Mfn2、miRNA-101调控转化生长因子-β1参与肝泡型包虫病肝纤维化的研究

目的 探讨Mfn2、miRNA-101通过TGF-β1调控肝泡型包虫病肝纤维化的潜在作用。方法 收集2020年7月-2020年10月青海省人民医院确诊的20例肝泡型包虫病患者术后切除的肝组织,采集距肝脏病灶边缘2 cm以外正常肝组织、距肝脏病灶边缘2 cm以内肝组织。行HE、Masson染色,将不同标本纤维化分级,通过免疫组化、RT-qPCR检测Mfn2、TGF-β1、α-SMA、miRNA-101在不同级别纤维化组织中的表达。结果 Mfn2、TGF-β1、α-SMA、miRNA-101在不同级别纤维化组织中的差异表达均具有统计学意义(P<0.05)。Mfn2与TGF-β1、α-SMA表达量均呈负相关(P<0.05),miRNA-101与TGF-β1、α-SMA表达量均呈负相关(P<0.05),TGF-β1与α-SMA表达量呈正相关(P<0.05),Mfn2与miRNA-101表达量无显著相关性(P>0.05)。结论 Mfn2、miRNA-101可能抑制肝泡型包虫病肝纤维化,并且可能通过抑制TGF-β1发挥抗纤维化作用。

miRNA-21/101/125a/195/200b在肝硬化、肝癌中的表达变化

目的观察microRNA(miRNA)-21/101/125a/195/200b在肝硬化、肝癌中的表达变化。方法收集患者肝组织样本,其中血管瘤6份、肝硬化10份,肝癌及癌旁组织14对;除血管瘤外,其余样本均HBsAg阳性。PCR检测各组miR-21、miR-101、miR-125a、miR-195、miR-200b的表达。采用Pearson相关性分析探索miR-101的表达与临床相应指标之间的相关性。结果与对照组相比,肝硬化组血小板(PLT)明显降低,凝血酶原时间(PT)延长、国际标准化比值(INR)升高,天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和总胆红素(TBil)升高;HE染色、Masson染色及网状纤维染色显示符合肝硬化诊断。与肝硬化组相比,肝癌组白细胞(WBC)、PLT均有所升高,PT、INR降低,AST、TBil表达下降;与对照组、肝硬化组相比,肝癌组甲胎蛋白(AFP)表达显著升高,免疫组化染色符合肝癌诊断。PCR检测miRNA的表达,与对照组相比,miR-101、miR-195在肝硬化组中的表达下降;与癌旁组织相比,miR-21在肝癌中的表达升高,miR-101、miR-195的表达则显著降低。miR-125a、miR-200b的表达在各组间无明显变化。Pearson相关性分析发现miR-101与PLT表达水平呈正相关,相关系数为0.375。结论 miR-101在肝硬化、肝癌组织中表达降低,且与血小板水平呈正相关,提示miR-101是慢性肝病的负调控因子。

miRNA-101对激素非依赖型前列腺癌细胞系LNCaP EZH2表达的影响

目的:探讨microRNA-101(miRNA-101)对激素非依赖型前列腺癌细胞系LNCa P的果蝇zeste基因增强子的人类同源基因(EZH2)表达的影响。方法:实验分为空白组、阴性对照组和转染组。转染组通过基因重组技术构建miRNA-101表达载体,应用脂质体将其转染到LNCa P细胞中,荧光显微镜检测转染效率。3组细胞通过qRT-PCR检测细胞中EZH2 mRNA的表达。阴性对照组和转染组用Western印迹检测EZH2蛋白的水平。结果:转染组细胞培养24 h后,70%以上的细胞内出现绿色荧光基因信号。阴性对照组和转染组细胞培养72 h后,转染组细胞miRNA-101表达增加明显(P<0.01);转染组EZH2 mRNA的表达水平(0.01±0.10)显著低于空白组(0.95±0.40)和阴性对照组(0.86±0.30)(P均<0.01)。阴性对照组EZH2蛋白表达水平随培养时间延长而增加,但转染组EZH2蛋白表达水平随培养时间延长则下降。结论:miRNA-101可以抑制LNCa P细胞的EZH2的表达,具有成为前列腺癌生物治疗靶点的可能。

