microRNA-93在胃癌中的表达及其临床意义

目的探讨microRNA-93在胃癌中的表达情况及其与临床病例特征的相关性。方法提取60例胃癌及其相应正常胃黏膜组织标本的总RNA,采用RT-qPCR方法检测microRNA-93的相对表达量,并分析其与临床TNM分期、淋巴结转移、分化程度以及肿瘤治疗疗效和预后等临床病理因素的关系。结果胃癌组织与癌旁正常组织比较,microRNA-93在胃癌组织中表达上调,而且其表达与TNM分期和淋巴结转移有显著相关性(P<0.05)。以相对表达量≥2.0为高表达为界限,进一步的多因素分析发现TNM分期、淋巴结转移、microRNA-93的表达与患者的预后显著相关(P<0.01)。microRNA-93的高表达降低了患者的疗效。结论 microRNA-93在胃癌组织中高表达,尤其是晚期转移性胃癌,提示microRNA-93在胃癌中是一种重要的癌基因。microRNA-93可能作为胃癌诊断和预后判断的分子标志物。

大肠癌中microRNA-93的表达及其与临床病理因素的关系

目的探讨大肠癌中microRNA-93的表达及其与临床病理因素的关系。方法取42例大肠癌及癌旁正常黏膜组织标本,采用茎环逆转录实时荧光定量PCR方法检测大肠癌及癌旁正常黏膜组织中microRMA-93的表达水平,并比较分析其在不同临床病理因素间的表达差异。结果(1)microRNA-93在大肠癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.01);(2)microRNA-93的表达与大肠癌淋巴结转移和浸润深度有关(P<0.05或0.01);而与患者的年龄、性别、肿瘤大小、远处转移、分化程度无关(均P>0.05);(3)microRNA-93评价大肠癌淋巴结转移的敏感性和特异性分别为0.867和0.556,评价大肠癌浸润深度的敏感性和特异性为0.800和0.833。结论 microRNA-93表达上调可能与大肠癌的发生、发展有关,microRNA-93可作为评价大肠癌淋巴结转移和浸润深度的辅助指标。

microRNA-93靶向作用WASF3对乳腺癌转移抑制的机制

目的:探讨微小RNA(miR-93)靶向作用WASF3对乳腺癌转移抑制作用及可能的作用机制。方法:培养SHZ-88乳腺癌细胞株,划痕愈合实验、Transwell小室检测miR-93对SHZ-88细胞转移、侵袭能力的影响;荧光报告基因实验及Western blot技术检测miR-93对WASF3表达的影响。结果:乳腺癌组织中miR-93的表达低于癌旁组织,WASF3的表达高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,miR-93上调组、WASF3下调组SHZ-88细胞穿过小室微孔膜的细胞数、细胞划痕间愈合距离均显著减小,miR-93下调组、WASF3上调组SHZ-88细胞穿过小室微孔膜的细胞数、细胞划痕间愈合距离均显著增大,差异均有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶活性测定结果显示,野生型组miR-93-3′-UTR的荧光活性低于阳性对照组(P<0.05)。与阳性对照组比较,模拟物组WASF3表达明显降低,抑制物组WASF3表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:上调miR-93可抑制SHZ-88细胞增殖、转移能力;该作用机制可能与直接靶向调节介导WASF3的表达有关。

MicroRNA-93在骨肉瘤组织中的表达及其意义

目的:分析MicroRNA-93(miR-93)在骨肉瘤组织中的表达,探讨其对骨肉瘤细胞的增殖及细胞周期的影响。方法:采用TagManMGB探针法定量分析38例骨肉瘤组织及对应软骨组织中miR-93的表达;构建miR-93过表达载体,并合成miR-93的反义核苷酸序列,分别转染骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63。采用MTT比色法检测骨肉瘤细胞增殖的改变情况,利用流式细胞仪检测骨肉瘤细胞周期的变化情况。结果:在38例骨肉瘤标本中,65.8%(25/38)的骨肉瘤组织miR-93表达明显高于对应软骨组织(P<0.05)。miR-93过表达载体可以促进骨肉瘤细胞的生长,使细胞周期G0/G1期明显降低,而S期比例明显增加;反义miR-93转染骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63后,miR-93的表达明显降低,U2-OS和MG-63骨肉瘤细胞生长受到明显抑制,其生长主要停滞在G0/G1期,而S期和G2/M期细胞的比例下降。结论:miR-93在骨肉瘤组织中表达明显上调,其可以通过调节细胞周期中G1/S期的转换而影响骨肉瘤细胞生长。

