血清miRNA-196a联合糖类抗原125、糖类抗原19-9对宫颈癌的诊断价值

目的探讨血清miRNA-196a联合糖类抗原19-9(CA19-9)及CA125诊断宫颈癌的临床价值。方法选取180例宫颈癌患者(宫颈癌组)、50例宫颈良性肿瘤患者(良性组)及50例健康体检者(对照组)为研究对象,比较不同临床分期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平,比较3组研究对象血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNA-196a、CA125、CA19-9三者单独及联合检测对宫颈癌的诊断效能。结果Ⅲ~Ⅳ期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于Ⅱ期与Ⅰ期患者,Ⅱ期宫颈癌患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于Ⅰ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。宫颈癌组患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于良性组和对照组,良性组患者血清miRNA-196a、CA125、CA19-9水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。miRNA-196a、CA125、CA19-9诊断宫颈癌的曲线下面积(AUC)分别为0.793、0.791、0.857,三者的诊断截断值分别为3.17、54.18 U/ml、23.72 U/ml,三者联合检测的AUC为0.950,大于三者单独诊断(P﹤0.05)。结论血清miRNA-196a联合CA19-9、CA125能够显著提高诊断效能,有助于宫颈癌的早期筛查及诊疗。

miRNA-196a与宫颈癌的关系研究

目的:探讨miRNA-196a与宫颈癌的相关性。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测35例宫颈癌组织、35例宫颈上皮内瘤样病变组织(CIN)和40例非癌疾病切除的正常宫颈组织中miRNA-196a的表达,分析miRNA-196a与宫颈癌的发生发展的相关性;并通过转染的方法将miRNA-196a转入宫颈癌细胞株Siha中,观察其对Siha细胞迁移和侵袭的影响。结果:相对于CIN组织和非癌疾病切除的正常宫颈组织,宫颈癌组织中miRNA-196a的表达水平明显上调,差异有统计学意义(P<0.01);miRNA-196a的表达水平与患者有无淋巴结转移、临床病理分级、临床分期和间质浸润深度密切相关(P<0.01),但与患者年龄、肿瘤直径大小和绝经与否均无明显关系(P>0.05);转染miRNA-196a可促进Siha细胞的迁移和侵袭。结论:miRNA-196a与宫颈癌的发生发展、迁移、侵袭密切相关。

高分辨率溶解曲线分析miRNA-196a2基因多态性与肺癌相关性

目的探讨microRNA-196a2基因多态性（rs1614913）与中国人群肺癌发病相关性。方法应用高分辨率溶解曲线（high resolution melting,HRM）分析技术对32例肺癌患者、27例肺部良性肿瘤患者及84例健康个体的microRNA-196a2基因多态性进行分析,并采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-restriction fragment length polymorphism,PCRRFLP）技术加以佐证。结果 micro-196a2在各组基因型分布均达到Hardy-Weinberg平衡。肺癌组C等位基因的分布频率高于对照组（P=0.0016）,OR=2.592（95%CI1.424～4.716）,说明C等位基因增加肺癌患病风险。结论 MicroRNA-196a2T/C（rs1614913）多态性增加肺癌的发病风险。MicroRNA-196a2基因多态性rs1614913可能是肺癌的一种有效的遗传标记物。

miRNA-196a2 rs116149131基因多态性与胃癌患病风险的Meta分析

目的探讨microRNA（miRNA）-196a2 rs116149131基因多态性与胃癌易感性的关系。方法计算机检索Pub Med、EMBASE、Cochrane library、中国知网、维普、万方及中国生物医学文献（CBD）等数据库中2016年3月1日之前关于miRNA-196a2 rs116149131基因多态性与胃癌易感性的相关研究。按纳入与排除标准筛选文献、提取资料并评价纳入研究的质量后,采用Stata 12.0软件进行Meta分析,计算合并OR值及其95%CI,并进行发表偏倚评估及敏感性分析。结果共纳入9篇文献,包括3992例患者和5699例对照。Meta分析结果显示,miRNA-196a2 rs116149131基因多态性与胃癌易感性无明显相关性。按种族进行亚组分析结果显示,rs116149131基因多态性在杂合子模型中显著增加高加索人种胃癌患病风险（CT vs.TT：OR=1.93,95%CI：1.35-2.75,P〈0.05）;而在亚洲人种中未发现该位点多态性与胃癌易感性有关。根据对照组人群的来源进行亚组分析结果显示,在以医院和以人群为基础的研究中均未发现有与胃癌易感性相关的等位基因或者基因型。在T〈C亚组中,显性基因模型（CT＋CC vs.TT：OR=1.40,95%CI：1.10-1.77,P=0.005）、纯合子模型（CC vs.TT：OR=1.59,95%CI：1.22-2.06,P=0.001）和杂合子模型（CT vs.TT：OR=1.33,95%CI：1.04-1.70,P=0.025）中发现rs116149131基因多态性与胃癌患病风险存在关联性;在等位基因模型和隐性基因模型中并未发现关联性。在T〉C组未发现rs116149131多态性与胃癌患病风险存在关联性。结论 miRNA-196a2 rs116149131基因多态性与胃癌患病风险无关联性,但存在种族差异。

