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Babesia Microti感染鼠对Babesia Rodhaini再感染交叉免疫保护机理的研究 被引量:1
1
作者 刘云 王洪斌 小野宪一郎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期656-659,662,共5页
目的研究Babesia Microti和Babesia Rodhaini感染的交叉免疫保护作用,以探讨B.Microti和B.Rodhaini不同种属之间是否存在交叉保护及保护机制。方法首先制备Babesia Microti感染耐过鼠,再用Babesia Rodhaini进行再感染,分别于B.Rodhaini... 目的研究Babesia Microti和Babesia Rodhaini感染的交叉免疫保护作用,以探讨B.Microti和B.Rodhaini不同种属之间是否存在交叉保护及保护机制。方法首先制备Babesia Microti感染耐过鼠,再用Babesia Rodhaini进行再感染,分别于B.Rodhaini再感染后的12、24、48、72h,使用ELISA方法分别检测血清中IL-12及IL-10的浓度,并同时检测寄生虫血症、网织红细胞变化、致死率与死亡时间。结果B.Microti感染耐过鼠再感染Babesia Rodhain后24h,小鼠血液中IL-12较未感染组及B.Microti感染耐过鼠明显增高,而血液中IL-10水平在再感染后72h时与对照组比较差异显著。B.Microti感染耐过鼠再感染Babesia Rodhain后,血液中出现一过性寄生虫血症,实验鼠可完全耐过。结论B.Microti感染耐过鼠可完全保护B.Rodhain的再感染,其细胞因子的产生为IL-12早于IL-10。 展开更多
关键词 B. microti B. Rodhaini IL-12 IL-10
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鼠感染Babesia microti和Babesia rodhaini后早期IL-12、IL-10诱生的研究 被引量:1
2
作者 刘云 小野宪一郎 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期52-54,共3页
目的研究Babesia microti和Babesia rodhaini感染后早期IL-12和IL-10诱生情况,以探讨B.microti和B.rodhaini不同种属感染的发病机制与免疫应答效应。方法使用ELISA方法分别检测Babesia microti和Babesia rodhaini感染鼠后的0、3、6、9... 目的研究Babesia microti和Babesia rodhaini感染后早期IL-12和IL-10诱生情况,以探讨B.microti和B.rodhaini不同种属感染的发病机制与免疫应答效应。方法使用ELISA方法分别检测Babesia microti和Babesia rodhaini感染鼠后的0、3、6、9、12、18、24、36、48、72、96h血清中IL-12及IL-10的浓度。结果B.microti感染后3h,小鼠血液中IL-12产生达一个高峰,至感染后24h达最高峰值,与对照组比较差异显著,同组鼠在感染的早期(96h前)血液中IL-10水平无明显变化。而B.rodhaini感染鼠,在感染后3~72h,血清中IL-10和IL-12水平与对照组比较均无明显差异。在感染后96h,血清中IL-10和IL-12水平开始下降,与对照组比较差异显著。结论B.microti感染鼠早期诱生的细胞因子主要为IL-12,而B.rodhaini感染后早期IL-12和IL-10水平无明显变化。 展开更多
关键词 B.micrati B.rodhaini 感染鼠 IL-12 IL-10
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Study on the production of IL-12, IL-10 in early stage after infection with Babesia microti and Babesia rodhaini in mice 被引量:1
3
作者 LIU Yun Hachikuchi Rie Kenichiro Ono 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2007年第1期17-21,共5页
The serum levels of IL-12 and IL-10 in mice after infected with Babesia microti (B. microti) and Babesia rodhaini (B. rodhaini) were examined. Collected the mice serum and examined the concentration of IL-12 and I... The serum levels of IL-12 and IL-10 in mice after infected with Babesia microti (B. microti) and Babesia rodhaini (B. rodhaini) were examined. Collected the mice serum and examined the concentration of IL-12 and