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miR-149-3p靶向调节Akt1介导牙周膜干细胞成骨分化的作用机制研究
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作者 袁琴 张玲玲 +2 位作者 戴丽 章茜 卫峥 《联勤军事医学》 CAS 2024年第1期1-5,共5页
目的探讨miR-149-3p靶向调节蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)介导牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化的作用及机制。方法选取2022-01月在作者医院口腔科就诊的18~25岁患者因正畸而拔除的前磨牙或第三磨牙... 目的探讨miR-149-3p靶向调节蛋白激酶B(protein kinase B,Akt1)介导牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cells,PDLSCs)成骨分化的作用及机制。方法选取2022-01月在作者医院口腔科就诊的18~25岁患者因正畸而拔除的前磨牙或第三磨牙,分离牙周膜组织,提取人PDLSCs。免疫组织化学染色法检测角蛋白(pan-cytokeratin)和波形蛋白(vimentin)鉴定人PDLSCs。将人PDLSCs分为对照组、空载组、miR-149-3p inhibitor组和miR-149-3p mimic组。对照组人PDLSCs不进行处理,空载组、miR-149-3p inhibitor组和miR-149-3p mimic组按Lipofectamine 3000说明书方法分别将空载质粒和miR-149-3p inhibitor、miR-149-3p mimic转染到人PDLSCs。实时荧光逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞内miR-149-3p、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)、Akt1 mRNA表达;Western blot检测细胞内ALP、Runx2、Akt1蛋白表达。采用Fluo-3 AM探针检测细胞内钙离子。结果免疫组织化学结果显示,人PDLSCs二氨基联苯胺(diaminobenzidine,DAB)染色vimentin呈阳性,pan-cytokeratin呈阴性,提示PDLSCs提取成功。与对照组和空载组相比,miR-149-3p inhibitor组miR-149-3p表达显著降低,ALP、Runx2、Akt1 mRNA和蛋白表达、细胞内钙离子荧光强度均显著升高(P均<0.05);miR-149-3p mimic组miR-149-3p表达显著升高,ALP、Runx2、Akt1 mRNA和蛋白表达、细胞内钙离子荧光强度均显著降低(P均<0.05)。与miR-149-3p inhibitor组相比,miR-149-3p mimic组miR-149-3p表达显著升高,ALP、Runx2、Akt1 mRNA和蛋白表达、细胞内钙离子荧光强度均显著降低(P均<0.05)。对照组与空载组各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达miR-149-3p可靶向抑制Akt1蛋白的表达,从而抑制成骨标志物ALP和Runx2表达,降低人PDLSCs内钙离子浓度,不利于人PDLSCs成骨分化。 展开更多
关键词 miR-149-3p 蛋白激酶B 牙周膜干细胞 成骨分化
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miR-149-3p通过调控NIS促进甲状腺乳头状癌增殖和迁移
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作者 谢文焌 李华水 林强 《福建医药杂志》 CAS 2024年第4期94-99,F0004,共7页
目的探讨miR-149通过调控钠/碘共同转运体(Sodium/Iodide Sympoter,NIS)调控甲状腺乳头状癌(Papillary Thyroid Carcinoma,PTC)细胞增殖和迁移能力。方法对选取的GSE113629转录组数据进行数据处理,筛选其中表达差异较为明显且在PTC组织... 目的探讨miR-149通过调控钠/碘共同转运体(Sodium/Iodide Sympoter,NIS)调控甲状腺乳头状癌(Papillary Thyroid Carcinoma,PTC)细胞增殖和迁移能力。方法对选取的GSE113629转录组数据进行数据处理,筛选其中表达差异较为明显且在PTC组织中表达明显增高的MicroRNA(miRNA)作为研究分子。通过在线数据库预测目标miR-NA的下游靶基因,随后检测调控目标miRNA表达后靶基因变化情况并观察靶基因水平改变对甲状腺癌细胞生物学行为的影响。结果在GSE112629数据集中,研究发现miR-149-3p在PTC组织中高表达。通过对miR-149-3p预测靶基因进行维恩分析,我们发现NIS是miR-149-3p的重要靶基因。通过分析GEPIA和UALCAN数据库,我们发现NIS在PTC样本中明显低表达,同时发现PTC的淋巴结转移率越高、分期级别越高则NIS表达量越低,并且NIS表达量与患者无病生存期(Disease Free Survival,DFS)呈正相关。在多种PTC细胞系中miR-149-3p表达水平均高于正常甲状腺细胞系,抑制PTC细胞内miR-149-3p表达后细胞内NIS表达水平明显升高。当敲低miR-149-3p时,细胞的增殖活性和迁移能力受到明显抑制。结论PTC中miR-149-3p高表达,并且miR-149-3p能够通过抑制NIS表达明显增强PTC的增殖活性和迁移能力。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 miR-149-3p NIS 增殖活性 迁移
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子宫内膜癌组织miR-141-3p、miR-149-3p表达与增殖基因、临床病理特征和预后的关系
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作者 王江 李艳 +1 位作者 贺泓霓 伍燕 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第3期289-294,300,共7页