miRNA-196a-5p调控Smad4表达对胃癌干细胞特性的影响

背景:miRNA-196a是新近发现的与乳腺癌、宫颈癌等多种肿瘤相关的microRNAs生物靶分子。研究证实,miRNA-196a-5p在胃癌细胞株和胃癌组织中均表达增加,然而,关于miRNA-196a-5p在胃癌干细胞中的功能和机制研究甚少。目的:分析miRNA-196a-5p在胃癌干细胞侵袭中的作用及机制。方法:流式细胞术分选胃癌BGC-823细胞株中的CD44^+细胞(即胃癌干细胞),qRT-PCR检测miRNA-196a-5p表达,Transwell实验检测细胞侵袭能力;参照Lipofectamine 2000转染试剂说明书的操作步骤,将miRNA-196a-5p inhibitor(即miRNA-196a-5p INH)转染至细胞中;双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-196a-5p对Smad4基因的调控作用;Western blotting实验检测上皮-间质转化相关蛋白(E-cadherin、N-cadherin和Vimentin)和Smad4蛋白表达。结果与结论:(1)miRNA-196a-5p在胃癌干细胞中表达增加(P<0.05);(2)抑制miRNA-196a-5p表达后,能够降低胃癌干细胞的侵袭能力(P<0.05),增加E-cadherin蛋白表达(P<0.05),降低N-cadherin和Vimentin蛋白表达(P均<0.05),增加Smad4蛋白表达(P<0.05);(3)结果表明,miRNA-196a-5p通过调控Smad4表达在胃癌干细胞上皮-间质转化和侵袭过程中发挥重要作用,miRNA-196a-5p具有作为胃癌治疗靶标的潜能。

miRNA-196a对宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响调节作用及相关机制研究

目的探讨与研究miRNA-196a对宫颈癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响调节作用及相关机制。方法36只小鼠平分为3组:对照组、实验1组、实验2组,每组各12只。实验1组、实验2组分别经腹腔注射0.2 m L感染Has慢病毒空载体、Has-miRNA-196a慢病毒载体的Hela细胞,对照组注射等体积的Hela细胞,连续注射3 d,在注射后4周测定移植瘤生长情况并检测细胞凋亡、自噬与炎症因子表达情况。结果实验2组的移植瘤重量(4.01±0.22)g低于实验1组(6.23±0.22)g与对照组(6.26±0.53)g,抑瘤率(40.86±11.31)%、细胞凋亡指数(30.67±2.14)%、Beclin-1(16.43±2.91)、LC3(12.22±1.13)相对表达水平高于实验1组[(40.86±11.31)%、(3.20±0.11)%、1.11±0.13、1.24±0.21]与对照组[(0.00±0.00)%、(3.13±0.24)%、1.13±0.03,1.23±0.321],差异有统计学意义(P<0.05),实验1组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。实验2组的血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)(7.21±0.52)pg/m L与白细胞介素6(IL-6)(8.08±0.54)pg/m L含量显著低于实验1组[(27.03±1.10)pg/m L、(35.81±1.66)pg/m L]与对照组[(27.33±1.49)pg/m L、(34.20±1.11)pg/m L],差异有统计学意义(P<0.05),实验1组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论MiRNA-196a在宫颈癌细胞裸鼠移植瘤中的过表达能促进移植瘤的凋亡与自噬,抑制肿瘤细胞炎症因子的释放,提高抑瘤率,从而降低移植瘤重量。

