中性粒细胞胞外诱捕网与口腔鳞状细胞癌关系的 研究进展

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps,NETs)是中性粒细胞释放的一种由解聚的染色质和颗粒蛋白组成的纤维网状结构,可以捕获和杀死细菌。NETs的形成由各种细菌、病毒等病原体激活,其过程被称为网捕死亡(NETosis)。NETosis是一种不同于细胞凋亡和细胞坏死的细胞程序性死亡过程,目前已经报道了两种NETosis形式:裂解性NETosis和非裂解性NETosis。研究发现NETs能够在肿瘤微环境(tumor microenvironment,TME)中与免疫细胞相互作用,激活巨噬细胞;促进髓系抑制细胞的免疫抑制作用;并能包裹在肿瘤表面,防止CD8+T细胞和自然杀伤细胞发挥细胞毒性作用。近年研究发现,NETs在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中大量存在,与OSCC发生发展关系复杂,根据不同的中性粒细胞表型,NETs可发挥促肿瘤或抗肿瘤作用,对N1型中性粒细胞,NETs可能是其发挥抗肿瘤作用的手段,而转换生长因子⁃β(transforming growth factor⁃β,TGF⁃β)诱导的NETs的形成可能与N2型中性粒细胞呈现促癌活性从而诱导口腔扁平苔藓恶变的机制有关。NETs还可能参与OSCC的转移过程,其通过捕获循环肿瘤细胞(circu⁃lating tumor cells,CTC)并诱导高凝状态促进肿瘤相关血栓的形成和血源性转移。NETs参与了OSCC发生和转移的过程,为抗肿瘤治疗和预测OSCC的预后提供了新的研究方向。抑制NETs的形成可以显著抑制化疗后产生的耐药性,并有利于降低OSCC患者的血栓形成风险从而抑制肿瘤转移。目前基于NETs相关基因已构建了多个关于头颈部鳞状细胞癌的预后模型。但目前NETs与OSCC的治疗尚处于讨论阶段,其作用机制与实行的可能性尚需大规模的基础与临床试验验证。本文通过综述NETs与OSCC之间的关系,为治疗OSCC提供新思路。

微小RNA-181a及其在恶性肿瘤中的作用

微小RNA(miRNA)是一类非蛋白质编码的小分子RNA,参与调控不同基因的表达,对癌细胞的侵袭和转移有着十分重要的影响。miRNA-181a(miR-181a)参与调控细胞的分化和免疫以及肿瘤的发生发展及预后等。本文就miR-181a的结构和功能,miR-181a在其他恶性肿瘤发病中的作用,miR-181a在口腔鳞状细胞癌发病中的作用等研究进展作一综述,以期为进一步研究miR-181a提供帮助。

肿瘤转移抑制基因BRMS1 mRNA在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:研究肿瘤转移抑制基因-乳腺癌转移抑制基因(breast cancer metastasis suppressor 1,BRMS1)在口腔鳞癌组织及癌旁组织中的表达,并探讨其表达规律及与临床病理学关系。方法:用RT-PCR技术检测38份口腔鳞癌、20份癌旁正常组织的BRMS1 mRNA的表达情况,并结合肿瘤病人的临床病理学资料进行分析。结果:口腔鳞癌组织BRMS1 mRNA表达量比癌旁组织明显偏低,其差异具有统计学意义(P<0.05)。BRMS1 mRNA表达水平在转移病例明显低于非转移的病例,低分化标本明显低于高中分化标本,差异均有统计学意义(P<0.05);但是在肿瘤临床分期、性别、年龄、瘤体大小等之间的表达量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:BRMS1在口腔鳞癌中的表达水平跟肿瘤的转移密切相关,也跟肿瘤的组织分化程度有关,可以作为口腔鳞癌治疗的预后指标之一。

口腔鳞癌中染色体9p、9q的杂合性丢失及P16表达的研究

检测９号染色体及ｐ１６基因在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法：应用聚合酶链反应技术，检测经显微切割的口腔鳞癌组织中两个ＤＮＡ微卫星多态标记ＤｑＳ３１９（９ｐ２１）和ＤｑＳ２９９（９ｑ２２～３１），分析染色体９ｐ、９ｑ的杂合性丢失情况。同时应用免疫组织化学方法观察其ｐ１６蛋白表达状况。结果：２９．４％出现ＤｑＳ３１９标记的ＬＯＨ，ＤｑＳ２９９标记发现较高频率ＬＯＨ（４３．８％）。ｐ１６蛋白免疫组化染色阳性率为８６．４％。其中３例未表达ｐ１６的标本中，有２例发现ＤｑＳ３１９的ＬＯＨ。结论：口腔鳞癌在染色体９ｐ２１区域频繁丢失可能与ｐ１６失活有关，而染色体９ｑ２２～３１区域在口腔鳞癌的较高频率丢失推测此区可能存在与肿瘤发生密切相关的抑癌基因。

