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MALDI-TOF MS直接靶板微滴生长测定法在CRKP快速检测中的应用
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作者 吴昕哲 茆海丰 +2 位作者 杨晋 左春磊 金丹婷 《检验医学》 CAS 2024年第6期587-591,共5页
目的探讨基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的直接靶板微滴生长测定(DOT-MGA)法快速筛查碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的准确性和临床应用价值。方法收集2020—2021年连云港市第一人民医院肺炎克雷伯菌临床分离株... 目的探讨基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的直接靶板微滴生长测定(DOT-MGA)法快速筛查碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的准确性和临床应用价值。方法收集2020—2021年连云港市第一人民医院肺炎克雷伯菌临床分离株251株,其中美罗培南敏感123株,CRKP128株。采用DOT-MGA法对4和6μL 2种取样量的所有菌株进行美罗培南耐药性检测。采用微量肉汤稀释法测定菌株的美罗培南最小抑菌浓度(MIC)。以微量肉汤稀释法耐药性分析结果为标准,评价DOT-MGA法耐药性检测结果的准确性。结果以微量肉汤稀释法为标准,孵育生长4 h后,DOT-MGA法2种取样量的敏感性和阴性预测值均为100.0%,其中4μL取样量检测CRKP的特异性为92.5%,阳性预测值为92.8%;6μL取样量检测CRKP的特异性为89.8%,阳性预测值为90.1%。123株美罗培南敏感株的美罗培南MIC_(50)为0.125μg·mL^(-1),MIC_(90)为0.25μg·mL^(-1);128株美罗培南耐药株的MIC_(50)和MIC_(90)均为≥128μg·mL^(-1)。DOT-MGA法与微量肉汤稀释法的一致性分析结果显示,4μL加样量Kappa值为0.88,6μL加样量Kappa值为0.83。结论基于MALDITOF MS的DOT-MGA法筛查CRKP具有较高的准确性,且简便、快捷,可用于快速检测CRKP。 展开更多
关键词 碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 直接靶板微滴生长测定法 微量肉汤稀释法
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微液滴高通量筛选方法的研究与应用进展 被引量:2
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作者 秦伟彤 杨广宇 《合成生物学》 CSCD 2023年第5期966-979,共14页
在单细胞层面对生物功能进行高通量的分析和分选是对关键基因、元件、途径与细胞工厂进行优化的重要技术。基于微液滴的筛选方法因其低成本、超高通量等优势,已被广泛应用于生物、医药、食品和工业等各个领域。本文针对目前主流的荧光... 在单细胞层面对生物功能进行高通量的分析和分选是对关键基因、元件、途径与细胞工厂进行优化的重要技术。基于微液滴的筛选方法因其低成本、超高通量等优势,已被广泛应用于生物、医药、食品和工业等各个领域。本文针对目前主流的荧光激活的液滴分选、吸光度激活的液滴分选,以及无标记液滴分选等微液滴筛选设备的进展进行综述,主要包括基于质谱、拉曼、核磁共振、电化学、图像识别等。并总结了近年来微液滴筛选设备在酶进化、微生物育种等领域应用成功的案例。此外还对不同的微液滴筛选设备的优势与面临的挑战进行了讨论,未来各种新的荧光探针的开发以及质谱等非标记检测方法的进一步发展,将是微液滴筛选设备的主要发展方向,在蛋白质工程、抗体工程、细胞分选及临床研究等方面具有重要的应用潜力。 展开更多
关键词 高通量筛选 微流控 分选方法 微液滴 检测信号
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MALDI-TOF MS快速检测血流感染大肠杆菌对第3代头孢菌素的药敏研究
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作者 刘春林 黄德兵 +1 位作者 吴清念 蔡甜 《医学研究杂志》 2023年第10期146-149,共4页
目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight,MALDI-TOF MS)直接靶板微滴生长法(direct-on-target microdroplet growth assay,DOT-MGA)快速检测血流感染大肠杆菌对第3代头... 目的评价基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight,MALDI-TOF MS)直接靶板微滴生长法(direct-on-target microdroplet growth assay,DOT-MGA)快速检测血流感染大肠杆菌对第3代头孢菌素药敏实验的价值。方法收集血流感染大肠杆菌50株作为实验菌株。采用菌液与不同浓度头孢噻肟在靶板上混合作为检测孔,不加抗菌药物的菌液作为生长对照孔,孵育4h后,根据DOT-MGA法鉴定靶板上的待测菌,所对应检测孔位代表头孢噻肟最低抑菌浓度,并以微量肉汤稀释法作为比较。结果微量肉汤稀释法和DOT-MGA法检测大肠杆菌对头孢噻肟最低抑菌浓度基本一致率为96%,分类一致率为94%,较大偏差为2%,次要偏差为4%,未发现重大偏差,均在临床可接受范围内。结论MALDI-TOF MS结合DOT-MGA法能够短时间内准确提供大肠杆菌对第3代头孢菌素的药敏信息,为临床早期精准管理血流感染患者提供依据。 展开更多
关键词 直接靶板微滴生长法 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 血流感染 第3代头孢菌素 最低抑菌浓度
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基于声表面波传感技术的微液滴检测方法 被引量:1
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作者 常敏 周军 +1 位作者 鲁敦科 张学典 《纳米技术与精密工程》 EI CAS CSCD 2011年第3期239-243,共5页