骨髓间充质干细胞miRNA-196a异常表达与激素性股骨头坏死关联的临床研究

目的探讨骨髓间充质干细胞miRNA-196a异常表达与激素性股骨头坏死的关联。方法选取确诊激素性股骨头坏死患者58例及其他类型股骨头坏死患者65例作为对照;荧光标记定量PCR测定mRNA表达水平,通过问卷调查方式收集其他相关因素信息。SPSS 17.0统计软件包用于数据分析。结果激素性股骨头坏死组骨髓间充质干细胞miRNA-196a表达水平高于对照组,且随着坏死程度的增加表达水平也随之增高(P<0.05);年龄大、miRNA-196a高表达,免疫性疾病家族史以及激素使用时间长均可能增加激素性股骨头坏死的发生风险,男性和体质量指数(BMI)超标则表现为弱保护因素(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞miRNA-196a异常表达与激素性股骨头坏死存在关联,且此关联受到年龄、性别以及家族史等因素的潜在影响。

miRNA-196a-2基因多态位点rs11614913与胃癌易感性的关联研究

目的：探讨miRNA-196a-2的单核苷酸多态（single nucleotide polymorphisms，SNPs）位点rsll614913与胃癌易感性的关系。方法：采用病例一对照研究设计，研究对象为232例经组织学确诊的胃癌病例和250例按年龄、性别进行匹配的无肿瘤史的社区对照人群。采用探针法SNP基因分型技术检测miRNA-196a-2基因的C／T多态的基因型，计算rsll614913多态位点基因型在病例与对照中的分布情况，采用logistic回归计算校正相对危险度（oddsratio，OR）和95％置信区间（95％confidenceinterval，95％CI）．评价基因型对胃癌易感性的影响。结果：miRNA-196a-2基因多态位点rsll614913CC、CT和1Tr基因型在胃癌人群中的分布频率为44．0％、47．0％和9．0％，与对照组（28．8％，54．4％和16．8％）相比差异有统计学意义（均P〈0．05）；与CC基因型相比，携带1Tr或CT基因型的个体胃癌发病危险度降低（OR=0．369，95％CI：0．204～0．659；OR=0．564，95％CI：0．387～0．830）；携带突变T碱基（CT／TT）的胃癌患者发生淋巴结转移的危险度降低（OR=0．618，95％CI：0．438～0．795；P=0．010）。讨论：miRNA-196a-2基因的C／T多态性与中国汉族人群胃癌的遗传易感性相关。

血清miRNA-196a、miRNA-92a表达水平与宫颈癌根治术后复发的关系

目的 探讨血清微小RNA(miRNA)-196a、miRNA-92a表达水平与宫颈癌根治术后复发的关系。方法 选取2015年1月至2016年6月甘肃省肿瘤医院收治的113例行宫颈癌根治术患者为宫颈癌组,68名体检健康女性为对照组,qRT-PCR检测两组血清miRNA-196a、miRNA-92a表达。分析宫颈癌患者血清miRNA-196a、miRNA-92a水平与临床病理特征的关系。术后随访5年,根据血清miRNA-196a、miRNA-92a水平均值将宫颈癌患者分为高表达和低表达。比较高表达和低表达宫颈癌患者复发率。多因素Cox回归分析宫颈癌根治术后复发的影响因素。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miRNA-196a、miRNA-92a水平对宫颈癌根治术后复发的预测价值。结果 宫颈癌组血清miRNA-196a、miRNA-92a表达高于对照组,差异有统计学意义(P <0.05)。不同国际妇产科联盟(FIGO)分期、间质浸润深度、淋巴结转移的宫颈癌患者血清miRNA-196a、miRNA-92a水平比较,差异有统计学意义(P <0.05)。截至末次随访,113例宫颈癌患者术后复发25例(22.12%),miRNA-196a、miRNA-92a高表达复发率高于低表达,差异有统计学意义(P <0.05)。FIGO分期ⅡA期、间质浸润深度≥1/2、淋巴结转移、miRNA-196a≥5.239、miRNA-92a≥1.816是宫颈癌根治术后复发的独立危险因素(HR> 1,P <0.05)。ROC曲线显示,miRNA-196a联合miRNA-92a预测宫颈癌根治术后复发的曲线下面积大于两者单独预测(Z=2.319、2.582,P=0.020、0.010)。结论 宫颈癌血清miRNA-196a、miRNA-92a水平高表达,二者与FIGO分期、间质浸润深度、淋巴结转移、复发有关,可作为宫颈癌根治术后复发的预测指标。

