CX3CL-1/CX3CR1信号调控的小胶质细胞活化在右美托咪定改善小鼠认知功能中的作用

目的按探究CX3CL-1/CX3CR1信号在右美托咪定(Dex)改善七氟醚诱导老龄小鼠认知功能障碍中的作用。方法野生型(WT)小鼠与CX3CR1敲除(CX3CR1^(-/-))小鼠各30只,各分为对照组,模型组,Dex组,每组10只。取模型组与Dex组小鼠以3%七氟醚麻醉,行肝脏切除术。术后每天腹腔注射20μg·kg^(-1)Dex,连续治疗7d,之后开展水迷宫实验与跳台实验。取小鼠脑组织分别开展苏木精-伊红染色、TUNEL染色、免疫组化染色、树突棘染色、电生理测试、Westernblot实验。丝结果与对照组相比,模型组小鼠水迷宫逃避潜伏期明显增加,穿越平台次数减少,第I象限停留时间减少,跳台错误潜伏期明显减少,跳台错误次数明显增加。在WT小鼠中,Dex明显减少了小鼠逃避潜伏期,增加了穿越平台次数与第I象限停留时间,提高了跳台错误潜伏期,减少了跳台错误次数。但在CX3CR1^(-/-)小鼠中,Dex对小鼠水迷宫测试和跳台实验中行为没有明显影响。此外,与模型组相比,WT小鼠经Dex治疗后,ibal表达明显减少,NLRP3表达降低,神经元状态明显恢复,TUNEL阳性细胞数明显减少。与此同时,Dex治疗明显增加了CX3CL-1/CX3CR1信号表达,提高了小鼠海马区fEPSP斜率,提高了树突棘密度。然而,对于CX3CR1^(-/-)小鼠,Dex对神经炎症,神经元凋亡以及树突棘的损伤没有明显影响。结论Dex通过激活CX3CL-1/CX3CR1信号抑制小胶质细胞活化,从而减轻神经炎症与神经元凋亡,提高树突棘密度,最终改善小鼠认知功能障碍。

脑内炎症反应对大鼠黑质多巴胺能神经元长时程毒性作用的研究

目的观察黑质部位炎症反应对多巴胺能神经元的长时程毒性作用,探讨脑内炎症反应在黑质多巴胺能神经元慢性变性过程中的作用。方法健康SD雄性大鼠28只,随机分为生理盐水组和10μg、25μg、50μg脂多糖组。定位注射生理盐水或脂多糖入右侧脑室,术后24周观察大鼠行为学改变,免疫组织化学染色观察黑质部位小胶质细胞的激活情况及酪氨酸羟化酶阳性神经元的变化。结果1.大鼠行为学观察显示,10μg、25μg和50μg脂多糖组大鼠的平均运动速度与对照组相比,差异无统计学意义。2.OX-42免疫组织化学染色显示,10μg和25μg脂多糖组大鼠黑质部位小胶质细胞激活明显。50μg脂多糖组大鼠黑质部位小胶质细胞激活不明显。3.酪氨酸羟化酶免疫组织化学染色显示,10μg和25μg脂多糖组大鼠黑质酪氨酸羟化酶阳性神经元与对照组相比,胞体变小,突起减少甚至消失,染色变浅;50μg脂多糖组大鼠酪氨酸羟化酶阳性神经元形态与对照组相比没有明显改变。4.酪氨酸羟化酶阳性细胞计数显示,10μg和25μg脂多糖组大鼠与对照组比较,分别减少15.5%(P<0.01)和20.1%(P<0.01);50μg脂多糖组大鼠与对照组比较没有统计学差异。结论脑室注射脂多糖引发的脑内炎症可导致黑质多巴胺能神经元变性,这一过程呈慢性迟发性;同时,低剂量脂多糖激活小胶质细胞对黑质多巴胺能神经元的慢性毒性作用更为明显;该病理过程较好地模拟了帕金森病的发病特点。