IL-10 by using ELISA after infection with B. microti and B. rodhaini at 0, 3, 6, 9, 12, 18, 24, 36, 72, 96 h in mice. The results showed that B. microti infection resulted in IL-12 increasing, which peaked at 3 and 24 h after the infection, while same infection did not induce a significant change in IL-10 compared to uninfected mice. When mice were infected with B. rodhaini, any significant changes were not decteted both in IL-12 and IL-10 in comparison with uninfected animals during the period of 3-72 h after infection. Instead, a significant decline in IL-12 and IL-10 was found compared to uninfected mice 96 h after infection with B. rodhaini. It indicates that the mutagenetic cytokine is IL-12 in the serum of mice after infection with B. microti, and no any significant changes were detected in both IL-12 and IL-10 from 0 to 72 h after infected with B. rodhaini. 展开更多
关键词 B. microti B. rodhaini MICE IL-12 IL-10
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hu-RBC-SCID小鼠模型的建立及野鼠Babesia microti样原虫感染人红细胞的研究
4
作者 魏强 迁正义 石原智明 《中国比较医学杂志》 CAS 2004年第4期208-210,i001,共4页
目的 用人红细胞 (RBC)替换SCID小鼠自身血循环红细胞而建立的人化小鼠模型 ,即hu RBC SCID模式小鼠 ,分离并测试野鼠Babesiamicroti(B .microti)样原虫对人红细胞的感染 ,以确定人巴贝斯原虫的感染来源。方法 用人O型红细胞注入先期... 目的 用人红细胞 (RBC)替换SCID小鼠自身血循环红细胞而建立的人化小鼠模型 ,即hu RBC SCID模式小鼠 ,分离并测试野鼠Babesiamicroti(B .microti)样原虫对人红细胞的感染 ,以确定人巴贝斯原虫的感染来源。方法 用人O型红细胞注入先期去除自身血循环红细胞的NOD shi scid小鼠血循环中 ,辅以肌内注射兔抗小鼠血红蛋白生成素血清和大鼠抗小鼠RBC单克隆抗体 ,建成hu RBC SCID模式小鼠 ,接种野鼠感染B .microti的RBC。结果 hu RBC SCID模式小鼠的人RBC中 ,在接种感染B .microti野鼠的RBC后 ,出现巴贝斯样原虫 ,并大量增殖。RDNA序列比较发现两类为B .microti样原虫 ,一类与人的一致。结论 感染野鼠的两类B .microti样原虫均对人RBC具有高度感染性 ;hu RBC SCID模式小鼠的感染 。 展开更多
关键词 hu-RBC-SCID 小鼠 野鼠 红细胞 巴贝斯原虫感染 动物模型
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田鼠巴贝西虫Babesiamicroti截短型分泌抗原的重组表达及其在诊断上的应用 被引量:4
5
作者 黄艳丽 曹杰 +4 位作者 蔺智兵 张厚双 周勇志 胡永浩 周金林 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2012年第4期213-219,共7页
田鼠巴贝西虫分泌抗原l(Babesiamicrotisecretedantigen1,BmSA1)是一个重要的诊断抗原候选分子,但全长蛋白的表达量少,也不宜纯化。本研究在此基础上,通过生物信息学分析,选取N-末端信号肽后,C-末端跨膜区前,包含CPSF73-100_C... 田鼠巴贝西虫分泌抗原l(Babesiamicrotisecretedantigen1,BmSA1)是一个重要的诊断抗原候选分子,但全长蛋白的表达量少,也不宜纯化。本研究在此基础上,通过生物信息学分析,选取N-末端信号肽后,C-末端跨膜区前,包含CPSF73-100_C功能区的228个氨基酸所编码基因片段,重组高效表达了一个可溶性截短型抗原,解决了完整蛋白重组表达纯化的困难。纯化的截短型抗原作为酶联免疫试验(ELISA)诊断抗原,可清晰地区分阴性及阳性鼠血清,并与其他病原感染无交叉反应,显示其诊断的特异性。鼠人工感染田鼠巴贝西虫系列血清检测表明,该抗原可检测早期感染(5天)和感染(55天)以后的样本,显示其对不同时期感染的宿主均具有诊断价值。结果表明,重组B.microti截短型抗原可作为一种诊断制剂检测田鼠巴贝西虫抗体。 展开更多
关键词 田鼠巴贝西虫 截短型抗原BmSAl 克隆 表达 诊断