miRNA-101通过下调COX-2的表达影响肺癌细胞的生物学功能

目的:探讨miRNA-101(miR-101)在肺癌组织和细胞中的表达及其对人肺癌细胞增殖、克隆形成和成瘤能力的影响。方法:采用Western blotting和实时荧光定量RT-PCR技术分别检测10例患者肺癌组织及相应癌旁组织、人肺癌细胞A549和NCI-H26及正常人胚肺成纤维细胞MRC-5中环氧合酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)及miR-101的表达。A549和NCIH26细胞分别转染miR-NC和miR-101构建过表达miR-101的细胞系及其对照,Western blotting、CCK-8和克隆形成实验分别检测过表达miR-101对A549、NCI-H26细胞中COX-2的表达、细胞增殖和克隆形成能力的影响。用A549、A549/NC、A549/101细胞在BALB/c裸鼠皮下构建移植瘤模型,观察过表达miR-101对A549细胞小鼠移植瘤生长的影响。结果:在肺癌组织和A549、NCI-H26细胞中,COX-2的表达明显高于癌旁组织(t=20.03,P=0.001)和MRC-5细胞(t=14.59,P=0.012),而miR-101的表达则相反(组织:t=18.33,P=0.002;细胞:t=28.95,P=0.000)。成功构建过表达miR-101的A549/101、NCI-H26/101细胞系,与A549、NCI-H26细胞相比,A549/101(t=26.03,P=0.000)、NCI-H26/101(t=23.29,P<0.01)细胞内COX-2表达量显著降低,A549/101和NCI-H26/101细胞的活力和克隆形成能力也显著降低(均P<0.05)。A549/101细胞小鼠皮下肿瘤的生长速度较A549细胞和A549/NC细胞显著减慢(F=14.81,P=0.003)。结论:肺癌组织和A549、NCI-H26细胞中miR-101低表达、COX-2高表达,过表达miR-101可以抑制A549、NCI-H26细胞的增殖,其机制可能与下调了COX-2表达有关。

miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达及对胃癌生物学行为的影响

目的:探讨miRNA-101在胃癌组织和细胞中的表达情况及对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:应用实时荧光定量PCR法分析31例胃癌组织和癌旁组织样本以及人胃癌细胞系SGC-7901、MKN45、人正常胃黏膜上皮细胞系GES1中miRNA-101的表达水平;建立miRNA-101重组腺病毒载体感染胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,对照组为感染阴性对照病毒的胃癌细胞系SGC-7901、MKN45,MTT法检测miRNA-101对胃癌细胞增殖能力的影响;Transwell小室法检测胃癌细胞的迁移和侵袭能力。结果:胃癌组织中miR-101表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01);miR-101在细胞系SGC-7901和MKN45中的表达量明显低于人正常胃黏膜上皮细胞系GES1(P<0.01)。孵育48 h后MKN45细胞miRNA-101组的细胞增殖能力低于其对照组(P<0.05);而孵育72 h后SGC-7901细胞和MKN45细胞的miRNA-101组细胞增殖能力均亦低于相应对照组(P<0.05)。迁移试验结果显示,miRNA-101组迁移的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数明显低于相应对照组(P<0.01);侵袭实验结果显示,miRNA-101组侵袭的胃癌细胞SGC-7901和MKN45的平均细胞数亦明显低于其对照组(P<0.01)。结论:miRNA-101在胃癌组织和胃癌细胞系中表达下调,转染miRNA-101可明显降低SGC-7901和MKN45细胞的增殖、迁移、侵袭能力,miRNA-101可能参与了胃癌疾病的发生及发展。

