重复Morris水迷宫训练提高大鼠空间学习能力却不影响空间记忆能力

采用每周一个周期的Morris水迷宫(MWM)训练(包括第1d的定位航行实验和第2d的空间探索实验),探讨重复MWM训练对大鼠空间学习、记忆能力的影响。在定位航行实验中,动物随机从不同象限连续入水5次以寻找隐藏站台,测量其上台潜伏期来评定其空间学习能力;在第二个训练日中,空间探索实验时撤去隐藏在靶象限的站台,计算大鼠在靶象限活动时间的百分比,评定大鼠的空间记忆能力。采用雄性SD大鼠20只,连续四周重复给予MWM定位航行和探索训练,分别评定大鼠空间学习和记忆能力。结果显示:随着训练次数的增加,动物的上台潜伏期逐渐缩短。同时,第一次的MWM训练能够提高大鼠的空间记忆能力,然而重复训练则轻微提高大鼠的空间记忆能力,但无统计学差异:在1、2、3、4周测得的靶象限内活动时间百分比分别为39.29%±1.62%,39.97%±2.34%,42.05%±2.32%,39.30%±1.64%。本实验结果提示:重复MWM定位航行能够增强动物的空间学习能力,但不影响动物的空间记忆能力。空间学习和记忆能力可能存在不同的形成机制。

雄激素对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马神经元的影响

目的探讨雄激素对SAMP8小鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元的影响。方法7月龄雄性SAMP8小鼠30只,随机分为假手术组、去势组及去势+雄激素补充治疗组。十一酸睾酮(TU)剂量为37.4mg/(kg.15d)。雄激素补充治疗45d后,通过Morris水迷宫观察小鼠学习记忆能力;用苏木素伊红染色,Aβ免疫组织化学及图像分析观察海马CA1区神经元的变化。结果1.Morris水迷宫中,去势组定位航行试验潜伏期明显长于其他组(P<0.05),探索实验跨越平台次数减少(P<0.05)。TU补充治疗能改善学习记忆能力,与假手术组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.去势组海马CA1区弥漫性空泡变性,细胞排列疏松、紊乱,核深染、固缩;Aβ阳性神经元染色深,其数量及吸光度(A)明显高于其他组(P<0.05)。结论去势后,雄激素缺乏可导致学习记忆能力下降,海马神经元严重损伤,雄激素补充治疗可减轻神经元损伤,改善学习和记忆能力。

热性惊厥对大鼠情感行为及学习记忆的影响

【目的】 探讨热性惊厥对大鼠情感行为及学习记忆能力的影响。 【方法】 3 6只雄性SD (Spraque Dawley)大鼠随机分为热性惊厥组 (febrileseizuresgroup ,FS) ,发热对照组 (febrilecontrolgroup ,FG)及正常对照组 (nor malcontrolgroup ,NG)。观察各组大鼠在旷场试验 (openfieldtest ,OFT)、避暗试验 (passiveavoidancetest,PAT)以及在Morris水迷宫 (Morriswatermaze ,MWM )试验中情感行为及学习记忆能力的改变。 【结果】 FS组大鼠与NG、FG组相比 :在OFT中穿格得分分值 ( 3 7.48± 7.0 9)降低 ,后肢性站立的次数 ( 12 .11± 4.41)减少 ,排出粪便粒数 ( 10 .62±2 .3 2 )增多 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ;在PAT中 ,FS组大鼠犯错次数 ( 4 .0 2± 1.2 9)增加 ,且记忆潜伏期 [( 169.71± 10 3 .2 2 )秒 ]缩短 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1) ;在Morris水迷宫试验中 ,FS组大鼠搜寻站台的逃逸潜伏期明显延长 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。