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High prevalence of Babesia microti in small mammals in Beijing
6
作者 Chun-Yan Wei Xiao-Mei Wang +5 位作者 Zhen-Sheng Wang Zhi-Hua Wang Zeng-Zhi Guan Lian-Hui Zhang Xiang-Feng Dou Heng Wang 《Infectious Diseases of Poverty》 SCIE 2020年第6期105-105,共1页
Background: Babesiosis is an emerging tick-borne zoonotic infectious disease.Babesia microti is responsible for most cases of human babesiosis globally.It is important to investigate the prevalence of B.microti in the... Background: Babesiosis is an emerging tick-borne zoonotic infectious disease.Babesia microti is responsible for most cases of human babesiosis globally.It is important to investigate the prevalence of B.microti in the mammalian host population of a specific region in order to elucidate mechanisms of pathogen transmission and to define geographic areas where humans face the greatest risk of exposure.The aim of this study is to understand the prevalence and genotypes of B.microti in the small mammals that are found in Beijing,China.Methods:: We trapped small mammals from all of the 16 urban,suburban,and outer suburban districts of Beijing during the years 2014,2017 and 2018.Genomic DNA was extracted from the heart tissues individually and the Babesia 18S rRNA gene was detected by PCR.The genotypes of B.microti were identified based on sequence alignments and phylogenetic analysis.The morphology of the parasites was observed under light microscopy.The risk factors were analyzed statistically based on both univariate analyses and multivariate logistic regression.Results: A total of 1391 small mammals were collected.Positive infection of B.microti was detected in 12.1%(168/1391)of small mammals from 15 out of the 16 districts.Both Kobe-type and U.S.-type B.microti,accounting for 9.5%and 2.7%,respectively,were identified.Classic diverse morphologic forms of B.microti were observed.Specific types of ecological habitats including shrub areas,broad-leaved forest,and cropland were revealed to be risk factors associated with B.microti infection.Conclusions: This study demonstrated the wide prevalence of B.microti infection in eight species of small mammals in Beijing,with Kobe-type more prevalent than U.S.-type.This study provides fundamental information for the development of informed prevention and control measures by public health authorities;the data gathered indicates a need for further monitoring of both clinical diseases in individuals presenting with babesiosis-like symptoms,as well as the infection status of ticks in high risk areas. 展开更多