目的探讨子宫内膜癌组织中miR-141-3p、miR-149-3p表达及与增殖基因、临床病理特征和预后的关系。方法选取2017年2月至2019年2月该院诊治的98例子宫内膜癌患者作为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测子宫内膜癌患者癌组织中miR-141-3p、... 目的探讨子宫内膜癌组织中miR-141-3p、miR-149-3p表达及与增殖基因、临床病理特征和预后的关系。方法选取2017年2月至2019年2月该院诊治的98例子宫内膜癌患者作为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测子宫内膜癌患者癌组织中miR-141-3p、miR-149-3p及增殖基因[增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期素D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)]mRNA相对表达水平。Pearson相关分析子宫内膜癌患者癌组织中miR-141-3p、miR-149-3p表达与PCNA、cyclin D1、CDK4 mRNA表达的相关性。不同临床病理特征的子宫内膜癌患者癌组织miR-141-3p、miR-149-3p表达进行比较。Kaplan-Meier曲线分析子宫内膜癌患者癌组织miR-141-3p、miR-149-3p表达对其预后的影响。单因素及多因素Cox回归分析影响子宫内膜癌患者预后的因素。结果子宫内膜癌患者癌组织中miR-141-3p、miR-149-3p、PCNA mRNA、cyclinD1 mRNA、CDK4 mRNA相对表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌患者癌组织中miR-141-3p、miR-149-3p表达与PCNA mRNA、cyclinD1 mRNA、CDK4 mRNA表达呈正相关(均P<0.05)。国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ期、有淋巴结转移的子宫内膜癌患者癌组织miR-141-3p、miR-149-3p相对表达水平分别高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移的子宫内膜癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-141-3p高表达组3年总体生存率显著低于miR-141-3p低表达组,差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=7.043,P=0.008)。miR-149-3p高表达组患者3年总体生存率显著低于miR-149-3p低表达组,差异有统计学意义(Log-rankχ^(2)=7.094,P=0.007)。FIGO分期Ⅲ期、有淋巴结转移、miR-141-3p升高、miR-149-3p升高是影响子宫内膜癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论检测子宫内膜癌患者癌组织中miR-141-3p、miR-149-3p表达有助于评估其患者生存预后。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 miR-141-3p miR-149-3p 临床病理特征 预后
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高危型HPV感染对宫颈阴道微生态、miR-149-3p、CYBRD1表达的影响
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作者 李琼 谢林峻 +1 位作者 庞君 陈稀文 《中国计划生育学杂志》 2024年第9期2141-2145,共5页
目的:探讨宫颈炎患者高危型HPV(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态、miR-149-3p、CYBRD1表达的影响。方法:选取2020年12月-2022年12月因宫颈炎就诊于本院的102例临床资料,根据是否感染HR-HPV分入高危HPV阴性组(n=65)与阳性组(n=37)。检测HPV... 目的:探讨宫颈炎患者高危型HPV(HR-HPV)感染对宫颈阴道微生态、miR-149-3p、CYBRD1表达的影响。方法:选取2020年12月-2022年12月因宫颈炎就诊于本院的102例临床资料,根据是否感染HR-HPV分入高危HPV阴性组(n=65)与阳性组(n=37)。检测HPV阳性患者HPV感染亚型,比较两组阴道微生态改变及阴道微生态平衡状态;采用荧光定量PCR法检测宫颈脱落细胞miR-149-3p、CYBRD1水平;Spearman法分析宫颈阴道微生态与宫颈脱落细胞miR-149-3p、CYBRD1水平的相关性;采用多因素logistic逐步回归分析HR-HPV感染影响因素。结果:HR-HPV阳性组宫颈病变严重程度高于阴性组,阳性组中HPV16亚型检出率最高(51.0%),其次为HPV18(18.6%);阳性组阴道微生态失衡、解脲脲原体阳性率、乳酸杆菌异常率均高于阴性组,miR-149-3p(0.53±0.12)低于阴性组(1.67±0.23),CYBRD1相对表达量(1.29±0.27)高于阴性组(0.46±0.10)(均P<0.05);HR-HPV感染与宫颈脱落细胞miR-149-3p表达呈负相关、与CYBRD1表达、阴道微生态失衡、解脲脲原体阳性率及乳酸杆菌异常率呈正相关(均P<0.05)。HR-HPV阳性组不良孕产史占比高于阴性组(P<0.05)。多因素分析显示:解脲脲原体阳性率、乳酸杆菌异常率、不良孕产史、阴道微生态失衡、miR-149-3p降低、CYBRD1升高是HR-HPV感染影响因素(均P<0.05)。结论:HR-HPV感染者宫颈脱落细胞中miR-149-3p低表达、CYBRD1高表达,亚型检出以HPV16、HPV18为主,且HR-HPV感染会影响患者宫颈阴道微生态失衡,增加宫颈病变严重程度。 展开更多
关键词 高危型人乳头瘤病毒 miR-149-3p 人细胞色素b还原酶1 宫颈阴道微生态 相关性 影响因素
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血清miR-149-3p和CXCR3水平与aSAH后迟发性脑缺血的相关性分析
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作者 付宏亮 景文记 卢俊义 《中国临床神经外科杂志》 2023年第1期11-14,共4页
