骨桥蛋白和整合素αⅤ表达与喉和下咽鳞状细胞癌侵袭转移的相关性

目的:探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)及其受体整合素αⅤ(integrin αⅤ,ITGAⅤ)在喉和下咽鳞状细胞癌(laryngeal and hypopharyngeal squamous cell carcinoma,LHSCC)中的表达及其对肿瘤侵袭转移等生物学行为的影响。方法:设计并制作喉和下咽鳞状细胞癌组织芯片,应用免疫组织化学技术在组织芯片上检测OPN和ITGAⅤ蛋白表达,应用专业级病理图像处理软件(Image Pro Plus 5.02,IPP 5.02)对免疫组织化学染色结果进行相对定量,分析OPN和ITGAⅤ的表达量与喉和下咽鳞状细胞癌临床病理分期的相关性。结果:原发癌及转移癌中OPN和ITGAⅤ的表达量均明显高于正常黏膜,差异有统计学意义(P<0.001);高分化组的OPN和ITGAⅤ表达量明显低于中分化组和低分化组,差异均有统计学意义(P<0.001);有淋巴结转移组的OPN和ITGAⅤ表达量明显高于无淋巴结转移组(P<0.001);2者的表达量与肿瘤的原发部位、浸润范围以及患者的年龄、性别等因素均无相关性。结论:OPN和ITGAV的表达与喉和下咽鳞状细胞癌的侵袭转移相关,OPN和ITGAⅤ的过表达可能是促成喉癌和下咽癌侵袭转移的重要因素之一。

蛇床子素通过上调微RNA-101a-3p抑制阿尔茨海默病细胞淀粉样前体蛋白表达

目的:研究阿尔茨海默病细胞模型中蛇床子素抑制淀粉样前体蛋白(APP)的作用及机制。方法:脂质体2000转染建立APP高表达的SH-SY5Y细胞模型。利用MTT和乳酸脱氢酶(LDH)法检测蛇床子素对APP高表达细胞的存活率和损伤程度的影响。利用基因芯片技术筛选给予蛇床子素治疗后差异表达的微RNA(miRNA),然后通过生物信息学分析预测与差异表达miRNA靶向结合的基因。细胞内转入差异表达miRNA的抑制剂,然后采用免疫荧光细胞化学法观察细胞中APP、β淀粉样蛋白(Aβ)表达情况,RT-PCR法检测细胞中APP mRNA表达。结果:实验成功构建了APP高表达的阿尔茨海默病细胞模型。MTT和LDH法检测结果显示,蛇床子素对于APP高表达的细胞具有一定的保护作用,可以减轻细胞的损伤。miRNA-101a-3p是蛇床子素调控较明显的miRNA,其与APP的3'非翻译区靶向结合。与模型对照组比较,miR-101a-3p抑制剂组APP和Aβ蛋白荧光强度增加,APP mRNA表达量增加(均P<0.01);加入蛇床子素后细胞中APP和Aβ蛋白荧光强度降低,APP mRNA表达量减少(均P<0.01)。结论:在阿尔茨海默病细胞模型中,蛇床子素通过上调miR-101a-3p抑制APP表达。

非小细胞肺癌组织COX-2和p53表达及其临床意义的研究

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和p53表达与病理特征和预后之间的关系。方法:将88例NSCLC及10例正常肺组织标本制作成组织芯片,应用免疫组织化学SP法检测COX-2和p53的表达,并与临床病理特征及长期生存率进行比较分析。结果:COX-2胞质和p53胞核阳性表达率分别为71.6%(63/88)和35.2%(31/88),而正常肺组织均为阴性。NSCLC患者的COX-2(χ2=20.045,P=0.000)和p53表达(χ2=5.153,P=0.028)均明显高于正常肺组织。COX-2和p53表达无相关性,P=0.694。COX-2在女性(χ2=8.213,P=0.005)、不吸烟(χ2=5.086,P=0.027)、腺癌(χ2=12.137,P=0.001)、淋巴结转移阳性(χ2=9.475,P=0.003)和Ⅲ期(χ2=6.761,P=0.017)患者中表达升高,与年龄、分化程度和肿瘤大小无关。COX-2表达者生存时间短,χ2=5.986,P=0.014。p53表达与年龄等临床参数和生存期均无关,P均>0.05。多因素分析显示,COX-2和p53不是影响NSCLC预后的独立危险因素。结论:COX-2阳性表达者预后差,可能在预后判定中有重要作用。

