SD大鼠乳鼠原代皮质神经元和小胶质细胞同时提取并培养的实验方法

背景:原代皮质神经元和小胶质细胞在探索神经系统疾病细胞疗法中起着至关重要的作用,而目前获得2种细胞的方法大多较繁琐,需分别单独提取。因此找到一种便捷、快速可同时提取2种细胞的方法十分关键。目的:探索一种新型同时提取原代皮质神经元及小胶质细胞的方法。方法:取24 h内新生SD大鼠乳鼠,将大脑取出放入装有DMEM的培养皿中,去除软脑膜后备用。同一脑组织,先提取原代神经元,再将剩余脑组织用于提取小胶质细胞,整个过程在冰上操作。原代皮质神经元提取培养步骤:镊子夹取2.0-3.0 mm厚度大脑皮质组织置于培养皿,用木瓜蛋白酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈互相粘连的组织悬液,吸上清细胞悬液,过滤、分装到15 mL离心管中,离心并重悬后将细胞接种于左旋多聚赖氨酸包被的6孔板爬片上放入细胞培养箱,每隔1 d观察神经元形态,第7天进行MAP2和β-Tubulin免疫荧光染色鉴定。小胶质细胞提取培养步骤:夹取上一步取皮质后剩余脑组织,厚度8-10 mm,置于培养皿,用胰酶消化20 min,中止消化后吹打组织呈匀浆,然后将匀浆转移到培养瓶中培养,第14天将培养瓶封口后进行恒温水平摇床振荡2 h,小胶质细胞脱落于上清中;取纯化后的小胶质细胞继续培养3 d进行Iba1免疫荧光染色鉴定。结果与结论:(1)神经元培养24 h后贴壁、胞体变大,部分神经元长出突触;培养到第3,5天时胞体进一步增大,大部分神经元已呈突触形态,部分神经元成团生长;第7天时,神经元突触延长增粗并互相连接成网。经β-Tubulin、MAP2免疫荧光染色鉴定为神经元。(2)小胶质细胞培养第1天换液后可见细胞贴壁生长;第3,5,7天时细胞密度均较小,细胞形态呈高亮椭圆或圆形,但已基本成团块状生长于其他细胞上层;第10天时小胶质细胞密度明显增大;第14天时小胶质细胞呈致密团块状生长于其他细胞上层,此时可进行分离纯化。取分离纯化后细胞再培养至第3天,经Iba1免疫荧光鉴定为小胶质细胞,且纯度大于95%。(3)结果表明,经此法提取并培养获得的原代皮质神经元和小胶质细胞纯度高、形态好、成活率高。

吸入暴露途径下纳米塑料在SD大鼠体内的富集特征研究

为探讨吸入暴露纳米级塑料在生物体呼吸系统以外组织上的富集特征,以100 nm聚苯乙烯微球对SD大鼠进行2 h短期吸入暴露,使用热裂解-气相色谱质谱法测定大鼠肝脏、肾脏、心脏以及脑组织上的聚苯乙烯浓度。结果显示:暴露组大鼠肾脏、心脏和肝脏中的浓度[(0.416±0.143)、(0.633±0.278)和(0.617±0.179)g/g]显著高于对照组大鼠[(0.249±0.020)、(0.070±0.096)和(0.101±0.140)g/g],差异具有统计学意义(P<0.05),但各组织间的相关性不显著(P>0.05);2组大鼠脑组织均未检出聚苯乙烯。研究表明,100 nm聚苯乙烯微球吸入暴露2 h后,可通过肺泡进入血液循环,进而在大鼠肝脏、肾脏、心脏中形成沉积。通过探讨纳米级塑料在生物体内的累积特征,为深入开展吸入纳米塑料对人体的健康影响研究提供数据支撑。

