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PKCε信号通路介导的葛根素抗心肌细胞缺氧/复氧损伤作用 被引量:12
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作者 汤蕾 胥甜甜 +4 位作者 易小清 刘瑛 罗喻超 尹东 何明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期77-81,共5页
目的探讨葛根素(puerarin,Pue)抗心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤保护作用与PKCε蛋白表达的关系。方法培养新生SD大鼠原代心肌细胞,分为正常对照(Con)组、A/R组、葛根素+A/R(Pue+A/R)组、葛根素+抑制剂+A/R(Pue+εV1-2+A/R)组、抑制剂+A/R(... 目的探讨葛根素(puerarin,Pue)抗心肌细胞缺氧/复氧(A/R)损伤保护作用与PKCε蛋白表达的关系。方法培养新生SD大鼠原代心肌细胞,分为正常对照(Con)组、A/R组、葛根素+A/R(Pue+A/R)组、葛根素+抑制剂+A/R(Pue+εV1-2+A/R)组、抑制剂+A/R(εV1-2+A/R)组。Western blot测定PKCε蛋白表达水平,MTT法检测细胞存活率,比色法测定培养液肌酸磷酸酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性、细胞内丙二醛(MDA)的含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,流式细胞仪测定线粒体膜电位和细胞凋亡。结果葛根素预处理24h后,心肌细胞PKCε表达呈剂量依赖性上调(P<0.01);培养液CPK、LDH活性降低,细胞内SOD、GSH-Px活性升高,MDA含量减少,细胞存活率升高,细胞凋亡减少(P<0.01);PKCε抑制剂εV1-2则可明显消弱葛根素的上述心肌保护作用。结论葛根素的抗心肌缺血/再灌注损伤保护作用涉及PKCε信号通路,至少部分依赖于其对PKCε表达水平的上调。 展开更多
关键词 葛根素 PKCe 缺氧 复氧 心肌保护 凋亡 线粒体 膜电位
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右美托咪定对抗化学性低氧引起的PC12细胞损伤 被引量:14
2
作者 莫利求 兰爱平 +7 位作者 林琳 周舸 张莉莉 杨春涛 王秀玉 杨战利 陈培熹 冯鉴强 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1288-1292,共5页
目的探讨α2肾上腺素受体激动剂右美托咪定能否保护PC12细胞对抗化学性低氧引起的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞以建立化学性缺氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Ho-chest 33258核染色法观察细胞... 目的探讨α2肾上腺素受体激动剂右美托咪定能否保护PC12细胞对抗化学性低氧引起的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理PC12细胞以建立化学性缺氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Ho-chest 33258核染色法观察细胞凋亡的形态学和数量的改变;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜检测细胞内的活性氧(ROS)水平;罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜检测线粒体膜电位(MMP)。结果在浓度为100~600μmol.L-1的范围内,右美托咪定浓度依赖性地对抗CoCl2引起的细胞毒性,使细胞存活率明显增加。400μmol.L-1右美托咪定能抑制CoCl2的致凋亡作用,使凋亡细胞数量减少。右美托咪定也能抑制CoCl2引起的ROS过度生成及MMP降低的作用。结论右美托咪定能保护PC12细胞对抗CoCl2诱导的损伤,此作用可能与其抑制ROS过度生成及保护MMP有关。 展开更多
关键词 右美托咪定 氯化钴 PC12细胞 活性氧 线粒体膜电位
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依达拉奉保护H9c2心肌细胞对抗化学性低氧引起的损伤 被引量:6
3
作者 张蔼玲 兰爱平 +5 位作者 郑东诞 胡芬 郭润民 沈宁 冯鉴强 廖新学 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期304-308,共5页
目的探讨新型的自由基清除剂依达拉奉(EDA)能否保护H9c2心肌细胞对抗化学性低氧引起的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理H9c2心肌细胞以建立化学性低氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色法... 目的探讨新型的自由基清除剂依达拉奉(EDA)能否保护H9c2心肌细胞对抗化学性低氧引起的损伤。方法应用化学性低氧模拟剂氯化钴(CoCl2)处理H9c2心肌细胞以建立化学性低氧损伤模型。应用CCK-8比色法检测细胞存活率;Hoechst 33258核染色法检测凋亡细胞的形态学及数量变化;双氯荧光素(DCFH-DA)染色荧光显微镜照像测定细胞内活性氧(ROS)水平;JC-1染色荧光显微镜照像检测线粒体膜电位(MMP)。结果应用100~1000μmol/L CoCl2处理H9c2心肌细胞24 h,呈浓度依赖性地降低细胞存活率;在12~36 h范围内,800μmol/L CoCl2呈时间依赖性地抑制细胞存活率;10~40μmol/L EDA或500~2000μmol/L N-乙酰半胱氨酸(NAC,为ROS的清除剂)预处理H9c2心肌细胞1 h呈浓度依赖性地对抗CoCl2对细胞存活率的抑制作用;在800μmol/LCoCl2处理H9c2心肌细胞前1 h,应用40μmol/L EDA预处理细胞不仅可明显的抑制CoCl2诱导的细胞内ROS生成增多,还能抑制CoCl2的致细胞凋亡作用及MMP的损伤作用。结论 EDA能保护心肌细胞对抗CoCl2诱导的损伤作用,此心肌细胞保护作用可能与其抗氧化作用及保护MMP有关。 展开更多