miRNA-196a-2 rs11614913单核苷酸多态性与中国人群中原发性肝细胞肝癌发病风险的Meta分析

目的系统评价miRNA-196a-2 rs11614913单核苷酸多态性(SNP)与中国人群原发性肝细胞肝癌(HCC)发病风险的关系。方法计算机检索中国知网(CNKI)、维普(VIP)、万方、PubMed、EMBASE、Elsevier数据库,检索时间为从建库到2017年12月,收集miRNA-196a-2 rs11614913 SNP与中国人群原发性HCC发病风险的病例对照研究。采用RevMan 5.3和Stata 11.0软件进行Meta分析。结果共纳入9篇文献,包括3634例原发性HCC患者和5003例对照者。Meta分析结果显示,在显性模型、隐性模型、共显性模型TT/CC基因型中,整体效应差异均有统计学意义(显性模型:OR=0.79,95%CI:0.63~0.99;隐性模型:OR=1.26,95%CI:1.01~1.58;共显性模型TT/CC基因型:OR=0.65,95%CI:0.50~0.83,P﹤0.05);而在共显性模型TT/TC基因型中,整体效应差异无统计学意义(OR=0.92,95%CI:0.83~1.02,P=0.13)。性别、吸烟、饮酒、乙型肝炎病毒(HBV)感染对罹患HCC风险的Meta分析结果显示:男性罹患HCC的风险高于女性(OR=1.43,95%CI:1.15~1.78,P﹤0.01),吸烟、饮酒及HBV感染均能增加罹患HCC的风险(吸烟:OR=1.28,95%CI:1.16~1.42;饮酒:OR=1.36,95%CI:1.13~1.65;HBV感染:OR=11.12,95%CI:7.82~15.90,P﹤0.01)。结论miRNA-196a-2 rs11614913基因多态性与中国人群HCC发病风险有关,携带CC基因型能够增加罹患HCC的风险,此外,男性罹患HCC的风险高于女性,吸烟、饮酒、HBV感染也能增加HCC的发病风险。

MiRNA-196a在牙周炎及牙龈炎中的表达及作用研究

目的 探究分析MiRNA-196a在牙周炎及牙龈炎中的表达及作用研究。方法 选取2016年8月至2018年8月期间本院口腔科收治的牙龈炎及牙周炎患者90例作为临床研究对象,各45例。分别记为牙龈炎组、牙周炎组,并按牙周炎严重程度将试验B组患者分为轻度牙周炎、中度牙周炎及重度牙周炎三组,各15例。选取同期来院体检的40例健康志愿者作为对照组。分别提取研究对象龈沟液,检测其龈沟液中miR-196a的表达,同时检测研究对象菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、探诊深度(PD)、附着丧失(AL)等临床指标,分析不同研究对象龈沟液miR-196a表达水平与PLI、GI、PD、AL等临床指标间的相关关系。结果 牙周炎组患者龈沟液miR-196a表达水平(3.22±0.67),明显高于牙龈炎组(1.45±0.53)及健康对照组(0.67±0.21),差异有统计学意义(P<0.05);且重度牙周炎组患者龈沟液中miR-196a表达水平(4.35±0.68),明显高于中度牙周炎组(3.41±0.74)及轻度牙周炎组患者(2.34±0.58),差异有统计学意义(P<0.05);牙龈炎组及牙周炎各组患者PLI、GI、PD、AL等临床指标水平均明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);且重度牙周炎组患者PLI、GI、PD、AL等临床指标水平(3.73±0.72)、(3.55±0.74)、(6.32±0.72)mm、(5.21±0.57)mm,明显高于轻度、中度牙周炎组,差异均有统计学意义(均P<0.05);牙龈炎及牙周炎患者龈沟液miR-196a含量与PLI、GI、PD、AL等临床指标水平呈明显正相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 牙龈炎及牙周炎患者龈沟液中miR-196a呈明显高表达,且随着miR-196a表达水平的升高,其牙周炎程度更为严重,提示龈沟液miR-196a表达水平可作为临床牙周炎诊治的有效评估指标。

miR-192、miR-196a表达与HER-2阴性晚期胃癌患者化疗疗效的相关性

目的 观察人类表皮生长因子受体-2(HER-2)阴性胃癌患者肿瘤组织及血清中miR-192、miR-196a表达水平与氟尿嘧啶类联合奥沙利铂化疗方案近期疗效的关系。方法 收集2020年5月~2023年4月济宁医学院附属医院行Xelox方案或SOX方案化疗晚期胃癌患者93例,根据近期疗效分为敏感组及耐药组。对两组患者肿瘤组织及血浆中miR-192、miR-196a表达量进行比较,采用Spearman法分析表达量与近期疗效的相关性。结果 与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-192及miR-196a均过表达[(0.165±0.061)vs.(0.043±0.009)、(0.338±0.084)vs.(0.057±0.021)],差异有统计学意义(t=19.081、31.297,P<0.05)。敏感组患者组织及血浆中miR-192表达均高于耐药组[(0.214±0.066)vs.(0.119±0.058)、(0.137±0.041)vs.(0.069±0.019)],miR-196a表达均低于耐药组[(0.294±0.071)vs.(0.367±0.093)、(0.229±0.065)vs.(0.273±0.072)],差异有统计学意义(t=7.355、10.713、4.110、3.027,P<0.05)。miR-192表达与化疗敏感度呈正相关,组织及血浆表达相关系数分别为0.577、0.482,miR-196a表达水平与化疗敏感度呈负相关,组织及血浆表达相关系数分别为-0.474、-0.413。患者胃癌组织及血浆中的miR-192、miR-196a呈正相关,相关系数分别为0.784、0.698。结论 HER-2阴性胃癌患者肿瘤组织及血清中miR-192表达水平与SOX、Xelox化疗方案近期疗效正相关,miR-196a的表达水平与SOX、Xelox化疗方案近期疗效负相关。检测血浆miR-192和miR-196a的表达有可能实现耐药的动态监测。