结肠扩张刺激对P2X4受体在IBS大鼠神经中枢中表达的影响

目的观察P2X4受体在结肠扩张刺激引起的IBS大鼠骶髓后连合核(DCN)和骶髓后角中表达的变化,为探讨IBS的神经作用机制提供理论依据。方法采用免疫组织荧光化学的方法,通过对P2X4受体和小胶质细胞的标志物OX42的荧光双标记,观察其在小胶质细胞和神经元上的反应;通过免疫电镜同步观察P2X4受体与小胶质细胞和神经元的相互关系。结果对照组大鼠的DCN和骶髓后角中几乎没有发现P2X4的表达。而在IBS大鼠组,P2X4在DCN和骶髓后角神经元和小胶质细胞中表达明显增高。电镜下,在对照组的DCN和骶髓后角,少数P2X4-LI产物表达在胶质细胞突起上,此突起可与神经元胞体、轴突、树突或另外的胶质细胞突起接触。而在IBS大鼠的DCN和骶髓后角中,P2X4在抑制性突触上的表达明显增加。有的表达在突触复合体上,并且在神经元上也有发现。然而P2X4阳性产物更多的表达在胶质细胞的突起上。结论P2X4是小胶质细胞活化的启动因素,可能是IBS内脏敏感性增高的重要因素。

一种改良的新生大鼠小胶质细胞原代培养方法

目的:改良现有的小胶质细胞纯化分离培养方法,建立稳定、高产的培养模型。方法:选用新生1～2d SD大鼠进行混合胶质细胞培养,然后结合营养剥离法及震摇法纯化分离小胶质细胞;利用CD11b/c(OX42)免疫细胞化学的方法对分离的小胶质细胞纯度进行鉴定。结果:改良的方法可稳定的获得5×104个/培养瓶(25cm2)的小胶质细胞,纯度达到95%,荧光倒置显微镜下观察细胞形态,分离第1 d小胶质细胞呈不规则圆形,折光不均匀,继续培养3-5 d,小胶质细胞逐渐出现单极或多极突起,7 d时部分细胞转为静止状态,呈分枝状。结论:改良的小胶质细胞培养方法产量多,纯度高,为小胶质细胞在中枢神经系统疾病相关研究提供了新的基础。

糖皮质激素对活化后小胶质细胞株N9中MHC-Ⅱ和OX40L表达的影响

目的研究糖皮质激素对炎症刺激活化后的小胶质细胞株N9表面分子MHC-Ⅱ和OX40L表达的影响。方法脂多糖(LPS)联合小鼠γ-干扰素刺激N9细胞活化,采用RT-PCR、免疫荧光检测N9活化前后OX40L的表达。糖皮质激素及其受体阻断剂RU-486处理活化的N9细胞后,用流式细胞术(FACS)检测MHC-Ⅱ、OX40L的表达变化。结果N9活化前OX40L mRNA和蛋白均有组成性表达,活化后MHC-Ⅱ和OX40L表达显著上调(P<0.05),糖皮质激素处理后与活化组比较两分子表达下调(P<0.05),加入RU-486又可使两分子表达上调。结论小胶质细胞N9活化后MHC-Ⅱ、OX40L表达显著升高,而糖皮质激素可通过抑制小胶质细胞MHC-Ⅱ和OX40L表达拮抗小胶质细胞的抗原呈递功能,从而降低由T细胞活化介导的损伤效应。

