ERA实时荧光法快速检测乙肝病毒的建立与应用

基于酶促重组等温扩增(ERA)技术构建一种快速检测乙肝病毒的实时荧光检测方法。根据乙肝病毒聚合酶编码区(P区)保守序列设计引物和探针,对引物、温度、荧光探针浓度等反应条件进行优化,建立ERA实时荧光法最佳反应体系,再对其敏感性、特异性、抗干扰能力、临床样本检出效果进行验证。结果显示:ERA实时荧光法在42℃、20 min内可完成对乙肝病毒的检测,最低检出限为102 copies/μL;除乙肝病毒外,其他4种病毒(甲肝病毒、丙肝病毒、EB病毒、巨细胞病毒)均未产生荧光扩增曲线,具有良好的特异性和抗干扰能力;以实时荧光PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法检测58份乙肝病毒临床样本的灵敏度为97.37%、特异度为100%、阴性预测值为95.24%、阳性预测值为100%、Kappa值为0.96。成功建立了一种简单、快速、灵敏、特异、低成本的乙肝病毒早期检测方法,满足乙肝病毒快速检测的需要。

常见致病真菌所致角膜炎的激光扫描共焦显微镜图像特点分析

背景真菌性角膜炎仍是中国主要的感染性眼病，传统的确诊方法主要是角膜刮片后进行菌种培养。激光扫描共焦显微镜检查是近年来使用的无创性活体眼表检查的方法，但目前关于真菌性角膜炎病灶区相关检查特点的研究工作尚不够系统和完善。目的研究和分析中国常见的4种致病菌引起的真菌性角膜炎的激光扫描共焦显微镜检查特点。方法采用回顾性研究设计，对2007年1月至2011年11月在南京军区南京总医院初诊且进行激光扫描共焦显微镜检查的65例真菌性角膜炎患者的临床资料进行分析，患者均为单眼患病。所有患眼均进行角膜真菌的实验室培养和激光扫描共焦显微镜检查，对不同菌种引起的真菌角膜炎激光扫描共焦显微镜图像特点进行分析，主要包括菌丝的特点、孢子的分布及菌丝与病灶周围组织反映的关系，并总结激光扫描共焦显微镜下真菌菌丝与其他角膜组织的鉴别要点。结果角膜感染菌的实验室培养结果显示，本研究中纳入的患眼中镰刀菌角膜感染者占63．0％，曲霉菌感染者占16．9％，念珠菌感染者占3．0％，链格孢霉菌感染者占4．6％。激光扫描共焦显微镜检查显示，镰刀菌感染性角膜炎病灶中的菌丝在角膜浅基质层呈树枝样高反光，而在深基质层表现为线型，病灶区炎性细胞较少；念珠菌感染性角膜炎病灶中的假菌丝位于角膜浅、中基质层，有散在的孢子和炎性细胞浸润，基质纤维增生活跃；曲霉菌感染病变区的菌丝呈蠕虫状，形状较镰刀菌细且短；链格孢霉菌感染病灶区的菌丝长、直且粗大，并有球形厚垣孢子位于菌丝顶端。激光扫描共焦显微镜下各种真菌性角膜炎病灶区的菌丝与角膜上皮下神经丛、树突状细胞、角膜的增生纤维等均表现为高反射，但其形状、分布及走行均有所不同。结论真菌菌丝是诊断和鉴别真菌性角膜炎感染菌属的主要依据，激光扫描共焦显微镜可在活体提供有用的相关信息，为真菌性角膜炎的早期诊断和治疗提供可靠依据。

用单克隆抗体免疫酶染法快速诊断甲乙型流感

用单克隆抗体(简称单抗)免疫荧光法快速诊断流感,国外和国内均有报道,但用单抗免疫酶染法国外报道较少,国内则未见报道。为了便于广大基层使用,我们建立了简便,快速、敏感地诊断流感的免疫酶染色法(IE)。方法是将呼吸道标本接种于MDCK细胞后,于不同时间用我们自制的抗甲型和乙型流感病毒型特异性单克隆抗体进行间接免酶染色,以检查细胞内表达的病毒相关抗原。