基于液质联用法测定嘧啶核苷类化合物GY005在SD大鼠体内的药代动力学实验研究

建立LC-MS/MS法测定嘧啶核苷类化合物GY005在大鼠血浆中的浓度,并应用于大鼠体内的药代动力学研究。以特非那定为内标,经乙腈-甲醇沉淀蛋白后,采用ACE 5 C4 column(50 mm×2.1 mm,2.5μm)色谱柱,以0.1%甲酸水和0.1%甲酸乙腈为流动相,进行梯度洗脱分离,流速0.7 mL·min^(-1),进样量10μL;采用电喷雾离子源(ESI),正离子扫描方式,MRM扫描,分别以m/z 445.15→270.10和m/z 472.40→436.40作为化合物GY005和内标(特非那定)的质谱检测条件。大鼠灌服2 mg·kg^(-1)化合物GY005后,不同时间点取样测定其血浆浓度,计算药代动力学参数。雌雄SD大鼠单次静脉注射2 mg·kg^(-1)的受试品后,化合物GY005在雄性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(228±44)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.30±0.01)h,清除率(CL)为(149±29)mL·min^(-1)·kg^(-1)。化合物GY005在雌性大鼠体内的暴露量(AUC_(last))为(215±158)h·ng·mL^(-1),消除半衰期(T_(1/2))为(0.32±0.03)h,清除率(CL)为(226±162)mL·min^(-1)·kg^(-1)。雌雄间暴露水平相当,没有显著性差异。这个方法具有简便、灵敏、快捷,适用于化合物GY005的药代动力学研究。

菜籽油对SD大鼠糖脂代谢的影响

本实验采用微波对菜籽进行预处理并压榨制成菜籽油(rapeseed oil,RO),探究RO干预后对高糖高脂饮食SD大鼠糖脂代谢的影响。结果表明:RO能够抑制SD大鼠体内HbAlc的上升和促进肝糖原的合成以改善血糖代谢。RO能够显著降低SD大鼠血浆中TC、TG、LDL-C的水平和提高HDL-C以改善血脂代谢,同时提高SD大鼠血浆中GSH-Px、SOD、CAT的活性和GSH含量,并减少降低MDA的生成以降低血糖血脂对脏器的损伤。此外,RO通过降低ApoB含量以及增加ApoA1含量来调控LDL-C和HDL-C。因此,RO可有效地调节血糖血脂代谢、提高血浆抗氧化能力,缓解氧化应激。RO具备开发成为辅助降血糖血脂制品原料的潜力。

刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育的影响

目的:观察刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育的影响。方法:实验设刺山柑果风湿止痛凝胶膏高(117.8 g/m^(2))、中(58.9 g/m^(2))、低(29.5 g/m^(2))剂量组,辅料对照组(辅料帖)和阳性对照组(环磷酰胺),妊娠第6天(GD6)~GD15每天经皮给药1次,阳性对照组于GD12皮下注射环磷酰胺。实验期间观察孕鼠的一般状况、体质量和饲料消耗量;GD20处死孕鼠,取胎仔,检查子宫连胎质量、黄体数、着床数、胎仔质量、胎仔身长、胎仔尾长、活胎数、死胎数、吸收胎数、胎仔性别及外观、内脏和骨骼畸形。结果:刺山柑果风湿止痛凝胶膏各剂量组孕鼠体质量、体质量增量、摄食量、子宫连胎质量、子宫和卵巢的脏器质量及其系数、平均黄体数、着床前丢失率、平均着床数、着床率、平均活胎数、活胎率、死胎率、吸收胎率、胎仔性别比、胎仔的外观异常率、窝均体质量、窝均身长、窝均尾长、骨骼畸形率和内脏畸形率与辅料对照组相比差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论:刺山柑果风湿止痛凝胶膏对SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性的未见不良反应水平为117.8 g/m^(2),是临床拟用体表剂量的12倍。在本试验条件下,SD大鼠经皮给予刺山柑果风湿止痛凝胶膏对胚胎-胎仔发育无毒性影响。

Toxic Effects of Tetrabromobisphenol A on Thyroid Hormones in SD Rats and the Derived-reference Dose

The present study determined the thyroid hormone interference of tetrabromobisphenol A （TBBPA） in Sprague-Dawley （SD） rats, and the derived-reference dose （RfD） of different endpoint effects on mammals based on experimental results and data collection. Based on repeated exposure toxicity tests on mammals and extensive research, the present study used BMDS240 Software to derive a benchmark dose, and analyzed the accuracy and uncertainty, and similarity with other studies. Test results on triiodothyronine （T3）, thyroxine （T4）, and thyroid stimulating hormone （TSH） demonstrated that all the indicators presented a non-monotonous dose-effect relationship clearly, except TSH in male rats exposed to 0-1000 mg/kg BW per day. Therefore, RfDs were derived from different critical effects. In summary, RfD for mammals in the present study was found to be 0.6 mg/kg per day.

SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验背景数据的建立

目的总结国家药物安全评价监测中心2013-2022年SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的正常值范围,建立SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验各指标的背景数据库,为药物胚胎-胎仔发育毒性评价提供参考。方法对本中心2013-2022年11项SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中对照组共计205只孕鼠和3037只胎鼠各项胚胎发育和胎仔生长发育指标进行统计分析,计算其平均数、标准差、变异系数和95%置信区间。指标包括孕鼠妊娠期体重和体重增长幅度、孕鼠摄食量、妊娠结局(妊娠率、平均黄体数、平均着床数、平均活胎数、活胎率、吸收胎率、死胎率)、胎仔生长发育情况(胎仔重、胎盘重、性别比)、胎仔外观异常率、内脏异常率和骨骼异常率。结果孕鼠妊娠期体重呈增长趋势,妊娠后期体重增长幅度明显增大。孕鼠摄食量随着妊娠时间的增加呈增长趋势。妊娠第20天进行剖腹产,妊娠率为93.2%,平均黄体数、着床数和活胎数分别为18.0±3.2,15.9±2.8和14.8±3.0,活胎率为93.4%,死胎率为6.6%;胎仔雄/雌性别比为0.94,平均体重为(3.6±0.3)g,胎盘平均重量为(0.6±0.3)g。胎仔外观异常发生率约为0.2%,内脏异常率约为0.8%。骨骼异常率约为1.2%,未骨化和骨化不全的发生率较高,主要发生于胸骨和舌骨等,胎仔的掌骨骨化数、跖骨骨化数和骶尾椎骨化数分别为7.0±0.7,8.0±0.1和7.4±0.5,第Ⅰ~Ⅳ胸骨骨化率较高,平均为98.6%~99.9%,第Ⅴ胸骨骨化率为(68.0±28.4)%,第Ⅵ胸骨骨化率为(82.8±23.9)%。结论初步建立了本GLP实验室SD大鼠胚胎-胎仔发育毒性试验中各指标背景数据库,为生殖毒性研究提供参考。

不同低氧胁迫方式下SD大鼠急进高原模型的比较研究

目的对SD大鼠在高原实地和模拟高原环境这2种低氧胁迫方式下建立的急进高原模型进行比较研究,进而鉴定模拟高原实验舱的可靠性。方法将SD大鼠分别急进模拟高原动物实验舱(4000 m)或高原实地实验室(4010 m)来建立大鼠急进高原模型,在暴露24 h或72 h后采集并测定高原生理病理变化相关指标,主要包括血常规、血生化、血气、氧化损伤指标(超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px))、炎症指标(白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)和白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6))、病理组织分析和低氧敏感基因(低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,Hif-1α)和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,Vegfa))等,最终对结果进行差异性分析,得出差异性评估报告。结果相同海拔高度下,高原实地或模拟高原暴露72 h后均可以产生明显的肺部和脑部损伤。相同暴露时间下,动物机体的血常规、血生化和血气结果相近,炎症指标(IL-6,IL-1β,MCP-1和IFN-γ)、氧化损伤指标(MDA,SOD和GSH)和脑部低氧敏感基因(Hif-1α和Vegfa)等检测结果无显著性差异。但是,模拟72 h组的二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PaCO_(2))和碱剩余(base excess,BE)显著高于其他低氧处理组、模拟72 h组的肺部低氧敏感基因(Hif-1α和Vegfa)与空白对照组无显著性差异,以及高原实地处理组脑系数显著高于模拟高原处理组等结果提示高原实地和模拟高原环境可能存在细微区别。结论模拟高原实验舱在4000 m海拔可成功建立急进高原动物模型,最优暴露时间应大于24 h但略短于72 h。模拟高原实验舱具有良好的可靠性,但条件允许情况下应尽量前往高原实地来建立急进高原动物模型。