基因芯片研究小金丹对人肝癌细胞信号转导基因表达的影响

目的观察中药复方小金丹对人肝癌细胞信号转导基因表达的影响。方法制备小金丹含药血清,用不同浓度的小金丹含药血清处理人SMMC-7721细胞。采用基因芯片技术检测小金丹含药血清处理后人肝癌细胞SMMC-7721细胞信号转导基因表达变化。结果小金丹处理SMMC-7721细胞后,所检测的96个信号转导基因中,有77个基因的表达出现显著上调或下调(比值<0.5或>2.0)。剂量不同,其影响的基因种类和程度也有所不同。结论小金丹可显著影响人肝癌细胞信号转导基因的表达。

APE1在肝细胞癌组织芯片的表达及临床病理意义

目的探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(APE1)基因在原发性肝细胞癌(HCC)的表达及其与临床病理变化的关系。方法应用免疫组织化学方法,检测包含HCC及转移灶、癌旁肝硬化组织、癌旁慢性肝炎组织和正常肝组织的组织芯片中APE1的表达情况,结合临床病理资料进行统计分析。结果APE1在癌旁肝硬化组织、癌旁慢性肝炎组织和正常肝组织以细胞核表达为主,在HCC和转移灶组织以细胞质细胞核联合表达为主(P<0.01)。细胞质与细胞核染色强度均与HCC分级和转移密切相关(P<0.01),细胞质染色强度还与肿瘤包膜有无浸润有关(P<0.01)。结论APE1蛋白表达与HCC恶性表型有关,APE1蛋白过表达及细胞质表达的出现可能成为HCC预后不良的指标之一。

非小细胞肺癌组织中SKP2蛋白的表达及其对预后的影响

目的:探讨SKP2蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其对患者预后的影响。方法:利用组织芯片和免疫组化技术检测SKP2蛋白在89例NSCLC、5例肺良性肿瘤和5例正常支气管和肺组织中的表达。结果:NSCLC组织中SKP2蛋白表达阳性率为(23·52±13·57)%,明显高于肺良性肿瘤、正常支气管及肺组织(2·91±1·27)%,两者差异有统计学意义,t′=31·373,P=0·000。SKP2蛋白在NSCLC组织中的表达水平与细胞分化程度密切相关,χ2=14·402,P1=0·000;与年龄、性别、吸烟史、肿瘤位置、大小、病理类型、淋巴结转移和TNM分期等差异无统计学意义,P1值均>0·05。SKP2蛋白表达阳性的NSCLC患者5年生存率较阴性患者降低,χ2=4·119/4·636,P1=0·042/0·031;r=-0·186,P2=0·000。结论:SKP2蛋白表达在NSCLC的发生发展中起促进作用,并对患者的预后产生不良影响。

卵巢癌组织芯片中PI3K p85α,AKT1及Ki-67表达的研究

目的:应用高通量组织芯片技术分析卵巢癌和正常卵巢组织中磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基p85α(PI3Kp85α)、AKT1和Ki-67蛋白的表达,探讨其相关性及临床意义。方法:用组织芯片技术结合免疫组化法检测177例卵巢癌和10例正常卵巢组织中PI3Kp85α、AKT1及Ki-67的表达。结果:PI3Kp85α、AKT1及Ki-67的总阳性表达率在卵巢癌组织中分别为70.6%、79.1%和74.5%,正常卵巢组织中分别为30.0%、10.0%和10.0%,2者差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);在高分化卵巢癌组织中分别为43.5%、52.2%、47.8%,中分化卵巢癌组织中分别为69.4%、77.4%、74.2%,低分化卵巢癌组织中分别为78.3%、86.9%和84.8%,3者差异有统计学意义(均P<0.01),其阳性表达率及强度随癌症恶性程度增高而增高;PI3Kp85α、AKT1与Ki-67蛋白3者的表达均存在相关性(均P<0.01)。结论:联合分析PI3Kp85α、AKT1和Ki-67的表达对预测卵巢癌的发生和发展有重要意义。

