靶向YB-1的microRNA表达载体的构建及其对MB-MDA-231细胞增殖的影响

目的:构建靶向YB-1基因的microRNA表达载体,研究其对乳腺癌细胞MB-MDA231增殖的影响。方法:采用microRNA靶基因预测软件预测可能作用于YB-1基因的micro RNA,构建其过表达载体,利用Lipofectamine2000转染细胞MB-MDA231,荧光显微镜下评估转染效果,real-time PCR检测microRNA137表达,real-time PCR、Western blot分别检测YB-1mRNA、蛋白水平的表达,双荧光酶素分析microRNA137作用位点,MTT检测MB-MDA231细胞转染后增殖情况;结果:酶切、测序结果表明pGensill-pre-mir137载体构建成功,real-time PCR结果表明pGensill-pre-mir137实验组细胞较对照组mir137表达明显增高(P<0.05);RT-PCR、Westernblot显示实验组转染后YB-1mRNA和蛋白水平表达较对照组均降低(P<0.05);双荧光素酶分析显示共转染microRNA137表达载体与荧光报告载体后,荧光素酶活性较对照组降低30%;MTT法检测显示转染实验组较对照组细胞增值能力降低(P<0.05)。结论:靶向YB-1基因的microRNAl37表达载体构建成功,microRNA137可通过靶向YB-1的3’非编码区,抑制MB-MDA231 YB-1基因的表达而影响其增殖。

微小RNA137基因与精神分裂症的关联研究

目的:探索微小RNA137(miR-137)基因与中国汉族精神分裂症及其临床表现之间的关系。方法:采用改良的多重连接酶检测反应技术(iMLDR)对254例稳定期精神分裂症患者(病例组)和339名健康对照者(对照组)miR-137基因rs1625579位点进行分型;采用阳性和阴性症状量表(PANSS)和重复性神经心理状态测验(RBANS)评定患者精神病性症状和认知功能,分析rs1625579位点与疾病及其症状间的关系。结果:病例组与对照组miR-137基因rs1625579位点基因型的观察值和期望值Hardy-Weinberg平衡吻合度良好(P=0.27;P=0.30);病例组和对照组比较miR-137基因rs1625579位点基因型和等位基因频率差异无统计学意义(χ~2=0.80,P=0.37;χ~2=0.75,P=0.39)。携带rs1625579位点G/T和T/T患者PANSS和RBANS评分比较差异无统计学意义(P均>0.05)。结论:本研究结果不支持miR-137基因是精神分裂症的易感基因。