N-亚硝基布美他尼SD大鼠体内致突变性风险研究

目的评价布美他尼杂质N-亚硝基布美他尼的体内致突变风险和肝细胞DNA损伤风险。方法SD大鼠随机分为6组,分别为:溶媒对照组(溶媒为0.5%羧甲基纤维素钠),N-亚硝胺布美他尼100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组,阳性对照组1[N-乙基-N-亚硝基脲(ENU),40 mg·kg^(-1)]、阳性对照组2[甲磺酸乙酯(EMS),200 mg·kg^(-1)]。2个阳性对照组均为每组6只动物,其余每组12只动物。大鼠连续14 d经口灌胃给予受试物N-亚硝胺布美他尼。首次给药后约14 d和约28 d后采集外周血用于Pig-a基因突变率检测,末次给药后约3 h取肝细胞开展彗星试验。结果试验期间给予N-亚硝基布美他尼未导致异常临床症状和动物体重及摄食量改变。100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物肝细胞平均tail%DNA值(平均数/中位数)分别为2.90±0.38/2.34±0.46、3.58±0.27/2.87±0.51、3.45±0.59/2.21±1.44,与溶媒对照组相应数值相比未见差异,且无明显剂量效应相关性。首次给药后14 d,100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物平均RBC^(CD59-)和RET^(CD59-)百万分之发生率(RBC^(CD59-)百万分之发生率/RET^(CD59-)百万分之发生率)分别为2.9±1.6/1.2±0.8、2.8±2.4/1.3±1.5、2.4±1.0/1.3±1.5;首次给药后28 d,100、300、1000 mg·kg^(-1)剂量组动物RBC^(CD59-)百万分之发生率/RET^(CD59-)百万分之发生率分别为5.1±1.5/2.2±0.6、4.3±1.5/3.5±3.6、4.8±2.4/2.5±2.7。上述数值与相同时间点溶媒对照组相比均未见差异,且经统计学分析未见剂量效应相关性。结论连续经口给予N-亚硝基布美他尼14 d,SD大鼠的最大耐受量高于1000 mg·kg^(-1),未检出外周血基因突变风险和肝细胞DNA损伤风险。研究数据可为药品中遗传毒性杂质的合理监管和含N-亚硝基杂质药物的安全使用提供数据支持。

SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法

目的:探索有效的SD大鼠、小鼠创面新生皮肤组织石蜡切片的制备方法。方法:取21只雄性SD大鼠、21只雄性SD小鼠制作创伤模型,在不同愈合时间取创面新生皮肤组织制作石蜡切片,对石蜡切片制作过程中的关键步骤进行控制,包括固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、脱蜡、复水、染色、脱水、封藏等。比较不同愈合时间皮肤组织石蜡切片的差异。结果:实验制得组织切片染色均匀,细胞排列紧密,无裂缝,细胞核染色清晰,呈暗红色,成纤维细胞、毛囊、毛细血管和肌肉组织结构均清晰可见。随着愈合时间的延长,皮肤表皮层增厚,毛囊越来越多且分化程度提高,成纤维细胞数量增加。结论:该制备方法可以有效保证石蜡切片的质量并判定皮肤愈合程度。

不同抗凝比例对SD大鼠凝血指标的影响

目的探讨不同抗凝比例对SD大鼠凝血结果的影响。方法SD大鼠80只,雌雄各半。腹腔静脉采血,部分进行血钙(Ca^(2+))、血细胞比容(HCT)和血小板(PLT)的检测,其余按照枸橼酸钠抗凝管1∶2、1∶4、1∶6、1∶8和1∶10的抗凝比例,进行凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的检测,并分析结果。结果SD大鼠的Ca2+和HCT与人类正常值相近,但PLT远大于人类PLT的正常值范围。APTT随着抗凝剂量增加时间延长,各抗凝组间差异有统计学意义(P<0.05),PT随着抗凝剂量增加时间延长,各抗凝组与1∶2或1∶4组间差异有统计学意义(P<0.05)。APTT在抗凝比1∶8~1∶10时凝固曲线基线期缩短,PT在抗凝比1∶2~1∶4时凝固曲线有异常波动。结论SD大鼠最优抗凝比应适当高于人类,在1∶6左右能降低不合格标本的检出率,给动物实验提供更可靠的检测结果。