MicroRNA-93在宫颈癌中的表达及其对细胞生物学行为的影响

目的探讨microRNA-93(miR-93)在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法收集2014年1月-2014年7月中南大学湘雅医院有完整病历资料的41例宫颈癌患者组织标本及对应癌旁组织,实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测宫颈癌组织中miR-93表达水平;采用脂质体转染法将miR-93模拟片段(mimic)转染入宫颈癌Hela细胞,恢复细胞内miR-93表达;活细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测miR-93对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响;Transwell小室法检测其对Hela细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blot检测Hela细胞中上皮生长因子受体(EGFR)及其下游蛋白的表达量变化。结果 41例宫颈癌患者肿瘤组织中miR-93表达量(0.048±0.013)低于癌旁组织(0.113±0.025),差异有统计学意义(P=0.026);转染miR-93模拟片段后,宫颈癌Hela细胞中miR-93表达恢复;与对照组和空白组比较,实验组宫颈癌细胞增殖能力下降(P=0.004),早期凋亡比例增加(P=0.032),侵袭(P=0.003)和迁移能力下降(P=0.003);过表达miR-93的Hela细胞EGFR及下游的p-AKT表达下降(P=0.005),而总AKT蛋白无明显变化(P=0.372)。结论 miR-93在宫颈癌组织中的表达量下降,恢复其在宫颈癌细胞中的表达能够明显抑制其细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制部分与miR-93抑制宫颈癌细胞EGFR/AKT信号通路活性有关。

microRNA-93过表达促进A172脑胶质瘤细胞增殖并抑制其凋亡

目的探讨微小RNA-93(miR-93)对胶质瘤细胞A172增殖和凋亡的影响,观察miR-93对胶质瘤生物学行为的影响。方法通过荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测2例正常人脑组织、10例胶质瘤样本和5种胶质瘤细胞系中miR-93的表达;利用人工合成miR-93 mimic瞬时转染脑胶质瘤A172细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-93的表达水平;采用MTT比色法检测A172细胞增殖情况;流式细胞术检测A172细胞周期与凋亡。结果胶质瘤样本及胶质瘤细胞系中miR-93的表达量较瘤旁与正常胶质细胞系高,miR-93 mimic上调了A172细胞中miR-93的表达水平,促进了A172细胞的增殖能力。miR-93转染细胞后,进入S期细胞显著增加,而G1期细胞则明显减少,同时A172细胞的凋亡数量减少。结论 miR-93在胶质瘤样本及胶质瘤细胞系中高表达,过表达miR-93有效促进了A172细胞的增殖,S期细胞增加G1期减少、细胞凋亡降低,提示miR-93可能成为胶质瘤诊断和治疗的新靶点。

microRNA-93-5p联合在早期糖尿病肾病诊断中的研究

目的 研究尿视黄醇结合蛋白(RBP)、血微小RNA-183(microRNA-183)、微小RNA-93-5p(microRNA-93-5p)联合应用在诊断早期糖尿病肾病(DN)中的价值。方法 将医院2019.01-2021.01间收治的133例2型糖尿病(T2DM)患者纳为研究对象,根据其24 h尿蛋白排泄率(UAER)将其分为单纯糖尿病组(T2DM组,UAER≤30 mg/24 h,n=38)与早期DN组(30 mg/24 h300 mg/24h,n=49),并将同期50例健康体检合格者纳为对照组。检测所有被研究对象尿RBP、血microRNA-183、microRNA-93-5p水平,绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析尿RBP、血microRNA-183、microRNA-93-5p联合应用在诊断早期DN中的价值。结果对照组、T2DM组、早期DN组患者尿白蛋白/尿肌酐(UACR)水平均低于临床DN组。对照组、T2DM组患者UACR水平均低于早期DN组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。对照组及T2DM组尿RBP、血microRNA-183及microRNA-93-5p水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组尿RBP水平均低于早期DN组及临床DN组,血microRNA-183及microRNA-93-5p水平均高于早期DN组及临床DN组,且早期DN组尿RBP水平均低于临床组,血microRNA-183及microRNA-93-5p水平均高于临床DN组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析提示,尿RBP水平与UACR水平之间呈正相关,血microRNA-183、microRNA-93-5p水平与UACR呈负相关(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,尿RBP、血microRNA-183及microRNA-93-5p在诊断早期DN中的AUC均超过0.75,其诊断价值均高于UACR,且尿RBP、血microRNA-183及microRNA-93-5p三者联合应用可有效提高各指标单独应用时的效能,提高早期DN诊断效果。结论 尿RBP、血microRNA-183及microRNA-93-5p在诊断早期DN中的效能均高于UACR,三者连个应用可成为诊断早期DN的潜在指标。