FHIT抑癌基因在头颈部鳞癌中的研究进展(综述)

脆性组氨酸三联体基因 (FHIT)是 1996年新发现的一种定位于人类染色体 3p14 .2上的抑癌基因 ,其编码的蛋白质具有ApnA水解酶的特性 ,可通过水解ApnA(主要是Ap3A)而阻止细胞生长信号传导途径 ,从而抑制细胞的生长 ;另有观点认为FHIT可与Ap3A等结合成FHIT底物复合物 ,这种复合物可能是一种信号物质 ,其抑癌作用可能比其水解酶作用更重要。研究表明FHIT在肿瘤的发生中起着重要的作用 ,现就FHIT在头颈部鳞癌中的研究进展作一综述。

肿瘤抑制蛋白Maspin在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨Maspin蛋白在口腔鳞状细胞癌(OSCC)发生发展过程中的作用,为临床应用提供理论依据。方法采用鼠抗人Maspin单克隆抗体及SP免疫组化法检测45例OSCC、33例癌旁组织及15例正常口腔组织中Maspin蛋白的表达水平,用半定量积分法判断结果。结果在正常口腔组织、癌旁组织和OSCC组织中Maspin蛋白表达阳性率分别为86.67%(13/15)、72.73%(24/33)和37.78%(17/45)。Maspin蛋白在OSCC组织、癌旁组织和正常口腔组织中表达逐渐增高,其中OSCC组织和正常口腔组织、OSCC组织和癌旁组织、癌旁组织和正常口腔组织之间表达差异有统计学意义(P<0.05)。Maspin蛋白的表达与OSCC淋巴结转移和组织学分级有关(P<0.05),与TNM分期无关(P>0.05)。结论Maspin蛋白在OSCC的发生发展过程中可能起着重要作用,检测OSCC组织中Maspin蛋白的表达水平可能有助于对淋巴结转移潜能的预测。

口腔鳞癌中抑癌基因的失活

目的 :探讨同一口腔鳞癌标本中 3种抑癌基因失活情况。方法 :2 7例口腔鳞癌标本行ABC免疫组织化学染色 ,一抗分别为鼠抗人nm2 3 ,P5 3单克隆抗体及P16多克隆抗体。以癌细胞着色 30 %为判断高低表达的界值。结果 :p16基因失活率最高 ,为 6 6 7% ;2种以上基因同时失活为 5 1 9% ,其中p16和nm2 3占 6 4 2 % (9 14)。结论 :p16基因失活是口腔鳞癌中发生频率最高的分子事件 ;口腔鳞癌中抑癌基因的失活为非单一基因失活 ,其意义值得探讨 ;同时提示 ,研究口腔鳞癌其基因表达及意义时 ,应注意抑癌基因失活的复杂性。

过表达LATS2基因诱导口腔鳞癌细胞自噬的初步研究

目的:探讨大肿瘤抑制因子2(LATS2)基因过表达诱导口腔鳞癌细胞(OSCC)发生自噬性的现象的机制。方法:构建慢病毒载体LATS2稳定转染SCC-25细胞,并设空载体为对照组。转染72 h后提取细胞总蛋白,Western印迹方法检测LATS2、自噬标志物(LC3)、Beclin-1蛋白表达的变化,双荧光自噬流以及透射电子电镜检测细胞自噬水平。结果:与对照组相比,实验组细胞LC3、Beclin-1蛋白的表达明显增多(P<0.05);透射电子显微镜观察到OSCC细胞SCC-25细胞质内有大量自噬体和自噬溶酶体。结论:LATS2基因可诱导OSCC细胞SCC-25发生自噬。

过表达大肿瘤抑制因子2对口腔鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨过表达大肿瘤抑制因子2(LATS2)基因对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖和凋亡的影响。方法应用慢病毒介导的基因过表达技术,使用LATS2过表达慢病毒感染SCC-25细胞株。通过CCK-8检测过表达LATS2对细胞增殖的影响;流式细胞术检测LATS2基因过表达后细胞凋亡情况;Westernblot检测LATS2过表达后对凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达的变化。结果转染p EGFP-LATS2细胞的LATS2基因表达明显上调;p EGFP-LATS2组细胞增殖明显受到抑制;流式细胞术检测pEGFP-LATS2组凋亡率明显高于空白对照组(control)和空载体组(pEGFP-control)(P<0.05)。与control和pEGFP-control组相比,pEGFP-LATS2组Bax蛋白上调,而Bcl-2蛋白下调。结论过表达LATS2基因可明显抑制SCC-25细胞增殖并促进细胞凋亡。