目的探讨血清微小RNA-149-3p(miR-149-3p)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)与动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)后迟发性脑缺血(DCI)的相关性。方法2020年6月~2022年6月前瞻性收集aSAH共175例,采用qRT-PCR法检测血清miR-149-3p,采用酶联免疫吸附... 目的探讨血清微小RNA-149-3p(miR-149-3p)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)与动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)后迟发性脑缺血(DCI)的相关性。方法2020年6月~2022年6月前瞻性收集aSAH共175例,采用qRT-PCR法检测血清miR-149-3p,采用酶联免疫吸附法检测血清CXCR3水平。结果175例中,58例发生DCI,发生率为33.1%;117例未发生DCI。与未发生DCI病人比较,DCI病人血清miR-149-3p水平显著降低(P<0.05),CXCR3水平显著升高(P<0.05)。aSAH病人血清miR-149-3p水平与CXCR3水平呈明显负相关(r=-0.462,P<0.001);多因素logsitic回归分析显示,miR-149-3p水平降低、CXCR3水平增高是aSAH后发生DCI的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-149-3p水平≤0.94预测aSAH后发生DCI的曲线下面积(AUC)为0.828,敏感度为82.76%,特异度为72.65%;血清CXCR3水平≥12.81 ng/L预测aSAH后发生DCI的AUC为0.812,敏感度为79.31%,特异度为83.76%;血清miR-149-3p≤0.94联合血清CXCR3联合≥12.81 ng/L预测aSAH后发生DCI的AUC为0.906,敏感度为91.38%,特异度为83.76%。两者联合预测效果更好(P<0.05)。结论aSAH后发生DCI病人血清miR-149-3p水平降低、CXCR3水平升高,是aSAH后发生DCI独立危险因素,可能作为预测aSAH后发生DCI的指标。 展开更多
关键词 动脉瘤性蛛网膜下腔出血 微小RNA-149-3p CXC趋化因子受体3 迟发性脑缺血
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羊种布鲁杆菌介导的mmu-miR-149-3p靶基因的初步鉴定 被引量:1
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作者 焦寒伟 周志雄 +11 位作者 李文杰 顾国婧 李博文 赵宇 刘煜萱 王怡丹 王兴龙 陈吉轩 帅学宏 黄庆洲 罗艺晨 伍莉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2164-2168,2175,共6页
布鲁杆菌病是由布氏杆菌(Brucella)引起的一种急性或慢性人兽共患传染病,在我国,羊种布鲁杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)最为流行。前期研究发现,mmu-miR-149-3p的潜在靶基因有10个,分别为:Bcl6b、Nos2、Slc7a11、Olr1、Ikbke... 布鲁杆菌病是由布氏杆菌(Brucella)引起的一种急性或慢性人兽共患传染病,在我国,羊种布鲁杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)最为流行。前期研究发现,mmu-miR-149-3p的潜在靶基因有10个,分别为:Bcl6b、Nos2、Slc7a11、Olr1、Ikbke、Slc31a2、IL1rl1、Dusp16、Ifit1和Rhoc。本试验通过X-treme Gene高效转染试剂,分别将5,50和100 nmol/L,Cy3标记的mimics转染至RAW264.7细胞24 h后,流式细胞仪分析,筛选出最佳转染mimics的浓度;并将mmu-miR-149-3p mimics与mmu-miR-NC mimics,按照最佳转染浓度,转染至RAW264.7细胞24 h后,加入TRIzol裂解细胞,提取总RNA,转录组获得cDNA;利用NCBI primer设计mmu-miR-149-3p的10个潜在靶基因的特异性引物,运用qRT-PCR方法,进行验证试验。结果发现,转染Cy3标记的mimics最佳浓度为100 nmol/L,其阳性率为49.94%,平均荧光强度为18.74;与mmu-miR-NC mimics转染组相比,在mmu-miR-149-3p mimics转染组中,Olr1、Slc7a11和IL1rl1的相对表达量显著降低。结果初步表明,mmu-miR-149-3p的靶基因为Olr1、Slc7a11和IL1rl1。这为揭示mmu-miR-149-3p在B.melitensis侵染巨噬细胞过程中的功能奠定了基础,还为进一步阐释B.melitensis的感染机制以及防控布病提供了参考。 展开更多
关键词 羊种布鲁杆菌 mmu-mir-149-3p Olr1 Slc7a11 IL1rl1
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慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清miR-221-3p和miR-149-3p表达水平及其与预后的相关性分析 被引量:3
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作者 郭大伟 李维 赵雪林 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第4期72-77,共6页
