新型聚乙烯醇微囊的制备及其结构性能研究

采用低温物理交联法制备新型聚乙烯醇微囊,所得微囊机械强度好,克服了目前普遍采用的海藻酸钠-聚赖氨酸-海藻酸钠(APA)微囊易碎的缺点,在APA微囊已完全破碎的机械强度下,聚乙烯醇微囊的破碎率仅为3%.在体外模拟肠胃生理极限条件下可保持稳定的物理化学性质,对尿素、尿酸和肌酐等小分子具有良好的通透性,能在10min内完全通透.将高效分解尿素的脲酶基因工程菌E.coliDH5包埋于聚乙烯醇微囊之中,其工程菌仍具有很高的分解尿素能力,其活力约为自由菌的80%.

抗高血压肽在大肠杆菌中表达的研究

本研究根据已经公开发表的具有降血压作用的来源于酪蛋白的一段多肽氨基酸序列CEI12,人工合成了一段双链DNA分子,经酶切后与表达载体pQE16连接,转化进入到大肠杆菌E.ColiJM109和E.ColiDH5嶂校又猩秆〕鲅粜灾刈榭寺。⒔杏盏急泶铮璖DS-PAGE电泳分析和westernblotting蛋白质印迹检测表明,该抗高血压小肽CEI12(与DHFR融合后)在E.ColiJM109中得到了成功表达。

重组大肠杆菌发酵生产二倍体质粒的研究

随着基因治疗和基因疫苗的发展,急需大量的非病毒载体质粒DNA.主要对重组大肠杆菌E.coliDH5α发酵生产pUC21二倍体质粒的培养基组分和补料分批培养的葡萄糖流加策略进行了研究.初步确定的培养基组分是以葡萄糖作碳源,酵母粉作氮源,并且添加磷酸盐、硫酸镁、柠檬酸和微量元素.研究发现溶氧反馈流加是比较好的流加葡萄糖的补料策略,它能把葡萄糖浓度控制在较低的水平,从而避免产生乙酸效应.溶氧反馈流加发酵的最大生物量可达30.84g/L,质粒pUC21-Dimer的最大产量达96.38mg/L.该研究为重组大肠杆菌生产二聚体质粒建立了优化工艺,对大规模生产作为基因治疗的多聚体质粒具有指导意义.