不同周龄和性别的SPF级SD大鼠血液生理生化指标的测定与比较分析

目的探讨分析不同周龄和性别的SPF级SD大鼠血液生理生化指标。方法研究对象为SPF级SD大鼠80只,并随机将其分为4、12、24、48周龄4个实验组,每组内雌雄比例为1:1,所有SD大鼠均应用XFA6030型动物血液细胞分析仪对其血液生理指标展开分析,应用Beckman Coulter AU5800全自动生化分析仪对其血液生化指标展开分析。结果与12、24、48周龄SD大鼠相比较,4周龄的SD大鼠在WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT、PCT、BA#、BA%几方面具有较大差异,P<0.05,且各项指标达到峰值的时间均为24周,在雌雄的性别差异中,4周龄SD大鼠BA%具有差异;12、24周龄SD大鼠WBC、RBC具有差异;24周龄SD大鼠BA%具有差异;48周龄SD大鼠MCH、PCT具有差异,且所有差异P值均<0.05;与12、24、48周龄SD大鼠相比较,4周龄的SD大鼠在AST、CHOL、TP、GLU、CRE、ALT、ALP、BUN、TG几方面具有较大差异,P<0.05,在雌雄的性别差异中,4周龄SD大鼠CRE、ALP见具有差异;12周龄SD大鼠AST、CHOL、BUN具有差异;12周龄以及24周龄SD大鼠ALP具有差异,且所有差异P值均<0.05。结论在性别相同但周龄不同的SD大鼠中,其血液生理生化指标存在统计学差异,同样的,在同周龄但不同性别的SD大鼠中亦存在差异。

The effect of Xin-Nao-Xue-Mai-Ning on SD rats with hypothyroidism and IRE1-XBP1 signaling

Objective:To investigate the effect of Xin-Nao-Xue-Mai-Ning(XNXMN)on hypothyroidism in SD rats and explore the effect of IRE1-XBP1 signaling pathway on hypothyroidism in rats,and to analyze the possible mechanism of XNXMN in the treatment of hypothyroidism.Method:Twenty-four male SD rats were given a 0.1%concentration of propylthiouracil(PTU)solution by gavage every day to establish a hypothyroidism animal model.After the completion of the model building,intervention with XNXMN.Observe the general conditions of rats,serum triiodothyronine(T3),tetraiodothyronine(T4),thyroid stimulating hormone(TSH)levels,X box binding protein 1(XBP-1)protein expression level,and perform statistical analysis.Results:XNXMN can improve the general condition of hypothyroidism rats,reduce serum TSH,increase T3,T4 and reduce the expression of XBP1 protein in thyroid endoplasmic reticulum.Conclusion:XNXMN can improve the symptoms of hypothyroidism rats and has the effect of treating hypothyroidism.Its mechanism of action may be related to the expression of IRE1-XBP1 signaling pathway proteins that regulate the unfolded protein pathway of the endoplasmic reticulum.

HPLC-MS/MS法考察水黄皮素在SD大鼠体内的药代动力学特征

目的:建立大鼠血浆中水黄皮素的定量分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法:通过灌胃给予SD大鼠水黄皮素(10 mg·kg^(-1)),血浆样品经蛋白沉淀法处理后进行HPLC-MS/MS定量分析,以五味子醇甲为内标,采用Agilent Poroshell 120 EC-C_(18)(50 mm×3.0 mm,2.7μm)色谱柱,乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相,流速0.3 mL·min^(-1),梯度洗脱;采用电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)扫描,水黄皮素[M+H]^(+)m/z 293.1→277.0,五味子醇甲[M+H]^(+)m/z433.2→384.2;使用DAS软件计算相关药代动力学参数。结果:在1.5625~1600 ng·mL^(-1)浓度范围内,水黄皮素线性关系良好(r=0.9997),定量下限为1.5625 ng·mL^(-1),精密度RSD和准确度RE均小于20%;低、中、高质控样品精密度RSD和准确度RE均小于15%,提取回收率在91.70%~100.28%,基质效应在88.35%~97.55%,稳定性RSD均小于15%。水黄皮素在雌性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.95 h、1214.85 ng·mL^(-1)和11920.43 ng·mL^(-1)·h;在雄性SD大鼠体内T_(max)、t_(1/2)、C_(max)和AUC_(0→t)分别为3 h、1.19 h、1221.57 ng·mL^(-1)和9983.40 ng·mL^(-1)·h。结论:所建方法符合生物样品定量分析的基本要求,可用于水黄皮素在大鼠血浆中的含量测定及其药代动力学评价;水黄皮素在雌性SD大鼠体内的生物利用度更高。