左旋多巴对脂多糖诱导小胶质细胞产生致炎因子的影响及黄芪保护作用

目的探讨左旋多巴(L-DOPA)对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞产生致炎因子的影响及黄芪多糖(ASP)的保护作用。方法不同浓度LPS(1、5、10ng/ml)和(或)L-DOPA(50、100、500μmol/L)及ASP(20μg/ml)+LPS(10ng/ml)+L-DOPA(50μmol/L)处理小胶质细胞培养液,于0、4、24、48h动态观察一氧化氮(NO)的含量、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平及黄芪多糖对上述指标的影响。结果 LPS处理小胶质细胞培养液,当LPS浓度5ng/ml48h、10ng/ml24h、L-DOPA浓度为100μmol/L72h、500μmol/L24h以后、LPS+L-DOPA组各个时间点NO的含量均高于对照组(P<0.05),LPS+L-DOPA组显著高于单独用LPS或L-DOPA处理组(P<0.05)。LPS5ng/ml24h、10ng/ml4h、L-DOPA500μmol/L72h、LPS+L-DOPA组各时间点TNF-α的含量均高于对照组(P<0.05),LPS+L-DOPA组显著高于单独用LPS或L-DOPA处理组(P<0.05),黄芪多糖处理组明显降低NO的含量和TNF-α的水平(P<0.05)。结论 LPS致炎作用有时间剂量依赖性,小剂量L-DOPA无致炎作用,但L-DOPA增强LPS的致炎作用,黄芪多糖通过抑制NO、TNF-α的释放发挥抗炎保护作用。

β淀粉样蛋白所致的炎症反应在阿尔茨海默病中的作用机制

阿尔茨海默病(AD)是一种慢性神经退行性疾病,β淀粉样蛋白(Aβ)在海马过度沉积形成的老年斑是其主要的病理特点。Aβ激活胶质细胞介导的炎症反应分泌促炎因子包括白细胞介素1、白细胞介素6及肿瘤坏死因子α等可以导致神经细胞变性、损伤和死亡。Aβ也可通过与Tau蛋白相互作用介导的炎症反应加快AD的进展。因此,Aβ沉积激活胶质细胞引起的炎症反应可能是AD的重要致病机制。

p38 MAPK信号通路在小胶质细胞激活介导多巴胺能神经元变性中的作用研究

目的:研究p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)在脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞激活介导多巴胺(DA)能神经元变性中的作用。方法:脑立体定位注射LPS于大鼠脑黑质,Western blot印记法检测不同时间点(0、0.5h、1h、6h、12h)黑质p38磷酸化水平。酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)免疫组织化学染色观察蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂SB203580预处理后LPS对DA能神经元变性的影响。结果:黑质注射LPS后,Western blot结果显示p38MAPK总体蛋白水平在各组均存在表达,无显著性差异(P>0.05),而其磷酸化p-p38MAPK却发生了明显变化。正常对照组和PBS注射侧几乎无p-p38的表达,LPS注射后30min,p-p38即有少量的表达;1h表达量增加;6h表达量达高峰;12h后表达量逐渐下降。与PBS对照侧相比,LPS注入黑质导致TH阳性细胞数下降至38%;SB203580预处理可以显著增加TH+细胞数达63%(P<0.05)。结论:p38MAPK信号通路参与了LPS诱导小胶质细胞激活介导DA能神经元变性,可通过阻断信号通路来减轻LPS诱导DA能神经元变性,为PD治疗提供新的思路。

七叶皂苷钠对脑缺血再灌注损伤大鼠MG、iNOS表达的影响

目的观察七叶皂苷钠对大鼠脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞(MG)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨其脑保护作用的可能机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、对照组、七叶皂苷钠组。改良线栓法制备建立局灶性脑缺血-再灌注动物模型(MCAO模型),分别于手术后1d、3d、7d免疫组化法观察大鼠海马一区OX-42及iNOS的表达情况。结果对照组、七叶皂苷钠组3d时OX-42达峰,7d时明显降低;iNOS 1d达峰,3d明显下降,7d时接近正常。七叶皂苷钠组优于对照组(P<0.05)。结论七叶皂苷钠可能通过抑制小胶质细胞的活化和iNOS的表达,对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥脑保护作用。