关键词 Babesia microti GENOTYPE Molecular epidemiology Small mammal BEIJING Tick-borne infectious disease Risk factor
原文传递
1例人感染巴贝虫的诊断与病原体鉴定 被引量:40
7
作者 姚立农 阮卫 +5 位作者 曾长佑 李祖火 张轩 雷永良 陆巧绎 陈华良 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期118-121,共4页
目的对首诊为疟原虫感染的巴贝虫感染者进行确诊及临床诊治情况分析。方法收集患者的临床发病资料,并对患者及其居住环境进行流行病学调查;采集骨髓样和血样,吉氏染色涂片后镜检;并以巴贝虫(Babesia)18s核糖体RNA属和种特异性引物分别... 目的对首诊为疟原虫感染的巴贝虫感染者进行确诊及临床诊治情况分析。方法收集患者的临床发病资料,并对患者及其居住环境进行流行病学调查;采集骨髓样和血样,吉氏染色涂片后镜检;并以巴贝虫(Babesia)18s核糖体RNA属和种特异性引物分别扩增患者血样基因组DNA,扩增产物测序后进行BLAST分析。结果该患者反复发热20余天,出现贫血(红细胞2.59×1012和血红蛋白5.5 g/L),CT示肝脾肿大。骨髓涂片和外周血涂片吉氏染色后镜检,发现有疑似恶性疟原虫或巴贝虫感染。经流行病学调查,该患者无外出史,但有输血史和被蜱叮咬史。患者血样经巴贝虫属和种特异性引物扩增,分别出现约400 bp和1 600 bp条带。测序的序列经BLAST分析,与田鼠巴贝虫(Babesia microti)的同源性为99%,登录号分别为JQ609305和JQ609304。结论结合患者的临床发病资料、流行病学史、病原学和分子生物学检测结果,确诊为田鼠巴贝虫感染。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 感染 诊断
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福建省1例人巴贝虫病的诊断与鉴定 被引量:15
8
作者 欧阳榕 陈朱云 +2 位作者 林耀莹 肖丽贞 谢汉国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期492-494,共3页
目的分析1例人感染巴贝虫的实验室资料,提高对巴贝西虫病的诊断水平。方法观察外周血中虫体的形态;从患者外周血中提取的DNA核酸,采用田鼠巴贝虫种特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)。采用PCR扩增田鼠巴贝虫18S rRNA片段,取阳性PCR产物... 目的分析1例人感染巴贝虫的实验室资料,提高对巴贝西虫病的诊断水平。方法观察外周血中虫体的形态;从患者外周血中提取的DNA核酸,采用田鼠巴贝虫种特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)。采用PCR扩增田鼠巴贝虫18S rRNA片段,取阳性PCR产物送测序并进行序列比对分析。结果外周血中见大量疑似恶性疟原虫虫体;PCR产物测序结果经过BLAST比对,与田鼠巴贝虫18s核糖体DNA序列有99%的同源性。结论感染的虫体为田鼠巴贝虫。福建省部分地区鼠类(尤其是野鼠)存在田鼠巴贝虫感染,是巴贝虫病的自然疫源地,必须引起足够的重视。 展开更多
关键词 人巴贝虫病 田鼠巴贝虫 感染 诊断
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微小巴贝虫在不同免疫状态小鼠体内消长规律研究 被引量:6
9
作者 蔡玉春 卢艳 +6 位作者 陈韶红 郭俭 陈木新 田利光 张玲玲 周洋 陈家旭 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期170-174,共5页
目的观察微小巴贝虫感染不同免疫状态小鼠后的消长规律。方法实验分正常BALB/c小鼠组、免疫抑制BALB/c小鼠组、SCID小鼠组和NOD-SCID小鼠组等,每组5只小鼠。免疫抑制BALB/c小鼠,每只经腹腔注射0.5mg地塞米松,连续5d。随后,各组小鼠每只... 目的观察微小巴贝虫感染不同免疫状态小鼠后的消长规律。方法实验分正常BALB/c小鼠组、免疫抑制BALB/c小鼠组、SCID小鼠组和NOD-SCID小鼠组等,每组5只小鼠。免疫抑制BALB/c小鼠,每只经腹腔注射0.5mg地塞米松,连续5d。随后,各组小鼠每只腹腔注射100μL含微小巴贝虫鼠血(红细胞染虫率约20%)。每组留1只小鼠作未感染对照鼠。自接种当天每d尾部采血涂薄血片,吉姆萨染色,镜检观察红细胞染虫状况。结果正常BALB/c小鼠感染微小巴贝虫第3d在红细胞内查见虫体,感染后第7d染虫率最高为82.4%,染虫率在20%以上约持续7d;短暂免疫抑制BALB/c小鼠在感染后第5d染虫率达到高峰为73.18%,染虫率在20%以上约持续14d,而后染虫率处于0%~2%的较低水平状态。NOD-SCID小鼠组分别于第7d(72.45%)、第16d(67.4%)、第24d(58.9%)多次出现染虫率高峰,微小巴贝虫在NOD-SCID小鼠体内不会被大量清除,染虫率一直处于较高状态,平均为41.9%。SCID小鼠组于第8d出现第1次染虫率高峰,为86.4%,至第18d出现第2次高峰为62.23%,染虫率也一直处于较高状态,平均为38.2%。在薄血片中观察到小点状体,马耳他十字,小环状体,环状体,长丝状体,以及游离在红细胞外的虫体等多种巴贝虫形态。结论微小巴贝虫在正常BALB/c小鼠和短期免疫抑制BALB/c小鼠体内虫密度出现先升高又下降的宿主自限性现象;而在SCID小鼠和NOD-SCID小鼠体内虫密度出现多个高峰,且能持续较高水平。 展开更多