MicroRNA-93及Tspan1在结肠癌中的表达及其临床病理意义

目的探讨microRNA-93(miR-93)及Tspan1在结肠癌组织及细胞中的表达及其临床病理意义,预测两者的靶向调控关系。方法选取手术切除结肠癌组织及对应癌旁组织74例,人结肠癌细胞株(SW480、SW620、HCT116、CaCo-2、LoVo、HT29)及正常人结肠上皮细胞株(FHC),分别采用qRT-PCR及Western blotting检测miR-93、Tspan1 mRNA及Tspan1蛋白表达,观察两者在不同临床病理特征患者的表达差异,Pearson法分析miR-93与Tspan1 mRNA的相关性,采用TargetScan及GeneCard软件预测两者的靶向调控关系。结果与癌旁组织比较,miR-93在结肠癌组织中表达降低(P<0.05),Tspan1 mRNA及蛋白在结肠癌组织中表达升高(P<0.05);与正常人结肠上皮细胞比较,miR-93在结肠癌细胞株中表达降低(P<0.05),Tspan1 mRNA及蛋白在结肠癌细胞株中表达升高(P<0.05);miR-93在远处转移、淋巴结转移阳性、血管浸润阳性及高TNM分期患者中低表达(P<0.05),Tspan1 mRNA在远处转移、淋巴结转移阳性、血管浸润阳性及高TNM分期患者中高表达(P<0.05)。Pearson法相关性分析显示,miR-93与Tspan1 mRNA表达呈负相关[r=-0.735(95% CI:-0.855,-0.535),P=0.000]。生物信息学预测,miR-93及Tspan1在3’-UTR区可能具有靶向调控关系。结论 miR-93在结肠癌中低表达,Tspan1在结肠癌中高表达,miR-93及Tspan1具有靶向调控关系,两者可能成为结肠癌的肿瘤标志物或预测因子。

MicroRNA-93和TLR4在类风湿关节炎患者血清中的表达及临床意义

目的Toll样受体(TLR)4是NF-kB信号通路的重要调节因子,被认定为miRNA-93的直接靶标。文章探究MicroRNA-93(miRNA-93)和TLR4在类风湿关节炎(RA)患者血清中的表达情况以及临床意义。方法回顾性分析2020年4月至2021年4月于上海中医药大学附属曙光医院风湿免疫科诊治的82例RA患者临床资料。依据28个关节疾病活动度评分(DAS28)将RA患者进一步分组。DAS28>5.1者纳入高活动组(n=42),2.6<DAS28≤5.1分者纳入中低活动组(n=40);另选取同期健康体检者38例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测外周血miRNA-93和TLR4的表达水平,ELISA法检测血清白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)表达水平,分析血清miRNA-93、TLR4、IL-6、TNF-α、MMP-3之间的关系,评价血清miRNA-93、TLR4在RA疾病诊断中的效能。结果高活动组、中低活动组患者血清miRNA-93表达水平均低于对照组,TLR4表达水平均显著高于对照组(P<0.05);高活动组患者血清miRNA-93表达水平低于中低活动组,TLR4表达水平高于中低活动组(P<0.05)。高活动组、中低活动组的IL-6、TNF-α、MMP-3表达水平均较对照组更高(P<0.05),高活动组患者IL-6、TNF-α、MMP-3表达水平均高于中低活动组(P<0.05)。RA患者血清miRNA-93和TLR4表达呈负相关(r=-0.0.518,P=0.000)。血清miRNA-93与IL-6、TNF-α、MMP-3水平均呈负相关(r=-0.437、-0.329、-0.541,P<0.05);血清TLR4与IL-6、TNF-α、MMP-3水平均呈正相关(r=0.543、0.437、0.462,P<0.05)。血清miRNA-93诊断RA的AUC为0.72,敏感度与特异度分别为79.27%和68.42%;血清TLR4诊断RA的AUC为0.723,敏感度与特异度分别为47.56%和92.11%;血清miRNA-93联合TLR4诊断RA的AUC为0.81,敏感度与特异度分别为81.60%和65.34%,两者联合诊断的效能均优于单独血清miRNA-93、TLR4诊断(Z=2.137、2.458,P=0.032、0.029)。IL-6、TNF-α、MMP-3诊断RA的AUC分别为0.785、0.797、0.756(P<0.05)。结论RA患者血清miRNA-93表达降低,TLR4表达升高。两者联合检测有助于RA疾病的诊断。

