不同炖煮温度对燕窝营养物质及抗氧化能力的影响

本文针对不同温度炖煮的燕窝的3’-唾液酸乳糖、谷胱甘肽、小分子燕窝蛋白、抗氧化能力进行了研究。结果表明,相比于95℃炖煮的燕窝,100℃和115℃炖煮的燕窝的3’-唾液酸乳糖含量分别提高了63.02%和644.20%,谷胱甘肽含量分别提高了25.33%和68.73%,小分子蛋白峰面积(相对含量)分别提高了76.30%和666.18%,抗氧化能力分别提高了44.45%和207.57%。由此可见,适当地提高炖煮温度可以在营养成分、吸收、健康效应方面提升燕窝的价值。

以CD4为靶点的小分子化合物J2对异基因角膜移植小鼠淋巴细胞的影响

目的探讨小分子化合物J2对异基因角膜移植小鼠淋巴细胞的影响。方法建立小鼠角膜移植模型,随机分为A、B、C、D4个组。A组为空白对照组3只BALB/c小鼠,B、C、D组各11只鼠,均取右眼行C57BL/6-BALB/c同种异体角膜移植术,自手术当日开始腹腔注射给药,B组给予不含药物的安慰剂,C组给予环孢素A(CsA)10mg/kg,D组给予J215mg/kg,每日1次,连续给药12d。给药后7d,取大鼠脾细胞给予刀豆蛋白(ConA)刺激细胞增生,采用ELISA法测定细胞上清液中白细胞介素-2(IL-2)及IL-4的含量,比较各组细胞增生指数及细胞因子含量。结果 B组角膜植片平均存活时间为(18.88±4.19)d,C组、D组发生排斥时间分别为(35.13±5.74)d、(33.62±6.80)d,明显延迟,与B组比较差异均有统计学意义(q=9.17,P<0.01;q=8.33,P=0.00),而C组与D组比较差异无统计学意义(q=0.85,P=0.60)。ConA刺激角膜移植后小鼠脾细胞增生,各组小鼠脾细胞的增生指数差异无统计学意义(F=3.729,P=0.061)。异基因小鼠角膜移植后3周左右小鼠脾细胞中IL-2和IL-4的含量无明显变化。应用ConA刺激后ELISA法检测结果表明,角膜移植小鼠脾细胞分泌IL-2明显增多,J2可抑制ConA诱导的IL-2分泌增加。结论 J2可能通过抑制CD4+T淋巴细胞而抑制角膜排斥反应的发生;J2能够明显抑制ConA刺激角膜移植后小鼠脾细胞的增生及Th1细胞因子的产生。

分子靶向抗肿瘤药物研究进展

分子靶向抗肿瘤药物有独特的靶向抗肿瘤作用,在当前临床治疗中已发挥重要作用,并显示出良好的应用前景。根据其分子的大小可将分子靶向抗肿瘤药物分为大分子单克隆抗体类和小分子化合物类,我们简要综述了这2类分子靶向抗肿瘤药物的研究进展。

肾上腺髓质素2在肾性高血压大鼠心肌中的变化

目的：通过观察小分子生物活性肽肾上腺髓质素2在大鼠两肾一夹术后肾性高血压发生、发展过程中的变化，探讨其在病理、生理过程中的作用。方法清洁级雄性SD大鼠18只，体重180~220g，随机分为模型组和对照组。模型组行两肾一夹手术，对照组仅分离肾动脉，8周后作左心导管插管法测定血流动力学指标，并计算左室重量与体重比值；采用逆转录-聚合酶链反应方法测定心肌肾上腺髓质素2的mRNA含量变化；采用免疫组织化学方法测定左心室心肌组织的肾上腺髓质素2表达，并对表达强度进行半定量分析。结果模型组大鼠颈动脉收缩压、平均颈动脉压、LV±dp/dtmax、LVEDP较对照组明显升高（P均〈0.01），左室重量与体重也升高（P〈0.05）；模型组大鼠左室心肌肾上腺髓质素2的mRNA表达较对照组高（P〈0.01），免疫组化的累积光密度较对照组升高95%（P〈0.01），且主要发布在心肌细胞的细胞核。结论肾上腺髓质素2在肾性高血压大鼠的心肌内基因表达上调及蛋白合成增加，提示其在肾性高血压致心肌肥厚的过程中起重要作用。