子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义

目的探讨子痫前期患者胎盘中miRNA-101和内质网蛋白ERp44的表达和意义。方法选取2013年5月~2014年5月入住山东省交通医院分娩的100例产妇的胎盘绒毛组织,随机均分为对照组和子痫前期组,每组各50例。采用RT-PCR法检测各组胎盘组织中miRNA-101的表达情况;Western blot法检测过表达和封闭miRNA-101后,各胎盘组织ERp44的表达情况;采用流式细胞仪检测滋养细胞的凋亡情况。结果与对照组相比,子痫前期组中miRNA-101的表达明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。在滋养细胞HTR-8/SVneo中过表达miRNA-101后,ERp44的表达显著下调(P<0.05);封闭miRNA-101后,ERp44的表达上调(P<0.05);过表达miRNA-101,细胞凋亡数量减少;封闭miRNA-101,细胞凋亡数量增加。结论子痫前期中,miRNA-101可通过调控内质网蛋白ERp44的表达来调控胎盘滋养细胞的凋亡过程。

microRNA-101a与COX-2在尿酸性肾病模型中的变化

目的:观察micro RNA-101a(mi R-101a)和环氧化酶-2(COX-2)在尿酸性肾病大鼠模型中的变化情况。方法:将24只雄性SD大鼠随机分成3组,即正常对照组(BC组)、模型组(M组)和塞来昔布组(S组),每组各8只,以含酵母和腺嘌呤的饲料喂养造模,21 d后检测各组大鼠血清中肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)的含量,并用实时定量PCR技术检测大鼠肾脏皮质中mi R-101a的表达及Wersten Blot法检测COX-2及caspase-3的表达。结果:M组Cr、BUN、UA较BC组升高(P<0.05),S组Cr、BUN、UA较M组降低(P<0.05);M组mi R-101a的表达较BC组明显降低(P<0.05),S组mi R-101a的表达较M组大鼠升高(P<0.05);M组COX-2及caspase-3的表达较BC组明显升高(P<0.05),S组COX-2及caspase-3的表达较M组明显降低(P<0.05)。结论:mi R-101a表达降低及COX-2表达升高可能参与高尿酸引起的肾脏损害的过程,COX-2特异性抑制剂塞来昔布可减轻其损害。

microRNA-101a在尿酸诱导的肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的研究尿酸对肾小管上皮细胞间充质转分化的影响及microRNA-101a在其中的作用。方法体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E),分别以0、10、100、500μmol/L的尿酸诱导细胞,采用实时定量PCR检测各组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原(Col I)及E钙蛋白mRNA的表达水平;Wersten blot检测各组中α-SMA的表达,免疫荧光检测各组中胶原蛋白I(COL)表达水平,观察细胞是否发生转分化。再用实时定量PCR检测各组中miR-101a及COX-2mRNA的表达水平,Wersten blot检测各组中COX-2的表达。进一步实验选择100μmol/L尿酸诱导细胞,并转染miR-101a mimics,分为3组,miR-101a组:先转染miR-101amimics,再以100μmol/L尿酸培养基培养;空白对照组:以100μmol/L尿酸培养基培养;阴性对照组:细胞转染随机合成的miRNA NC片段,再以100μmol/L尿酸培养基培养。检测各组中α-SMA、Col I、E钙蛋白及COX-2mRNA的表达量。结果培养基中尿酸浓度越高,α-SMA、Col I表达水平也越高,E钙蛋白越低,提示细胞发生转分化,同时miR-101a表达减少,COX-2mRNA表达增多。miR-101a组与空白对照组和阴性对照组比较,α-SMA、Col I及COX-2的表达明显降低(P<0.05),E钙蛋白明显升高(P<0.05),空白对照组与阴性对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论尿酸诱导肾小管上皮细胞转分化可能呈浓度依赖性,miR-101 a及COX-2可能参与尿酸诱导肾小管上皮细胞转分化的调节过程。