关键词 依达拉奉 H9C2心肌细胞 化学性低氧 活性氧 线粒体膜电位
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薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用 被引量:14
4
作者 高卫真 王玮 +8 位作者 范晓静 康毅 赵云茜 于雷 张真 吴艳娜 刘艳霞 娄建石 高文远 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2008年第2期72-74,共3页
目的研究薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用体外培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤模型,以薯蓣皂苷进行干预。心肌细胞随机分为5组:空白对照组(C组);缺氧/复氧组(A/R组);薯蓣皂苷(Dioscin... 目的研究薯蓣皂苷对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法采用体外培养乳鼠心肌细胞,建立缺氧/复氧损伤模型,以薯蓣皂苷进行干预。心肌细胞随机分为5组:空白对照组(C组);缺氧/复氧组(A/R组);薯蓣皂苷(Dioscin)低、中、高剂量干预组(Dioscin+A/R组)。分别观察各组心肌细胞搏动频率;MTT法测细胞存活率;用Rh123荧光探针标记线粒体,检测荧光强度以反映线粒体膜电位(△Ψm)变化;Fluo-3负载心肌细胞,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞内钙离子浓度变化。结果薯蓣皂苷干预组心肌细胞搏动频率、细胞存活率、△Ψm与A/R组比较明显升高;细胞内平均钙离子荧光强度显著低于A/R组。结论从细胞水平初步证实薯蓣皂苷预处理心肌细胞对A/R损伤有一定保护作用,保护机制可能涉及对线粒体膜保护和防止细胞内钙超载等。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷 缺氧/复氧损伤 心肌细胞 线粒体膜电位 钙超载
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三七皂苷Rg1对肝纤维化大鼠线粒体质子跨膜转运的作用机制 被引量:2
5
作者 李剑瑜 刘鹏年 +6 位作者 张霞 穆启梅 高飞 甄敬辉 柳伟 石娜 武凡 《环球中医药》 CAS 2015年第5期523-526,共4页
目的探讨在三七皂苷(panax notoginseng saponins,Pn S)Rg1干预下,肝纤维化大鼠线粒体质子跨膜转运的变化和肝线粒体膜的流动性的变化,为开发三七单体Rg1在临床抗纤维化的应用提供详尽的试验依据和理论基础。方法 72只Wistar大鼠随机分... 目的探讨在三七皂苷(panax notoginseng saponins,Pn S)Rg1干预下,肝纤维化大鼠线粒体质子跨膜转运的变化和肝线粒体膜的流动性的变化,为开发三七单体Rg1在临床抗纤维化的应用提供详尽的试验依据和理论基础。方法 72只Wistar大鼠随机分为对照组、四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)肝纤维化大鼠模型组、Pn S Rg1组各24只。除对照组外,其余2组用5%CCl4橄榄油按5 m L/kg灌胃制作肝纤维化大鼠模型。Pn S Rg1组在每次CCl4灌胃同时腹腔注射Pn S Rg1(5 mg/kg)用稳态荧光探针标记技术动态观察肝纤维化大鼠线粒体质子跨膜转运的变化,用荧光偏振法测定肝线粒体膜的流动性和膜的微黏度的改变。结果 (1)与对照组相比,肝纤维化模型组大鼠用单因素多组间方差分析,发现模型组大鼠质子跨膜转运中,肝线粒体质子跨膜转运能力显著下降(P<0.01)。Pn S Rg1组与对照组相比质子跨膜转运的变化没有显著性意义(P>0.05),与模型组相比,有显著性差异(P<0.01)。(2)肝纤维化模型组大鼠用单因素多组间方差分析,与对照组相比,证实模型组大鼠线粒体膜的流动性显著下降(P<0.01),增加膜的微黏度(P<0.01);而Rg1组与模型组相比增加线粒体膜的流动性(P<0.01),降低膜的微黏度(P<0.01)。结论肝纤维化大鼠肝线粒体质子跨膜转运能力下降和线粒体膜的流动性显著下降是导致肝纤维化的重要原因之一。Pn S Rg1通过增加肝线粒体质子跨膜转运能力和线粒体膜的流动性而防治肝纤维化的发生发展的。 展开更多
关键词 肝纤维化 线粒体 质子跨膜转运 膜的流动性 三七皂苷RG1
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参麦注射液与氨茶碱合用对家兔膈肌功能的影响 被引量:2
6
作者 关宿东 刘桂兰 葛敏 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2000年第3期146-148,共3页
