鼻病毒非结构蛋白2B引起细胞自噬产生的研究

目的利用miniSOG标签观察鼻病毒非结构蛋白2B蛋白在细胞中定位及自噬体产生。方法将非结构蛋白2B和miniSOG进行融合表达构建pcDNA3.1-2B-miniSOG-flag质粒,将质粒转染HEK293细胞,在荧光显微镜下,2B-miniSOG阳性细胞进行固定、光氧化及超薄切片制备,电镜下观察2B-miniSOG蛋白在细胞中的定位及细胞超微结构变化,Westernblot(WB)检测LC3的表达。结果2B-miniSOG蛋白在荧光显微镜下发出绿色荧光,WB检出自噬标志性蛋白LC3-II表达增加。电镜下观察到蛋白定位于线粒体,细胞中出现大量囊泡样结构,可观察到自噬体和自噬溶酶体。结论鼻病毒非结构蛋白2B可引起细胞自噬发生。