淫羊藿苷对SAMP8小鼠记忆能力、神经元微观形态及GSK-3β蛋白表达的影响

目的:观察淫羊藿苷对SAMP8小鼠记忆能力、神经元微观形态及GSK-3β蛋白表达的影响,为临床治疗提供依据。方法:采用随机、平行对照设计将所选动物分为4组,正常组、模型组、安理申组、淫羊藿苷组,每组各10只,淫羊藿苷组的小鼠灌胃剂量为20 mg/kg,安理申组的小鼠灌胃剂量为1.3 mg/kg,药液浓度均为2 mg/m L。模型组予蒸馏水灌胃10 m L/kg,时程长为4周,灌胃结束后进行水迷宫,电镜,Western检测。结果:(1)模型组与正常组比较在水迷宫实验中逃避潜伏时间明显增长,安理申组与淫羊藿苷组可以改善这一现象。在第一天的训练中淫羊藿苷组、模型组和正常组没有表现出明显统计学意义(P>0.05)。在随后的四天中淫羊藿苷组和安理申组的小鼠潜伏期明显低于模型组,均有明显统计学意义(P<0.05)。在第五天的在空间探索实验中淫羊藿苷组、安理申组穿越平台次数明显多于模型组,其中淫羊藿苷组最为明显。(2)电镜下观察发现,模型组与正常组比较神经元细胞器丰富度明显降低,各个细胞器结构有明显损害,淫羊藿苷组与安理申组可以保护细胞器的完整程度,降低细胞水肿程度,使线粒体,内质网等细胞器相对完整,其中淫羊藿苷组在降低细胞水肿方面优于安理申组,保护线粒体以及内质网方面相差不大。(3)Western检测发现海马DG区模型组GSK-3β表达量升高最明显,淫羊藿苷组与安理申组表达量相对较少,安理申组相对更明显,两组均介于模型组与正常组之间。结论:淫羊藿苷可改善模型小鼠学习记忆能力,该作用可能与保护小鼠海马神经元结构,降低神经纤维缠结相关蛋白表达相关。

大鼠脑震荡后8天不同损伤程度空间认知行为的变化

目的:探讨伤后8 d内认知障碍改变与不同程度脑震荡(BC)损害的关系.方法:成年SD大鼠36只,应用自制单摆式闭合性脑损伤机械打击装置复制不同损伤程度的BC大鼠模型.随机分为对照组、单纯型脑震荡(SBC)组和复杂型脑震荡(CBC)组(n=12).应用Morris水迷宫实验,评价大鼠空间学习记忆功能.结果:在Morris水迷宫测试中,SBC组大鼠1～3 d找到平台的时间与对照组相比显著延长;CBC组大鼠伤后1～5d找到平台的时间与对照组SBC组相比显著延长.SBC和CBC大鼠在Morris水迷宫无平台探测试验中,在原有平台象限(Ⅲ象限)的时间比对照组减少但无显著差异.结论:认知障碍的严重程度与脑震荡损伤程度有关.

多重脑震荡对大鼠空间认知行为的影响

目的探讨多重脑震荡(MCC)对大鼠认知行为的影响。方法成年SD大鼠24只,应用自制金属单摆式闭合性脑损伤机械打击装置复制MCC大鼠模型,随机分为对照组和MCC组,伤后应用Morris水迷宫实验,评价大鼠的空间学习记忆功能。结果在Morris水迷宫测试中,与对照组(8～14d测试结果分别为:64.74±23.43,33.16±17.70,36.59±27.53,37.60±18.20,37.14±26.03,16.85±10.63,10.02±6.51)相比,MCC大鼠伤后8～14d找到平台的时间明显延长,且在伤后的第9d(71.74±35.76)、第10d(63.14±31.02)、第13d(47.51±40.93)、第14d(42.39±43.33)差异具有显著性。在无平台探测实验中,与对照组(23.89±11.82)相比,MCC后第14d(15.12±6.56)大鼠在原有平台第三象限停留时间明显减少,差异显著(P<0.05)。结论实验性多重脑震荡大鼠在Morris水迷宫实验中,出现较为严重的空间认知行为障碍。