microRNA-101在结肠癌中的表达及与临床病理参数的关系

目的研究分析microRNA-101在结肠癌中的表达情况及与患者临床病理参数的相关性。方法提取80例结肠癌患者癌组织及其正常结肠黏膜组织标本的总RNA,采用茎环逆转录及实时荧光定量方法(stemloop-RT-q PCR)检测microRNA-101的表达量,统计分析microRNA-101表达情况与患者临床病理参数之间的关系。结果结肠癌组织中microRNA-101的表达量明显低于癌旁正常结肠黏膜组织中的表达(P=0.001 8);microRNA-101在高分化患者的癌组织中表达水平较高,在低分化患者组织中表达水平最低,差异有统计学意义(P<0.05);microRNA-101在TNM分期为Ⅰ和Ⅱ期的患者中表达量高于Ⅲ和Ⅳ期患者(P<0.05)。结论结肠癌组织中microRNA-101的表达降低对肿瘤的发生发展起到了重要的作用,microRNA-101具有抑癌基因的作用,从而为结肠癌的分子靶向治疗提供了新的靶点。

microRNA-101和环氧合酶-2在胃癌中的表达及其临床意义

背景:microRNAs是一类对靶基因表达具有转录后调控作用的非编码小RNA。microRNA-101(miR-101)在多种恶性肿瘤中呈低表达,而过表达外源性miR-101可发挥肿瘤抑制作用。前期体内、外实验发现外源性miR-101可抑制胃癌细胞增殖和环氧合酶-2(COX-2)表达。目的:检测胃癌组织中的miR-101、COX-2表达并探讨其临床意义。方法:收集手术切除胃癌组织和配对癌旁非癌组织标本30例,以实时荧光定量RT-PCR检测miR-101、COX-2mRNA表达,分析两者间以及两者与胃癌主要临床病理特征的关系。结果:绝大多数胃癌组织中miR-101表达低下,COX-2 mRNA则呈过表达。胃癌组织与癌旁非癌组织间miR-101、COX-2 mRNA表达量差异显著(P<0.01),且两者表达在癌组织和癌旁组织中均呈负相关(癌组织:r=-0.767,P=0.000;癌旁组织:r=-0.718,P=0.000)。TNMⅢ、Ⅳ期胃癌和伴淋巴结转移的胃癌中,miR-101表达分别显著低于TNMⅠ、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例(P<0.05),COX-2 mRNA表达分别显著高于TNMⅠ、Ⅱ期病例和无淋巴结转移病例(P<0.05)。结论:miR-101与COX-2之间的负相关性可能有助于胃癌的临床诊断;miR-101表达低下伴COX-2过表达与胃癌临床进展和转移有关,对预后判断有一定参考价值。

上调miRNA-101表达对人肝癌HepG2细胞系增殖的影响

目的通过上调人肝癌HepG2细胞株中miRNA-101表达,探讨miRNA-101抑制靶基因EZH2对肝癌细胞增殖的影响。方法人工合成miRNA-101模拟体并转染至HepG2肝癌细胞株中,利用MTT法检测细胞增殖抑制、流式细胞仪检测细胞周期、实时荧光定量PCR检测EZH2 mRNA表达。结果 miRNA-101模拟体转染组HepG2细胞增殖活性明显低于阴性对照组及空白对照组(P<0.05),miRNA-101模拟体组G0/G1期细胞明显增多,为(74.71±4.6)%,S期细胞减少,为(14.57±1.1)%(P均<0.05);miRNA-101模拟体组EZH2 mRNA较阴性对照组和空白对照组表达下降(P<0.05)。结论上调miRNA-101可抑制EZH2基因表达,对人肝癌细胞增殖活性具有负调控作用。