P16、PTEN、E-cadherin、CtBP1联合检测对子宫内膜腺癌的诊断意义

目的研究P16、PTEN、E-cadherin、CtBP1在子宫内膜癌中的表达,评价联合检测三者对子宫内膜癌临床病理诊断的意义。方法使用组织芯片和免疫组化染色技术观察P16、PTEN、E-cadherin、CtBP1在60例子宫内膜腺癌和30例正常子宫内膜组织中的表达情况,使用二元逻辑回归ROC曲线分析方法对联合检测指标进行筛选,并对个体诊断进行预测。结果 P16、PTEN、E-cadherin在子宫内膜癌中的阳性表达率高于正常子宫内膜(P<0.05);CtBP1在两种组织中均高度表达,未见显著差异(P>0.05)。P16和PTEN联合检测具有中等强度准确性,在假阳性率为10%的条件下诊断点为0.900。结论 P16、PTEN、E-cadherin阳性表达与子宫内膜癌发生有关;P16和PTEN联合检测对子宫内膜腺癌的临床病理诊断有参考价值。

甲状腺癌p53调节基因Mdm2以及p21^(WAF/CIP1)蛋白的表达

目的探讨p53、鼠双微体2(murinedonbleminute2,Mdm2)及p21WAF/CIP1等蛋白在甲状腺癌组织中的表达、意义及相互作用关系。方法取甲状腺癌、癌旁与良性病变组织构建组织芯片,应用免疫组化方法检测p53、Mdm2及p21WAF/CIP1在甲状腺良恶性病变中的表达。结果p53、Mdm2及p21WAF/CIP1在甲状腺癌中表达的阳性率分别为50.6%(37/73),63.0%(47/73)和38.4%(28/73)。同癌旁组织相比,p53和Mdm2表达明显升高(P<0.01),而p21WAF/CIP1的表达明显降低(P<0.05)。p21WAF/CIP1和p53的阳性表达均与未分化癌、有无淋巴结转移及受累程度显著相关(P<0.05);Mdm2的阳性表达与甲状腺良恶性病变显著相关(P<0.05)。三者阳性表达两两之间统计学上具有关联性(P<0.05)。结论p53和Mdm2的过表达以及p21WAF/CIP1的缺失表达可能会导致甲状腺癌的恶性形成和进展;三者中蛋白主要以p53-Mdm2-p21WAF/CIP1通路的方式作用于细胞的转化和肿瘤的形成;联合检测p53和Mdm2的表达可用于评定甲状腺癌的恶性程度。检测p21WAF/CIP在甲状腺癌中表达的变化可用于评估其生物学行为和判断预后。

采用SELDI-TOF质谱技术分析胃癌患者血清蛋白质谱的变化

目的:利用蛋白质芯片和生物信息学方法从胃癌患者血清中筛选标志蛋白质。方法:采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)和Q10蛋白芯片对30例胃癌患者、30例胃炎患者、20例术后胃癌患者和40例健康者血清的蛋白质指纹图谱进行了检测,使用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机读取数据,获得的结果采用CIPHERGEN公司的Biomarker wizard和Biomarker Patterns System软件分析。结果:胃癌患者与健康者血清蛋白质指纹图谱相比有18个显著差异蛋白质,其中8个蛋白质在患者血清中高表达,10个蛋白质在患者血清中低表达。三个蛋白质(5907Da、5080Da、8691Da)组合构建诊断模型可鉴别胃癌与健康者。胃癌患者与胃炎患者血清蛋白质指纹图谱相比有13个显著差异蛋白质,其中7个蛋白质在胃癌患者血清中高表达,6个蛋白质在胃癌患者血清中低表达。二个蛋白质(5907Da、6436Da)组合构建诊断模型可鉴别胃癌与胃炎患者。结论:实验证明利用蛋白质组学和生物信息学方法可以从血清中筛选出胃癌相关的标志蛋白质,可见蛋白质芯片技术对于发现和筛选血清中的胃癌标志蛋白质及疗效判断是一种有效、快速的工具。