乙酰葛根素对AD大鼠海马小胶质细胞及PKC-δ的影响

目的探讨乙酰葛根素对Aβ_(1-42)海马立体定位注射导致阿尔茨海默病模型大鼠的药物作用及对海马小胶质细胞和炎症因子PKC-δ表达水平的影响。方法将40只Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型组、乙酰葛根素低、高剂量组。应用Aβ_(1-42)双侧海马注射制备AD大鼠模型,Morris水迷宫测定不同时期各组大鼠的学习记忆能力,电镜观察小胶质细胞的活化程度,Elisa测定血清PKC-δ含量的变化。结果乙酰葛根素能显著改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,减轻小胶质细胞的活化程度,降低PKC-δ的表达(P<0.05)。结论乙酰葛根素对阿尔茨海默病具有显著的预防和保护作用。

手术创伤对老年大鼠认知功能的影响

目的探讨手术创伤对老年大鼠认知功能的影响及其机制。方法SD雄性大鼠70只，随机分为手术组和对照组，各35例。手术组水合氯醛麻醉后行脾切除手术，对照组仅行水合氯醛麻醉。两组分别于手术前1d（T0）和手术后1（T1）、3（T3）、5（T5）和7d（T7），用Morris水迷宫方法测试大鼠的认知功能，荧光定量聚合酶链式反应（RTFQ-PCR）定量检测海马区腺苷酸活化激酶（AMPK）mRNA的表达，免疫组化计数法检测海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果与TO比较，手术组T1、T3逃避潜伏期、总路程明显延长（F=4．65、29．46，q=3．21～4．52，P＜0．05）；T1、T3和T5的AMPKmRNA表达明显增高（F=12．84，P＜0．05），T1、T3星形胶质细胞GFAP表达明显增高（F=82．08，q=3．47～4．89，P＜0．05）。与对照组比较，手术组T1、T3的逃避潜伏期、总路程明显延长（t=2.97～5．80，P＜0．05）；T1、T3、T5的AMPK mRNA表达明显增高（t=2．52～9．78，P＜O．05），T1、T3星形胶质细胞GFAP的表达明显增高（t=2．20、4．74，P＜0．05）。对照组麻醉后各时间点各指标比较差异无显著性（P＞0．05）。结论大鼠脾切除术引起了海马区AMPK mRNA表达增高，海马区星形胶质细胞被激活，并且出现了短暂的认知功能损伤。

Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎性反应对神经元细胞Mecp2蛋白表达的影响

目的:体外研究Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎症反应对海马神经元细胞甲基化Cp G结合蛋白(Mecp2)表达的影响。方法:(1)用不同浓度的Aβ_(1-42)(终浓度分别为0,5,10,20,30μmol/L)处理小胶质细胞系(N9),24h后取上清液,ELISA检测每组N9细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-1β的含量,选择合适的Aβ_(1-42)的终浓度。(2)用Aβ_(1-42)(终浓度为20μmol/L)及TLR4拮抗剂TAK-242(终浓度为1μg/ml)处理小胶质细胞系(N9),分为3组:正常对照组(con组)、单纯Aβ_(1-42)处理组(Aβ_(1-42)组)、Aβ_(1-42)处理后TAK-242干预组(TAK-242组)。24 h后取上清液,ELISA检测每组N9细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IL-1β的含量。(3)实验分组同(2),24 h后收集培养液,分别干预生长良好的海马神经元细胞系(HT-22)。24 h后,通过Western Blot、免疫荧光染色方法检测每组HT-22细胞中Mecp2蛋白的表达。结果:(1)ELISA结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)处理后,N9细胞分泌的TNF-α、IL-1β的表达量随Aβ_(1-42)浓度的增加而增加(P<0.05)。(2)ELISA结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)组的TNF-α、IL-1β的表达水平明显提高(P<0.05);TAK-242组的细胞分泌TNF-α、IL-1β水平较Aβ_(1-42)组显著降低(P<0.05)。(3)Western Blot结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显增加(P<0.05);与Aβ_(1-42)组相比,TAK-242组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显减少(P<0.05)。(4)免疫荧光染色结果显示:与con组相比,Aβ_(1-42)组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达明显增强;而与Aβ_(1-42)组相比,TAK-242组HT-22细胞中Mecp2蛋白表达减弱。结论:Aβ诱导的小胶质细胞发生炎性反应,导致神经元的损伤,可能是由于这种炎性反应使得神经元细胞中Mecp2蛋白的表达量增加,从而损伤神经元。