目的:观察参麦注射液与氨茶碱联合用药对兔跨膈压及膈肌电活动影响.提高隔肌疲劳的治疗效果。方法:双侧膈神经刺激40min,复制膈肌疲劳模型(Diaphragmaticfatigue,DiF)。动物随机分3组:①参麦组(... 目的:观察参麦注射液与氨茶碱联合用药对兔跨膈压及膈肌电活动影响.提高隔肌疲劳的治疗效果。方法:双侧膈神经刺激40min,复制膈肌疲劳模型(Diaphragmaticfatigue,DiF)。动物随机分3组:①参麦组(2mL/kg,N=7);②氨茶碱组(20mg/kg,N=7);③合用组(参麦注射液2mL/kg+氨茶碱20mg/kg,N=7)。于药前及药后 30、60、120 min记录跨膈压(Transdiaphragmatic pressure,Pdi);记录膈肌肌电图(Diaphragmatic electromyogrm,EMGdi)输入计算机作快速富利叶分析(FFT),算出高/低频比值(High/Low frequency ratio,H/L)、中心频率(CentraL frequency,Fc);同时记录膈肌诱发电位(Diaphragm e-voked potential,DEP),打印出幅度和潜伏期,数据经方差分析、q检验。结果:参麦注射液、氨茶碱单用均可提高Pdi、H/L、Fc及DEP幅度(与DiF比,P<0.05);两药合用,能提高 Pdi、Fc,且缩短 DEP潜伏期(合用与单用比,P<0.05)? 展开更多
关键词 参麦注射流 药理学 氨茶碱 肌电描记术
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疏肝健脾化痰活血方对非酒精性脂肪性肝病大鼠体外细胞模型线粒体膜流动性及膜电位水平的影响 被引量:3
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作者 曾兰 盛国光 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2012年第6期360-362,共3页
目的:研究疏肝健脾、化痰活血方对幼鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)体外模型肝细胞线粒体膜流动性、膜电位水平的干预作用。方法:软脂酸诱导幼鼠原代培养肝细胞复制NAFLD细胞模型,并用疏肝健脾、化痰活血方药含药血清干预,荧光比色法检测... 目的:研究疏肝健脾、化痰活血方对幼鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)体外模型肝细胞线粒体膜流动性、膜电位水平的干预作用。方法:软脂酸诱导幼鼠原代培养肝细胞复制NAFLD细胞模型,并用疏肝健脾、化痰活血方药含药血清干预,荧光比色法检测肝细胞线粒体膜流动性和膜电位水平。结果:中药能明显提高NAFLD体外模型细胞线粒体膜流动性、膜电位水平。结论:疏肝健脾、化痰活血方能有效改善肝细胞线粒体膜流动性和膜电位水平,防护体外NAFLD细胞模型线粒体损伤。 展开更多
关键词 疏肝健脾 化痰活血 线粒体 非酒精性脂肪性肝病 膜流动性 膜电位水平 幼鼠
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Salinomycin对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/DOX的增殖抑制作用及机制
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作者 刘浩 卢敏莹 贺智敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期549-554,共6页
目的本研究旨在探讨Salinomycin对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/DOX增殖和凋亡的影响及可能作用机制。方法 MTS实验检测Salinomycin对MCF-7/DOX细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI染色检测Salinomycin对MCF-7/DOX耐药细胞凋亡的影响;DCFH... 目的本研究旨在探讨Salinomycin对乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/DOX增殖和凋亡的影响及可能作用机制。方法 MTS实验检测Salinomycin对MCF-7/DOX细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI染色检测Salinomycin对MCF-7/DOX耐药细胞凋亡的影响;DCFH-DA染色检测Salinomycin对MCF-7/DOX耐药细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生的影响;JC-1法测定细胞线粒体膜电位;Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白BAX、BCL-2、caspase-3和caspase-9的表达变化。结果 Salinomycin能明显抑制MCF-7/DOX耐药细胞增殖,且具有浓度依赖性;流式分析发现Salinomycin能够诱导MCF-7/DOX细胞凋亡,增加细胞内ROS水平,降低细胞线粒体膜电位;与对照组相比较,Salinomycin处理明显抑制BCL-2的表达,上调BAX、cleaved caspase-3和cleaved caspase-9的蛋白表达;抗氧化剂N-acetylcysteine(NAC)则逆转上述作用。结论 Salinomycin能够诱导MCF-7/DOX细胞凋亡,其机制可能与Salinomycin诱导ROS的产生,激活线粒体凋亡途径有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 SALINOMYCIN 阿霉素耐药 细胞凋亡 活性氧 线粒体膜电位