目的分析慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清微小核糖核酸(micro RNA,miR)-221-3p和miR-149-3p水平变化及其与预后的相关性。方法选取2019年4月~2021年10月在江油市人民医院治疗的180例慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者作... 目的分析慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清微小核糖核酸(micro RNA,miR)-221-3p和miR-149-3p水平变化及其与预后的相关性。方法选取2019年4月~2021年10月在江油市人民医院治疗的180例慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者作为研究对象,根据一年后随访结果分为生存组(n=120)和死亡组(n=60)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测患者血清中miR-221-3p和miR-149-3p的相对表达水平,并对生存组、死亡组患者血清miR-221-3p和miR-149-3p水平进行比较。Spearman法分析miR-221-3p,miR-149-3p与急性生理和慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)的相关性。对影响慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者预后的因素进行Logistic回归分析;受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-221-3p和miR-149-3p的表达对慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者预后的预测价值。结果生存组血清miR-221-3p,miR-149-3p表达水平和APACHEⅡ评分分别为1.02±0.18,1.01±0.21和12.80±4.45分;死亡组慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清miR-221-3p,miR-149-3p表达水平和APACHEⅡ评分分别为1.54±0.36,0.66±0.16和27.45±6.05分;与生存组相比,死亡组患者血清miR-221-3p表达水平、APACHEⅡ评分均明显升高(t=12.938,18.395,P<0.01),miR-149-3p表达水平显著降低(t=11.360,P<0.01),差异均有统计学意义;慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清miR-221-3p水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.509,P<0.05),miR-149-3p水平与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.470,P<0.05);Logistic回归分析发现吸烟(OR=3.216,95%CI:1.112~9.304)、高APACHEⅡ评分(OR=1.355,95%CI:1.054~1.741)、高血清miR-221-3p水平(OR=4.264,95%CI:1.772~10.260)是影响慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者预后的危险因素(P<0.05),高血清miR-149-3p水平(OR=0.198,95%CI:0.078~0.503)是影响患者预后的保护因素(P<0.01);经ROC曲线分析,血清miR-221-3p,miR-149-3p及二者联合预测慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.889,0.860和0.959,二者联合检测优于其各自单独预测(Z=2.174,3.225,P=0.015,<0.01)。结论慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者血清miR-221-3p水平升高,miR-149-3p水平降低,与患者预后有关,能够预测慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭患者的预后。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病并发Ⅱ型呼吸衰竭 微小核糖核酸-221-3p 微小核糖核酸-149-3p
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上调长链非编码RNA DANCR通过miR-149-3p/转录因子叉头框M1信号轴促进宫颈癌的进展 被引量:2
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作者 孙一 贺蓓 +1 位作者 郭婷 贺同强 《中国性科学》 2023年第1期65-70,共6页
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA) DANCR在宫颈癌进展中的功能。方法 检测宫颈癌组织和细胞中DANCR、microRNA-149-3p(miR-149-3p)和转录因子叉头框M1(FOXM1)的表达。分别下调DANCR、miR-149-3p和Forkhead-box M1(FOXM1)的表达,采用CCK-... 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA) DANCR在宫颈癌进展中的功能。方法 检测宫颈癌组织和细胞中DANCR、microRNA-149-3p(miR-149-3p)和转录因子叉头框M1(FOXM1)的表达。分别下调DANCR、miR-149-3p和Forkhead-box M1(FOXM1)的表达,采用CCK-8法检测细胞活力,Western blot检测细胞上皮间质转化(EMT)能力,细胞迁移检测细胞迁移能力。采用双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA DANCR与miR-149-3p、miR-149-3p和FOXM1之间的结合。分析上调LncRNA DANCR通过miR-149-3p对宫颈癌发展的影响。结果 LncRNA DANCR和FOXM1在宫颈癌组织和细胞中表达上调,miR-149-3p表达降低。与siRNA NC相比,LncRNA DANCR siRNA和FOXM1 siRNA组抑制了细胞增殖、迁移与EMT,而miR-149-3p inhibitor组与inhibitor NC组相比,SiHa细胞增殖与迁移能力升高。LncRNA DANCR靶向并负调控miR-149-3p,间接上调了FOXM1的表达。上调LncRNA DANCR通过miR-149-3p促进细胞增殖、迁移与EMT。结论 上调LncRNA DANCR通过miR-149-3p/FOXM1轴促进SiHa细胞的增殖、迁移与EMT。 展开更多
关键词 长链非编码RNA DANCR miR-149-3p 宫颈癌 增殖
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miR-149-3p调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎性反应的影响 被引量:2