关键词 微小巴贝虫 BALB C小鼠 SCID小鼠 NOD-SCID小鼠
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田鼠巴贝虫病诊断方法的研究进展 被引量:8
10
作者 孙嘉慧 韩建平 +1 位作者 冯正 胡薇 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期235-237,241,共4页
田鼠巴贝虫病是一种与疟疾相似的人兽共患血液寄生虫病,主要分布于美国、欧洲和亚洲等国家和地区。田鼠巴贝虫病的诊断方法种类繁多,但目前大多仍处于初期探索阶段。本文对现有的人感染田鼠巴贝虫病的主要诊断方法和存在的问题作一简要... 田鼠巴贝虫病是一种与疟疾相似的人兽共患血液寄生虫病,主要分布于美国、欧洲和亚洲等国家和地区。田鼠巴贝虫病的诊断方法种类繁多,但目前大多仍处于初期探索阶段。本文对现有的人感染田鼠巴贝虫病的主要诊断方法和存在的问题作一简要综述。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 诊断
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布渣叶总黄酮固体分散体片的大鼠体内生物利用度研究 被引量:2
11
作者 孙冬梅 徐文杰 +2 位作者 朱颖 陈玉兴 陈昭 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2016年第8期1936-1940,共5页
目的:建立了一种同时测定大鼠血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的HPLC/MS方法,并分析了布渣叶总黄酮提取物(BZY)和布渣叶总黄酮固体分散体片(SDT)的大鼠体内药代动力学特征,评价SDT体内生物利用度。方法:SD大鼠随机分为两组,分别灌胃给予... 目的:建立了一种同时测定大鼠血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的HPLC/MS方法,并分析了布渣叶总黄酮提取物(BZY)和布渣叶总黄酮固体分散体片(SDT)的大鼠体内药代动力学特征,评价SDT体内生物利用度。方法:SD大鼠随机分为两组,分别灌胃给予BZY和SDT,分别于不同时间点取血,采用HPLC/MS测定牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的血药浓度,绘制药时曲线,运用kinetica4.4软件计算药动学参数。结果:比较口服布渣叶总黄酮提取物和布渣叶总黄酮固体分散体片的药动学参数,牡荆苷AUC_(0→12)分别为(3.425±0.135)和(5.257±0.257)mg·L^(-1)·h,MRT_(0→t)分别为(4.317±0.129)和(4.467±0.104)h,t_(1/2)分别为(9.128±2.556)和(11.335±4.102)h,tmax分别为(0.500±0.000)和(1.0±0.000)h,Cmax分别为(0.7±0.049)和(1.295±0.042)mg·L^(-1),异牡荆苷AUC_(0→12)分别为(3.547±0.056)和(6.057±0.242)mg·L^(-1)·h,MRT0→t分别为(4.417±0.109)和(4.235±0.147)h,t_(1/2)分别为(6.382±1.429)和(7.411±3.566)h,tmax分别为(0.692±0.047)和(0.583±0.204)h,Cmax分别为(0.692±0.047)和(1.455±0.024)mg·L^(-1),水仙苷AUC_(0→12)分别为(11.962±0.584)和(20.400±0.444)mg·L^(-1)·h,MRT0→t分别为(4.270±0.088)和(4.310±0.056)h,t1/2分别为(2.879±0.840)和(3.054±0.588)h,tmax分别为(1.500±0.000)和(1.500±0.000)h,Cmax分别为(2.542±0.134)和(4.665±0.060)mg·L^(-1)。以BZY为对照,SDT中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的相对生物利用度分别为178.9%、187.5%、166.2%,且各指标的药动学参数AUC0→t、AUC0→∞、Cmax均显著性升高(P<0.01)。结论:提示制剂技术能提高布渣叶总黄酮中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的生物利用度,达到了实验预期要求。 展开更多
关键词 布渣叶 总黄酮 生物利用度 固体分散体
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田鼠巴贝虫可溶性抗原组分分析及其初步应用 被引量:2
12