MicroRNA-93对胶质瘤癌细胞侵袭和转移的影响及其作用机制研究

目的探讨micro RNA-93(mi R-93)对胶质瘤细胞侵袭和转移的影响及其初步机制研究。方法检测转化生长因子受体2(TGF-βR2)在胶质瘤标本中的表达,进行mi RNA表达谱分析,并进行荧光素酶验证,识别结肠癌中靶向TGF-βR2 mi RNAs。体内外分析mi RNA介导TGF-βR2表达下调对胶质瘤侵袭性的影响。结果胶质瘤中TGF-βR2表达下降。TGF-βR2是胶质瘤高侵袭性的标志物。胶质瘤中靶向TGF-βR2的主要mi RNAs是mi R-17-92及其同系物mi R-93,其中mi R-93的差异最大。mi R-93介导TGF-βR2下调会导致胶质瘤细胞侵袭能力下降。结论 mi R-93通过下调TGF-βR2表达,抑制胶质瘤细胞的侵袭和转移。

MicroRNA-93在骨肉瘤组织中的表达及临床意义

目的:探讨microRNA-93(miR-93)在骨肉瘤组织中的表达及临床意义。方法:回顾性分析2017年2月至2018年6月86例骨肉瘤患者和34例骨软骨瘤患者的临床资料,并收集手术病理标本,设为骨肉瘤组和骨软骨瘤组,所有标本均采用实时定量聚合酶链锁反应(qRT-PCR)检测miR-93表达情况,比较两组miR-93表达水平;并根据骨肉瘤患者miR-93表达水平分为骨肉瘤高表达组、骨肉瘤低表达组,比较两组临床病理特征和影响骨肉瘤组织中miR-93高表达的独立危险因素,以及1年生存率。结果:骨肉瘤组miR-93水平明显高于骨软骨瘤组,差异有统计学意义(P<0.05)。骨肉瘤高表达组临床分期和远处转移率均高于骨肉瘤低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。临床分期ⅡB~Ⅲ期、远处转移均为影响骨肉瘤miR-93高表达的独立危险因素(OR=2.273、2.472,P<0.05)。骨肉瘤高表达组1年生存率明显低于骨肉瘤低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨肉瘤患者miR-93水平呈高表达,临床分期ⅡB~Ⅲ期和远处转移均为影响骨肉瘤miR-93高表达的独立危险因素,miR-93水平检测可作为骨肉瘤诊疗的依据。

血清microRNA-21、microRNA-193a-3p表达与结直肠癌患者手术预后的关系

目的探究血清microRNA-21(miR-21)、microRNA-193a-3p(miR-193a-3p)水平与结直肠癌患者手术预后的关系。方法回顾性分析2020年1月—2022年1月苏州大学附属第一医院收治112例结直肠癌患者的病历资料。患者均接受结直肠癌根治术,术后随访16个月,记录患者的预后生存结局,多因素逐步Logistic回归分析结直肠癌患者手术预后的影响因素,评估血清miR-21、miR-193a-3p对结直肠癌患者预后的预测效能。结果112例结直肠癌患者死亡22例,病死率为19.64%;生存90例,生存率为80.36%。死亡组术前血清miR-21 mRNA相对表达量、临床分期Ⅲ期占比、淋巴结转移率均高于生存组(P<0.05),血清miR-193a-3p m RNA相对表达量低于生存组(P<0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示,临床分期Ⅲ期[OR=3.777(95%CI:1.399,10.194)]、淋巴结转移[OR=5.099(95%CI:1.715,15.156)]、miR-21表达升高[OR=4.889(95%CI:1.645,14.533)]、miR-193a-3p表达降低[OR=4.402(95%CI:1.481,13.084)]均是直肠癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特性曲线分析结果显示,血清miR-21、miR-193a-3p单一及联合预测结直肠癌预后的敏感性分别为69.04%(95%CI:0.487,0.813)、72.73%(95%CI:0.495,0.884)、86.36%(95%CI:0.640,0.964),特异性分别为62.22%(95%CI:0.513,0.720)、68.89%(95%CI:0.581,0.780)、90.00%(95%CI:0.814,0.950),曲线下面积分别为0.782、0.731和0.901。结论结直肠癌患者术前miR-21、miR-193a-3p表达与术后预后密切相关,且在结直肠癌患者的预后结局中表现出良好的预测效能。