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作者 王惟达 蒋林 史桂霞 《河北医药》 CAS 2023年第4期513-517,共5页
目的探讨miR-149-3p通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎症反应的影响。方法体外分离大鼠髓核细胞,用IL-1β浓度为10 ng/ml建立模型组,细胞分为Con组(空白对照)、IL-1β组(IL-1β处理)、IL-1β+miR-NC组(IL-1β处理,... 目的探讨miR-149-3p通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎症反应的影响。方法体外分离大鼠髓核细胞,用IL-1β浓度为10 ng/ml建立模型组,细胞分为Con组(空白对照)、IL-1β组(IL-1β处理)、IL-1β+miR-NC组(IL-1β处理,转染miR-NC)、IL-1β+miR-149-3p组(IL-1β处理,转染miR-149-3p)、IL-1β+miR-149-3p+Anisomycin组(IL-1β和通路激活剂Anisomycin处理,转染miR-149-3p)。采用qRT-PCR检测miR-149-3p相对表达水平;MTT、流式细胞术实验检测细胞增殖和凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2、Beclin 1、LC3II/LC3I、JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白表达;ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-8表达水平。结果IL-1β组内miR-149-3p相对表达量、细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显低于Con组,凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平、p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达明显高于Con组(P<0.05)。IL-1β+miR-149-3p组内miR-149-3p相对表达量、细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显高于IL-1β+miR-NC组(P<0.05),凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平、p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达明显低于IL-1β+miR-NC组。IL-1β+miR-149-3p+Anisomycin组的p-JNK、p-p38 MAPK蛋白表达、凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8表达水平明显高于IL-1β+miR-149-3p组,细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显低于IL-1β+miR-149-3p组(P<0.05)。结论上调miR-149-3p能促进IL-1β诱导的髓核细胞增殖,抑制细胞凋亡、自噬和炎性反应,其作用机制可能与激活JNK/p38 MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 miR-149-3p JNK/p38 MApK信号通路 髓核细胞 凋亡 自噬 炎症反应
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miR-149-3p在先天性心脏病胎鼠心脏组织中的表达及其对P19细胞分化的影响
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作者 胡丹慧 罗慧臣 刘海英 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第1期45-49,共5页
目的 探讨miR-149-3p在先天性心脏病(CHD)胎鼠心脏组织中的表达及其对小鼠畸胎瘤P19细胞分化的影响。方法 建立CHD室间隔缺损胎鼠模型,于妊娠第19天,HE染色观察心脏组织病理学变化,实时荧光定量PCR(qPCR)检测心脏组织中miR-149-3p和热... 目的 探讨miR-149-3p在先天性心脏病(CHD)胎鼠心脏组织中的表达及其对小鼠畸胎瘤P19细胞分化的影响。方法 建立CHD室间隔缺损胎鼠模型,于妊娠第19天,HE染色观察心脏组织病理学变化,实时荧光定量PCR(qPCR)检测心脏组织中miR-149-3p和热休克蛋白蛋白家族B成员6(HSPB6)mRNA表达水平。二甲基亚砜(DMSO)诱导P19细胞向心肌细胞分化,并收集分化第0、5、10天的细胞,qPCR检测诱导分化过程中心肌分化标志物GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、心房利钠尿多肽(ANP)的mRNA表达水平以及HSPB6 mRNA和miR-149-3p表达水平。miR-149-3p过表达慢病毒和空载慢病毒感染P19细胞,DMSO诱导分化第10天,免疫荧光染色检测细胞中cTnI蛋白表达情况,qPCR检测心肌分化相关标志物mRNA表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-149-3p与HSPB6之间的靶向关系。结果 与正常组比较,CHD组胎鼠出现心脏室间隔缺损,心脏组织中miR-149-3p高表达,而HSPB6低表达(P<0.01)。P19细胞在向心肌细胞分化的过程中,GATA4、cTnT、ANP和HSPB6mRNA水平均逐渐上升,而miR-149-3p表达水平逐渐下降(P<0.05)。诱导分化第10天,miR-149-3p过表达可明显降低心肌细胞分化率,并下调GATA4、cTnT、ANP mRNA表达水平(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-149-3p可以靶向调控HSPB6表达。结论 miR-149-3p可能通过靶向下调HSPB6抑制P19细胞向心肌细胞分化。 展开更多
关键词 心脏缺损 先天性 微RNAS HSp20热休克蛋白质类 细胞分化 miR-149-3p p19细胞
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HOXA11-AS/miR-149-3p通路在肺鳞状细胞癌中的作用及机制研究