为了提高声表面波(SAW)技术用于微液滴体积测量的精度,提出了一种差分面积拟合法.根据声表面波信号的特点分析了差分面积拟合法的合理性,在自行研制的声表面波液滴体积检测系统上对该方法的应用进行了验证.采用两种黏性不同的微液滴,分... 为了提高声表面波(SAW)技术用于微液滴体积测量的精度,提出了一种差分面积拟合法.根据声表面波信号的特点分析了差分面积拟合法的合理性,在自行研制的声表面波液滴体积检测系统上对该方法的应用进行了验证.采用两种黏性不同的微液滴,分别为5~9μL的微水滴和微油滴进行了测量.对测得的信号分别采用曲线峰值法和差分面积拟合法与微液滴大小进行回归.实验结果表明,采用差分面积拟合法进行回归得到的模型的相关系数相比采用峰值法提高了4%以上,同时对两种微液滴的预测均方根误差(RMSEP)减小了37%以上,从而证明了该方法的有效性. 展开更多
关键词 声表面波 微液滴 体积 差分面积法
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Computational and Experimental Analyses of Detachment Force at the Interface between Carbon Fibers and Epoxy Resin
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作者 Kazuki Mori Nobuhiko Matsumoto +1 位作者 Sukeharu Nomoto Kenji Tsuruta 《Open Journal of Composite Materials》 2017年第4期179-184,共6页
Herein, we used theoretical and experimental methods to investigate the shear fracture strengths of carbon fiber/epoxy resin interfaces. The shear strengths of carbon fiber and epoxy resin were measured using the micr... Herein, we used theoretical and experimental methods to investigate the shear fracture strengths of carbon fiber/epoxy resin interfaces. The shear strengths of carbon fiber and epoxy resin were measured using the microdroplet test, whereas interaction and binding energies were estimated using?Ab initio?and molecular dynamics methods. However, binding energies did not impact the shear strength volumes determined by microdroplet tests,?i.e., bonds between functional groups of the carbon filer and the epoxy resin were difficult to break. On the other hand, the interaction energies calculated for epoxy monomers were in good agreement with experimental data. Moreover, we determined the relationship between the simulated interaction energy and the shear fracture strength volume obtained using the microdroplet test. 展开更多
关键词 Carbon Fiber–Reinforced Composite Ab INITIO method Molecular Dynamics Simulation microdroplet Test
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微滴法诊断隐匿精子症结合自制金属冷冻板法保存微量精子的实验研究 被引量:1
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作者 房芃 赵秀红 +4 位作者 陈永刚 王爱妍 毕敬磊 韩昊辰 崔艳国 《中国男科学杂志》 CAS CSCD 2022年第5期8-11,共4页
目的研究一种创新的寻找隐匿精子症精子的方法,结合自制金属冷冻板法冷冻保存发现的微量精子,以期为患者进一步卵细胞质内单精子注射(ICSI)提供精子保障。方法选取75例常规精液涂片未见精子的标本,每份标本充分混匀后均分为两份,分别采... 目的研究一种创新的寻找隐匿精子症精子的方法,结合自制金属冷冻板法冷冻保存发现的微量精子,以期为患者进一步卵细胞质内单精子注射(ICSI)提供精子保障。方法选取75例常规精液涂片未见精子的标本,每份标本充分混匀后均分为两份,分别采用传统的玻片法和创新的微滴法寻找精子,发现精子后记录精子数目、活力、圆细胞数目及检测的耗时等;微滴法发现的精子立即应用自制金属冷冻板法冷冻保存大于24 h后复苏,记录复苏后的精子数目、存活数目等。结果微滴法更容易发现精子,在精子总数小于10条、10~50条及大于50条的各级标本中,微滴法的检出例数(检出率)分别为15例(20.0%)、18例(24.0%)和10例(13.3%),均高于玻片法10例(13.3%)、12例(16.0%)和8例(10.7%),差异有统计学意义。并且微滴法结合自制金属冷冻板法可以将发现的精子冷冻保存利用,获得较高的精子复苏率(91.6%),前向运动+非前向运动(PR+NP)级精子的复苏率达到56.8%。微滴法检测平均用时3.6±0.9 min较玻片法8.5±1.2 min少。结论隐匿精子症中采用微滴法更易发现精子,结合自制金属冷冻板法冷冻发现的微量精子,有较好的复苏率,复苏后的精子可用于ICSI操作,提高精子的利用率,提升患者成为生物学父亲的机会。 展开更多
关键词 隐匿精子症 微滴法 精子保存
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