小胶质细胞和脑出血

小胶质细胞作为中枢神经系统重要的固有免疫细胞,在神经变性和神经炎性反应过程中起重要作用。小胶质细胞是中枢神经系统的"警察",任何神经中枢微小变化都会引起它的变化。脑出血是人类常见的急危重症疾病,发生率高、致残程度重,给社会和家庭带来沉重负担。本文就脑出血后小胶质细胞的激活、作用、凋亡等方面进行综述。

芍药苷通过IL-10-STAT3信号通路抑制脂多糖诱导BV2细胞炎症与吞噬作用

小胶质细胞是中枢神经系统中重要免疫细胞,也是炎症反应中的主要效应细胞。芍药苷被证实能有效抑制炎症反应,在调节免疫方面具有巨大药用价值。本文旨在阐明BV2细胞炎症反应中芍药苷对细胞炎症及吞噬的抑制作用,并探索其中潜在机制。体外实验利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导BV2细胞发生炎症反应,芍药苷能有效抑制BV2细胞TNF-α和NO的产生以及BV2细胞异常增加的吞噬功能,并且在此过程中IL-10-STAT3信号通路被激活;芍药苷的抑制作用在我们使用STAT3抑制剂JSI-124后显著降低,TNF-α和NO的表达量增加、BV2细胞的吞噬功能增强。上述结果表明,芍药苷能有效抑制BV2细胞炎症作用及吞噬作用,这一过程中依赖IL-10-STAT3信号通路的激活。这将加深我们对芍药苷抑制小胶质细胞炎症作用机制的认识。

鞘内注射米诺四环素对脊神经结扎大鼠神经病理性疼痛模型的镇痛效应

目的探讨脊髓小胶质细胞参与调解神经病理性疼痛的分子机制。方法成年雄性SD大鼠32只,随机分为4组,每组各8只。假手术(SO)组,暴露脊神经但不结扎;结扎L5/6脊神经(SNL)组;SNL+生理盐水(NS)组结扎L5/6脊神经,鞘内注射NS;SNL+米诺四环素(MI)组,结扎L5/6脊神经,鞘内注射MI。分别测量各组大鼠术前及术后2~7 d机械缩足阈值(MWT)和热痛缩足潜伏期(TWL)。SNL+NS组和SNL+MI组于术后7 d测量痛阈前30 min鞘内注射NS或MI。最后一次痛阈测量后,将大鼠处死取脊髓背角用ELISA法检测脊髓组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)表达水平。结果四组大鼠痛阈基础值差异无统计学意义(P>0.05)。SNL组、SNL+NS组和SNL+MI组,术后2~6天MWT和TWL较SO组显著下降(P<0.05)。与SNL组比较,鞘内注射NS对大鼠MWT和TWL无影响(P>0.05);鞘内注射MI显著升高大鼠MWT和TWL(P<0.05)。SNL组脊髓背角TNF-α和IL-1β表达水平较SO组显著升高(P<0.05);SNL+NS组TNF-α和IL-1β表达水平明显高于SO组(P<0.05),与SNL组比较差异无统计学意义(P>0.05);SNL+MI组TNF-α和IL-1β表达水平与SO组比较差异无统计学意义(P>0.05),明显低于SNL组(P<0.05)。结论脊髓小胶质细胞参与调解SNL神经病理性疼痛,鞘内注射米诺四环素的镇痛效应可能与TNF-α、IL-1β密切相关。