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作者 赵静 黄珺霞 +1 位作者 唐秀花 王红 《医学研究杂志》 2023年第2期30-36,共7页
目的探究长链非编码RNA HOXA11-AS在肺鳞状细胞癌发生过程中的确切机制。方法采用定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测HOXA11-AS、miR-149-3p和SPT16表达变化。并通过MTT法检测细胞活力。双荧光素酶报告基因检测miR-149-3p与HOXA11-AS或SP... 目的探究长链非编码RNA HOXA11-AS在肺鳞状细胞癌发生过程中的确切机制。方法采用定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测HOXA11-AS、miR-149-3p和SPT16表达变化。并通过MTT法检测细胞活力。双荧光素酶报告基因检测miR-149-3p与HOXA11-AS或SPT16的互作关系。结果在肺鳞状细胞癌组织和细胞中HOXA11-AS和SPT16的表达升高,而miR-149-3p的表达降低。miR-149-3p是HOXA11-AS的作用靶点,而SPT16是miR-149-3p的作用靶点。HOXA11-AS的敲低抑制了肺鳞状细胞癌细胞的增殖能力,而使用miR-149-3p抑制剂可拮抗HOXA11-AS敲低对肺鳞状细胞癌细胞增殖的抑制作用。此外,上调SPT16可减弱si-HOXA11-AS介导的肺鳞状细胞癌细胞的抗增殖作用。结论HOXA11-AS的敲低可通过调控miR-149-3p/SPT16轴在肺鳞状细胞癌中发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 肺鳞状细胞癌 HOXA11-AS miR-149-3p 竞争性内源RNA
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miR-149-3p 通过靶向FOXP3 抑制宫颈癌HeLa细胞的恶性生物学行为 被引量:3
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作者 王慧玲 杨君 +1 位作者 陈瑞香 蔡政 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期704-710,共7页
目的:探索miR-149-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制。方法:HeLa细胞随机分为5组:未转染(HeLa)组、mimic-scramble组、miR-149 mimic组、FOXP3过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimicscramble为miR... 目的:探索miR-149-3p对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响及其机制。方法:HeLa细胞随机分为5组:未转染(HeLa)组、mimic-scramble组、miR-149 mimic组、FOXP3过表达(pc-FOXP3)组、共转染(mimic+pc-FOXP3)组,Mimicscramble为miR-149 mimic的阴性对照随机序列。荧光素酶实验验证miR-149-3p与FOXP3的靶向结合关系。实时定量PCR(q RT-PCR)检测HeLa细胞中miR-149-3p表达及FOXP3的m RNA水平,Western blotting检测FOXP3的蛋白水平。CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭,划痕实验分析细胞迁移。结果:荧光素酶实验显示miR-149-3p可靶向结合FOXP3。与未转染组相比miR-149 mimic组miR-149-3p表达升高、FOXP3 m RNA水平下降(P<0.01),而且miR-149mimic组FOXP3蛋白水平低于未转染组(P<0.01)、pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组FOXP3蛋白水平降低(P<0.01)。miR-149 mimic组细HeLa胞增殖倍数低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组细胞增殖倍数高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞增殖倍数下降(P<0.01);miR-149 mimic组HeLa细胞凋亡率高于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组细胞凋亡率低于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组细胞凋亡率上升(P<0.01);miR-149 mimic组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率低于未转染组(P<0.01),pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率高于未转染组(P<0.01),与pc-FOXP3组相比mimic+pc-FOXP3组每个视野下的侵袭细胞数和划痕愈合率下降(P<0.01)。结论:miR-149-3p通过靶向FOXP3抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭和迁移,同时促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-149-3p FOXp3基因 宫颈癌 HELA细胞 增殖 凋亡 侵袭 迁移
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miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移 被引量:3
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作者 林志金 张长青 +3 位作者 陈新琦 许伯明 李颖怡 陈雅妮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1212-1216,共5页