DEHP诱导的氧化应激致小鼠学习记忆能力的下降和维生素E的保护作用

目的研究邻苯二甲酸二乙基己酯(Di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)对小鼠学习记忆能力的影响与其在脑组织造成氧化损伤的关系。方法 36只雄性昆明小鼠随机分成4组,每组9只,分别为空白对照组(生理盐水)、DEHP染毒组(50mg/kg DEHP)、维生素E(vitamin E)保护组(50mg/kg DEHP+50mg/kg维生素E)、维生素E对照组(50mg/kg维生素E)。每天清晨灌胃1次,连续10天。期间进行Morris水迷宫测试,检验小鼠的学习记忆能力变化,10天后将小鼠处死,取出脑组织,检验ROS及MDA含量。结果 Morris水迷宫结果显示,DEHP染毒组小鼠学习记忆能力与对照组相比显著下降(P<0.05),而维生素E作为抗氧化剂在一定程度上可减少其下降幅度;DEHP染毒组小鼠脑组织中的ROS水平和MDA含量显著上升(P<0.05),而维生素E可减少这种增加,并与对照组没有显著差异。结论维生素E作为抗氧化剂可对DEHP致小鼠学习记忆能力损伤有保护作用,DEHP致小鼠学习记忆能力损伤可能与其在脑组织造成的氧化损伤有关。

艾炷灸足三里悬钟对衰老小鼠学习记忆及脑NO NOS的影响

目的:通过观察艾炷灸"足三里、悬钟"两穴对衰老小鼠模型的学习记忆功能及脑组织NO含量、NOS活力的影响,探讨艾炷灸对脑老化的作用机理。方法:36只小鼠随机分为3组,将两组连续注射D-半乳糖6周,其中一组模型组,另一组为在12天后进行艾炷灸治疗(治疗组),第3组注射同剂量生理盐水为对照组,另将16月龄小鼠作为第4组自然衰老对照组(自衰组)。采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆功能,NO含量、NOS活力测定分别用硝酸还原酶法和化学比色法。结果:(1)在水迷宫测试的6项指标中①模型组与对照组比较"潜伏期、寻求次数、停留时间、象比"4项指标均有显著性差别(P<0.05),模型组与自衰老组在"寻求次数、停留时间、跨越次数、原平台象比"4项均无差别(P>0.05),提示模型组的学习记忆能力与自衰组相似。②模型组与治疗组比较6项均有显著性差异(P<0.05,P<0.01),治疗组与对照组各项指标无显著性差异(P>0.05)。(2)①模型组和自衰组的大小脑皮质NO含量、NOS活力都比对照组明显升高(P<0.05,P<0.01),提示D-半乳糖造成亚急性衰老小鼠大小脑皮质NO含量、NOS活力都明显升高,与自然衰老小鼠的情况接近。②模型组与治疗组比较,大小脑皮质NO含量、NOS活力显著升高,有显著差异(P<0.05,P<0.01);对照组与治疗组比较,无显著差异(P>0.05)。结论:艾炷灸"足三里、悬钟"两穴可以改善D-半乳糖所致衰老小鼠的学习记忆功能,与其可降低异常增高脑组织中NO含量、NOS活力有关,具有延缓衰老作用。

多发梗死痴呆动物模型的改进与评价

[目的]对栓子注入法造成多发梗死痴呆(MID)模型加以改进并进行评价。[方法]颈外动脉逆行插管注入血栓建立MID大鼠模型,观察大鼠大脑皮质及海马的病理形态变化,同时应用Morris水迷宫检测MID大鼠的空间学习记忆的变化。[结果]1)病理形态学显示:MID大鼠局部脑区可见多发软化坏死灶,大脑皮质变薄,细胞数目减少,海马区存在广泛的细胞脱失现象,细胞排列稀疏、紊乱。2)行为学检测显示:MID大鼠学习记忆的获得、保持及再学习的能力存在严重障碍,学习记忆的过程延长。[结论]经行为学及形态学的检测,证实了栓子注入法造成多发梗死痴呆模型的可靠性和可重复性。