iNOS抑制剂阻断由细菌脂多糖诱导活性小胶质细胞对少突胶质细胞前体毒性作用的研究

目的探讨由细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的活性小胶质细胞（MG）对少突胶质细胞（OL）前体的毒性作用及选择性iNOS抑制剂1400W对毒性作用的阻断效果。方法取2日龄SD大鼠脑内MG和OL前体共培养，分为共培养对照组，共培养LPS组以及共培养LPS＋1400W组。对共培养细胞经LPS100ng／ml诱导后48h，分别应用硝酸还原比色法检测一氧化氮（NO）含量，免疫细胞染色法检测过氧亚硝酸盐（ONOO^-）含量，Westernblot法检测诱生型一氧化氮合酶（Inducible Nitric Oxide Synthase，iNOS）蛋白合成量，Hochest33342／PI荧光染色观察细胞凋亡形态学改变，以及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果与共培养对照组比LPS可诱导培养细胞内NO含量[（82．27±3．41）μmol／L vs．（167．86±9．87）μmol／L，t=8．593，P〈0．01]、ONOO^-含量[（6．14±1．27）×10^7／L vs．（34．38±7．75）×10^7／L，t=5．892，P〈0．01]以及iNOS蛋白合成量相对值[（0．18±0．027）VS．（0．79±0．068），t=9．26，P〈0．01]明显增高，OL前体的凋亡率亦显著增加[（6．73±1．39）％vs．（24．77±2．05）％，t=12．619，P〈0．01]。应用1400W10μmol／L则可显著抑制因LPS诱导而增高的NO含量[（69．55±5．07）μmol／L，t=8．896，P〈0．01]、ONOO^-含量[（10．33±3．47）×10^7／L，t=14．96，P〈0．01]以及iNOS蛋白的合成量（0．35±0．042，t=5．506，P〈0．01），并显著降低了OL前体的细胞凋亡率[（11．8±2．06）％，t=7．715，P〈0．01]。结论NO、iNOS以及ONOO^-等物质在LPS诱导OL前体的死亡通路中扮演了重要角色，1400W通过选择性抑制iNOS，减少了NO以及ONOO^-的生成，从而有效阻断了由LPS诱导活性MG对OL前体的毒性作用，提高了OL前体的存活率。

趋化因子配体2中和抗体对骨癌痛大鼠痛行为及脊髓小胶质细胞活化的影响

目的探讨鞘内注射趋化因子配体2（CCL2）中和抗体对胫骨癌痛大鼠机械痛行为及脊髓小胶质细胞活化的影响。方法采用Walker256乳腺癌细胞，构建大鼠胫骨癌痛模型。雌性SD大鼠（160～180g）40只，随机分为5组（n=8）：假手术组（Ⅰ组）、假手术＋CCL2中和抗体组（Ⅱ组）、骨癌痛组（Ⅲ组）、骨癌痛＋control IgG组（Ⅳ组）和骨癌痛＋CCL2中和抗体组（Ⅴ组）。术后第10～12天，每天1次鞘内注射CCL2中和抗体或control IgG（10μg／15μl）。分别于术前、术后1d，3d，5d，7d，10d，14d，21d测定各组大鼠机械痛敏闽值（PMWT）。另取30只大鼠，分组同前（n=6），术后14d取材，免疫荧光染色法测定各组大鼠脊髓背角小胶质细胞标志物（Iba-1）的平均光密度值（MOD）。结果（1）痛行为学：术后10d，14d，21d，Ⅲ组大鼠PMWT分别为：（1．78±0．38）g，（1．70±0．17）g，（1．35±0．07）g；Ⅳ组大鼠PMWT分别为：（2．99±0．67）g，（2．52±0．75）g，（1．13±0．07）g；Ⅴ组大鼠PMWT分别为（5．88±0．66）g，（7．81±0．75）g，（6．19±0．53）g。与Ⅲ组相比，Ⅴ组大鼠PMWT值明显升高（P〈0．01），Ⅳ组大鼠PMWT值无明显变化（P〉0．05）。（2）免疫荧光染色：术后14d，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组大鼠脊髓背角Iba-1的MOD值分别为（151．3±10．8），（149．2±10．6），（74．5±5．0）；与Ⅲ组相比，Ⅴ组大鼠MOD值明显升高（P〈0．01）；Ⅳ组大鼠MOD值无明屁变化（P〉0．05）。结论鞘内注射CCL2中和抗体能显著减轻胫骨癌痛大鼠的机械痛敏，并能抑制其脊髓小胶质细胞的活化。