结肠癌组织中microRNA-101 microRNA-132及COX-2的表达与病理相关性分析

目的分析结肠癌组织中miRNA-101、miRNA-132及COX-2的表达与病理相关性。方法收集2013年11月至2016年1月结肠癌病灶组织和癌旁正常组织各135例，应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）法检测组织中miRNA-101mRNA、miRNA-132mRNA和COX-2mRNA的表达，并分析各基因的相关性及与结肠癌临床病理特征的关系。结果与癌旁正常组织相比，结肠癌组织中的miRNA-101mRNA和miRNA-132mRNA的表达水平显著降低，COX-2mRNA显著上升，差异有统计学意义（P〈0．05）；结肠癌组织中miRNA-101mRNA、miRNA-132mRNA和COX-2mRNA的表达与肿瘤的分化程度、TNM分期以及淋巴结转移有关；低中分化、TNM分期为Ⅲ期或Ⅳ期及淋巴结转移，结肠癌组织中miRNA-101mRNA和micrRNA-132mRNA的表达显著降低，COX-2mRNA的表达显著提高（P〈0．05）；miRNA-101、miRNA-132与COX-2呈显著负相关（P〈0．05）。结论结肠癌组织中miRNA-101和miRNA-132表达下调，COX-2表达上调与结肠癌的发展进程有关，可作为结肠癌治疗的潜在靶点。

胃癌患者手术前后miRNA-101、miRNA-21表达水平及其临床意义

目的探讨胃癌患者手术前后血浆miRNA-101、miRNA-21表达水平及其临床意义。方法选取50例行胃癌根治术的胃癌患者为胃癌组,另选取同期健康体检者50例为健康对照组,分别于术前、术后1周及术后1个月检测胃癌患者,体检时检测健康体检者血浆中miRNA-101、miRNA-21表达水平;并比较不同临床特征胃癌患者的血浆miRNA-101、miRNA-21表达水平。结果术前胃癌组患者血浆miRNA-101相对表达量明显低于健康对照组,miRNA-21相对表达量明显高于健康对照组(P﹤0.01)。与术前比较,术后1周及术后1个月胃癌患者血浆miRNA-101相对表达量逐渐增高,血浆miRNA-21相对表达量逐渐降低(P﹤0.05)。不同分化程度、TNM分期、淋巴结转移情况的胃癌患者术前血浆miRNA-101、miRNA-21相对表达量比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论胃癌患者血浆miRNA-101、miRNA-21可作为胃癌潜在的生物标志物,有望成为胃癌诊断、手术疗效评估的新手段。

MiRNA-101在结直肠腺瘤及结直肠癌中表达差异的分析

目的检测miRNA-101在结直肠腺瘤及结直肠癌组织中的表达差异并探讨其临床意义。方法收集33例结直肠腺瘤组织(管状绒毛腺瘤8例,管状腺瘤25例)及瘤旁正常组织,31例结直肠癌组织及癌旁正常组织,采用荧光定量PCR技术测定miRNA-101的相对表达量,分析其与年龄、性别、病理类型等之间的关系。结果miRNA-101在腺瘤中的表达高于瘤旁组织(P<0.05),在癌组织中的表达低于癌旁组织(P<0.05),在不同年龄、性别、病理类型及肿瘤部位的相对表达量均无差异,无统计学意义。结论miRNA-101在腺瘤组织中表达升高,在结直肠癌组织中表达降低,提示其在正常结直肠组织到结直肠腺瘤再到结直肠癌的发生发展过程中发挥了重要的调控作用。