阻抗法在食品微生物快速检测中的应用

阻抗法作为一种高效的微生物快速检测方法,在食品工业中具有广泛的应用前景。文章介绍了阻抗法检测微生物的原理及其在检测菌落总数、酵母菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌以及商业无菌等方面的应用。

作物氮素无损快速营养诊断研究进展

植物的氮素营养诊断技术方法有化学诊断和无损测试诊断,其中化学诊断包括植株的全氮诊断和植株硝酸盐快速诊断;而无损测试技术则包括叶绿素荧光动力学诊断法、叶绿素仪法、机器视觉、光谱遥感等。根据作物氮素营养诊断方法的发展,总结了各种作物氮素营养诊断方法的优缺点,提出无损快速诊断技术可作为农作物生产上的氮素营养测定方法,有着广泛的研究和应用前景。

人工关节感染微生物分子诊断的研究进展

准确的微生物诊断是人工关节感染治疗成功的关键,但传统微生物培养方法诊断的敏感性和特异性均不高,且耗时长。微生物分子诊断方法直接检测样本中微生物的核酸,具有检测灵敏度高、检测时间短等优点,可有效弥补培养方法的不足,提高人工关节感染的微生物检出率。本文回顾了近年来分子诊断方法在人工关节感染微生物诊断中的应用和研究进展,归纳和比较了不同的分子诊断技术体系的特点,为临床的应用和研究提供参考。

含氮功能基高分子胶乳的研制及其在多种疾病快速诊断中的应用

报告近年来我们研制的含有氮功能基（ＮＨ２、ＣＯＮ３ 等）的高分子胶乳载体的制备、性质及其在疾病快速诊断中的应用。即重氮化聚苯乙烯胶乳，三元共聚重氮化胶乳、叠氮胶乳及细胞标记用彩色高分子胶乳。用三元共聚重氮胶乳制备了登革病毒免疫快诊试剂，其检出敏感性达８２．３％ ，且５ ｍ ｉｎ 即出结果；检测登革热病人急性期血清标本４０ 例；同时与ＰＣＲ（聚合酶链反应）及病毒分离方法进行比较，结果表明三种方法的联合检出率为９２．５％ ，而胶乳凝集法的敏感性与ＰＣＲ 类似（７５％ ），高于病毒分离方法（５５％ ），但时间仅为ＰＣＲ 法的几十分之一。用叠氮胶乳检测类风湿因子、ＨＣＧ 抗体及登革病毒也取得了较好的检验效果。

微生物快速检验技术进展

传统的微生物分离、 培养与鉴定需时较长,难以适应诊断、治疗的需要。近年己发展了多种快速诊断方法,可在常规微生物实验室应用。如自血、尿、粪便、脑脊液中直接检查微生物的抗原或抗体,应用细菌的专有酶和酶的产色或荧光底物进行快速鉴定,应用各种载体的快速凝集试验,自标本中直接检查细菌的毒素以及快速细菌药敏试验等。

胶体染料试纸条法快速诊断家畜血吸虫病的研究

为了适应现场家畜血吸虫病的筛查需要 ,设计了简便快速的胶体染料试纸条诊断技术用于检测家畜血清中的抗血吸虫抗体 ,以该方法检测血吸虫病牛、猪血清 83份 ,其结果为阳性检出率 1 0 0 %,健康牛、猪血清 73份的检测结果为阴性符合率分别为 95 .3 %和 94.0 %,与感染肝片形吸虫的牛、羊血清 1 6份的交叉反应率为 1 8.8%。表明本方法敏感性高 。

食品微生物检测中快速检测方法的运用

随着经济的不断发展,人们对食品的安全问题也越来越重视,在食品微生物检测中运用快速检测法不仅可检测出食品中的微生物,提升检测效率,还可确保人们的健康与食品的安全。本文主要探讨食品微生物检测中快速检测方法,以此提升食品的安全性,推动食品行业的持续发展。

