microRNA20b调节PPARγ抑制缺氧/复氧诱导的内皮细胞凋亡

目的:观察microRNA20b对缺氧/复氧诱导内皮细胞凋亡的影响。方法:采用人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)建立缺氧/复氧损伤细胞模型。将生长状态良好的HUVECs随机分为正常对照组(Normal组)、缺氧后阴性对照组(HR+NC组)、缺氧后microRNA20b过表达组(HR+20b组)、缺氧后阴性对照抑制组(HR+IN NC组)和缺氧后microRNA20b抑制组(HR+IN20b组)。缺氧前24 h采用lipofectamine2000将Negative Control、microRNA20b mimics、inhibitor Negative Control、microRNA20binhibitor分别转染入后四组细胞,然后缺氧培养12 h后复氧4 h。采用免疫荧光检测过氧化物酶体增值物受体γ(PPARγ)蛋白的变化,Annexin V-FITC/PI流式双染法检测细胞的早晚期凋亡率,Western blot检测PPARγ以及凋亡相关蛋白Bax、抗凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平。结果:与Normal组相比,缺氧/复氧损伤后各转染组PPARγ蛋白表达升高,凋亡率升高。与HR+NC组相比,HR+20b组的PPARγ及凋亡相关蛋白Bax表达降低、抗凋亡相关蛋白Bcl-2表达升高,凋亡率降低[(7.70+0.85)%vs(18.20+1.05)%,P<0.05]。与HR+IN NC组相比,HR+IN 20b组的PPARγ及凋亡相关蛋白Bax表达升高、抗凋亡相关蛋白Bcl-2表达降低,凋亡率升高[(18.9+3.05)%vs(13.0+2.25)%,P<0.05]。结论:microRNA20b靶向作用于PPARγ抑制缺氧/复氧损伤诱导的内皮细胞凋亡。