口腔鳞状细胞癌组织miR-31-5p、LATS2表达变化及其临床意义

目的探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织微小RNA-31-5p(miR-31-5p)、大肿瘤抑制激酶2(LATS2)表达变化及其临床意义。方法选择OSCC患者97例,取术中切除的OSCC组织及其配对的癌旁正常组织,采用RT-qPCR法检测miR-31-5p、LATS2 mRNA表达。比较OSCC组织与癌旁正常组织miR-31-5p、LATS2 mRNA表达,通过在线网站预测miR-31-5p与LATS2的靶向结合位点,并分析二者表达的关系及其与患者临床病理特征的关系。分析不同miR-31-5p、LATS2 mRNA表达与OSCC患者预后的关系。采用多因素Cox回归模型分析OSCC患者预后的影响因素。结果OSCC组织miR-31-5p相对表达量高于癌旁正常组织,LATS2 mRNA相对表达量低于癌旁正常组织(t分别为35.314、40.900,P均<0.01)。经在线网站预测,miR-31-5p与LATS2存在靶向结合位点。Pearson相关分析显示,OSCC组织miR-31-5p表达与LATS2 mRNA表达呈负相关关系(r=-0.688,P<0.01)。OSCC组织miR-31-5p、LATS2 mRNA表达与肿瘤组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤直径无关(P均>0.05)。97例OSCC患者中,miR-31-5p表达≥3.258者55例、miR-31-5p表达<3.258者42例,LATS2 mRNA表达≥1.216者40例、LATS2 mRNA表达<1.216者57例。miR-31-5p表达≥3.258者3年累积生存率低于miR-31-5p表达<3.258者,LATS2 mRNA表达≥1.216者3年累积生存率高于LATS2 mRNA表达<1.216者(χ^(2)分别为5.829、6.616,P均<0.05)。所有患者术后随访4~36个月,中位随访时间26个月,随访期间死亡31例。多因素Cox比例风险回归分析显示,TNM分期Ⅲ、Ⅳ期及有淋巴结转移、miR-31-5p表达≥3.258为OSCC患者死亡的独立危险因素,而LATS2 mRNA表达≥1.216则为其独立保护因素(P均<0.05)。结论OSCC组织miR-31-5p高表达、LATS2低表达,二者表达变化与肿瘤组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移以及患者预后有关。

口腔鳞状细胞癌中TSLC1基因启动子甲基化状态检测的临床意义

目的:探讨肺癌抑癌基因1(TSLC1)在口腔鳞状细胞癌组织中基因启动子甲基化状态及其与临床病理参数的联系。方法:应用甲基化特异性PCR检测TSLC1基因启动子在55例口腔鳞状细胞癌组织及10例正常组织中的甲基化状态并结合临床病理资料进行分析。结果:在癌组织中TSLC1基因甲基化阳性率为76.4%(42/55),正常组织未出现TSLC1基因甲基化。TSLC1基因甲基化与口腔鳞状细胞癌临床分期显著相关(P=0.008)。结论:TSLC1基因甲基化与口腔鳞状细胞癌临床分期密切相关,可能是参与口腔鳞状细胞癌发展的重要分子事件。

lncRNA在口腔鳞癌中的研究进展

口腔鳞癌的发病机制非常复杂,目前仍未明确。研究发现lncRNA是肿瘤中的一组重要的调节因子,与口腔鳞癌的发生发展密切相关,本文就lncRNA在口腔鳞癌中表达及作为一类新的肿瘤标志物和治疗靶标的研究进展作一综述。

口腔鳞癌组织中染色体3p14.2区杂合性丢失的研究

目的：检测口腔鳞癌组织中３ｐ１４．２区Ｄ３Ｓ１３００位点丢失情况，为新的抑癌基因定位提供依据。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术以Ｄ３Ｓ１３００位点微卫星多态为遗传标记，检测口腔鳞癌组织中该位点的杂合性丢失（Ｌｏｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ，ＬＯＨ）状况。结果：２２例口腔鳞癌１７例提供信息，７例出现杂合性丢失，ＬＯＨ率为４１％（７／１７），有２例出现微卫星的不稳定性。结论：３ｐ１４．２区Ｄ３Ｓ１３００位点杂合性丢失可能与口腔鳞癌的发生发展相关，提示该区域可能存在口腔鳞癌的抑癌基因。