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穿心莲内酯对急性淋巴细胞白血病细胞的生长抑制及凋亡诱导作用 被引量:4
9
作者 李晓文 周越菡 +4 位作者 邓健志 罗珍华 江海键 张漫丽 覃楚玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期977-984,共8页
目的:研究穿心莲内酯(andrographolide,AND)对急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞生长和凋亡的影响。方法:人ALL细胞株CEM-C1经AND处理12 h、24 h和48 h,应用CCK-8法检测AND对细胞活力的影响;应用Wright-Giemsa... 目的:研究穿心莲内酯(andrographolide,AND)对急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞生长和凋亡的影响。方法:人ALL细胞株CEM-C1经AND处理12 h、24 h和48 h,应用CCK-8法检测AND对细胞活力的影响;应用Wright-Giemsa染色法观察AND处理24 h对CEM-C1细胞形态及数量的影响;应用流式细胞术+annexin V-FITC/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染色法分析AND作用24 h对CEM-C1细胞凋亡的作用;采用流式细胞术+PI染色法分析AND作用24 h对CEM-C1细胞周期分布的作用;用Western blot法检测AND对CEM-C1细胞凋亡相关蛋白水平的影响;应用JC-1线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)检测试剂盒检测AND作用24 h对CEM-C1细胞MMP的影响。最后将CEM-C1细胞接种于BALB/c-nu雌性裸鼠右胁腹侧建立裸鼠ALL移植瘤模型,通过检测肿瘤体积及重量观察AND的体内抗ALL作用,并应用免疫组化法检测裸鼠肿瘤组织凋亡蛋白cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:CCK-8实验结果表明,AND对CEM-C1细胞活力的抑制作用呈时间及剂量依赖性。Wright-Giemsa染色结果显示,应用AND后CEM-C1细胞缩小、凝聚,细胞染色加深,细胞质呈均质红染并且细胞数减少。流式细胞术检测结果表明,AND处理细胞24 h后,随着AND浓度的增加,凋亡细胞数量增多,且细胞周期被阻滞在G2期,细胞生长被抑制。Western blot结果显示,AND上调活化凋亡蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-7及促凋亡蛋白Bax的水平,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达;且cleaved caspase-3/caspase-3、cleaved caspase-7/caspase-7和Bax/Bcl-2的比值随AND浓度升高而增大。JC-1染色法结果表明,CEM-C1细胞的MMP随AND剂量增大而降低。体内实验结果显示,AND明显抑制荷瘤鼠的肿瘤生长,并上调肿瘤组织cleaved caspase-3的水平。结论:穿心莲内酯在体内外均抑制ALL细胞的生长并诱导其发生凋亡。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 穿心莲内酯 细胞生长 细胞凋亡 线粒体膜电位
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阿的平联合硫利达嗪对慢性粒细胞白血病细胞的诱导凋亡作用
10
作者 涂瑶瑶 徐含章 +1 位作者 雷虎 吴英理 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1016-1021,共6页
目的探讨阿的平(QC)联合硫利达嗪(THZ)对慢性粒细胞白血病(CML)细胞(K562)的影响。方法以不同浓度QC(0、1、2、3和4μmol/L)和THZ(0、2、4、8和16μmol/L)处理K562细胞不同时间(0、24和48 h)后,锥虫蓝排斥实验检测两药单加对K562细胞活... 目的探讨阿的平(QC)联合硫利达嗪(THZ)对慢性粒细胞白血病(CML)细胞(K562)的影响。方法以不同浓度QC(0、1、2、3和4μmol/L)和THZ(0、2、4、8和16μmol/L)处理K562细胞不同时间(0、24和48 h)后,锥虫蓝排斥实验检测两药单加对K562细胞活性的影响。以不同浓度的QC(2、3和4μmol/L)和THZ(2、4和8μmol/L)分别单加及合加处理K562细胞24 h,锥虫蓝排斥实验检测K562细胞活力,利用CompuSyn软件计算两药合加的协同指数。3μmol/L的QC与4μmol/L的THZ分别单加及合加处理K562细胞,用或不用caspase不可逆抑制剂Z-VAD-FMK(20μmol/L)处理,RH-123/PI双染后流式细胞术检测线粒体跨膜电位的变化,Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达。结果锥虫蓝排斥实验结果显示:QC与THZ单加,低浓度时对K562细胞的抑制效应并不明显;两药合加对K562细胞有良好的协同杀伤效应。Western blotting检测结果显示:K562经两药合加处理后出现PARP-1的剪切及凋亡相关蛋白Bcl-2、Mcl-1表达的减少,且这种效应不能被Z-VAD-FMK逆转。流式细胞术检测结果表明:相对于两药单加,3μmol/L的QC与4μmol/L的THZ合加处理24 h后K562细胞线粒体膜电位明显降低,并且这种效应不能被Z-VADFMK逆转。结论 QC与THZ两药联合能协同诱导K562细胞凋亡,这种效应为非caspase依赖,线粒体跨膜电位下降可能参与了这一过程。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 阿的平 硫利达嗪 协同作用 线粒体跨膜电位