肾上腺髓质素2在肾性高血压大鼠肾脏中的表达变化

目的观察小分子生物活性肽肾上腺髓质素2(ADM2)在"两肾一夹"肾性高血压大鼠中肾脏的表达,探讨其在该病理生理过程中的作用.方法清洁级雄性SD大18只,体重180~220 g,随机分为对照组和模型组.模型组行两肾一夹手术,对照组行假手术.8周后左心导管插管法测定收缩压(SBP),舒张压(DBP),平均颈动脉压(mCAP)、左心室舒张末压(LVEDP)以及左心室内压最大上升/下降速率,同时测定LVM/BW;采用逆转录-聚合酶链反应方法测定肾脏组织IMD/ADM2的mRNA含量变化;采用免疫组织化学方法(IHC)测定左心室肾脏组织IMD/ADM2的表达部位,并对其表达强度进行半定量分析.结果模型组颈动脉SBP、DBP、mCAP、LVEDP和左心室内压最大上升/下降速率比对照组升高(P<0.01),左室肥厚指数比对照组升高(P<0.05);模型组肾脏组织IMD的mRNA表达比对照组高(P<0.01);模型组肾脏组织IMD免疫组化的累积光密度比对照组高(P<0.01),且主要分布在肾小动脉血管平滑肌细胞及肾小管细胞的细胞核.结论IMD/ADM2在肾性高血压大鼠的肾脏内基因表达上调及蛋白合成增加,提示IMD/ADM2在肾性高血压致肾脏病变的过程中具有重要的调控意义.

具抑制端粒酶活性的G-四链体小分子配体研究进展

端粒酶能阻止端粒的缩短使细胞无限增殖形成肿瘤。端粒3′端富G序列在一定生理条件下可形成具有抑制端粒酶活性的G-四链体结构,从而达到促进肿瘤细胞凋亡的作用。能够诱导DNA特别是致癌基因富G区域形成并稳定G-四链体结构的配体具有重要的抗肿瘤意义。以G-四链体为抗癌药物作用靶点对化合物进行筛选和结构设计是目前化学家和生物学家的关注点。该文对近年来以G-四链体为靶点的小分子端粒酶抑制剂的研究进行了综述。

PD0325901和CHIR99021促进牛体细胞克隆胚胎体外发育的研究

【目的】选取MAP2K和GSK3的抑制剂PD0325901、CHIR99021(简称2i)对牛体细胞核移植(SCNT)胚胎进行处理,研究这2种小分子物质对胚胎发育及其多能性基因(OCT4、SOX2、KLF4、DPPA3、CDX2、GATA4、NANOG)表达的影响。【方法】以牛皮肤成纤维细胞为供体,牛MⅡ期卵母细胞为受体,构建牛SCNT胚胎,采用添加2i(PD0325901 0.4μmol/L,CHIR99021 3μmol/L)的胚胎培养液体外培养SCNT胚胎72h,以mSOF+DMSO培养液处理的SCNT胚胎及体外受精(IVF)胚胎为对照,统计核移植胚胎体外发育率,并对胚胎多能性相关基因的表达进行实时定量PCR检测。【结果】与对照相比,2i处理能使SCNT胚胎囊胚率和囊胚细胞总数显著增加,凋亡细胞率显著下降,多能性相关基因NANOG和SOX2表达量上调,而细胞分化相关基因GATA4的表达量下调,其他基因表达量变化不显著,从而使SCNT胚胎的发育状态更接近于IVF胚胎。【结论】2i共处理72h可优化SCNT胚胎发育状态。

分子构象场相变的闭路格林函数描述

本文CTPGF方法导出了分子构象跃迁的公式,并由此得到了分子构象可能出现的数量上限的结果。

土鳖虫胰酶酶解物抗凝活性部位分离纯化及组成分析

目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶酶解物进行分离纯化,初步确定其抗凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物,以APTT(活化部分凝血酶时间)为指标,采用溶剂萃取法,获得抗凝活性部位IV,经凝胶柱色谱法对其进行分离纯化获得胰酶酶解纯化物;采用考马斯亮蓝法对纯化物进行定量分析,通过MALDI-TOF-MS检测分离部分的分子量分布范围。结果:土鳖虫胰酶酶解物部位IV有较强的抗凝活性,其抗凝活性强度与酶解物质量浓度相关;部位IV经Sephadex G-25纯化后,通过考马斯亮蓝法测得其蛋白质量分数5.5%;进一步经Sephadex G-10脱盐的纯化物,采用MALDI-TOF-MS检测,确定为相对分子质量在850～910 Da的3组多肽混合物。结论:采用凝胶柱色谱法分离纯化土鳖虫胰酶酶解物是可行的,抗凝活性组分是<1 000 Da的小分子肽类。