SD大鼠外周血单个核细胞成分及干/祖细胞含量的年龄变化

目的:研究SD大鼠外周血单个核细胞(PBMNCs)的组成成分及其随年龄的变化,为大鼠PBMNCs相关研究提供参考。方法:使用淋巴细胞分离液、不连续密度梯度离心法制备3、6、12月龄雄性SD大鼠PBMNCs,检测PBMNCs中细胞种类和含量、淋巴细胞和单核细胞含量随年龄的变化趋势;流式细胞术、免疫荧光技术检测PBMNCs干/祖细胞含量及随年龄变化趋势。结果:使用淋巴细胞分离液,不连续梯度离心法制备PBMNCs,不同细胞成分分层清晰,红细胞、粒细胞去除较完全,PBMNCs中淋巴细胞、单核细胞含量随年龄的增长下降趋势明显;PBMNCs中Nanog、OCT4、SOX2、SSEA4四种干性标志物均有表达,Nanog阳性表达量最低,SSEA4表达量最高,可达23.1%;总体趋势均为6月龄大鼠PBMNCs中干/祖细胞含量最高。结论:SD大鼠PBMNCs中干/祖细胞含量较高,动物实验治疗疾病的作用可能较人体应用的疗效好。进行SD大鼠PBMNCs移植治疗疾病的实验研究,建议选用6月龄以下大鼠为宜。

缺血性脑卒中SD大鼠血清、脑脊液中NSE、MBP水平及其与神经功能缺损评分和脑梗死体积的相关性

目的探讨缺血性脑卒中SD大鼠血清、脑脊液中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、髓鞘碱性蛋白(MBP)水平及其与神经功能缺损评分和脑梗死体积的相关性。方法购买SD大鼠进行大脑中动脉闭塞缺血模型造模手术,将术后成功造模的大鼠随机分为8组,每组8只,术后8 h进行神经功能缺损评分,术后在8 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d及21 d时间段采集腹腔静脉血及抽取延髓脑脊液后,断头取脑,进行0.4%的2,3,5-氯化三苯基四氮唑大脑染色测定脑梗死体积,并检测NSE及MBP水平。采用Spearman相关对血清、脑脊液NSE、MBP水平与脑梗死体积和神经功能缺损评分的相关性进行分析。结果各组血清、脑脊液中NSE和MBP水平在术后8 h开始升高,3 d达峰值,7 d下降至与对照比较差异无统计意义(P>0.05);术后8 h至5 d,脑脊液NSE和MBP水平明显高于血清。血清、脑脊液NSE、MBP水平与脑梗死体积、神经功能缺损评分均呈正相关(P<0.05)。结论血清、脑脊液中NSE、MBP为脑梗死的新型标志物,通过动物实验可为临床患者标本采集推荐最佳时间窗口。

SD大鼠扩张型心肌病模型的建立

目的:探讨用多柔比星腹腔注射建立扩张型心肌病模型的可行性。方法:取10周龄雄性SD大鼠(350±50)g,共40只。随机分为4组:对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,给药组腹腔注射量分别为8、16、24 mg/kg,并于给药前及给药后第2、4、6、8周用心脏超声观察收缩期、舒张末期内径及射血分数;第9周取心肌观察病理形态特征结果:心脏超声检查显示给药8周后中、高剂量组大鼠左心室收缩期末口径及舒张期末口径增大,左心室射血分数下降(P<0.05);组织病理检查符合扩张型心肌典型病理特征,但高剂量组大鼠生存率较低。结论:予以大鼠多柔比星腹腔注射每周2 mg/kg,8周可建立扩张型心肌病实验模型。