作者 张加 司晨晨 +3 位作者 蔡玉春 卢艳 陈韶红 陈家旭 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期469-472,478,共5页
目的 分析田鼠巴贝虫可溶性抗原,寻找可用于免疫诊断的有效抗原组分.方法 用田鼠巴贝虫感染BALB/c小鼠,待虫血症达高峰期时,收集田鼠巴贝虫虫体;采用超声法制备可溶性粗抗原(soluble babesia antigens,SBA)并包板,ELISA检测血清特异性... 目的 分析田鼠巴贝虫可溶性抗原,寻找可用于免疫诊断的有效抗原组分.方法 用田鼠巴贝虫感染BALB/c小鼠,待虫血症达高峰期时,收集田鼠巴贝虫虫体;采用超声法制备可溶性粗抗原(soluble babesia antigens,SBA)并包板,ELISA检测血清特异性IgG,评价SBA的免疫反应性、交叉反应性和特异性;以SDS-PAGE电泳分析SBA组分,并进行Western Blot,分析其与感染鼠血清的反应性.结果 SBA-ELISA法可检测早期感染(7 d)小鼠血清,且与恶性疟、间日疟弓形虫病阳性血清无交叉反应,显示出其较好的诊断敏感性和较高的特异性.通过SDS-PAGE分析,获得5条分子质量为72、66、60、53、43 kDa的主蛋白带和介于14.4~116 kDa的7条次带.经Western Blot分析,SBA有15个抗原组分能被阳性小鼠血清识别,以72、53、43、39、30 kDa蛋白组分反应较强.结论 以SBA建立的间接ELISA可用于巴贝虫感染的有效筛查工具;田鼠巴贝虫可溶性抗原组分中72、53、43、39、30KDa为比较理想的抗原组分. 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 可溶性抗原 SDS-PAGE WESTERN BOLT ELISA
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热熔挤出法制备布渣叶提取物固体分散体 被引量:2
13
作者 涂瑶生 朱颖 +1 位作者 孙冬梅 徐文杰 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期728-734,共7页
目的采用热熔挤出法制备布渣叶提取物固体分散体,提高布渣叶提取物的体外溶出度。方法以PEG6000和泊洛沙姆407联合应用为载体,采用热熔挤出法制备布渣叶提取物固体分散体,并对其物相特征、溶出行为进行研究。结果 PEG6000和泊洛沙姆407... 目的采用热熔挤出法制备布渣叶提取物固体分散体,提高布渣叶提取物的体外溶出度。方法以PEG6000和泊洛沙姆407联合应用为载体,采用热熔挤出法制备布渣叶提取物固体分散体,并对其物相特征、溶出行为进行研究。结果 PEG6000和泊洛沙姆407按1∶4比例制备的布渣叶提取物固体分散体,总黄酮、牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的溶出度分别为80%、100%、100%、90%。在相同药辅比情况下,二元载体制备的固体分散体的溶出度和溶出速率比单一载体制备的固体分散体均有明显提高。结论以PEG6000和泊洛沙姆407联合应用为载体,采用热熔挤出法制备的布渣叶提取物固体分散体,能显著改善布渣叶提取物中总黄酮、牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的溶出度。 展开更多
关键词 布渣叶 提取物 热熔挤出 体外溶出度
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布渣叶总黄酮基本理化性质研究 被引量:5
14
作者 徐文杰 孙冬梅 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第2期362-365,共4页
目的:考察布渣叶固形物质量、总黄酮提取物的溶解度,研究温度、湿度、强光照射等对其稳定性的影响。方法:以总黄酮、牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷为指标,采用摇瓶法测定布渣叶总黄酮提取物在水、0.1 mol·L-1盐酸溶液和p H 6.8磷酸盐... 目的:考察布渣叶固形物质量、总黄酮提取物的溶解度,研究温度、湿度、强光照射等对其稳定性的影响。方法:以总黄酮、牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷为指标,采用摇瓶法测定布渣叶总黄酮提取物在水、0.1 mol·L-1盐酸溶液和p H 6.8磷酸盐缓冲液(PBS)中的表观溶解度与平衡溶解度,并考察光照、温度、湿度对其稳定性的影响。结果:布渣叶总黄酮提取物表观溶解度及总黄酮的平衡溶解度在0.1 mol·L-1、盐酸溶液水和p H 6.8 PBS中均属于略溶;以牡荆苷、异牡荆苷为指标,布渣叶总黄酮提取物在0.1 mol·L-1盐酸溶液、水和p H 6.8 PBS中平衡溶解度均为几乎不溶;以水仙苷为指标,布渣叶总黄酮提取物在0.1 mol·L-1盐酸溶液、水和p H 6.8 PBS中平衡溶解度均为极微溶解。稳定性试验结果显示光照、高温、高湿条件对布渣叶总黄酮提取物的含量几乎无影响。结论:随着介质的p H增大,布渣叶总黄酮提取物及其指标成分的溶解度减小。在高湿高温强光照射条件下,布渣叶总黄酮提取物的4个指标成分均较为稳定。研究结果为布渣叶总黄酮提取物的剂型设计以及其他药学研究提供实验依据。 展开更多
关键词 布渣叶 总黄酮 平衡溶解度 稳定性
