水貂皮下埋植外源性褪黑激素效果观察分析

辽宁省某水貂场历经５ 年对取皮貂皮下埋植外源性褪黑激素试验，现场观察分析结果表明，褪黑激素可使水貂冬毛生长期提前，提高毛皮品质和尺码，缩短皮貂饲养周期，降低饲料成本。同时，也可提高对疾病的抵抗力。

三种水貂皮组织结构的研究

为了观察水貂皮的组织学结构特点,试验制作了水貂皮石蜡切片,H.E.染色,对三种水貂皮肤组织结构进行系统的研究。结果表明:水貂皮的组织结构是由表皮、真皮及皮下组织三层结构组成;水貂毛在皮面呈不规则的点状排列,10余根至20余根绒毛长在同一毛囊中;短毛黑公水貂的皮板是最好的,毛绒密度大,针绒毛细。

β-catenin和BMP2基因在幼龄水貂皮肤中表达的研究

本试验旨在探讨β-catenin和BMP2基因在幼龄水貂皮肤中定量表达的规律及意义。试验选用0～6周龄的幼龄公水貂21只,每周龄各3只,采集背中部的皮肤样品,运用实时荧光定量PCR技术相对定量方法,检测不同周龄的幼龄水貂皮肤中β-catenin和BMP2基因相对表达量的变化。结果显示,随着周龄的增加β-catenin mRNA丰度呈上调趋势,在4周龄时显著增大（P〈0.05）,5周龄时达最大（P〈0.01）,6周龄时β-catenin相对表达量与5周龄相比极显著下降（P〈0.01）;而BMP2mRNA的表达保持稳定（P〉0.05）。β-catenin mRNA的丰度与次级毛囊发育变化趋势一致,与前人相关报道一致,提示其可能参与水貂次级毛囊发育;而BMP2mRNA的丰度在毛囊发育阶段变化不明显。

利用冷冻切片法与石蜡切片法对水貂组织切片进行优化研究

应用冷冻切片法和石蜡包埋切片法,对水貂体组织进行切片后HE染色观察;并在冷冻切片方法中应用3种不同的固定剂,对固定剂的固定效果进行对比分析。结果表明,石蜡切片法更适合于脑组织,而冰冻切片法更适合于皮肤组织。冰冻切片方法中3种固定剂的固定效果比较,固定剂A(无水乙醇80 mL、甲醛10%10 mL、冰醋酸10 mL)优于固定剂C(10%的福尔马林溶液)与固定剂B(甲醛40%15mL、无水乙醇85mL)。

水貂皮流行花色设计与制作

结合水貂皮毛被特征及市场需求,设计了漂黄(漂金)、白绒深针、白绒黄针、深底白尖、特黑色、艳丽色、草上霜效应、一毛双色效应、渐变效应、印花等10种流行花色。通过试验研究获得了实现水貂皮不同花色的制作技术。

水貂皮肤黑色素细胞体外分离、培养及初步鉴定

为了探究黑色素细胞在水貂毛色形成过程中的生物学功能,为毛色基因功能的深入研究提供适宜的细胞模型。本研究采用0.25%DispaseⅡ、0.1%胶原酶Ⅰ及0.25%胰蛋白酶(含0.02%EDTA)联合消化法获取水貂皮肤黑色素细胞,利用不同培养基进行选择培养、传代培养与纯化,并采用多巴染色法染色,进一步对其开展了形态学初步鉴定。结果表明,酶消化分离的水貂黑色素细胞在M-254培养基中生长良好,显微镜观察细胞呈两极或三极状,多巴染色鉴定黑色素细胞呈棕黑色阳性,初步鉴定为水貂黑色素细胞。本研究为深入揭示水貂皮肤黑色素细胞在毛色形成过程中的作用奠定了理论基础。