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Effect of 935-MHz Phone-simulating Electromagnetic Radiation on Endometrial Glandular Cells during Mouse Embryo Implantation
11
作者 刘文惠 郑新民 +4 位作者 屈在卿 张铭 周春 马玲 张元珍 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2012年第5期755-759,共5页
This study examined the impact of 935MHz phone-simulating electromagnetic radiation on embryo implantation of pregnant mice.Each 7-week-old Kunming (KM) female white mouse was set up with a KM male mouse in a single c... This study examined the impact of 935MHz phone-simulating electromagnetic radiation on embryo implantation of pregnant mice.Each 7-week-old Kunming (KM) female white mouse was set up with a KM male mouse in a single cage for mating overnight after induction of ovulation.In the first three days of pregnancy,the pregnant mice was exposed to electromagnetic radiation at low-intensity (150 μW/cm2,ranging from 130 to 200 μW/cm2,for 2-or 4-h exposure every day),mid-intensity (570 μW/cm2,ranging from 400 to 700 μW/cm2,for 2-or 4-h exposure every day) or high-intensity (1400 μW/cm2,ranging from 1200 to 1500 μW/cm2,for 2-or 4-h exposure every day),respectively.On the day 4 after gestation (known as the window of murine embryo implantation),the endometrium was collected and the suspension of endometrial glandular cells was made.Laser scanning microscopy was employed to detect the mitochondrial membrane potential and intracellular calcium ion concentration.In high-intensity,2-and 4-h groups,mitochondrial membrane potential of endometrial glandular cells was significantly lower than that in the normal control group (P<0.05).The calcium ion concentration was increased in low-intensity 2-h group but decreased in high-intensity 4-h group as compared with the normal control group (P<0.05).However,no significant difference was found in mitochondrial membrane potential of endometrial glandular cells between low-or mid-intensity groups and the normal control group,indicating stronger intensity of the electromagnetic radiation and longer length of the radiation are required to inflict a remarkable functional and structural damage to mitochondrial membrane.Our data demonstrated that electromagnetic radiation with a 935-MHz phone for 4 h conspicuously decreased mitochondrial membrane potential and lowered the calcium ion concentration of endometrial glandular cells.It is suggested that high-intensity electromagnetic radiation is very likely to induce the death of embryonic cells and decrease the chance of their implantation,thereby posing a high risk to pregnancy. 展开更多