血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行根治性前列腺切除术老年前列腺癌患者预后的评估价值

目的分析血清微小RNA(miRNA)-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行腹腔镜根治性前列腺切除术(LRP)的老年前列腺癌患者预后的评估价值。方法选取2014年1月至2018年9月该院收治的行LRP治疗的213例老年前列腺癌患者作为研究对象,根据5年随访结局将患者分为预后优良组(87例)和预后不良组(126例)。收集患者术前临床基线资料及血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平。采用Logistic回归分析筛选影响患者预后的因素,并以独立危险因素构建预后预测模型,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测价值。结果多因素Logistic回归分析结果显示,患者血清前列腺特异性抗原(PSA)水平、切缘阳性、血清miRNA-21-5p与miRNA-5189-5p表达水平均为行LRP的老年前列腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05),以独立危险因素构建联合预测模型,各因素单独预测行LRP的老年前列腺癌患者预后的曲线下面积均小于4项联合(P<0.05)。结论血清miRNA-21-5p、miRNA-5189-5p表达水平对行LRP的老年前列腺癌患者预后的预测具有较高价值。

胎衣不下奶牛miRNA-185靶向调控血管内皮生长因子A表达的研究

【目的】通过体内和体外试验检测miRNA-185及血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)在胎衣正常排出和胎衣不下(RFM)奶牛胎盘组织中的差异表达情况及VEGFA在奶牛母体胎盘组织中表达分布,验证及明确miRNA-185和VEGFA与奶牛胎衣不下发生密切相关并存在靶向调节关系,为深入研究miRNA-185在奶牛胎衣不下发生过程中的作用提供理论依据和试验基础。【方法】采用实时荧光定量PCR法检测胎衣正常排出及胎衣不下奶牛母体胎盘组织中miRNA-185及VEGFA基因表达情况,采用荧光原位杂交技术(FISH)检测VEGFA在母体胎盘组织的表达分布及mRNA的差异表达情况;采用双荧光素酶明确miRNA-185与VEGFA的靶向调节关系,采用实时荧光定量PCR及Western blotting检测体外转染miRNA185 mimics、miRNA-185 inhibitor及miRNA-185 NC后VEGFA mRNA及蛋白的差异表达情况。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,与胎衣正常排出奶牛相比,胎衣不下奶牛体内miRNA-185及VEGFA的表达水平均极显著下调(P<0.01);荧光原位杂交结果显示,VEGFA mRNA主要在奶牛子宫内膜上皮细胞中表达。VEGFA是miRNA-185的靶向调节蛋白。与阴性对照组相比,转染miRNA-185 mimics后VEGFA的mRNA及蛋白表达水平均极显著下调(P<0.01),转染miRNA-185 inhibitor后VEGFA的mRNA及蛋白表达水平均极显著上调(P<0.01)。【结论】胎衣不下奶牛母体胎盘组织内miRNA-185及VEGFA表达显著降低,VRGFA主要在子宫内膜上皮细胞中表达,miRNA-185可通过靶向调控VEGFA的表达参与奶牛胎衣不下的发生发展。

