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半滑舌鳎病原鳗利斯顿氏菌表型及分子特征研究
被引量:
33
1
作者
张晓君
秦国民
+3 位作者
阎斌伦
徐静
毕可然
秦蕾
《海洋学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期112-122,共11页
2008年12月,江苏赣榆某渔场养殖半滑舌鳎出现大量死亡,症状主要表现为:头部、鳃盖及鳍基出血,尾鳍腐烂,腹腔膨胀并积有大量腹水,部分病鱼肠管脱出肛外。从病鱼肝脏、腹水中分离出大量优势生长的细菌,人工感染试验证明其对半滑舌鳎有较...
2008年12月,江苏赣榆某渔场养殖半滑舌鳎出现大量死亡,症状主要表现为:头部、鳃盖及鳍基出血,尾鳍腐烂,腹腔膨胀并积有大量腹水,部分病鱼肠管脱出肛外。从病鱼肝脏、腹水中分离出大量优势生长的细菌,人工感染试验证明其对半滑舌鳎有较强的致病性。对3株分离菌进行了形态特征、理化特性、胞外酶及溶血素活性等表型生物学性状检验;测定了代表菌株的16SrRNA和gyrB基因序列,分析了16 S rRNA和gyrB两种基因序列的同源性,并构建了系统发生树,比较了两种基因对分离菌的鉴定能力;结果表明gyrB基因用于细菌种间鉴定更具优越性;基于16S rRNA和gyrB基因的系统发育学分析表明分离菌与鳗利斯顿氏菌具有高同源性,根据分离菌的表型及分子特征,判定分离菌为利斯顿氏菌属(Listonella MacDonell and Colwell 1986)的鳗利斯顿氏菌[Listonella anguillarum (Bergeman 1909) MacDonell and Colwell 1986]。胞外酶活性及溶血活性检测表明3株分离菌均具有淀粉酶、蛋白酶、卵磷脂酶等胞外酶活性,在含7%家兔脱纤血液营养琼脂培养基上呈β型溶血,PCR检测3株供试菌均可扩增出大小约493 bp的溶血素基因和大小约248 bp的金属蛋白酶基因。分离菌的耐药谱测定结果显示,对供试49种抗菌药物中的青霉素G等13种药物耐药,对羧苄青霉素等6种药物存在敏感与耐药的株间差异。
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关键词
半滑舌鳎(Cynoglossusse
milaevis
Günther)
鳗利斯顿氏菌(Listonella
anguillarum)
16S
RRNA基因
gyrB基因
下载PDF
职称材料
半滑舌鳎雌鱼基因组Fosmid文库构建及分析
被引量:
5
2
作者
孙晓华
张全启
+5 位作者
王旭波
翟腾
齐洁
王志刚
王兴莲
王亚楠
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期88-92,共5页
半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)是我国的大型经济鱼类,其养殖发展迅速。有关半滑舌鳎的基因组文库构建和分析等方面的研究,目前尚未见报道。用流式细胞仪检测雌性半滑舌鳎基因组大小。从半滑舌鳎雌鱼肌肉提取基因组DNA,选取大小合...
