0.05),说明肠道微生物能够降解利用硫酸软骨素及其降解产物。且降解后的硫酸软骨素更显著地增加了拟杆菌门和副杆菌属等有益菌的丰度(P<0.05),更明显的抑制了潜在致病菌型埃希氏-志贺氏菌属(P<0.05)。此外,LWCS发酵能维持24 h的酸性环境,并产生更多的乙酸、丙酸和总短链脂肪酸(分别增加1.15、1.03和1.09倍)。以上结果表明,光催化降解后的硫酸软骨素具有更强的肠道益生作用,该研究为硫酸软骨素的开发应用提供了科学依据。

B群链球菌母婴垂直传播风险及分子流行病学研究

目的:研究B群链球菌(GBS)母婴垂直传播风险及分子流行病学特征,以更好地进行新生儿感染防控。方法:以2021年4月—2022年4月在上海市金山区亭林医院待产、分娩的产妇为研究对象,产妇均经产前GBS筛查,筛查阳性、阴性产妇按照1∶2的随机化比例纳入研究,最终共纳入300名产妇。收集产妇基本信息、妊娠史、疾病史、用药史等信息。统计新生儿GBS阳性率,采用logistic回归分析GBS垂直传播的独立相关因素,分析母婴GBS毒株的分子特征,采用Kappa检验分析母婴GBS分子特征的一致性。结果:300名产妇中,GBS母婴垂直传播率为14.29%。多因素logistic回归分析显示,经阴道分娩、会阴撕裂、胎膜不完整为母婴GBS垂直传播的独立危险因素。产妇检出的112个GBS毒株与新生儿检出的17个GBS毒株经Kappa一致性分析结果显示,母婴配对ST分型、血清分型、毒力基因和菌毛分型均有较高一致性,对应的Kappa值分别为0.826、0.810、0.893和0.902。结论:经阴道分娩、会阴撕裂、胎膜不完整为GBS母婴垂直传播的独立危险因素,GBS垂直传播过程中母婴配对GBS分子特征具有较高一致性,但也存在少量突变。

基于改进BP的分子泵故障诊断研究

分子泵为EAST装置提供洁净的真空环境,其运行状态影响EAST实验的顺利开展。由于在EAST实验运行过程中,分子泵设备可能会出现异物坠入或者真空泄漏故障,对装置造成次生危害。针对分子泵故障数据集不平衡导致故障诊断精度低以及模型过拟合问题,提出一种基于时域频域预处理与改进BP相结合的算法,实现分子泵故障诊断。通过在BP神经网络的基础上,引入粒子群算法(PSO)并结合五折交叉验证优化模型。首先在模拟分子泵故障的破坏性测试平台上,采集正常态、真空泄漏以及异物坠入故障振动信号,然后对数据进行时域频域特征提取融合,将得到的特征向量集作为优化算法的输入,对模型进行训练,实现分子泵故障诊断。经实验验证,所提出改进BP算法在诊断精确率上可以达到96.84%,优于支持向量机(SVM)、K近邻(KNN)和BP算法。

基于综合实验集群课程设计的高分子物理实验教学探究

高分子物理实验课程采用传统单项实验教学模式,不仅不能有效调动学生的主观能动性,还在一定程度上背离用来加深学生对高分子物理基础知识的理解和掌握的开课初衷。因此,该文提出以综合实验集群课程设计的高分子物理实验教学改革探究,探索将原本相对独立的单项实验进行集群组合课程设计,引导学生从更系统全面的角度出发,加深对各单项实验之间关联性把握的同时,进一步强化学生对高分子物理基础知识的理解、掌握和运用。该文主要介绍临沂大学在高分子物理实验课程实施综合实验集群教学改革方面的尝试及取得的初步进展。

外周血T淋巴细胞亚群及T细胞表面共抑制分子表达水平对PD-1/ PD-L1抑制剂联合化疗治疗NSCLC疗效的预测效能分析

目的 探讨外周血T淋巴细胞亚群及T细胞表面共抑制分子表达水平对程序性死亡因子1(PD-1)/程序性死亡因子配体1(PD-L1)抑制剂联合化疗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)疗效的预测效能。方法 选取该院2019年5月至2021年4月行PD-1/PD-L1抑制剂联合化疗治疗的NSCLC患者48例,依据治疗4个周期后的效果分为缓解组(n=22)和未缓解组(n=26)。比较两组一般资料及治疗前、治疗4个周期后外周血T淋巴细胞亚群及T细胞表面共抑制分子(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、PD-1)、肿瘤标志物[糖类抗原125(CA125)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)]水平,分析NSCLC患者外周血T淋巴细胞亚群及T细胞表面共抑制分子与肿瘤标志物的相关性及NSCLC患者疗效影响因素,评价外周血各指标对治疗NSCLC疗效的预测价值。结果 两组治疗4个周期后外周血CD3^(+)、CD4^(+)水平均较本组治疗前提高,且缓解组高于未缓解组,外周血CD8^(+)、PD-1、血清CA125、CEA、CYFRA21-1水平均较本组治疗前降低,且缓解组低于未缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC患者治疗4个周期后外周血CD3^(+)、CD4^(+)与血清CA125、CEA、CYFRA21-1水平呈负相关,外周血CD8^(+)、PD-1与血清CA125、CEA、CYFRA21-1水平呈正相关(P<0.05)。建立Logistic预测评估模型,获取联合检测预测未缓解的曲线下面积为0.938,预测灵敏度为80.00%,特异度为90.91%。结论 PD-1/PD-L1抑制剂联合化疗治疗NSCLC后外周血T淋巴细胞亚群及T细胞表面共抑制分子表达水平可出现显著变化,且其表达水平与肿瘤恶性程度有关,对预测疗效具有较高价值。