细胞胀亡在精液脱落细胞学的形态特征与机制的探讨

目的依据细胞凋亡在精液脱落细胞学的形态特征、机制和临床应用，作为评价睾丸生殖功能障碍的意义．方法采用精波涂片，瑞－姬染色，油镜下检出、观察，根据生精细胞凋亡与胀亡形态特征，进行鉴别和分类，确定精液脱落细胞的性质，为临床诊断提供依据。结果生精细胞可以在精液中大量出现，表现不同类型的形态特征，其变化受离子泵功能、三磷酸腺苷（ATP）的机制和分子生物学机制调控。结论细胞凋亡与胀亡的过程中，线粒体是中心环节，在男性睾丸生精障碍同样也存在缺血、缺氧和毒性因子作用，而线粒体是睾丸生精障碍的靶点，是造成睾丸损伤的中心环节。生精细胞学检测结果评估睾丸生殖功能具有明显的临床意义，应积极开展，提高诊断水平。

锰对大鼠脑线粒体能量代谢的影响

目的通过线粒体孵育液染锰并用NAC干预研究锰对大鼠线粒体能量代谢的影响及NAC的防护效果。方法Wistar大鼠12只，麻醉后断头取脑，梯度离心得线粒体液。将所得线粒体液分为6组，第1组为对照组；第2。5组为不同剂量染锰组，分别加入5、50、500、1000μmol／LMnCl2；第6组为NAC预处理组，线粒体液先用500μmol／LNAC预处理1h后加500μmol／LMnCl2。各组于培养箱内30℃孵育2h后测顺乌头酸酶、线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位，每个指标重复测量6次。结果与对照组相比，500、1000μmol／L染锰组顺乌头酸酶活性显著降低（P〈0．05），50、500、1000μmol／L染锰组线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位显著降低（P〈0．05），且在一定范围内随着MnCl2剂量增加，顺乌头酸酶、线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位有降低趋势。与单纯染锰组相比，NAC预处理组顺乌头酸酶、线粒体复合体Ⅰ的活性和线粒体膜电位显著升高（P〈0．05）。结论锰可以剂量依赖性地诱导大鼠脑线粒体能量代谢降低；NAC预处理能预防锰所致大鼠脑线粒体能量代谢降低。

红景天苷对缺氧缺糖损伤的神经细胞线粒体膜电位和凋亡的影响

目的:观察红景天苷对神经细胞系SH-SY5Y细胞缺氧/缺糖损伤时线粒体膜电位和凋亡的影响。方法:四唑盐比色实验(MTT)检测线粒体活性,流式细胞术检测细胞凋亡百分率和线粒体膜电位,荧光显微镜观察细胞形态学变化和坏死百分率。结果:缺氧/缺糖损伤2h可诱导SH-SY5Y细胞凋亡和坏死,分别为18.59%(P<0.01)和4.94%(P<0.01),形态学观察也发现SH-SY5Y细胞的染色质凝聚,核碎裂,凋亡小体产生,线粒体膜电位和活性分别降低29.17%(P<0.01),38.80%(P<0.01),随着缺氧/缺糖时间的延长,细胞凋亡的发生也越来越多,坏死的细胞也增多,线粒体膜电位和活性进一步下降;红景天苷能显著降低SH-SY5Y细胞凋亡及坏死的百分率,提高线粒体膜电位和活性,其作用随剂量增加而作用增加。结论:红景天苷可抑制缺氧/缺糖损伤所致的线粒体膜电位和活性的降低,从而具有稳定线粒体膜电位的作用,抑制神经细胞凋亡的发生。

高效抗逆转录病毒疗法(HAART)相关线粒体毒性的研究进展

高效抗逆转录病毒疗法(HAART)是目前临床上最有效的治疗和控制艾滋病方法,HAART显著降低了艾滋病患者的死亡率,但部分患者可出现严重的毒副作用,最主要的毒副作用与线粒体毒性相关,本文就HAART导致线粒体损伤的相关机制进行综述。

糖尿病大鼠逼尿肌线粒体琥珀酸脱氢酶及其超微结构的改变

目的探讨能量代谢与糖尿病膀胱逼尿肌线粒体损伤的关系。方法建立2型糖尿病(T2DM)大鼠模型,在高糖高脂饮食喂养第4、12、24周取大鼠膀胱逼尿肌制备匀浆测定琥珀酸脱氢酶活性,并电镜观测逼尿肌线粒体的形态改变。结果T2DM组大鼠的琥珀酸脱氢酶活性在其发病早期就出现降低;随着T2DM大鼠病程的延长,逼尿肌线粒体超微结构的损伤明显加重。结论在糖尿病膀胱的发病过程中线粒体破坏所导致的逼尿肌能量代谢障碍可能是引起逼尿肌收缩功能障碍的始动因素。