半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)是我国的大型经济鱼类,其养殖发展迅速。有关半滑舌鳎的基因组文库构建和分析等方面的研究,目前尚未见报道。用流式细胞仪检测雌性半滑舌鳎基因组大小。从半滑舌鳎雌鱼肌肉提取基因组DNA,选取大小合适的DNA片段,经末端修复并回收后,再以Fosmid作为载体,构建半滑舌鳎雌鱼基因组文库。经检测,雌性半滑舌鳎基因组大小约为606.36 Mb。所构建的Fosmid文库含有49 920个克隆,重组率为96.88%;插入片段长度分布在33-45 kb之间,平均为39.2 kb;覆盖雌性半滑舌鳎基因组3.12倍;从文库中筛选得到单拷贝DNA序列的概率为95.6%。对培养第1天和第6天的克隆进行比较,结果表明文库稳定性高,培养过程中没有发生变化。
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关键词
半滑舌鳎
Cynoglossusse
milaevis
雌鱼
FOSMID文库
基因组大小
下载PDF
职称材料
题名
半滑舌鳎病原鳗利斯顿氏菌表型及分子特征研究
被引量:
33
1
作者
张晓君
秦国民
阎斌伦
徐静
毕可然
秦蕾
机构
淮海工学院海洋学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室
出处
《海洋学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期112-122,共11页
基金
江苏省自然科学基金项目(BK2009163)
连云港市科技攻关项目(CN0826)
+1 种基金
淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室研究基金(2008HS016)
淮海工学院引进人才科研启动基金资助项目(KQ07106)
文摘
2008年12月,江苏赣榆某渔场养殖半滑舌鳎出现大量死亡,症状主要表现为:头部、鳃盖及鳍基出血,尾鳍腐烂,腹腔膨胀并积有大量腹水,部分病鱼肠管脱出肛外。从病鱼肝脏、腹水中分离出大量优势生长的细菌,人工感染试验证明其对半滑舌鳎有较强的致病性。对3株分离菌进行了形态特征、理化特性、胞外酶及溶血素活性等表型生物学性状检验;测定了代表菌株的16SrRNA和gyrB基因序列,分析了16 S rRNA和gyrB两种基因序列的同源性,并构建了系统发生树,比较了两种基因对分离菌的鉴定能力;结果表明gyrB基因用于细菌种间鉴定更具优越性;基于16S rRNA和gyrB基因的系统发育学分析表明分离菌与鳗利斯顿氏菌具有高同源性,根据分离菌的表型及分子特征,判定分离菌为利斯顿氏菌属(Listonella MacDonell and Colwell 1986)的鳗利斯顿氏菌[Listonella anguillarum (Bergeman 1909) MacDonell and Colwell 1986]。胞外酶活性及溶血活性检测表明3株分离菌均具有淀粉酶、蛋白酶、卵磷脂酶等胞外酶活性,在含7%家兔脱纤血液营养琼脂培养基上呈β型溶血,PCR检测3株供试菌均可扩增出大小约493 bp的溶血素基因和大小约248 bp的金属蛋白酶基因。分离菌的耐药谱测定结果显示,对供试49种抗菌药物中的青霉素G等13种药物耐药,对羧苄青霉素等6种药物存在敏感与耐药的株间差异。
关键词
半滑舌鳎(Cynoglossusse
milaevis
Günther)
鳗利斯顿氏菌(Listonella
anguillarum)
16S
RRNA基因
gyrB基因
Keywords
half-smooth tongue sole (Cynoglossus se
milaevis
Gunther)
Listonella anguillarum
16S rRNA gene
gyrB gene
分类号
S941 [农业科学—水产养殖]
下载PDF
职称材料
题名
半滑舌鳎雌鱼基因组Fosmid文库构建及分析
被引量:
5
2
作者
孙晓华
张全启
王旭波
翟腾
齐洁
王志刚
王兴莲
王亚楠
机构
中国海洋大学海洋生命学院
出处
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第8期88-92,共5页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2006AA10A404)资助
文摘
半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)是我国的大型经济鱼类,其养殖发展迅速。有关半滑舌鳎的基因组文库构建和分析等方面的研究,目前尚未见报道。用流式细胞仪检测雌性半滑舌鳎基因组大小。从半滑舌鳎雌鱼肌肉提取基因组DNA,选取大小合适的DNA片段,经末端修复并回收后,再以Fosmid作为载体,构建半滑舌鳎雌鱼基因组文库。经检测,雌性半滑舌鳎基因组大小约为606.36 Mb。所构建的Fosmid文库含有49 920个克隆,重组率为96.88%;插入片段长度分布在33-45 kb之间,平均为39.2 kb;覆盖雌性半滑舌鳎基因组3.12倍;从文库中筛选得到单拷贝DNA序列的概率为95.6%。对培养第1天和第6天的克隆进行比较,结果表明文库稳定性高,培养过程中没有发生变化。
关键词
半滑舌鳎
Cynoglossusse
milaevis
雌鱼
FOSMID文库
基因组大小
Keywords
half smooth tongue sole
Cynoglossus se
milaevis
female fish
Fosmid library
genome size
分类号
Q959.4 [生物学—动物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
半滑舌鳎病原鳗利斯顿氏菌表型及分子特征研究
张晓君
秦国民
阎斌伦
徐静
毕可然
秦蕾
《海洋学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
33
下载PDF
职称材料
2
半滑舌鳎雌鱼基因组Fosmid文库构建及分析
孙晓华
张全启
王旭波
翟腾
齐洁
王志刚
王兴莲
王亚楠
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2010
5
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职称材料
已选择
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