MicroRNA-218、microRNA-193b在宫颈癌组织中的表达及与化疗耐药性的关系

目的 探讨microRNA-218(miR-218)、microRNA-193b(miR-193b)在宫颈癌组织中的表达及其与化疗耐药性的关系。方法 选取2018年1月-2023年1月成都医学院第一附属医院收治的101例行手术治疗的宫颈癌患者。患者均行紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂药物敏感性试验,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-218、miR-193b表达情况。比较癌组织、癌旁组织中miR-218、miR-193b表达情况,统计化疗药物耐药情况,分析宫颈癌组织中miR-218、miR-193b的表达与化疗耐药性的关系。结果 癌组织中miR-218相对表达量低于癌旁组织(P <0.05),miR-193b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05)。宫颈癌患者行体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂的耐药率分别为38.61%、46.53%、48.51%、26.73%和40.59%。宫颈鳞癌与宫颈腺癌患者对体外化疗药物紫杉醇、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、卡铂耐药率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。耐药患者癌组织中miR-218相对表达量均低于敏感患者,miR-193b相对表达量均高于敏感患者(P <0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,miR-218、miR-193b及两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性的敏感性分别为74.51%(95%CI:0.601,0.852)、70.59%(95%CI:0.560,0.821)、82.35%(95%CI:0.686,0.911),特异性分别为74.00%(95%CI:0.594,0.849)、78.00%(95%CI:0.637,0.880)、90.00%(95%CI:0.774,0.963),曲线下面积分别为0.754(95%CI:0.661,0.847)、0.743(95%CI:0.643,0.843)、0.890(95%CI:0.824,0.956)。结论 宫颈癌组织中miR-218表达低于癌旁组织、miR-193b表达高于癌旁组织,miR-218、miR-193b的表达水平与宫颈癌患者化疗耐药性有关,两者联合预测宫颈癌患者化疗耐药性效能良好。

微RNA-93-5p对多囊卵巢综合征患者卵巢颗粒细胞增殖的影响及机制

目的探讨血浆微RNA(miR)-93-5p对多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢颗粒细胞增殖的影响及其可能机制。方法选择2022年1月至2023年1月焦作市人民医院收治的120例育龄期PCOS患者为PCOS组,选择同期在本院体检的18例育龄期健康女性为对照组。收集2组受试者的年龄、体质量和身高,计算体质量指数(BMI)。2组受试者均在自然月经周期的卵泡期或黄体酮诱导的撤退性出血期采集空腹静脉血,采用电化学法测定血清黄体生成素(LH)、促卵泡激素(FSH)、总睾酮(TT)、抗米勒管激素(AMH)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)水平,并计算胰岛素抵抗稳态模型(HOMA-IR);采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测2组受试者血浆中miR-93-5p表达水平。取对数生长期人卵巢颗粒细胞KGN,以每孔3×10^(5)个细胞接种至6孔板中,随机分为miR-93-5p mimics组、LY294002+miR-93-5p组、AZD5363+miR-93-5p组、阴性对照(NC)组、空白对照组。miR-93-5p组KGN细胞转染miR-93-5p mimics;LY294002+miR-93-5p组KGN细胞转染miR-93-5p mimics,并于转染前1 h给予50 mmol·L^(-1) LY294002处理;AZD5363+miR-93-5p组KGN细胞转染miR-93-5p mimics,并于转染前1 h给予50μmol·L^(-1) AZD5363处理;NC组KGN细胞转染阴性对照质粒;空白对照组KGN细胞不做任何处理。应用qRT-PCR法检测各组KGN细胞中miR-93-5p表达,细胞计数试剂盒-8试验检测各组KGN细胞增殖情况。结果PCOS组与对照组受试者的年龄及FSH、ALT、AST水平比较差异无统计学意义(P>0.05);PCOS组患者的BMI、TT、AMH、LH、FINS、FBG、HOMA-IR显著高于对照组(P<0.05)。PCOS组患者血浆中miR-93-5p相对表达量显著高于对照组(t=-5.549,P<0.001)。miR-93-5p与TT、FINS、HOMA-IR呈中度正相关(r=0.434、0.622、0.586,P<0.001),与FBG和LH呈低度正相关(r=0.398、0.398,P<0.001)。ROC曲线显示,血浆miR-93-5p诊断PCOS的最佳临界值为1.380,曲线下面积为0.906(95%置信区间:0.839~0.973,P<0.001),敏感度为0.858,特异度为0.833,约登指数为0.691。miR-93-5p mimics组、LY294002+miR-93-5p组、AZD5363+miR-93-5p组KGN细胞中miR-93-5p相对表达量均显著高于空白对照组和NC组(P<0.05)。培养24、48、72 h时,miR-93-5p mimics组、LY294002+miR-93-5p组、AZD5363+miR-93-5p组KGN细胞的增殖能力显著高于空白对照组和NC组(P<0.05);LY294002+miR-93-5p组、AZD5363+miR-93-5p组细胞的增殖能力显著低于miR-93-5p mimics组(P<0.05)。结论PCOS患者血浆miR-93-5p呈过表达,miR-93-5p可能通过基于调控磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激B信号通路介导PCOS卵巢颗粒细胞增殖来参与PCOS的发生发展,血浆miR-93-5p水平对PCOS有一定的诊断价值。