口腔鳞癌组织LATS2基因启动子甲基化水平及其意义

目的探讨大肿瘤抑制因子2(LATS2)基因启动子甲基化在口腔鳞状细胞癌(口腔鳞癌)发生、发展中的作用。方法选取108例口腔鳞癌患者手术切除的肿瘤组织,其中45例留取癌旁正常组织。采用RT-PCR法检测口腔鳞癌组织及癌旁正常组织LATS2 mRNA表达;采用特异性PCR法检测口腔鳞癌组织LATS2基因启动子甲基化情况,采用Spearman相关分析法分析口腔鳞癌组织LATS2启动子甲基化与患者临床病理参数的关系及其与LATS2 mRNA表达的关系。结果口腔鳞癌组织及癌旁正常组织LATS2 mRNA阳性表达率分别为47. 22%(51/108)、100%(45/45),LATS2 mRNA相对表达量分别为0. 32±0. 04、1. 01±0. 08,二者比较P均<0. 05。口腔鳞癌组织LATS2基因启动子完全甲基化率高于癌旁正常组织,完全非甲基化率低于癌旁正常组织,二者比较P均<0. 05。口腔鳞癌组织LATS2基因启动子甲基化与肿瘤临床分期、组织分级及淋巴结转移有关,并与LATS2 mRNA表达呈负相关关系(P均<0. 05)。结论 LATS2基因启动子甲基化可能通过导致LATS2基因表达下调,促进口腔鳞癌的发生、发展。

Gli1调控口腔鳞状细胞癌上皮-间充质转化的研究进展

HH(hedgehog)信号通路轴由:hedgehoge配体(Shh、Ihh和Dhh)、Patch和Smo两个膜蛋白形成复合物以及下游锌指核转录因子Gli组成,HH信号通路中锌指核转录因子Gli家族以Gli1为主导并起到决定性作用。上皮-间充质转化与包括口腔鳞状细胞癌在内的多种肿瘤的侵袭和转移密切相关,关于口腔鳞状细胞癌与Shh/Gli1信号轴的作用研究报道较少见,现就口腔鳞状细胞癌发生上皮-间充质转化与Gli1的相关性研究进展作一综述。

Nme基因家族及其在口腔鳞癌中的研究进展

Nme（neoplasm metastasis）基因家族又曾被称为nm23（non-metastatic 23）基因家族,nm23基因是发现最早的肿瘤转移抑制基因。该基因家族成员的蛋白产物都具有二磷酸核苷激酶（nucleoside diphosphate kinase,NDPK）活性结构,目前发现有10个成员（Nme1~Nme10）。目前已知Nme基因家族编码的蛋白参与包括细胞生长、分化、代谢、信号转导等多个过程,在癌症的发生发展中扮演着重要的角色。目前研究最多的是Nme1和Nme2。研究发现肿瘤细胞分化和转移抑制功能与Nme1的关系最为密切。现就Nme（nm23）基因家族及其近年来在口腔鳞癌中的相关研究进展作一综述。

活性氧在七氟烷致人口腔鳞状细胞癌凋亡中的作用研究

目的研究七氟烷在人口腔鳞状癌细胞中的抗癌作用及其潜在的分子机制。方法 MTT 比色法检测七氟烷对人口腔鳞状癌细胞的增殖抑制作用;Annexin V-FITC/PI 双染法和流式细胞术检测七氟烷对人口腔鳞状癌细胞的诱导凋亡作用、活性氧水平及加入活性氧清除剂 N-乙酰半胱氨酸(NAC)后的细胞凋亡情况;利用 Western blot 实验对凋亡相关蛋白和信号通路相关蛋白进行检测。结果 MTT 实验表明七氟烷能够抑制多种人口腔鳞状癌细胞的增殖,并且通过降低线粒体膜电位,调节人口腔鳞状癌细胞中 Bcl-2 家族、caspase-3 和 PARP 蛋白的表达,最终诱导细胞凋亡。七氟烷还促进了人口腔鳞状癌细胞中活性氧的积累,并上调 JNK、p53 蛋白的磷酸化表达水平,激活 JNK/p53 信号通路。然而,在加入 NAC 之后,不但细胞凋亡情况被抑制,JNK/p53 信号通路的激活也被显著逆转。结论七氟烷通过调节活性氧水平来激活人口腔鳞状癌细胞中的 JNK/p53 信号通路从而诱导细胞凋亡,因此七氟烷有成为治疗人口腔鳞状癌的备选药物的潜力。

口腔鳞癌中染色体9q22—31的杂合性丢失

目的 检测染色体 9q在口腔鳞癌发生发展中的作用。方法 应用聚合酶链反应检测 2 2例经显微切割的口腔鳞癌组织中DNA微卫星多态标记D9S2 99(9q2 2 - 31)。 结果 杂合性丢失检出率为 4 3.8% (7/ 16 ) ,其中高分化鳞癌为 33.3% ,而低分化鳞癌为 75 %。结论 染色体 9q2 2 - 31区域在口腔鳞癌发生发展中起重要作用 ,提示此区域可能存在与口腔鳞癌发生发展密切相关的抑癌基因。