1,6-二磷酸果糖对热性惊厥大鼠学习记忆和情感行为损害保护作用的研究

【目的】探讨1,6-二磷酸果糖(fructose-1,6-diphosphate,FDP)对大鼠热性惊厥性学习记忆和情感行为损害的保护作用。【方法】30只21日龄雄性SD大鼠随机均分为果糖干预(FDP intervention group,FD)、盐水对照(so-dium chloride solutin control group,NS)和热性惊厥组(febrile seizure group,FS)。水浴法建立热性惊厥模型;FD组于惊厥前30min腹腔注射FDP25mg/100g大鼠体重;而NS组腹腔注射相同体积的0.9%氯化钠溶液;FS组不予干预。观察各组在避暗试验(passive avoidance test,PAT)、Morris水迷宫(Morris water maze,MWM)及旷场试验(open field test,OFT)中学习记忆和情感行为的变化。【结果】FDP可使惊厥大鼠在PAT中的记忆潜伏期延长[FD组为(341.16±97.44)s,NS组为(227.62±92.19)s,FS组为(213.66±90.70)s,P<0.01],错误次数减少(FD组为1.84±1.27,NS组为4.97±1.18,FS组为5.06±1.38,P<0.01);在OFT中,FDP可增强反复惊厥大鼠的兴奋性(FD组得分为65.41±8.02,NS组为46.22±7.97,FS组为48.81±7.69,P<0.0 1),提高大鼠对陌生环境的适应能力(FD组后肢性站立的次数为36.29±5.06,NS组为18.72±4.71,FS组为20.06±4.96,P<0.01),改善大鼠的紧张情绪(FD组粪便粒数为5.62±2.76,NS组为10.79±2.91,FS组为11.43±3.01,P<0.01);在MWM中,FD组大鼠逃逸潜伏期缩短,搜寻策略改善。【结论】1,6-二磷酸果糖可以改善反复惊厥大鼠的学习记忆和情感行为,对惊厥性脑功能损伤具有保护作用。

银丹心脑通软胶囊对VD大鼠学习记忆能力及AchE、NR2B的影响

目的:研究银丹心脑通软胶囊对血管性痴呆模型大鼠学习记忆能力及海马CA1区乙酰胆碱酯酶(AchE)、N-甲基D-天(门)冬氨酸受体2B(NR2B)的影响。方法:采用双侧颈总动脉结扎,缺血、再灌注,同时腹腔注射硝普钠方法制备模型,采用Morris水迷宫实验对大鼠的学习记忆能力进行测试,用HE染色观察病理变化,免疫组化染色技术对大鼠海马CA1区AchE及NR2B进行检测。结果:假手术组与正常对照组比较学习记忆能力无差异,海马CA1区AchE及NR2B表达较模型组、治疗组少;模型组与正常对照组比较学习记忆能力明显下降,海马CA1区AchE及NR2B表达增多,差异有统计学意义(P<0.05);治疗各组与模型组比较银丹心脑通软胶囊中剂量组和高剂量组学习记忆能力明显改善,海马CA1区AchE及NR2B表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:银丹心脑通软胶囊可改善VD模型大鼠的学习记忆能力,机制可能是由于降低海马CA区AchE及NR2B的表达。

水迷宫实验动物游动的图像轨迹采集分析系统设计

本系统目标是开发一套兼容性强、计算精度较高、低成本的Morris水迷宫实时图像追踪与分析系统 ,将水迷宫实验动物游动的图像轨迹实时采集到计算机中 ,以识别出游动轨迹并对其进行系统分析处理。

不同垫料对SPF级KM小鼠学习记忆能力的影响

目的探讨非专业加工制作的麦秸垫料、玉米芯垫料、刨花垫料和纸质垫料对SPF级昆明小鼠(KM)学习记忆能力的影响差异,以及不同垫料对小鼠行为学的影响。方法选用SPF级KM小鼠24只,分别使用麦秸垫料、刨花、玉米芯和纸质垫料饲养8周后,开展MORRIS水迷宫行为学实验,考察其行为学的变化和学习记忆能力的差异。结果麦秸组学习记忆能力增加明显高于刨花组(P<0.05);水迷宫实验期间,各组增重差异不显著。定位航行实验结果显示,麦秸组第5 d的逃避潜伏期显著低于其余三组(P<0.05),其余时间段差异无显著性;空间探索实验结果显示麦秸组小鼠穿过原平台位置的次数、游泳时间均多于其余三组。结论不同垫料对水迷宫实验中KM小鼠的体质量影响较小,麦秸垫料对KM小鼠学习记忆能力的影响优于刨花垫料和玉米芯垫料,建议将麦秸垫料作为实验动物接触性垫料推广使用。