miRNA-432-5p在脂多糖诱导的肺泡上皮细胞损伤中的作用及可能机制研究

目的探讨miRNA-432-5p在脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮细胞损伤中的作用及可能机制。方法人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、LPS组、miRNA-432-5p mimics组及miRNA-432-5p siRNA组。利用CCK-8实验检测细胞的活性;利用ELISA法检测细胞培养液中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)的含量;利用RT-qPCR检测细胞中miRNA-432-5p mRNA的表达;利用Hoechst染色检测细胞的凋亡情况;利用Western blot检测细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸蛋白酶1(Caspase1)、白细胞介素1β(IL-1β)蛋白的表达。结果LPS组细胞的活性OD值(6 h:0.809±0.09;12 h:0.601±0.09;24 h:0.485±0.43)明显低于对照组的1.000±0.00,差异均具有统计学意义(P<0.05);LPS组细胞中miRNA-432-5p mRNA表达水平为1.563±0.10,明显高于对照组的1.000±0.00,细胞凋亡率为(41.52±1.83)%,明显高于对照组的(0.000±0.00)%,差异均有统计学意义(P<0.05);LPS组培养液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量分别为(36.32±6.07)pg/mL、(45.08±3.75)pg/mL、(40.87±6.65)pg/mL,明显高于对照组的(5.27±0.84)pg/mL、(5.57±0.65)pg/mL、(3.26±0.85)pg/mL,差异均具有统计学意义(P<0.05),LPS组细胞中的NLRP3、Caspase1和IL-1β蛋白表达水平分别为0.734±0.08、0.305±0.06、0.430±0.05,明显高于对照组的0.163±0.03、0.025±0.01、0.032±0.01,差异均具有统计学意义(P<0.05)。miRNA-432-5p mimics组细胞凋亡率为(24.23±3.09)%,明显低于LPS组的(41.52±1.83)%,细胞活性为0.639±0.09,明显高于LPS组的0.468±0.07,差异均有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p mimics组培养液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量分别为(22.85±4.01)pg/mL、(29.15±5.22)pg/mL、(20.63±3.89)pg/mL,明显低于LPS组的(36.32±6.07)pg/mL、(45.08±3.75)pg/mL、(40.87±6.65)pg/mL,差异均具有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p mimics组细胞中的NLRP3、Caspase1和IL-1β蛋白表达水平分别为0.473±0.04、0.121±0.02、0.279±0.04,明显低于LPS组的0.734±0.08、0.305±0.06、0.430±0.05,差异均有统计学意义(P<0.05)。miRNA-432-5p siRNA组细胞凋亡率为(56.44±3.25)%,明显高于LPS组的(41.52±1.83)%,细胞活性为0.348±0.06,明显低于LPS组的0.468±0.07,差异均有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p siRNA组培养液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量分别为(51.08±4.12)pg/mL、(53.61±4.83)pg/mL、(59.97±3.62)pg/mL,明显高于LPS组的(36.32±6.07)pg/mL、(45.08±3.75)pg/mL、(40.87±6.65)pg/mL,差异均有统计学意义(P<0.05);miRNA-432-5p siRNA组细胞中的NLRP3、Caspase1和IL-1β蛋白表达水平分别为0.969±0.12、0.430±0.09、0.575±0.07,明显高于LPS组的0.734±0.08、0.305±0.06、0.430±0.05,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-432-5p可通过抑制NLRP3炎性小体通路的激活,对受损细胞发挥保护作用。

miRNA-5582在卵巢癌组织中的表达及对卵巢癌细胞增殖和侵袭的影响

目的观察微小RNA(miRNA)-5582对卵巢癌SK-OV-3细胞增殖和侵袭的影响并探讨其可能的机制。方法采用加利福尼亚大学圣克鲁兹分校(UCSC)数据库分析miRNA-5582在卵巢癌组织中的表达及其与卵巢癌患者临床分期的关系。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢癌细胞株A2780、HO-8910、OC3、SK-OV-3和正常卵巢上皮细胞株IOSE80中miRNA-5582的表达,miRNA-5582表达最低的SK-OV-3细胞株分为对照组和miRNA-5582组,分别转染miR-NC模拟物和miRNA-5582模拟物。MTS法和Transwell实验分别检测SK-OV-3细胞增殖及侵袭。以microRNA.org和miRWalk3.0数据库检索miRNA-5582的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证miRNA-5582的靶基因。qRT-PCR和Western blot法检测靶基因表达。结果miRNA-5582在卵巢癌组织中的表达显著低于正常组织(P<0.01)。miRNA-5582表达水平与卵巢癌患者的临床分期呈负相关(P<0.01)。miRNA-5582在卵巢癌细胞株中表达均显著低于IOSE80细胞(P<0.05),SK-OV-3细胞中miRNA-5582表达最低(P<0.01)。对照组和miRNA-5582组的miRNA-5582相对表达量为1.42±0.73和10.46±0.91,转染体系构建成功(P<0.01)。miRNA-5582组SK-OV-3细胞活性在第3、第4和第5天显著低于对照组(P<0.05)。对照组和miRNA-5582组侵袭细胞数分别为(49.48±3.78)和(15.77±3.40)个,miRNA-5582组细胞侵袭数量显著少于对照组(P<0.01)。miRNA-5582的靶基因是丝氨酸/精氨酸富集剪接因子3(SRSF3)(P<0.01)。miRNA-5582组SK-OV-3细胞SRSF3基因表达显著低于对照组(P<0.01)。结论miRNA-5582在卵巢癌组织和细胞株中低表达,上调miRNA-5582通过抑制SRSF3基因表达降低卵巢癌SK-OV-3细胞的增殖和侵袭能力,miRNA-5582可能为卵巢癌的防治提供新的靶点。

