盐酸溴己新中杂质N-(2-硝基)-N-环己基-N-甲胺的遗传毒性评价

目的:评价盐酸溴己新国抽杂质的遗传毒性,为其制定合理限值提供毒理学依据。方法:按照《中国药典》和ICH M7指导原则的要求,采用基于专家知识规则Derek和基于统计学的Sarah的(Q)SAR软件对杂质N-(2-硝基)-N-环己基-N-甲胺进行分类,采用Mini-Ames试验进一步验证预测结果并进一步对杂质进行准确分类,制定合理限度。结果:通过(Q)SAR评估,N-(2-硝基)-N-环己基-N-甲胺为3类杂质;Mini-Ames试验结果显示N-(2-硝基)-N-环己基-N-甲胺在无和有活化系统条件下,各剂量组菌落数均未增加,Mini-Ames试验为致突变阴性。结论:N-(2-硝基)-N-环己基-N-甲胺没有遗传毒性,可按普通杂质制定限值。

微孔板与标准平皿Ames试验比较研究

目的使用鼠伤寒沙门菌和大肠埃希菌及阳性剂开展基于6孔板、24孔板和标准10 cm平皿的Ames试验,为确立标准化微孔板Ames试验奠定研究基础。方法 6种不同鼠伤寒沙门菌(TA97、TA98、TA100、TA102、TA1535、TA1537)和1种大肠埃希菌(WP2 uvr A)经鉴定及扩增后,分别使用标准平皿、6孔板和24孔板在有无S9代谢活化条件下使用不同浓度的阳性剂开展平板掺入法Ames试验。所有样本置37℃培养约48 h后进行菌落计数。结果所有试验条件下均出现浓度相关性的回复菌落形成率增加,且最高浓度条件下的菌落数高于对照组3倍。然而微孔板中可出现阴性背景菌落数过少的情况,阳性剂的用量也不能照搬标准平皿中的浓度设置。结论本研究所用条件可成功开展基于6孔板和24孔板的Ames试验,其试验条件和背景数据需要经过摸索与积累。