结直肠癌患者microRNA-101、microRNA-182表达与病理特征及预后的关系

目的探讨结直肠癌组织中microRNA-101(miR-101)、microRNA-182(miR-182)表达与临床病理特征及预后的关系。方法选取2015年4月—2018年1月青海省人民医院收治的83例拟行结直肠癌根治术患者,术后随访5年。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有患者癌组织及癌旁组织miR-101、miR-182的表达;分析不同临床病理特征结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182的表达;采用多因素Cox比例风险模型分析影响结直肠癌患者术后复发转移的因素;分析结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182表达与术后复发转移的关系。结果癌组织miR-101 mRNA相对表达量低于癌旁组织,miR-182 mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05);低分化、病理分期Ⅲ期、有浆膜浸润、有淋巴结转移的结直肠癌患者癌组织miR-101mRNA相对表达量低于中高分化、病理分期Ⅱ期、无浆膜浸润、无淋巴结转移者(P<0.05),miR-182 mRNA相对表达量的比较结果则相反(P<0.05);多因素Cox比例风险模型分析结果显示,病理分期[RR(95%CI:3.001,17.726)、分化程度[RR(95%CI:2.119,12.516)]、miR-101[RR(95%CI:1.842,10.881)]、miR-182[RR(95%CI:1.850,10.925)]是影响结直肠癌患者术后复发转移的因素(P<0.05);miR-101高表达患者的无病生存率高于低表达患者(P<0.05),miR-182低表达患者的无病生存率高于高表达患者(P<0.05)。结论结直肠癌患者癌组织miR-101、miR-182的表达与临床病理特征及预后有关,miR-101低表达、miR-182高表达患者治疗后复发转移风险高。

上调microRNA-101沉默EZH2基因表达对人膀胱癌T24细胞系增殖和凋亡的影响

目的探讨microRNA-101抑制靶基因EZH2对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响.方法构建靶向EZH2基因的microRNA-101质粒并转染至人膀胱癌细胞中,采用RT-PCR法检测EZH2mRNA的表达情况,利用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖抑制,通过Annexin V-FITC/PI流式细胞术实验观察转染后细胞的凋亡情况.结果 microRNA-101阳性对照组EZH2 mRNA较阴性对照组和空白对照组表达下降(P<0.05);在转染5 d后,其生长抑制率明显高于对照组(P<0.01);microRNA-101组较阴性对照组及空白对照组G0/G1期细胞数明显增多,S期细胞数明显减少,凋亡率增加(P<0.01).结论上调microRNA-101可抑制EZH2基因的表达,并有效的抑制人膀胱癌细胞的增殖,促进其凋亡,为深入研究膀胱癌的基因治疗提供理论依据.

microRNA-101和COX-2在结肠癌中的表达及其临床意义

目的:检测结肠癌组织miR-101、COX-2的表达并探讨其临床意义。方法:收集结肠癌组织和癌旁组织标本32例,荧光定量PCR检测miR-101、COX-2 mRNA的表达,分析两者相关性及其与临床病理的关系。结果:与癌旁组织比较,结肠癌组织中miR-101表达相对降低(P<0.01),COX-2 mRNA表达相对增高(P<0.01),且两者表达呈负相关(r=-0.373 5,P<0.01)。结肠癌组织中COX-2的表达与肿瘤的分化程度无关(P>0.05);miR-101随肿瘤分化程度降低其表达也降低(P<0.05)。Dukes分期C^D期肠癌组织中COX-2表达量高于A^B期,miR-101的表达量低于A^B期,但差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 :miR-101表达降低及COX-2过表达与结肠癌的发生有关,二者可以成为结肠癌的诊断标志物和潜在治疗靶点。

何首乌颗粒剂对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆及miRNA-101表达的影响

目的研究何首乌对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力及双侧海马区mi RNA-101表达的影响,并探讨其作用机制。方法将120只SD大鼠随机分为4组,每组30只,分别为假手术组、石杉碱甲组、模型组、中药组。除假手术组外,使用化学试剂冈田酸(OA)注射SD大鼠杏仁核部位,形成阿尔茨海默病模型。造模后每组分别予以相应干预(假手术组与模型组均灌等容量生理盐水)。干预21 d结束后,运用Morris水迷宫作为行为学检测方法,评测大鼠学习记忆能力,行为学观察共进行5 d,结束后处死实验大鼠,取双侧海马运用RT-PCR进行mi RNA-101半定量检测。结果经21 d干预后,与模型组相比,中药组与石杉碱甲组的阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力均更强,其差异具有统计学意义(P<0.01);与模型组相比,中药组与石杉碱甲组大鼠双侧海马区mi RNA-101的相对表达量增加(P<0.01)。结论何首乌能显著改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,对阿尔茨海默病有一定的治疗作用;通过提高模型大鼠海马区mi RNA-101的含量来改善症状可能是其作用机制之一。