微波诱导小胶质细胞的促炎症反应

目的探讨微波与小胶质细胞促炎症反应之间的关系，揭示小胶质细胞在微波致中枢神经损伤中的作用。方法离体培养的N9小胶质细胞接受90mW／cm^2微波辐照，在辅照后0、1、3、6、12、24h采用细胞流式计数的方法观察CD11b的表达情况，用酶联免疫吸附（ELISA）方法检测N9细胞培养上清液中FNF—α的浓度，采用反转录－聚合酶链反位（RT-PCR）检洲N9小胶质细胞一氧化氮合酶（iNOS）mRNA表达，采用硝酸还原酶法检测培养上清液中NO含量。结果微波辐照后3h阳性表达CD11b的小胶质细胞明显增加，与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．01），一直持续到辐照后24h，并在辐照后6h达到高峰．TNF—α含量在辐射后1h明显升高[（657．8±25．9）pg／ml]，并一直持续到24h，在辐照后3h达到峰值[（762．1±61．5）pg／ml]，与对照组[（258．9±81．7）pg／ml]比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。NO的含量在辐照后1h开始升高[（4．48±0．59）μmol／1．1，与对照组[（2．65±0．14）μmol／L]的差异有统计学意义（P〈0．05），并随时间的延长逐渐增加。iNOSmRNA表达在辐照后1h开始明显升高，6h升高约2倍，此后表达有所下降，但24h内均高于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05或心0．01）。结论微波辐照可明显诱导小胶质细胞活化，活化的小胶质细胞可通过分泌大量TNF—α，释放NO等产生促炎症反应。

糖尿病太鼠痛性周围神经病变时脊髓小胶质细胞的活化

目的评价糖尿病大鼠痛性周围神经病变时脊髓小胶质细胞的活化。方法SD大鼠25只，2月龄，雌雄不限，腹腔注射1％链脲佐菌素60mg／kg以制备大鼠糖尿病痛性周．围神经病。变模型，取造模成功的10只SD大鼠作为糖尿病痛性周围神经病变组（DM组），另取10只同月龄SD大鼠作为对照组（NC组）。分别于注射前（T1）、注射后2、7、14、21、28d（T2～6）时称量体重，取尾静脉血0．1ml测定血糖水平，于T1、T3-6时测定大鼠右后爪机械缩足反应阈值；注射28d时麻醉大鼠，取L4,5脊髓制备切片，采用免疫组化法检测脊髓小胶质细胞补体受体3（CR3）的表达。结果与NC组比较，DM组T2～6时血糖升高、体重下降，T4-6时机械缩足反应阈值降低，T6时小胶质细胞CR3表达上调（P〈0．05或0．01）；与T1时比较，DM组L2-6时血糖升高、体重下降，T6时机械缩足反应阈值降低（P〈0．01）。结论脊髓小胶质细胞的活化与大鼠糖尿病痛性周围神经病变的发病有关。

小胶质细胞活化对中枢神经系统功能的影响

背景小胶质细胞（microglia，MG）是中枢神经系统（central nervous system，cNs）中一种重要的免疫细胞，MG的活化可对CNS功能产生重要影响。目的通过探讨活化状态的MG生物学特性和临床应用前景，总结出关于MG活化有价值的研究方向。内容对MG细胞活化状态的生物学特性进行探讨，并总结在何种情况下MG活化发挥神经损伤作用，在何种情况发挥神经保护作用及MG活化的可能临床应用及面临问题。趋势MG的活化对CNS既可产生保护作用，又可产生损伤作用，如何通过调节MG的活化状态，趋利避害，是今后的研究方向。