目的:探究miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移的机制。方法:体外培养人胃癌细胞SGC-7901,并分为:Ctrl组、miR-NC组、miR-149-3p mimic组、pLV-FOXM1组和pLV-FOXM1+miR-149-3p mimic组;使用RT-PCR分别检测正常组织、... 目的:探究miR-149-3p靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901生长和迁移的机制。方法:体外培养人胃癌细胞SGC-7901,并分为:Ctrl组、miR-NC组、miR-149-3p mimic组、pLV-FOXM1组和pLV-FOXM1+miR-149-3p mimic组;使用RT-PCR分别检测正常组织、原位肿瘤组织和转移后肿瘤组织中miR-149-3p和FOXM1 mRNA的表达水平并分析miR-149-3p与FOXM1的线性关系;使用miR-NC、miR-149-3p mimic转染细胞后检测miR-149-3p和FOXM1 mRNA表达水平;双荧光素酶检测miR-149-3p与FOXM1的靶向关系;CCK-8检测细胞增殖情况,体外侵袭实验检测细胞侵袭情况,划痕实验检测细胞迁移情况;蛋白质印迹检测N-cadherin、E-cadherin、MMP-2、MMP-9、FOXM1、PCNA、p21的表达水平。结果:相比原位肿瘤组织和转移后肿瘤组织,正常组织中FOXM1 mRNA表达较低、miR-149-3p表达较高。荧光素酶报告实验表明miR-149-3p序列上有FOXM1的结合位点。相比空白对照组(Ctrl),miR-149-3p mimic组细胞增长受到显著抑制,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。相比Ctrl组,pLV-FOXM1组细胞生长受到促进,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著降低(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。相比pLV-FOXM1组,miR-149-3p+pLV-FOXM1组细胞增长受到显著抑制,FOXM1、P21、E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);单位面积细胞侵袭数目、细胞迁移能力、PCNA、N-cadherin、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:miR-149-3p可以靶向FOXM1抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长侵袭和迁移,其机制与调控细胞生长侵袭和迁移的蛋白有关。 展开更多
关键词 胃癌 miR-149-3p 细胞迁移 细胞生长
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LncRNA PVT1通过竞争miR-149-5p上调CHI3L1并影响变应性鼻炎进展的研究 被引量:1
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作者 姜玉秋 唐桥斐 +1 位作者 闫智永 张爽 《天津医药》 CAS 北大核心 2022年第3期259-264,共6页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PVT1对变应性鼻炎(AR)进展的影响及其相关作用机制。方法24只BALB/c小鼠,其中6只作为对照组,余18只采用卵白蛋白和氢氧化铝建立AR模型并采用随机数字表法均分为模型组、AR+NC组(尾静脉注射空载体慢病毒)、... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)PVT1对变应性鼻炎(AR)进展的影响及其相关作用机制。方法24只BALB/c小鼠,其中6只作为对照组,余18只采用卵白蛋白和氢氧化铝建立AR模型并采用随机数字表法均分为模型组、AR+NC组(尾静脉注射空载体慢病毒)、AR+shPVT1组(尾静脉注射LncRNA PVT1干扰载体慢病毒),每组6只。采用行为学评分评估各组小鼠过敏症状;HE染色观察各组小鼠鼻黏膜组织病理学改变;实时荧光定量PCR检测各组小鼠鼻黏膜组织中LncRNA PVT1、miR-149-5p和几丁质酶-3样蛋白1(CHI3L1)mRNA的表达;Western blot检测CHI3L1蛋白表达;ELISA分析各组小鼠血清IgE、白细胞介素(IL)-5、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。构建LncRNA PVT1和CHI3L1的野生型(WT)和突变型(MT)荧光素酶报告质粒,单独或同时与miR-149-5p mimic共转染293T细胞,采用双荧光素酶实验分析并计算各组细胞荧光素酶相对活性。结果与模型组相比,AR+shPVT1组小鼠行为学评分降低;血清中IgE、IL-5和TNF-α水平降低;鼻黏膜组织中LncRNA PVT1 mRNA表达水平降低,miR-149-5p mRNA表达水平升高,CHI3L1 mRNA及蛋白水平均降低,鼻黏膜组织炎症反应减轻。双荧光素酶实验证实LncRNA PVT1通过竞争性结合miR-149-5p,上调miR-149-5p靶基因CHI3L1的表达。结论在AR模型小鼠中异常高表达的LncRNA PVT1通过发挥竞争性内源RNA作用抑制miR-149-5p表达而上调CHI3L1的表达,引发小鼠鼻黏膜组织的炎性症状并促进过敏反应。 展开更多
关键词 鼻炎 过敏性 RNA 长链非编码 小鼠 近交BALB C 壳多糖酶3样蛋白质1 LncRNA pVT1 miR149-5p
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miR-149-3p通过靶向S100A4抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭 被引量:8
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作者 谢顺明 王文晓 赵文武 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第1期12-17,共6页