MicroRNA-101调控人胃癌细胞系增殖、迁移、侵袭的实验研究

目的通过实验研究miRNA-101在胃癌中的表达水平,以及对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭力和皮下移植瘤的影响,以探讨将miRNA-101用于胃癌生物靶向治疗的可能性。方法分子克隆技术构建miRNA-101重组腺病毒表达载体,MTT法检测细胞增殖能力,Millipore Transwell小室法检测细胞迁移能力,Matirgel法检测细胞侵袭能力,q-PCR定量分析各基因表达水平,使用BALB/c免疫缺陷裸鼠建立胃癌皮下移植瘤模型。结果 miRNA-101在胃癌组织中的表达量为(0.661±0.396),低于所对应的癌旁组织(1.128±0.697),差异有统计学意义(t=10.091,P<0.01)。胃正常上皮细胞GES-1中的miRNA-101表达量高于胃癌细胞系BGC-823、SGC-7901、MKN-45和AGS。miRNA-101对MKN-45细胞的增殖能力呈现明显的抑制作用,对胃癌细胞BGC-823、SGC-7901、MKN-45、AGS的迁移和侵袭均有抑制作用。选取MKN-45细胞系建立裸鼠皮下移植瘤模型后5周,Ad-miRNA-101组肿瘤体积为(333.56±46.71)mm^3,小于Ad-EGFP组(806.41±51.83)mm^3,差异有统计学意义(t=21.431,P<0.01)。结论在胃组织中,miRNA-101是一个抑制性miRNA,miRNA-101表达水平下调参与胃癌的发生和发展。miRNA-101将有可能成为胃癌生物靶向治疗的新靶点。

MicroRNA-101、L型钙通道β_2及钠钙交换体在房颤病人血清中的表达变化及临床意义

目的比较MicroRNA-101(miR-101)、L型钙通道β2(L-type calcium channelβ2Subunit,CACNB2)及钠钙交换体(NCX)在房颤(AF)病人血清中的表达变化,并分析其临床意义。方法筛选2014年3月—2015年3月来就诊的100例AF病人为研究对象,设为试验组(n=100);同时选取100例正常病人作为空白对照组(n=100)。试验时,分别应用荧光定量逆转录聚合酶链式技术(Real-Time quantity PCR)和免疫印迹(Western blot)方法检测两组右心耳组织中miR-101和CACNB2、NCX的表达水平变化,探讨miR-101与CACNB2、NCX表达水平的相关性,阐述miR-101在房颤发生与维持中可能机制及临床检测意义。结果 (1)治疗前,两组受试者在年龄、性别、手术方式等临床资料比较无有统计学意义(P>0.05),试验组左房内径(58.9±7.2)mm,大于对照组(37.9±8.1)mm,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)实时荧光定量PCR结果表明,AF病人右心耳组织中的microRNA-101表达量(0.620 7±0.132 1),较正常病人(2.310 0±0.342 2)低;AF病人右心耳组织中的CACNB2、NCX通道mRNA表达量(1.980 0±0.315 1,1.8027±0.281 1),较正常病人(0.752 6±0.383 0,0.602 1±0.291 1)表达量高,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫印迹(Westernblot)结果表明,AF病人右心耳组织中的CACNB2和NCX蛋白的表达水平(1.36±0.18,1.46±0.12)均较正常病人(1.10±0.25,1.06±0.21)高,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 AF病人右心耳组织中miR-101的表达水平与AF的发生具有相关性,CACNB2、NCX通道是miR-101的靶向调控位点,参与AF的发生。