抑制miRNA-376c-3p对肾透明细胞癌生长的影响

目的探究miRNA-376c-3对肾透明细胞癌(ccRCC)中肿瘤细胞生长的影响。方法以实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN及正常人近段肾小管上皮细胞系HKC中miRNA-376c-3p的表达。体外培养786-O细胞,随机分为对照组、miR-376c-3p inhibitor组(转染miR-376c-3p inhibitor)、miR-376c-3p mimics组(转染miR-376c-3p mimics)、阴性对照组(转染miR-376c-3p阴性对照),分组转染后以RT-PCR检测4组细胞miRNA-376c-3p表达;以Ki67免疫荧光染色、集落生成实验检测4组786-O细胞增殖;以TUNEL染色检测4组786-O细胞凋亡;以免疫荧光染色检测4组786-O细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达并比较其Bax/Bcl-2。于右腋窝皮下接种上述4组786-O细胞建立其裸鼠移植瘤模型,3周后测定其肿瘤体积与质量;以Ki67免疫荧光染色、TUNEL染色分别检测4组裸鼠肿瘤细胞增殖与凋亡。结果与HKC细胞比较,ccRCC细胞系786-O、Caki-1、SN12-PM6、ACHN中miR-376c-3p表达降低(P<0.05)。与对照组比较,miR-376c-3p inhibitor组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比升高(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比降低(P<0.05);miR-376c-3p mimics组细胞增殖率与集落形成率、肿瘤体积与质量、裸鼠肿瘤组织Ki67阳性比降低(P<0.05),细胞miR-376c-3p相对表达、Bax/Bcl-2与凋亡率、裸鼠肿瘤组织TUNEL阳性比升高(P<0.05);阴性对照组各指标无明显变化(P>0.05)。结论抑制miRNA-376c-3p可削弱ccRCC细胞增殖及集落生成活性,促进其凋亡,并在裸鼠体内抑制其移植瘤生长。

超声及血清CK-19、Galectin-3、miRNA-363联合诊断PTMC颈部淋巴结转移的临床价值

目的 研究超声及血清细胞角蛋白19(CK-19)、半乳糖凝集素3(Galectin-3)及微小核糖核酸-363(miRNA-363)联合诊断甲状腺微小乳头状癌(PTMC)颈部淋巴结转移(CLNM)的临床价值。方法 回顾性选取2021年7月至2023年6月在天津市环湖医院诊断的PTMC患者92例纳入研究组,选择同期本院收治的结节性微小甲状腺肿患者92例纳入对照组。观察两组病灶情况及超声特点;比较两组血清CK-19、Galectin-3、miRNA-363水平,研究组是否发生CLNM患者病灶超声特点及血清CK-19、Galectin-3、miRNA-363水平。分析PTMC~CLNM超声特点与血清CK-19、Galectin-3、miRNA-363水平的相关性。结果 研究组多枚病灶、病灶>0.5 mm、病灶纵横比≥1、病灶形态不规则、病灶边缘模糊、病灶微钙化、病灶低回声、淋巴结肿大占比分别为70.65%、71.74%、82.61%、61.96%、72.83%、80.43%、84.78%、70.65%,均大于对照组(31.52%、52.17%、27.17%、25.00%、19.57%、15.22%、66.30%、22.83%),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组血清CK-19、Galectin-3水平分别为(30.45±3.31)、(4.68±0.48)μg/L,均高于对照组[(7.05±0.73)、(1.72±0.19)μg/L],血清miRNA-363水平为(2.89±0.30) fmol/L,低于对照组[(4.30±0.46) fmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组发生CLNM患者多枚病灶、病灶形态不规则、病灶边缘模糊、病灶微钙化、淋巴结肿大占比分别为90.91%、86.36%、95.45%、100.00%、90.91%,均大于未发生CLNM患者(64.29%、54.29%、0、25.00%、64.29%),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组发生CLNM患者血清CK-19、Galectin-3水平(41.20±4.42)、(5.94±0.62)μg/L,均高于未发生CLNM患者[(24.36±2.71)、(3.25±0.34)μg/L],血清miRNA-363水平为(2.14±0.23) fmol/L,低于未发生CLNM患者[(3.46±0.36) fmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析,CLNM患者多枚病灶、病灶形态不规则、病灶边缘模糊、淋巴结肿大及血清CK-19、Galectin-3、miRNA-363水平均与CLNM呈正相关(P<0.05)。结论 超声及血清CK-19、Galectin-3、miRNA-363联合诊断PTMC~CLNM具有较高的临床价值。