胰腺小分子活性肽对H_2O_2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响

目的研究胰腺小分子活性肽对H2O2诱导体外大鼠胰岛细胞凋亡的影响。方法采用胶原酶消化和组织培养法分离纯化大鼠胰岛细胞,检测其纯度与活性。对照组加入普通培养基,实验组培养基中加入不同质量浓度(100、200、300、400μg/ml)胰腺小分子活性肽,阳性对照组培养基中加入100nmol/L艾塞那肽。每组细胞做5个复孔(n=5),培养5d后每组均接受H2O2100μmmol/L处理1h。采用Hoechst33258核染色形态学观察;AnnexinV-FITC/PI双染色流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;荧光定量PCR法检测bax、bcl-2及caspase3mRNA的表达;Western-bolt检测bax、bcl-2蛋白的表达。结果 300、400μg/ml胰腺小分子活性肽和阳性对照组胰岛细胞凋亡率小于对照组(P<0.05);300、400μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2蛋白表达高于对照组(P<0.05),bax与caspase3蛋白表达低于对照组(P<0.05);300、400μg/ml胰腺小分子活性肽组胰岛细胞bcl-2mRNA的表达高于对照组(P<0.05),且bax mRNA的表达低于对照组(P<0.05)。结论胰腺小分子活性肽在浓度为300、400μg/ml时对大鼠胰岛细胞凋亡有明显保护作用。

构建一种精确表达小分子蛋白的技术平台

目的:克服原核表达的小分子蛋白难以去除附加氨基酸的问题,为基因工程精确表达小分子蛋白提供一种简便有效的解决方案。方法:以73个氨基酸的小分子蛋白(黑色素瘤生长激活因子CXCL1的功能区)为例,用PCR方法扩增了基因,TA克隆到载体PETSUMO。测序验证后的重组质粒转化至表达菌BL21(DE3)中诱导表达,融合蛋白用基质辅助解吸电离飞行时间质谱仪进行串联质谱鉴定(MALDI-T0F-MS/MS),通过特异性的SUMO蛋白酶酶解载体SUMO蛋白,利用SUMO蛋白和其蛋白酶带6×His标签的性质,经镍螯合柱亲和层析将二者去除,以Western blotting证明目的小分子蛋白的分离。结果:①经测序,重组质粒无突变,TA克隆方向正确,重组载体构建成功。②MALDI-T0F-MS/MS证明融合蛋白由SUMO蛋白和CXCL1蛋白组成,除去SUMO蛋白后的表达终产物经Western blotting鉴定,与其相应的抗体有特异性结合,证明分离得到的小分子蛋白即为目的蛋白。结论:运用这一技术可将载体蛋白完全去除从而达到精确表达小分子蛋白的目的,在分子生物学的实验研究中有很好的应用前景。

醋柴胡小分子水溶性部位对甲氨蝶呤药物代谢动力学的影响

目的:探讨P-糖蛋白抑制剂醋柴胡小分子水溶性部位(MHE)对甲氨蝶呤药动学行为的影响。方法:SD雄性大鼠分别灌胃甲氨蝶呤或甲氨蝶呤联合MHE后,于不同时间点眼眶静脉丛采血,利用20%高氯酸沉淀蛋白法处理血样,采用高效液相色谱法分析,非隔室模型估算药代动力学参数。结果:与单用组比较,联用组甲氨蝶蛉药时曲线下面积AUC0-t增加16.6%,AUC0-∞增加33.8%,生物半衰期(t1/2)延长了1.2倍,平均驻留时间(MRT0-t)增加了26.1%,而药物清除率(CL)下降了20.3%,但2组的药代动力学参数无显著性差异。结论:MHE具有增强甲氨蝶呤生物利用度的趋势,二者联合用药需要关注毒副反应的发生。