Morris水迷宫联合神经功能评分法构建脓毒症脑病大鼠模型的研究

目的 在脑电生物监测方法构建脓毒症脑病动物模型的基础上，进一步探讨和改良脓毒症脑病大鼠模型。方法 80只SD大鼠放置脑电监测电极后采用经典盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture ，CLP）方法诱发脓毒症，术后分别根据脑电图（electroencephalogram，EEG）监测法（简称EEG法）和Morris水迷宫（Morris water maze, MWM）实验联合神经功能评分法（简称MWM法）将大鼠分为脓毒症脑病（sepsis associated encephalopathy, SAE）组和非脓毒症脑病（non-sepsis associated encephalopathy，NSAE）组，比较两种诊断方法的差异。结果 两种诊断方法具有较高一致性，且与后期标本病理改变相符。结论 SAE大鼠EEG方法模型稳定性欠佳，而MWM法鉴别脓毒症脑病与EEG法具有较好的一致性，可以用于脓毒症脑病动物模型筛查。

白藜芦醇对阿尔茨海默病小鼠前额叶皮质SIRT1、RARβ、ADAM10蛋白表达及Tau蛋白磷酸化水平的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对阿尔茨海默病(AD)小鼠前额叶皮质沉默信息调节因子2相关酶I(SIRT1)、维甲纬酸受体β(RARβ)、含有解整合素和金属蛋白酶结构域的蛋白10(ADAM10)表达及Tau蛋白磷酸化水平的影响。方法选取6月龄C57BL/6雄性小鼠6只作为空白对照组(BC组,生理盐水灌胃),6月龄APPswePSEN1dE9(APP/PS1)转基因小鼠12只制备AD小鼠模型后均分为AD组(生理盐水灌胃)、AD+Res组(800 mg/kg Res灌胃),采用Morris水迷宫实验(MWM)检测3组小鼠6月龄和9月龄时找到水中平台的时间;9月龄小鼠完成MWM后麻醉处死,取前额叶皮质,采用荧光实时定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)技术检测3组小鼠前额叶皮质SIRT 1和ADAM 10 mRNA表达水平,采用免疫蛋白印迹(Western blot)技术检测3组小鼠前额叶皮质SIRT1、RARβ及ADAM10蛋白表达及Tau蛋白磷酸化位点Ser396位点[p-tau(S396)]磷酸化水平。结果9月龄AD组和AD+Res组小鼠小鼠较本组6月龄时找到水中平台的时间延长(P<0.01),9月龄AD组小鼠较同月龄BC组小鼠找到平台的时间延长(P<0.01);AD组小鼠前额叶皮质SIRT 1和ADAM 10 mRNA表达水平较BC组小鼠下降(P<0.01),AD+Res组小鼠前额叶皮质ADAM 10 mRNA表达水平较AD组升高(P<0.01);AD组小鼠前额叶皮质SIRT1、RARβ、ADAM10蛋白表达水平较BC组降低(P<0.01),AD+Res组小鼠前额叶皮质SIRT1、ADAM10表达水平较AD组升高(P<0.05);AD组小鼠前额叶皮质p-tau(S396)磷酸化水平较BC组升高(P<0.001),AD+Res组小鼠前额叶皮质p-tau(S396)磷酸化水平较AD组降低(P<0.01)。结论Res可改善AD小鼠的认知功能,其机制可能与AD小鼠前额叶SIRT1、RARβ及ADAM10表达上调和Tau蛋白磷酸化水平降低有关。