胃癌患者血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93表达水平与病理特征及预后的关系

目的研究胃癌患者血清微小RNA(miR)-125b-5p、miR-144、miR-93表达水平与病理特征及预后的关系。方法回顾性选取2018年7月至2019年12月西安医学院第一附属医院收治的胃癌患者作为恶性组(80例),另选取该院同期收治的胃部良性病变患者作为良性组(93例)。统计两组血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93表达水平,比较不同病理特征胃癌患者血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93表达水平。胃癌患者随访3年,根据患者不同预后情况将其分为死亡组和存活组,比较死亡组和存活组血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93表达水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93表达水平单独及三者联合检测对胃癌患者预后的预测价值。结果恶性组血清miR-125b-5p、miR-93表达水平均高于良性组,血清miR-144表达水平低于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同TNM分期、分化程度、淋巴结转移情况、腹膜种植转移情况患者miR-125b-5p表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤最大径、TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况、腹膜种植转移情况、脉管浸润患者血清miR-144、miR-93表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组纳入33例患者,存活组纳入47例患者。死亡组血清miR-125b-5p、miR-93表达水平均高于存活组,miR-144表达水平低于存活组,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93单独检测预测胃癌患者预后的曲线下面积分别为0.737、0.757、0.738,均低于三者联合检测的0.887(Z=2.123、2.362、2.308,P<0.05)。结论胃癌患者、胃部良性病变患者及不同病理特征、不同预后胃癌患者血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93表达水平存在明显差异,血清miR-125b-5p、miR-144、miR-93联合对胃癌患者预后具有较好的预测价值,有望成为预测胃癌患者预后的标志物。

MicroRNA-196b、IGFBP-3在非小细胞肺癌组织中的表达及与预后关系

目的 探究microRNA-196b(miR-196b)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及与预后的关系。方法 选取2020年4月—2022年4月在无锡市第二人民医院手术治疗的NSCLC患者78例。收集患者的病历资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测癌组织、癌旁组织中miR-196b、IGFBP-3的表达。所有患者随访12个月,根据预后结局分为进展组、稳定组。筛查NSCLC患者预后的影响因素,评估组织中miR-196b、IGFBP-3表达对NSCLC患者预后的预测效能。分析癌组织中miR-196b、IGFBP-3不同表达患者生存曲线的差异。结果 进展组临床分期Ⅲ期占比、术前淋巴结转移率均高于稳定组(P <0.05)。进展组癌组织miR-196b相对表达量高于稳定组(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于稳定组(P <0.05)。癌组织miR-196b相对表达量高于癌旁组织(P <0.05),IGFBP-3阳性表达率低于癌旁组织(P <0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:临床分期[O^R=3.684(95%CI:1.259,10.778)]、术前淋巴结转移[O^R=3.557(95%CI:1.216,10.408)]、癌组织miR-196b表达[O^R=3.979(95%CI:1.359,11.641)]是NSCLC患者预后的危险因素(P <0.05),癌组织IGFBP-3表达阳性[O^R=0.220(95%CI:0.075,0.642)]是NSCLC患者预后的保护因素(P <0.05)。癌组织miR-196b、IGFBP-3及联合预测NSCLC患者预后的敏感性分别为66.25%(95%CI:0.512,0.797)、60.00%(95%CI:0.496,0.781)、87.50%(95%CI:0.725,0.963),特异性分别为69.74%(95%CI:0.534,0.825)、76.32%(95%CI:0.603,0.892)、72.37%(95%CI:0.576,0.861),曲线下面积分别为0.703、0.680、0.805。miR-196b低表达组生存情况优于高表达组(P <0.05)。IGFBP-3阳性表达组生存情况优于阴性表达组(P <0.05)。结论 NSCLC患者癌组织miR-196b、IGFBP-3表达与预后相关,且联合预测NSCLC患者预后效能良好。