关键词 electromagnetic radiation pregnant mouse embryo implantation mitochondrial mem-brane potential calcium ion concentration
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中介素预处理对NRK-52E细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制
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作者 冯殿卿 薛福平 +1 位作者 张媛媛 王艳红 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第10期1308-1313,共6页
目的 探讨中介素(intermedin,IMD)在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)条件下对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的保护作用及其机制。方法 体外培养NRK-52E细胞,随机分为空白对照(NC)组、氯化钴(CoCl2)组和IMD+CoCl2组;采用1.5... 目的 探讨中介素(intermedin,IMD)在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)条件下对大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK-52E)损伤的保护作用及其机制。方法 体外培养NRK-52E细胞,随机分为空白对照(NC)组、氯化钴(CoCl2)组和IMD+CoCl2组;采用1.5×10^(-4) mol/L CoCl2处理24 h建立NRK-52E细胞H/R模型,IMD+CoCl2组采用IMD 20 ng/mL预处理4 h,保持IMD浓度(20 ng/mL)用1.5×10^(-4) mol/L CoCl2处理24 h。流式细胞术检测细胞凋亡率,DCFH-DA探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量,JC-1探针法检测线粒体膜电位(MMP),real time-PCR法检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Caspase-3,以及氧化应激蛋白血红素加氧酶-1(HO-1)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA表达水平,Western blot法检测Bcl-2、Caspase-3、HO-1和eNOS蛋白表达。结果 与NC组相比,CoCl2组细胞凋亡率增加(P<0.01);ROS生成增加,MMP下降,同时Caspase-3表达增加(P<0.01),Bcl-2表达降低(P<0.01);与CoCl2组相比,IMD+CoCl2组细胞凋亡率显著下降(P<0.01),ROS生成显著减少而MMP显著增加,此外Caspase-3 mRNA及蛋白表达均下调(P<0.01),Bcl-2及eNOS、HO-1表达显著增加(P<0.05)。结论IMD能够改善NRK-52E细胞H/R诱导的损伤,其可能的机制是通过抑制H/R诱导的细胞凋亡和氧化应激,上调Bcl-2及eNOS、HO-1表达。 展开更多
关键词 中介素 缺氧/复氧 NRK-52E细胞 细胞凋亡 氧化应激 线粒体膜电位
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虾青素对体外氧化应激诱导人外周血内皮祖细胞凋亡的影响及机制 被引量:8
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作者 龚志刚 姜其钧 丁世芳 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期349-353,共5页
目的:探讨虾青素对体外氧化应激诱导人外周血内皮祖细胞凋亡的影响及机制。方法:体外培养人外周血单核细胞源的内皮祖细胞,分为对照组、模型组(叔丁基过氧化氢100μmol/L)、虾青素+叔丁基过氧化氢组(虾青素0.1、1.0、10.0nmol/L预处理24... 目的:探讨虾青素对体外氧化应激诱导人外周血内皮祖细胞凋亡的影响及机制。方法:体外培养人外周血单核细胞源的内皮祖细胞,分为对照组、模型组(叔丁基过氧化氢100μmol/L)、虾青素+叔丁基过氧化氢组(虾青素0.1、1.0、10.0nmol/L预处理24h后,再加终浓度为100μmol/L的叔丁基过氧化氢溶液继续培养6h)。MTT法检测细胞存活率;DAPI染细胞检测细胞凋亡率;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)活性;JC-1法测定线粒体膜电位。结果:与对照组比较,叔丁基过氧化氢(100μmol/L)能明显造成内皮祖细胞的凋亡(P<0.05)。虾青素可降低叔丁基过氧化氢引起的内皮祖细胞凋亡,表现为细胞凋亡率减少(P<0.05),线粒体膜电位增加,Caspase-3表达减弱。结论:ASX通过保护线粒体膜电位,下调Caspase-3活性,最终起到抗氧化应激诱导的内皮祖细胞凋亡。 展开更多