电极法快速诊断VTEC O157的药物敏感性

目的使用细菌氧化还原反应实验模型,以电极、计算机的组合技术,快速诊断VTEC O157的药物敏感性。方法 VTEC O157经抗生素处理后,将其附着在工作电极表面,在工作电极与对极之间以10 mV/s的递增速率输入阶梯形递增电压,计算机同步记录电压在0.00～1.00 V范围内的伏安图谱。根据伏安图谱上的峰电流值,判断VTEC O157对抗生素的敏感性;峰电流值≤2.5μA为敏感(S),峰电流值≥3.0μA为耐药(R),峰电流值2.6～2.9μA为中敏(M)。对照组采用常规琼脂扩散法诊断VTEC O157的药物敏感性。结果采用电极法,伏安图谱的记录及相关峰电流值数据的测定可在2 min内完成。本研究使用的VTEC O157菌株对13种抗生素的药敏试验结果表明,对Penicillin及Lincomycin二种抗生素不敏感,对Ampicillin及Erythromycin中度敏感,对余下的9种抗生素敏感。其结果同采用琼脂扩散法的结果一致。结论根据伏安图谱中峰电流值的大小,可间接判断VTEC O157对抗生素的敏感性。电极法的峰电流值与琼脂扩散法的抑菌圈直径成反比。

乳腺癌保乳术切缘刮片细胞学与快速组织学诊断的对比研究

目的:探讨术中切缘刮片细胞学与快速病理组织学对乳腺癌保乳术切缘的诊断价值。方法:6例患者行乳腺癌保乳术,术中对乳腺癌切缘行细胞学刮片同时取活检行快速组织学观察,并与术后病理诊断对比研究。结果:6例共24次切缘刮片细胞学诊断错误1次,冰冻检查诊断错误1例,两者联合应用诊断正确率100%。结论:术中刮片细胞学快速实用,与快速组织学检查同时使用可提高残端癌的检出率,同时掌握好乳腺导管上皮内瘤变的刮片细胞学形态,可更好预测残端癌发生的危险性。

鸡蛋中抗生素残留微生物法快速检测的研究

抗生素在蛋鸡饲养中应用广泛,其残留直接影响着食品安全。为了达到对鸡蛋中抗生素的全项、定性、快速检测要求,特试验了EXPLORER试剂盒的微生物法检测鸡蛋中抗生素,发现该方法能快速、简便,能定性检测青霉素、金霉类、土霉素、四环素等数种抗生素。

MPB64免疫胶体金法在新发肺结核患者中的应用

目的对免疫胶体金法、痰涂片抗酸染色法以及上海市疾病预防控制中心结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculosis complex,MTC)菌群鉴定等3种检测结果进行比较,评价MPB64免疫胶体金法在疑似新发肺结核患者中的临床应用价值。方法选取2018年9月至2019年8月经MGIT 960液体分枝杆菌培养仪培养阳性的疑似新发肺结核患者210例,首先进行MPB64免疫胶体金法检测,然后将标本转种至固体中性罗氏培养基中,待菌落在固体培养基中长势良好时,将其送至上海市疾病预防控制中心结核病防治科进行分枝杆菌菌群鉴定(PNB法、TCH法和28℃培养试验)。最后,比较分析胶体金法与传统的痰涂片抗酸染色法在检测抗酸杆菌阳性率方面的差异,并比较胶体金法检测结果与上海市疾病预防控制中心菌群鉴定结果之间的差异,分析胶体金法在菌群鉴定方面的敏感性、特异性以及准确度。结果210例疑似新发患者中,痰涂片抗酸染色阳性率为48.57%(102/210),MPB64免疫胶体金法阳性率为90.00%(189/210)。经上海市疾病预防控制中心菌群鉴定,其中结核分枝杆菌复合群感染187例,阳性率为89.05%(187/210),非结核分枝杆菌复合群23例,占比为10.95%(23/210)。与上海市疾病预防控制中心菌群鉴定结果比较,胶体金法在确诊结核分枝杆菌复合群感染中的敏感性为97.86%(183/187),特异性为73.91%(17/23),准确度为95.24%(200/210)。结论MPB64免疫胶体金法作为一种敏感性、特异性、准确度均较高的结核分枝杆菌快速检测方法,操作简便、快速、无需特殊仪器设备,适合于各基层试验应用于肺结核病的临床诊断。