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北京市密云县野栖鼠感染田鼠巴贝西虫的检测 被引量:2
15
作者 王振生 王小梅 +5 位作者 窦相峰 李旭 任海林 刘娟 卜玲毅 王恒 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2013年第4期218-222,共5页
针对2012年6月于北京市密云县辖区捕获的15只野栖鼠,检测其巴贝西虫感染状况。通过制备薄血涂片及采集心、肺组织样本提取基因组,结合镜检及聚合酶链式反应确定感染阳性样本,对巴贝西虫核糖体小亚基编码基因虫种特异片段进行扩增并... 针对2012年6月于北京市密云县辖区捕获的15只野栖鼠,检测其巴贝西虫感染状况。通过制备薄血涂片及采集心、肺组织样本提取基因组,结合镜检及聚合酶链式反应确定感染阳性样本,对巴贝西虫核糖体小亚基编码基因虫种特异片段进行扩增并测序,通过序列对比及进化树构建对野栖鼠感染的巴贝西虫进行同源性分析及虫种鉴别。本次检测的野栖鼠中1份社鼠Niviventerconfucianus血液镜检阳性,对应的心、肺组织样本检测到巴贝西虫虫种特异DNA片段,同源进化分析表明,该虫株与我国浙江、福建、台湾地区的田鼠巴贝西虫分离株具有高度同源性,属于田鼠巴贝西虫Babesiamicroti。北京市密云县野栖鼠首次被证实存在感染田鼠巴贝西虫的情况。 展开更多
关键词 田鼠巴贝西虫 聚合酶链式反应 薄血涂片
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液氮保种对田鼠巴贝虫标准株存活力的影响
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作者 蔡玉春 陈家旭 +3 位作者 卢艳 艾琳 吴芬 陈韶红 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期583-587,共5页
目的探索液氮保种对田鼠巴贝虫标准株存活力的影响。方法液氮保种1、3、6、9个月的田鼠巴贝虫标准株小鼠血室温复苏后感染正常BALB/c小鼠各3只(复苏1代,实验组),100μL/只;同时取3只新感染田鼠巴贝虫活体保藏小鼠为对照组。实验组染虫... 目的探索液氮保种对田鼠巴贝虫标准株存活力的影响。方法液氮保种1、3、6、9个月的田鼠巴贝虫标准株小鼠血室温复苏后感染正常BALB/c小鼠各3只(复苏1代,实验组),100μL/只;同时取3只新感染田鼠巴贝虫活体保藏小鼠为对照组。实验组染虫率达高峰时再接种正常BALB/c小鼠(复苏2代),观察田鼠巴贝虫的形态变化及增殖情况,并观察不同保存时间复苏1代及复苏2代的染虫率情况。结果液氮保种田鼠巴贝虫与活体保种的田鼠巴贝虫相比,形态变化不大,都会出现小滋养体、环状滋养体、裂殖体及未成熟和成熟裂殖子等多种形态。液氮复苏1代首次查见虫体及达到染虫率高峰的时间比动物保种延迟1~2d,但复苏2代即恢复一致。田鼠巴贝虫染虫全血经液氮保存1、3、6、9个月,仅达到高峰期时间延迟,其存活力未见明显下降。结论液氮保种对田鼠巴贝虫形态及存活力影响小,可成为一种较好的保存方式。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 液氮保种 动物保种 存活力
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广西某血站献血员巴贝虫感染情况调查 被引量:11
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作者 王华素 彭恒 +1 位作者 朱淮民 薛绍礼 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期283-287,共5页
目的调查分析广西某采血站献血员感染巴贝虫情况,提供我国巴贝虫的流行病学基础资料,也为安全输血提供科学依据。方法于2013年从广西某血站搜集抗凝输血袋残留血,共计1 900份,采用巴贝虫属18SrRNA和β-tubulin的引物Nest-PCR、形态学观... 目的调查分析广西某采血站献血员感染巴贝虫情况,提供我国巴贝虫的流行病学基础资料,也为安全输血提供科学依据。方法于2013年从广西某血站搜集抗凝输血袋残留血,共计1 900份,采用巴贝虫属18SrRNA和β-tubulin的引物Nest-PCR、形态学观察及间接荧光免疫方法(IFA),对献血员血液内的巴贝虫感染情况进行检测。结果广西某采血站献血员血液内巴贝虫感染总阳性率为2.53%(48/1 900),均为田鼠巴贝虫(Babesia microti),巴贝虫属18SrRNA引物扩增灵敏度远高于β-tubulin引物。显微镜检查有38份标本在红细胞内发现有核呈圆形且致密、胞质呈环形且纤细的环状体,巴贝虫属18SrRNA的Nest-PCR阳性标本血清IFA在抗体滴度≥1∶64未观察到特异性荧光,视为阴性。结论健康献血员中存在一定比例的Babesia microti感染率,对于有免疫功能低下的接受输血者来说,应当增加输血样本的巴贝虫检测。 展开更多
关键词 巴贝虫属 18SrRNA 献血员 巢式PCR 田鼠巴贝虫
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田鼠巴贝虫感染FTA-环介导等温扩增检测技术的建立 被引量:5
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作者 吴芬 蔡玉春 +5 位作者 秦志强 艾琳 卢艳 陈绍红 吴秀萍 陈家旭 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期435-441,共7页