miR-93靶向TLR4/NF-κB信号通路对动脉粥样硬化大鼠血管内皮炎症反应的影响

目的 探究微小核RNA(miR)-93对Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB的调控作用及对动脉粥样硬化(AS)大鼠血管内皮炎症反应的影响。方法 大鼠经高脂饲料喂养+腹腔注射维生素D3复制AS模型,随机分为正常对照组、模型组、miR-93模拟物(miR-93 agomir)组、agomir-NC组、RS09(TLR4激活剂)组、miR-93 agomir+RS09组,每组15只,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血脂[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]和炎症因子[白细胞介素(IL)-6、C反应蛋白(CRP)]水平;流式细胞术检测循环内皮细胞比例以评价血管内皮损伤状况;Movat染色观察动脉血管泡沫细胞聚集状况;油红O染色检测斑块面积;免疫组化法检测M1型巨噬细胞标记抗体(CD11)阳性表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-93表达;Western印迹法检测TLR4/核因子(NF)-κB通路蛋白、脂质沉积相关蛋白如三磷酸腺苷(ATP)结合盒转运体(ABC)A1、载脂蛋白(Apo)A1、巨噬细胞清道夫受体(ScR)-A、凝集素型氧化低密度脂蛋白受体(Lox)-1、M1型巨噬细胞极化相关蛋白[IL-1β、诱导型一氧化氮(iNOS)]、M2巨噬细胞极化相关蛋白[IL-10,几丁质酶-3样蛋白3(YM1)]表达。结果 与正常对照组相比,模型组动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积严重,斑块面积比例、IL-6、CRP、循环内皮细胞比例、TG、TC、LDL-C水平、TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化、炎症应答活性均明显升高,HDL-C、miR-93表达明显降低(P<0.05)。外源性上调miR-93,可明显促进脂质转运相关蛋白ABCA1及ApoA1表达,明显抑制TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,缓解大鼠动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积,明显降低斑块面积及循环内皮细胞比例(P<0.05)。RS09可明显促进TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,并可拮抗miR-93 agomir发挥的上述作用(P<0.05)。结论 外源性上调miR-93表达可能通过靶向抑制TLR4/NF-κB通路活化,发挥抗炎、抗M1型巨噬细胞极化、抗泡沫细胞聚集及抗脂质沉积作用,改善AS大鼠血管内皮损伤。

机械通气肺损伤患者微小RNA-93表达情况及临床意义

目的探讨微小RNA-93(miR-93)在机械通气肺损伤中的表达及临床意义。方法选取2021年3月至2022年10月在赣南医学院第一附属医院ICU治疗的机械通气肺损伤患者50例作为观察组,同时选取机械通气无肺损伤患者100例作为对照组,检测两组血清miR-93、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-8(IL-8)的差异。结果观察组血清miR-93相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而TNF-α、IL-1β和IL-8高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组重度肺损伤患者血清miR-93相对表达量低于轻中度患者,差异有统计学意义(P<0.05),而TNF-α、IL-1β和IL-8高于轻中度患者,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-93与Murray肺损伤评分呈负相关(r=-0.445,P<0.05)。血清miR-93与TNF-α、IL-1β、IL-8呈负相关(r=-0.394、-0.405、-4.111,P<0.05)。miR-93相对表达量诊断肺损伤的AUC为0.815,截断值为2.50,灵敏性和特异性分别为92.00%和58.00%;miR-93相对表达量诊断重度肺损伤的AUC为0.823,截断值为1.72,灵敏性和特异性分别为66.70%和84.40%。结论机械通气肺损伤患者血清miR-93表达下调,与患者肺损伤严重程度呈负相关,在诊断肺损伤及严重程度方面有一定应用价值。