关键词 氧化应激 内皮祖细胞 虾青素 细胞凋亡 线粒体膜电位
原文传递
Tyroserleutide tripeptide affects calcium homeostasis of human hepatocarcinoma BEL-7402 cells 被引量:3
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作者 FU Zheng1, LU Rong2, LI Guoli1, ZHAO Lan1, GAO Weizhen3, CHE Xuchun1, JIAN Xu4, ZHOU Chunlei1 & YAO Zhi1 1. Department of Immunology, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China 2. Shenzhen Kangzhe Pharmaceutical Co. Ltd., Shenzhen, 518029, China +1 位作者 3. Department of Pharmacy, Tianjin Medical University, Tianjin 300070, China 4. Central Laboratory of Tianjin Medical University Hospital, Tianjin 300070, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2005年第5期523-530,共8页
This study aimed to observe the effects of tyroserleutide (tyrosyl-seryl-leucine, YSL) on the growth of human hepatocarcinoma BEL-7402 that was transplanted into nude mice, and explore its anti-tumor mechanism prelimi... This study aimed to observe the effects of tyroserleutide (tyrosyl-seryl-leucine, YSL) on the growth of human hepatocarcinoma BEL-7402 that was transplanted into nude mice, and explore its anti-tumor mechanism preliminarily. YSL, at doses of 80 μg·kg?1·d?1, 160 μg·kg?1·d?1 and 320 μg·kg?1·d?1 significantly inhibited the growth of the human hepatocarcinoma BEL-7402 tumor in nude mice, producing inhibition of 21.66%, 41.34%, and 34.78%, respectively. Ultra structure of BEL-7402 tumor in nude mice showed that YSL could induce tumor cells apoptosis and necrosis, cell organelle mitochondria and endoplasmic reticulum damage, and calcium over-load. By confocal laser scanning microscopy and flow cytometry, we found that 10 μg/mL YSL rapidly induced an increase of the concentration of cytoplasmic free calcium in BEL-7402 cells in vitro, and maintained high concentrations of cytoplasmic free calcium for 1 h. Then the calcium concentration began to decrease after 2 h, and was lower than that of the control group at 4 h and 24 h (p<0.05). YSL also decreased the mitochondrial transmembrane potential of BEL-7402 cells in vitro, but had no effect on the calcium homeostasis or mitochondrial transmembrane potential of Chang liver hepatocytes. So affecting calcium homeostasis, then inducing apoptosis and necrosis may be a mechanism by which YSL inhibits the tumor growth in animal model. 展开更多
关键词 tyroserleutide YSL HUMAN HEPATOCARCINOMA BEL-7402 cytoplasmic free calcium mitochondrial TRANSmembrane potential.
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