微生物法快速检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量

建立了一种高效快速检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量的微生物方法。方法通过改进试验用菌的保存和传代,优化样液制备和加样体积,结合八道排枪同时加样操作和96孔酶标板技术进行检测,减少了试验步骤和试验误差。结果表明,方法标准曲线相关系数为0.999 2,检出限为2μg/100 g,样品平行试验的相对标准偏差（RSD）在7.5%~9.5%之间,加标回收率在93.3%~105%之间,检测周期缩短为2 d。与国标方法等相比较,本方法具有简单快速、灵敏度高、重现性好等特点,可准确快速检测婴幼儿配方乳粉中叶酸含量。

食品微生物检测中快速检测法的应用分析

微生物会在很大程度上影响食品安全,因此非常有必要做好食品微生物检测工作。但以往的微生物检测方法比较复杂,很难满足现代食品检验的检测流程,因此应积极引入快速检测法。本文主要介绍了食品微生物检测中较为常用的几种快速检测法,希望为相关工作者提供参考。

2种微生物试剂盒法快速检测乳粉中叶酸含量

目的 对2种商业化试剂盒法检测婴幼儿配斱乳粉中叶酸含量的结果迚行对比研究。方法 通过制作标准曲线,加标回收试验及样品重复性试验对2种试剂盒迚行比对。结果 研究表明2种试剂盒的叶酸标准曲线相关系数均在0.999以上;样品加标回收试验的加标回收率均在90%～100%之间,符合试剂盒加标回收要求;样品重复性试验结果相对标准偏差均小于5%。结论 2种商业化叶酸试剂盒具有操作简单、实验周期短、重复性较好等特点,可快速检测婴幼儿配斱乳粉中叶酸的含量。

基于生长时间光谱法的大肠菌群快速检测仪器的设计

针对微生物快速检测的需求,基于生长时间光谱法设计了大肠菌群快速检测仪器.根据大肠菌群指数生长期与大肠菌群浓度的关系来计算大肠菌群初始浓度;采用分光光度法对大肠菌群的指数生长时间进行检测;通过实验确定了625 nm作为分光光度检测波长;设计了基于双积分球的仪器光路结构,提高了仪器对透过率的测量稳定性,采用样品从实验开始时的初始透过率降低至初始透过率的70%时所需时间作为生长时间,显著降低了检测所需时间,对大肠菌群100 cfu/m L的检测,只需要276 min.建立了大肠菌群的生长时间与大肠菌群初始浓度的数学模型.设计实验评价了本方案平行样标准偏差小于12. 61%;与滤膜法进行比对,相关系数0. 979.

矿井瓦斯防治系统快速诊断评价方法研究

根据我国矿井瓦斯防治要求以及现场实际情况,首先运用层次分析法建立矿井瓦斯防治系统层次体系,然后运用基于层次分析法的模糊综合评价方法对矿井瓦斯防治系统进行快速的诊断评价。模型演示结果表明,五阳煤矿瓦斯防治系统处于良好状态,保持这种状态可以有效的促进矿井的安全生产,同时可以根据不同状态采取相应的措施,保障矿井瓦斯防治系统的安全。

基于最小二乘法的婴幼儿头型检测方法研究

针对婴幼儿头部畸形缺乏快速测量诊断方法,精确测量依赖于3D扫描仪,成本高昂、缺乏统一指标等问题,设计了一种新型婴幼儿头型测量诊断机构。首先给出了该设备的检测原理及数据采集方法;其次详细介绍了基于最小二乘法的椭圆拟合快速检测方法,该方法可以直观地获得婴儿头部的各项参数,快速有效地获得被检测婴幼儿头型信息。最后通过示例证明,该方法能够快速检测出婴幼儿头型轮廓,为婴幼儿的临床检查提供了方便有效的途径。