不同配方高脂饲料构建SD大鼠肥胖模型的实验研究

目的:研究不同配方高脂饲料对构建SD大鼠肥胖模型成功率的影响。方法:40只5周龄雄性SD大鼠随机分成4组:C组(SPF级繁殖鼠料),H1组(40%自配高脂饲料)、H2组(45%高脂饲料)、H3组(60%高脂饲料),每组10只。每周称量大鼠体重,饲养11周后大鼠麻醉处死,测量每只大鼠的体长、脂肪重量(肾周脂肪和附睾脂肪),计算其脂体比、BMI和Lee’s指数;检测大鼠的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)浓度。分析各组间上述指标的差异性,综合评估不同配方饲料对SD大鼠肥胖的影响。结果:(1)H2组大鼠自第8周体重显著高于对照组(P<0.05),且建模效率最高;(2)45%高脂饲料显著升高大鼠血清TC、TG和LDL-C浓度,而显著降低HDL-C浓度(P<0.05);(3)60%高脂饲料极显著升高大鼠血清TC和TG浓度(P<0.01),显著升高LDL-C浓度(P<0.05),而极显著降低HDL浓度(P<0.01);H2和H3组大鼠肾周脂肪重量、附睾脂肪重量、脂体比和Lee’s指数显著高于对照组。结论:(1)构建SD大鼠肥胖模型成功的判断标准:高脂饲料组体重显著增加,TC、TG、LDL-C显著升高,HDL-C显著降低,脂体比显著增加,Lee’s指数显著升高;且个体体重超过对照组平均体重20%。(2)喂饲6周是利用45%脂供能高脂饲料构建SD大鼠肥胖模型最经济的建模周期。

豫医卷毛大鼠与SD大鼠主要脏器系数及生长发育情况比较

目的:探讨豫医卷毛大鼠与SD大鼠主要脏器及生长特性的差异。方法:分别在21d龄、28d龄、60d龄和90d龄时测量20只豫医卷毛大鼠和20只SD大鼠(雌雄各半)的主要脏器质量、体质量及体长、尾长,计算各脏器占体质量的百分比(脏器系数)。结果:28d龄卷毛大鼠体长小于SD大鼠(P<0.05),60d龄卷毛雄鼠体质量、尾长大于SD大鼠(P<0.05)。28d龄、90d龄雄性卷毛大鼠脾脏系数小于SD大鼠(P<0.05),60d龄雄性卷毛大鼠胸腺系数小于SD大鼠(P<0.05),其余日龄2种大鼠之间比较各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卷毛突变基因对大鼠的中期生长及免疫力有一定影响。

坤泰胶囊对SD大鼠生育力和早期胚胎毒性的研究

目的观察坤泰胶囊(熟地黄、黄连、白芍、黄芩、阿胶、茯苓)对SD大鼠生育力及早期胚胎发育的影响。方法雌鼠于交配前2周连续给予坤泰胶囊成品粉溶液至妊娠第7日。低剂量组2.5 g/kg、中剂量组5.0 g/kg、高剂量组10.0 g/kg,对照组给予双蒸水。试验期间每天观察大鼠一般情况。测定雌鼠的质量、摄食量。于妊娠第14天解剖雌鼠,记录孕鼠的怀孕子宫质量、黄体数、着床数、吸收胎数、活胎数和死胎数。记录雌鼠交配率和妊娠率。结果与对照组相比,坤泰胶囊成品粉低、中、高剂量组雌鼠怀孕第0～第14天的质量、怀孕雌鼠黄体数、着床数、活胎仔数、吸收胎数、胎窝总质量、卵巢质量、子宫质量、胚胎死亡率、雌鼠平均性周期天数和平均性周期数、交配率、雌动物受孕率差异无统计学意义。结论本实验条件下,坤泰胶囊成品粉在10.0 g/kg剂量下,对SD雌性大鼠无明显生育力和早期胚胎毒性。