组织芯片检测星形胶质细胞上调基因1与原发性肝细胞癌病理因素的相关性

背景:星形胶质细胞上调基因1是肿瘤发生转移早期的重要标记分子之一,很有可能成为肝癌临床治疗的分子靶标。目的:探索原发性肝细胞癌患者星形胶质细胞上调基因1在其癌组织中的表达水平,并推测其在原发性肝细胞癌患者微创疗效中的地位。方法:采用组织芯片方法和免疫组织化学染色方法检测120例原发性肝细胞癌患者肿瘤组织中星形胶质细胞上调基因1蛋白表达水平,并与其临床病理资料进行相关性分析。结果与结论:原发性肝细胞癌患者星形胶质细胞上调基因1蛋白表达水平与其临床分期和组织分化程度密切相关,且其星形胶质细胞上调基因1蛋白高表达水平与Ki-67阳性率和肿瘤微血管密度有关,但该蛋白高表达与患者的性别及年龄无相关性。说明星形胶质细胞上调基因1蛋白表达水平与常规恶性检测指标相关,检测该蛋白表达水平对于判断原发性肝细胞癌具有重要意义。

MET4和C-28抗体检测卵巢上皮性肿瘤组织中MET蛋白表达的对比研究

目的评价MET4和C-28抗体检测卵巢上皮性肿瘤组织中MET蛋白表达的效能。方法采用免疫组织化学间接法检测卵巢上皮性肿瘤、卵巢转移性腺癌和正常卵巢组织芯片中MET蛋白表达的情况,采用Nuance光谱成像分析系统对组织芯片的免疫染色进行分析。结果 MET4和C-28蛋白阳性染色部位均位于细胞膜和细胞质。MET4蛋白的阳性总检出率为64.2%(111/173),高于C-28[50.2%(87/173)](P<0.05),且MET4蛋白在卵巢原发性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率显著高于卵巢转移性腺癌(P<0.05)。MET4和C-28蛋白阳性表达与卵巢上皮性肿瘤患者的临床病理参数无显著关系。MET4蛋白在细胞质、C-28蛋白在细胞膜的阳性表达与病理分级显著相关(P<0.05)。结论与C-28蛋白比较,MET4蛋白具有更高的特异性和检出率,可能具有更好的临床应用前景。

食管鳞癌组织中前列腺跨膜蛋白的表达和临床意义

目的探讨食管鳞癌组织及食管正常组织中雄激素诱导的前列腺跨膜蛋白1(PMEPA1)的表达情况,并分析其与食管鳞癌临床病理之间的关系。方法 230例食管癌患者均来自河南省林州市。利用组织微阵列技术,采用卵白素-生物素-辣根过氧化氢酶复合物(ABC)法,分析230例食管鳞癌组织(观察组)和相应正常食管组织(对照组)中PMEPA1的表达情况,并探讨其与食管鳞癌患者年龄、性别、肿瘤细胞分化程度、淋巴结转移、临床病理分期(TNM)分期和大体分型的关系。结果观察组中PMEPA1蛋白表达明显高于对照组PMEPA1蛋白表达(80.0%vs14.3%,P<0.01);PMEPA1蛋白高表达与淋巴结转移、TNM分期有关,而与年龄、性别、肿瘤细胞分化程度、和大体分型无关。结论 PMEPA1蛋白的异常表达可能在食管鳞癌的发生、发展及预后中起重要作用。

应用激光解吸电离飞行时间质谱技术筛选无精子症患者精浆差异蛋白

目的:用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析无精子症和正常人精浆蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别无精子症和正常人精浆标志物的诊断模型。方法:收集33例无精子症和31例正常人的精浆,用H50(疏水芯片)蛋白质芯片和SELDI-TOF-MS检测蛋白质质谱的表达。用Biomarker Patterns Software分析软件进行数据处理,建立区分无精子症和正常人精浆中蛋白质谱差异表达模型。结果:在分子量2000～20000范围内,共检测到78个有差异的蛋白峰,其中12个差异有显著性(P<0.01),建立了由3个差异蛋白组成的无精子症诊断模型,其诊断灵敏度为96.9%(32/33),特异性为96.7%(30/31)。结论:用SELDI-TOF-MS技术初步建立的区分无精子症和正常人的精浆蛋白差异表达模型可以区别无精子症和正常人,可能为无精子症的诊断提供新的手段。