持续输注异丙肾上腺素对早期脓毒症大鼠心肌线粒体的保护作用及其机制

目的探讨持续输注不同剂量异丙肾上腺素（ISO）对早期脓毒症大鼠心肌线粒体的保护作用及其机制。方法30只SD雄性大鼠按随机数字表法分为5组（每组各6只）：对照组，内毒素组和ISO低、中、高剂量组。内毒素组腹腔注射脂多糖（LPS）10mg／kg同时持续输注9g／L盐水1mL／h；ISO低、中、高剂量组腹腔注射LPS10mg／kg同时分别持续输注IS00．06、0．30和0．60μg／（kg·min）；对照组腹腔注射同时持续输注与其他组等体积的9g／L盐水。腹腔注射9g／L盐水或LPS后24h检测血清肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）、心肌线粒体氧化氮化应激水平和线粒体肿胀度，并观察心肌组织病理改变（HE染色）和线粒体形态学改变。结果与对照组比较，内毒素组CK、CK-MB、一氧化氮（NO）含量、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活力和丙二醛（MDA）含量均升高（P均〈0．05），超氧化物歧化酶（SOD）活力降低[（11．543±1．080）U／mgprot比（9．892±0．815）U／mgprot，P〈0．05]；HE染色示心肌组织呈炎症改变；线粒体超微结构异常（线粒体肿胀等）。ISO干预使CK和CK—MB水平及心肌线粒体肿胀度降低（P均〈0．05），SOD活力升高（P均〈0．05）；低剂量组NO含量、iNOS活力和MDA含量降低[（10．823±2．240）μmol／gprot比（7．917±2．203）μmol／gprot，（0．045±0．008）U／mgprot比（0．033±0．003）U／ragprot，（1．663±0．618）mmol／mgprot比（0．768±0．312）mmol／mgprot，P均〈0．05]，中、高剂量组iNOS活力和MDA含量升高（P均〈0．05）；与中剂量组相比，高剂量组肿胀度升高（1．160±0．186比1．393±0．128，P〈0．05）。结论脓毒症早期大鼠心肌和心肌线粒体受损，持续低剂量ISO输注对心肌线粒体具有保护作用，其机制可能与氧化氮化应激水平降低有关。

β-淀粉样蛋白对原代培养大鼠海马神经细胞钙稳态和线粒体线粒体通透性转运孔道的影响

目的研究β-淀粉样蛋白（β-amyloid）对原代培养的大鼠脑海马神经细胞内钙稳态和线粒体通透性转运孔（mltoehortrial permebility transitionpore，MPTP）的影响，探讨其神经毒性作用的机制。方法原代培养8d后的Wistar大鼠脑海马神经细胞，用老化的Aβ25-35，对其进行1，10和20μmol／L剂量的染毒，培养24和48h后观察海马神经细胞形态、游离钙浓度、Ca^2＋-ATP酶活性、线粒体膜电位，应用Western blot方法分析MPTP组成蛋白表达情况。结果随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长，可以观察到原代培养的海马神经细胞呈现出弥漫性肿胀、开始变形、出现空泡、胞体边缘模糊的形态变化；原代培养海马神经细胞内的游离钙离子的浓度也呈逐渐上升趋势，其中Aβ25-35 20μmol／L组在24h和48h时，细胞内钙离子浓度分别为（31．04±4．16）和（32．80±0．43），均显著高于对照组（20．95±4．04）和（22．23±0．49）（P〈0．05）；Ca2＋-ATP酶活性随着染毒剂量和染毒时间增加明显降低（P〈0．05），其中Aβ25-3520μmol／L组在24h和48h时，细胞内Ca2＋ATP酶活性为（2．14±0．01）和（1．10±0．05）U／mgprol，均显著低于对照组（5．17±0．08）和（4．57±0．06）（P〈0．05）；线粒体膜电位Aβ25-3520μmol／L组在24h和48h时，细胞内线粒体膜电位分别为（20．34±7．05）和（19．05±6．15），均显著低于对照组（38．47±0．72）和（40．07±1．26）（P〈0．05）；有明显剂量反应关系；MPTP孔道蛋白的WB结果显示蛋白表达量随着染毒剂量增加而增加。结论Aβ25-35,通过破坏细胞的钙稳态激活MPTP孔道影响线粒体功能从而发挥神经毒性作用。