miRNA-106a和miRNA-20a与新生儿呼吸窘迫综合征严重程度及预后的关系

目的探讨血清微小RNA(miRNA)-106a和miRNA-20a水平与新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)严重程度及预后的相关性。方法选取2021年3月至2024年4月在西安交通大学附属红会医院就诊的156例NRDS患儿为NRDS组,其中男77例,女79例,出生胎龄(33.87±2.01)周。根据NRDS患儿胸部影像检查结果将其分为轻度组(50例)、中度组(74例)和重度组(32例)。根据NRDS患儿结局将其分为预后良好组132例和预后不良组24例。另选取同期在西安交通大学附属红会医院体检的健康早产儿150例作为对照组,其中男77例,女73例,出生胎龄(34.05±1.83)周。采用定量聚合酶链式反应(qPCR)测定血清miRNA-106a和miRNA-20a水平;采用Pearson相关分析NRDS患儿血清miRNA-106a和miRNA-20a水平与新生儿急性生理评分(SNAPPE-Ⅱ)、1 min Apgar评分的相关性;采用受试者操作特征曲线(ROC)评价血清miRNA-106a和miRNA-20a水平预测NRDS患儿预后的价值。采用t检验、χ^(2)检验。结果NRDS组患儿血清miRNA-106a和miRNA-20a水平低于对照组[(0.97±0.30)比(1.70±0.53)、(0.88±0.32)比(1.57±0.55)],差异均有统计学意义(t=14.750、13.346,均P<0.05)。重度组、中度组、轻度组血清miRNA-106a和miRNA-20a水平及1 min Apgar评分比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。预后不良组NRDS患儿血清miRNA-106a和miRNA-20a水平低于预后良好组[(0.40±0.19)比(1.07±0.36)、(0.39±0.17)比(0.97±0.34)],SNAPPE-Ⅱ评分高于预后良好组[(34.25±6.50)分比(18.10±3.58)分],差异均有统计学意义(t=13.438、12.718、11.850,均P<0.05)。血清miRNA-106a和miRNA-20a水平与SNAPPE-Ⅱ评分呈负相关(均P<0.05),与1 min Apgar评分呈正相关(均P<0.05)。miRNA-106a、miRNA-20a预测NRDS患儿预后不良的灵敏度分别为95.8%、91.7%,特异度分别为93.2%、89.4%,曲线下面积(AUC)分别为0.961(95%CI 0.929~0.992)、0.938(95%CI 0.900~0.976),表明这些生物标志物预测NRDS患儿预后准确度较高。miRNA-106a联合miRNA-20a的灵敏度和特异度分别为91.7%、97.7%,AUC为0.984(95%CI 0.967~1.000),表明联合检测具有更高的预测效能。结论血清miRNA-106a和miRNA-20a水平在NRDS患儿中降低,且其水平随NRDS患儿严重程度加重而逐渐降低,二者在预测NRDS患儿预后中具有重要价值。

miRNA-195在腹主动脉瘤血管平滑肌细胞中作用机制探讨

目的探讨miRNA-195在大鼠腹主动脉瘤中表达及对血管平滑肌细胞的作用。方法建立大鼠腹主动脉瘤模型,实时荧光定量PCR检测miRNA-195在腹主动脉瘤组织中的表达量;血管平滑肌细胞中转染miRNA抑制物,用CCK-8试剂盒检测细胞增殖变化,流式细胞仪技术检测细胞凋亡率,蛋白印迹法检测MMP-2、MMP-9和OPN蛋白表达。结果miRNA-195在大鼠腹主动脉瘤组织中呈高表达;血管平滑肌细胞中转染miRNA-195抑制物后,转染组细胞的增殖能力在48 h、72 h和96 h比对照组提高40.5%(P<0.05)、39.7%(P<0.01)、36.1%(P<0.001),且转染组细胞凋亡率比对照组降低35.6%(P<0.001),MMP-2蛋白、MMP-9蛋白和OPN蛋白在转染组中表达量分别比对照组降低45.4%、36.8%和48.8%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miRNA-195表达升高导致血管平滑肌细胞数量减少,并可能通过上调MMP-2和MMP-9蛋白表达致细胞外基质发生降解,从而促进腹主动脉瘤的形成和发展。