miR-93-5p通过PI3K/AKT通路调控HepG2细胞自噬

目的:探究miR-93-5p对HepG2细胞增殖、自噬、葡萄糖消耗以及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)通路的影响。方法:高浓度葡萄糖诱导构建胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)细胞模型,设计合成miR-93-5p inhibitor和NC,结合自噬抑制剂3-MA,将细胞分为Control组、IR组、IR+inhibitor NC组、IR+inhibitor组、IR+3-MA+inhibitor组。CCK8法检测各组细胞增殖活力,试剂盒检测各组细胞葡萄糖消耗量和细胞糖原合成情况,Western-Blot法检测细胞自噬基因微管相关蛋白1轻链3(autophagy genes microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)-I、LC3-II、肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)蛋白、PI3K/AKT通路蛋白(AKT、p-AKT)的表达。结果:与对照组相比,IR组细胞增殖活力、葡萄糖消耗量和细胞糖原合成量、HGF蛋白、LC3-II蛋白表达下降(P<0.01),LC3-I蛋白和p-AKT/AKT值表达均增加(P<0.01)。与IR组和IR+inhibitor NC组相比,IR+inhibitor组细胞增殖活力、葡萄糖消耗量和细胞糖原合成量、HGF蛋白、LC3-II蛋白表达增加(P<0.01),LC3-I蛋白和p-AKT/AKT值表达均下降(P<0.01)。与IR+inhibitor组相比,3-MA能逆转miR-93-5p inhibitor的作用。结论:miR-93-5p通过PI3K/AKT通路促进HepG2细胞自噬,进而抑制胰岛素抵抗,缓解糖尿病造成的机体损伤。

脓毒症并发急性肾损伤患儿血清中miR-93-5p和miR-424-5p的表达及临床意义

目的探讨血清中微小RNA-93-5p(miR-93-5p)和微小RNA-424-5p(miR-424-5p)在脓毒症并发急性肾损伤(S-AKI)患儿中的表达水平及其临床意义。方法选取2019年11月至2021年11月南阳市中心医院综合ICU收治的116例脓毒症患儿作为研究对象,根据脓毒症患儿是否并发AKI分为AKI组60例和非AKI组56例;比较两组患儿的一般资料和血清miR-93-5p、miR-424-5p及肾功能指标[血肌酐(Scr)、胱抑素C(Cys-C)]水平;采用Pearson法分析S-AKI患儿血清miR-93-5p、miR-424-5p与肾功能指标的相关性;采用多因素Logistic回归分析脓毒症患儿并发AKI的影响因素;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-93-5p、miR-424-5p水平对脓毒症患儿并发AKI的诊断价值。结果AKI组患儿的尿量为(1.52±0.31)mL·kg^(-1)·h^(-1)、血清miR-93-5p表达水平为0.62±0.14,均明显低于非AKI组的(1.87±0.36)mL·kg^(-1)·h^(-1)、(1.02±0.21),急性生理学与慢性健康状况评分(APACHEⅡ评分)、序贯器官衰竭评分(SOFA评分)、血清miR-424-5p表达水平、Scr、Cys-C水平分别为(17.35±5.01)分、(5.77±1.80)分、(2.36±0.51)、(182.84±43.31)μmol/L、(1.63±0.39)mg/L,明显高于非AKI组的(14.96±4.12)分、(5.10±1.41)分、(1.01±0.23)、(91.51±28.34)μmol/L、(0.96±0.28)mg/L,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson法分析结果显示,S-AKI患儿血清miR-93-5p与Scr、Cys-C呈负相关(r=-0.621、-0.720,P<0.05),miR-424-5p与Scr、Cys-C呈正相关(r=0.503、0.538,P<0.05);经多因素Logistic回归分析结果显示,miR-424-5p、Scr、Cys-C是影响脓毒症患儿并发AKI的危险因素,miR-93-5p是保护因素(P<0.05);经ROC分析结果显示,血清miR-93-5p、miR-424-5p以及两者联合诊断脓毒血症患儿并发AKI的AUC分别为0.856、0.860、0.949,联合诊断的敏感度为90.00%,特异性为91.07%,两者联合优于血清miR-93-5p、miR-424-5p各自单独诊断(Z两者联合-miR-93-5p=2.897、Z两者联合-miR-424-5p=2.706,P=0.004、P=0.007)。结论S-AKI患儿血清miR-93-5p水平显著下调,miR-424-5p水平显著上调,两者联合诊断脓毒血症患儿并发AKI具有更高价值。