目的建立敏感、特异、高效的检测田鼠巴贝虫FTA-环介导等温扩增技术(LAMP)。方法根据GenBank公布的田鼠巴贝虫基因序列,就细胞色素B基因保守序列设计了多套LAMP引物,利用LAMP RealTime Turbidimeter LA-320仪筛选最佳引物、反应条件,建... 目的建立敏感、特异、高效的检测田鼠巴贝虫FTA-环介导等温扩增技术(LAMP)。方法根据GenBank公布的田鼠巴贝虫基因序列,就细胞色素B基因保守序列设计了多套LAMP引物,利用LAMP RealTime Turbidimeter LA-320仪筛选最佳引物、反应条件,建立LAMP检测方法,从保存有血液样本的FTA卡片中提取田鼠巴贝虫DNA进行LAMP,观察检测效果。结果设计的4组引物做LAMP试验,其中以引物1,最佳反应温度为64℃,恒温下作用,敏感性高,可在1h内完成,其检出限量为0.687fg/μL,而PCR的最低检测量为0.687pg/μL,与间日疟原虫、恶性疟原虫、卵形疟原虫、三日疟原虫、诺氏疟原虫、冈地弓形虫、利什曼原虫、冈比亚锥虫均无交叉反应。以建立的FTA-LAMP法检测20份PCR检测阳性的田鼠巴贝虫感染者血样,其阳性符合率100%。结论成功建立了检测田鼠巴贝虫特异性细胞色素B基因的FTA-LAMP方法,该法特异性强、灵敏度高、简便、快速、适于现场应用。 展开更多
关键词 田鼠巴贝虫 环介导等温扩增技术 FTA卡 细胞色素B基因
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田鼠巴贝西虫截短型分泌抗原1的原核表达与抗原性鉴定 被引量:1
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作者 姬艺洪 刘静娴 +4 位作者 史智扬 宋小凯 李祥瑞 周金林 焦永军 《江苏预防医学》 CAS 2017年第2期124-127,共4页
目的对田鼠巴贝西虫(Babesia microti)的诊断抗原分泌抗原1(Babesia microtisecreted antigen 1,BmSA1)的截短部分(tBmSA1)进行克隆构建、原核表达与纯化,并对重组tBmSA1进行质谱鉴定以及抗原性鉴定。方法通过PCR扩增截短型tBmSA1基因,... 目的对田鼠巴贝西虫(Babesia microti)的诊断抗原分泌抗原1(Babesia microtisecreted antigen 1,BmSA1)的截短部分(tBmSA1)进行克隆构建、原核表达与纯化,并对重组tBmSA1进行质谱鉴定以及抗原性鉴定。方法通过PCR扩增截短型tBmSA1基因,将其插入原核表达载体pET-30a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组tBmSA1,使用AKTA进行镍亲和层析纯化,并对纯化的重组tBmSA1进行质谱分析,通过Western Blot和ELISA鉴定重组tBmSA1的抗原性。结果成功构建了重组质粒pET-30a(+)-tBmSA1,重组tBmSA1得到高效表达和纯化,质谱分析验证了其正确性,Western Blot和ELISA结果显示其具有较好的抗原性。结论实现了田鼠巴贝西虫tBmSA1的原核高效表达,并验证了其诊断价值,为田鼠巴贝西虫感染诊断奠定了基础。 展开更多
关键词 田鼠巴贝西虫 分泌抗原 纯化 质谱分析 抗原性鉴定
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田鼠巴贝斯虫棒状体蛋白相关因子1基因的原核表达及其特性研究 被引量:1
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作者 蒋艺佳 肖雯雯 +6 位作者 聂政 敖阳思琦 李慕晓 何沛 周金林 赵俊龙 贺兰 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第2期48-54,共7页
本研究以田鼠巴贝斯虫基因组DNA为模板,扩增棒状体蛋白相关因子1(rhoptry-associated protein interacting factor 1,简称RAPIF1)基因,全长为771 bp,编码256 aa,编码蛋白的分子质量为29 kDa。利用多种数据库与生物信息学分析软件,对田... 本研究以田鼠巴贝斯虫基因组DNA为模板,扩增棒状体蛋白相关因子1(rhoptry-associated protein interacting factor 1,简称RAPIF1)基因,全长为771 bp,编码256 aa,编码蛋白的分子质量为29 kDa。利用多种数据库与生物信息学分析软件,对田鼠巴贝斯虫RAPIF1进行生物信息学分析,预测其亲水性/疏水性、跨膜区、信号肽、翻译后修饰位点、B淋巴细胞抗原表位,结果预示RAPIF1具有良好的亲水性。将RAPIF1的ORF插入表达载体pET-28a进行原核表达,重组蛋白rRAPIF1大小为37 kDa。制备rRAPIF1的多克隆抗体,Western blot结果显示,RAPIF1存在于虫体中,且rRAPIF1具有良好的反应原性,可有效区分田鼠巴贝斯虫阳性血清和阴性血清。本研究结果表明,RAPIF1预期可作为田鼠巴贝斯虫检测和疫苗制备的候选分子。 展开更多
关键词 田鼠巴贝斯虫 棒状体蛋白相关因子1 生物信息学分析 原核表达
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