家兔皮仿染水貂皮的研究

采用正交试验设计方法,研究用于仿染水貂皮的家兔坯皮质量要求、氧化染料配比以及染色工艺条件。研究结果表明,选用一级白色醛鞣冬季家兔坯皮,经脱脂、中和、媒染后用乌苏尔D0.20g/L,乌苏尔P0.25g/L,乌苏尔NZ1.00g/L,30％H_2O_31.4ml/L,25％NH_3·H_2O调PH值至8.0—8.5,温度36℃,浸染3h,取皮洗涤,干燥后,再提高浸染染料浓度3倍刷染一次,3h后、6h后提高为5倍浓度各刷染一次。经色度色差仪测定,仿貂兔皮与真貂反射系数曲线接近,仿染获得了成功。

国产水貂皮鞣制工艺

在分析国产水貂激素皮、季节皮、春皮特点的基础上,详细讨论了加工不同类型水貂皮的浸水、脱脂、浸酸、软化、鞣制、干燥、油鞣、干洗等主要工序的工艺要点和控制方法。

水貂酪氨酸酶(TYR)基因克隆、SNPs筛查及其皮肤组织mRNA差异表达分析

旨在克隆和分析水貂酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)基因编码区,揭示该基因编码区SNPs及其皮肤组织mRNA差异表达规律与水貂毛色表型的关系。本研究采集7月龄雄性金州黑水貂、名威银蓝水貂和红眼白水貂共计301个样本的血液,利用聚合酶链式反应(PCR)方法对水貂TYR基因5个外显子进行分段克隆,并拼接获得其完整编码区序列(coding sequence,CDS);采用PCR产物直接测序技术筛查3种毛色水貂外显子1、4和5中的SNPs;采集9只7月龄雄性水貂(黑、灰与白色被毛各3只)背中部皮肤组织,通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术检测TYR基因mRNA在3种毛色水貂皮肤组织中的表达水平。结果表明,克隆的水貂TYR基因序列长2 391 bp,由5个外显子组成,编码区长1 596 bp,编码的531个氨基酸中包括信号肽(18个氨基酸)和成熟肽(513个氨基酸),该序列已上传GenBank(KJ716783)。SNPs筛查发现,3种毛色水貂TYR基因外显子4和5不存在突变位点,外显子1发现2处变异:c.441G>A和c.138T>A,c.441G>A为同义突变且仅存在于金州黑水貂群体。qRT-PCR分析显示,TYR基因mRNA在3种毛色水貂皮肤组织中均表达,且在金州黑水貂中的表达极显著高于银蓝水貂和红眼白水貂(P<0.01),在银蓝水貂中的表达显著高于红眼白水貂(P<0.05)。研究结果提示,TYR基因c.138T>A位点及其皮肤组织mRNA差异表达水平与水貂毛色显著关联。

狐狸皮与貉皮的拉曼光谱分析

本实验使用拉曼光谱仪对狐狸皮、貉皮进行了分析,得到了狐狸和貉不同部位皮的拉曼特征图谱。实验结果表明,同种动物不同部位皮的拉曼图谱基本一致;其中,在400～2 000 cm-1波数范围内狐狸皮的拉曼图谱和貉皮存在一定差异。通过分析这些图谱差异,可以为研究狐狸皮和貉皮提供一定依据。

水貂EGF基因SNPS与皮张长度的相关性试验

以水貂的表皮生长因子基因(EGF)作为候选基因,采用单链构象多态性和DNA测序的方法检测了EGF基因单核苷酸多态性(SNPs)。针对该群体的特点建立合适的统计分析模型,并进行了EGF基因多态性与皮长性状的关联分析。结果表明,EGF基因对水貂的皮张长度有一定影响。BB基因型个体与AA基因型个体之间有一定的差异(P<0.05)。CD基因型个体皮长平均要高于CC和DD基因型,且与CC型个体差异显著(P<0.05),与DD型差异不显著(P>0.05)。统计各基因型之间的组合给水貂皮长带来的影响时,发现多数组合基因型对所检测的水貂皮长有显著影响(P<0.05)。