蛋白芯片技术筛选无精症患者精浆中标志蛋白质

目的:利用蛋白质芯片和生物信息学方法从无精症患者精浆中筛选标志蛋白质。方法:采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术(SELDI-TOF-MS)和IMAC3蛋白质芯片对30例无精症患者精浆和57例健康人精浆的蛋白质谱图进行了检测,使用PBSⅡ-C型蛋白质芯片阅读机读取数据,获得的结果采用CI-PHERGEN公司的Biomarkerwizard和BiomarkerPatternsSystem软件分析。结果:无精症患者与正常人精浆蛋白质谱相比有16个显著差异蛋白质,其中6个蛋白质在患者精浆中高表达,10个蛋白质在患者精浆中低表达。BiomarkerPatternsSystem软件用16个显著差异蛋白质中的3个标志分子建立无精症诊断的分类树模型。检测灵敏度为86.7%(26/30)、特异性为96.5%(55/57)。结论:实验证明利用蛋白质组学和生物信息学方法可以从精浆中筛选出无精症相关的标志蛋白质,而且蛋白质芯片技术对于发现和筛选精浆中的无精症标志蛋白质是一种有效、快速的工具。

蛋白芯片检测技术结合多维统计推断死亡时间

目的利用2100生物分析仪结合蛋白芯片获取死后大鼠肝组织蛋白质表达谱,推测其与死亡时间的关系。方法大鼠腹腔麻醉致死后置于16℃环境中,提取死后14个时间点肝组织中的水溶性蛋白质,使用蛋白芯片获取相对分子质量在14000~230000的蛋白质表达谱数据,并利用主成分分析(principal component analysis,PCA)、偏最小二乘-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)、Fisher判别对数据进行分析。结果根据蛋白质表达谱的变化和PLS-DA结果将死亡时间分为A组(0d)、B组(1~9d)、C组(12~30d)。经Fisher判别,模型的训练集及测试集的预测准确率均为100.0%,训练集的内部交叉验证准确率为100.0%。通过建立B、C组各时间点的Fisher判别模型缩小推断死亡时间窗口,B组中训练集及测试集的预测准确率均为100.0%,训练集的内部交叉验证准确率为100.0%;C组中训练集及测试集的预测准确率分别为95.2%、78.6%,训练集的内部交叉验证准确率为88.1%。结论蛋白芯片检测技术可以快捷简便地获取大鼠死后不同时间点肝组织相对分子质量在14000~230000的水溶性蛋白质表达谱,建立PLS-DA及Fisher判别模型对死亡时间进行分类预测判断,有望为死亡时间推断提供新的思路和方法。

应用组织芯片技术研究Cx43在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨间隙连接蛋白(Cx43)在癌旁组织、肝硬化组织和肝细胞癌中的表达及其在肝细胞癌中的意义。方法应用组织芯片技术和免疫组织化学技术SP法检测81例癌旁组织、82例肝硬化组织和359例肝细胞癌中Cx43的表达。结果 Cx43在肝细胞癌中的表达低于癌旁组织和肝硬化组织,差异有统计学意义(P<0.001);癌旁组织高于肝硬化组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Cx43与肝细胞癌的组织学分级、术后无瘤生存时间以及肿瘤直径有关(P<0.001、P<0.05和P<0.05),而与临床分期、淋巴结转移和脉管或门静脉癌栓无关(P>0.05)。结论 Cx43的异常表达与肿瘤的发生及预后有关,可以作为判断肝细胞癌预后有用指标之一。

应用液体芯片-质谱技术筛选肺鳞癌患者血清标志蛋白

目的探讨液体芯片．质谱技术（CLINPROT系统）在肺鳞癌患者血清标志蛋白筛选中的应用。方法应用CLINPROT系统检测34例肺鳞癌患者（肺鳞癌组）、46例良性肺疾病患者（良性对照组）及44名正常人（正常对照组）的血清蛋白表达谱，应用FlexAnalysis3．0软件进行数据分析，筛选差异表达蛋白质；采用液相色谱串联质谱（LC—MS／MS）技术鉴定标志蛋白。结果分别比较肺鳞癌组与正常对照组以及肺鳞癌组与良性对照组血清蛋白表达谱，在质荷比（M／Z）800—10000范围内，前者筛选出96个差异表达蛋白峰，其中M／Z为4054．13和4267．46的蛋白峰在2组间差异最大，用这2种差异蛋白建立的坐标系具有良好的区分肺鳞癌与正常人的能力；后者筛选出99个差异表达蛋白峰，其中M／Z为5065．27和4054．02的蛋白峰在2组间差异最大，用这2种差异蛋白建立的坐标系具有良好的区分肺鳞癌与良性肺疾病的能力。取M／Z为1778和1865的蛋白行LC-MS／MS鉴定，结果提示二者可能均为补体C3片段或C3前体。结论肺鳞癌患者与正常人以及与良性肺疾病患者之间血清蛋白表达谱存在明显差异，应用液体芯片-质谱技术可能从血清中筛选出敏感性高、特异性强的肺鳞癌标志蛋白。

