CircRNA_017122调控骨髓间充质干细胞放射抗性的机制

采用实时荧光定量PCR检测经不同吸收剂量处理后小鼠骨髓间充质干细胞内circRNA_017122表达水平,利用生物学软件TargetScan和miRanda预测mmu-circRNA_017122生物学功能,荧光素酶报告基因试验检测mmu-circRNA_017122与mmu-miR-29b-2-5p之间的结合情况,并用RNA pull-down试验证实mmu-miR-29b-2-5p与p53特异性结合,检测分别转染mmu-circRNA_017122 siRNA和mmu-miR-29b-2-5p inhibitor后P53的表达水平和细胞增殖情况。结果表明:骨髓间充质干细胞内mmu-circRNA_017122的表达水平受吸收剂量影响;生物学软件预测mmu-circRNA_017122可与mmu-miR-29b-2-5p特异性结合并进一步影响P53的表达;荧光素酶报告基因试验和RNA pull-down试验验证他们彼此之间可特异性结合;转染mmu-circRNA_017122 siRNA和同时转染mmu-miR-29b-2-5p inhibitor后P53表达量均显著降低,且细胞增殖减低。当骨髓间充质干细胞受辐照时,其内mmu-circRNA_017122通过ceRNA机制影响mmu-miR-29b-2-5p对p53的表达调控,从而参与辐照损伤修复,导致骨髓间充质干细胞放射抗性。

Mmu-circRNA_016901对骨髓间充质干细胞放射敏感性的影响

目的:探索mmu-circ RNA016901对调控骨髓间充质干细胞放射损伤的作用及其机制,方法:通过用不同剂量X射线辐照骨髓间充质干细胞,检测不同剂量处理后骨髓间充质干细胞内mmu-circ RNA016901表达水平,利用荧光素酶报告基因检测验证mi RNA1249-5p为mmu-circ RNA016901的靶点,免疫共沉淀实验验证mi RNA1249-5p为TGF-β3的靶点,调节mmu-circRNA01690表达水平后,检测转化生长因子-β3(transforming growth factor-β, TGF-β3)的表达和细胞增殖情况。结果:当辐照剂量<6 Gy时,不同辐照剂量处理的骨髓间充质干细胞,mmu-circ RNA016901表达差异显著,具有统计学意义(P<0.05),荧光素酶报告基因检测和免疫共沉淀实验证实mmu-circ RNA016901可特异性结合mi RNA1249-5p,过表达mmu-circ RNA016901可以负性调节mi RNA1249-5p,可导致TGF-β3表达明显升高,且促进细胞增殖。结论:mmu-circRNA016901通过miRNA1249-5p影响TGF-β3的表达,从而参与调节骨髓间充质干细胞放射损伤机制。