胃癌组织中microRNA的差异表达

目的 检测胃癌组织和癌旁组织中microRNA （miRNA）的差异表达.方法 收集经病理确诊为胃癌进行外科手术切除的25例患者的胃癌组织及距离胃癌病灶5 cm以上的癌旁组织,选取其中7例标本提取总RNA,应用Illumina miRNA芯片检测胃癌和癌旁组织中差异表达的miRNA.应用定量实时PCR技术验证25例胃癌和癌旁组织标本中差异表达的miRNA,并分析25例患者的临床病理与胃癌组织中miRNA差异表达的关联.结果 Illumina miRNA芯片检测显示,HS-138,HS-153,HS-157在胃癌组织中表达下调,miR-181a,miR-21,miR-21＊,miR-27a,miR-584,miR-93在胃癌组织中表达上调.定量实时PCR显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-181a表达上调（56.848±135.551比3.950±12.101,P＜0.05）,而miR-584在胃癌和癌旁组织中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）.胃癌组织miR-181a表达与患者胃癌淋巴结转移及年龄有关联（rp=0.462、0.414,P=0.009、0.023）,与性别和病理分型无关联（P=0.220、0.106）.结论 应用miRNA芯片技术和荧光定量PCR技术发现了胃癌组织中差异表达的miRNA.

非小细胞肺癌患者外周血EGFR基因突变富集液相芯片检测方法的建立

目的建立灵敏、特异、简便易行、高通量血浆检测非小细胞肺癌（NSCLC）表皮生长因子受体（EGFR）基因突变热点的突变富集液相芯片法（MEL）。方法设计EGFR外显子19E746-750缺失和外显子21L858R突变及野生型的特异探针，并偶联到不同荧光编码微球上，用生物素标记的探针反向序列交叉试验验证探针偶联效果后，与突变富集PCR产物互补配对杂交，然后经液相芯片仪检测分析，建立血浆检测EGFR突变的MEL技术。将不同拷贝数突变型与野生型质粒混合做模板，检测MEL的灵敏度与特异性。收集2008年9月至2010年4月在广州医学院第一附属医院住院的201例11IB或Ⅳ期NSCLC患者血浆标本，用突变富集PCR和MEL平行检测EGFR外显子19、21突变，同时筛选经2种方法鉴定过的50例标本的PCR产物，经直接测序验证MEL的灵敏度与特异性。并初步分析16例肺腺癌患者血浆EGFR基因突变与吉非替尼治疗疗效的关系。结果探针成功偶联到不同荧光编码的微球上，且可特异识别相应靶序列，MEL可检出低至10个拷贝的EGFR突变（灵敏度0．1％）。201例NSCLC患者中，MEL共检出EGFR外显子19E746-750缺失和外显子21L858R突变112例（55．7％），与突变富集PCR检出率[58．2％（117／201）]相比，差异无统计学意义（X2=3．20，P〉0．05），符合率为97．5％（196／201）；直接测序法从50例NSCLC患者中仅检出EGFR突变11例（22．0％），且低于MEL[50．0％（25／50），x2=12．07，P〈0．05]。经Fisher精确检验，接受吉非替尼治疗的肺腺癌患者中，9例血浆EGFR外显子19突变阳性患者较7例阴性患者具有较高的客观缓解率（P=0．041）和较长的疾病无进展生存期（x2=6．76，P=0．009）。结论成功构建了一种灵敏、特异、快速、高通量的NSCLC血浆诊断EGFR基因外显子19E746—750缺失和外显子21L858R突变的MEL检测平台，对指导晚期肺癌患者个体化治疗有重要价值。