目的:探讨miR-149-3p通过靶向S100A4抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭行为及其作用机制。方法:qP CR检测miR-149-3p的过表达情况; CCK-8细胞增殖实验检测miR-149-3p对膀胱癌细胞的增殖能力的影响;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测m... 目的:探讨miR-149-3p通过靶向S100A4抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭行为及其作用机制。方法:qP CR检测miR-149-3p的过表达情况; CCK-8细胞增殖实验检测miR-149-3p对膀胱癌细胞的增殖能力的影响;划痕愈合实验和Transwell侵袭实验检测miR-149-3p对膀胱癌细胞迁移和侵袭能力的影响;双荧光素酶报告基因检测miR-149-3p与S100A4的相互作用; Transwell侵袭实验检测S100A4的异位表达逆转miR-149-3p的抗肿瘤作用。结果:miR-149-3p过表达显著抑制培养的膀胱癌细胞48小时的生长能力;过表达miR-149-3p后在膀胱癌细胞中具有抗迁移和侵袭作用; miR-149-3p能与S100A4的3'UTR特异性结合,调控S100A4的表达活性; S100A4的过表达可以逆转由miR-149-3p引起的细胞迁移和侵袭能力的抑制。结论:miR-149-3p在膀胱癌的发生发展过程中起重要作用,可以通过靶向调节S100A4的表达影响膀胱癌细胞的增殖和迁移。 展开更多
关键词 膀胱癌 miR-149-3p S100A4 侵袭行为
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HE4、miR-149-3p在尖锐湿疣患者组织中的表达及其与HPV感染的关系 被引量:4
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作者 周蜜 许文芳 +4 位作者 陈将南 张宝军 王章善 付双杏 方晓波 《广东医学》 CAS 2022年第12期1535-1539,共5页
目的探究人附睾蛋白4(HE4)、miR-149-3p在尖锐湿疣(CA)患者组织中的表达及二者与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法选取收治的80例CA患者为研究对象(CA组),另选取50例行包皮环切术患者为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测组织中miR-14... 目的探究人附睾蛋白4(HE4)、miR-149-3p在尖锐湿疣(CA)患者组织中的表达及二者与人乳头瘤病毒(HPV)感染的关系。方法选取收治的80例CA患者为研究对象(CA组),另选取50例行包皮环切术患者为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测组织中miR-149-3p水平,免疫组化法分析HE4表达水平,荧光定量PCR法检测HPV DNA载量,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)水平。用Spearman法分析CA组织中miR-149-3p、HE4与IFN-γ、TNF-α、IL-10水平的相关性。结果与对照组相比,CA组组织中miR-149-3p水平、血清IFN-γ、TNF-α水平较低(P<0.05),HE4阳性表达率、血清IL-10水平较高(P<0.05)。与病毒载量为103~105组相比,105~107组、>107组组织中miR-149-3p水平较低(P<0.05),HE4阳性表达率较高(P<0.05)。Spearman相关分析显示,HPV6/HPV11阳性CA患者miR-149-3p与HE4呈负相关(P<0.05),CA组织中miR-149-3p与IFN-γ、TNF-α呈正相关(P<0.05),与IL-10呈负相关(P<0.05);HE4与IFN-γ、TNF-α呈负相关(P<0.05),与IL-10呈正相关(P<0.05)。结论CA组织中miR-149-3p表达水平较低、HE4阳性表达率较高,miR-149-3p与HE4表达水平呈负相关,二者表达水平与HPV感染有关。 展开更多
关键词 尖锐湿疣 人乳头瘤病毒 miR-149-3p 人附睾蛋白4 细胞因子
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miR-149-3p对糖尿病大鼠心肌细胞胰岛素抵抗的作用 被引量:1
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作者 何永丹 《中国老年保健医学》 2019年第5期34-37,共4页
目的探讨miR-149-3p对糖尿病大鼠心肌细胞胰岛素抵抗的干预作用及其机制。方法应用高脂饲料联合链脲佐菌素方法构建糖尿病大鼠模型,提取心肌组织总RNA,检测miR-149-3p的表达情况。培养H9c2心肌细胞,体外应用高糖高脂诱导H9c2细胞胰岛素... 目的探讨miR-149-3p对糖尿病大鼠心肌细胞胰岛素抵抗的干预作用及其机制。方法应用高脂饲料联合链脲佐菌素方法构建糖尿病大鼠模型,提取心肌组织总RNA,检测miR-149-3p的表达情况。培养H9c2心肌细胞,体外应用高糖高脂诱导H9c2细胞胰岛素抵抗模型,检测miR-149-3p的表达情况。应用miRNA转染技术将miR-149-3p转染进H9c2心肌细胞,并检测葡萄糖摄取。应用生物信息学实验、real time qPCR实验和western blot实验确定fat mass and obesity associated(FTO)是否为miR-149-3p的靶点。结果糖尿病模型组大鼠腹腔注射糖耐量实验中2h血糖显著高于对照组,且其血浆TC、TG和FFA水平均显著高于对照组。此外,糖尿病模型组大鼠心肌中miR-149-3p的表达显著降低;过表达miR-149-3p能够抑制胰岛素刺激的葡萄糖摄取,敲减miR-149-3p以能够促进胰岛素刺激的葡萄糖摄取。生物信息学实验、real time qPCR实验和western blot实验证明FTO是miR-149-3p的直接靶点。结论 miR-149-3p通过下调FTO抑制糖尿病大鼠心肌细胞胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 miR-149-3p 糖尿病 胰岛素抵抗 心肌细胞
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miR-149-5p对变应性鼻炎小鼠Notch1表达和Treg/Th17免疫平衡的影响 被引量:6
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作者 闫智永 张爽 唐桥斐 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第6期660-667,共8页
目的:探讨miR-149-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)表达和调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型... 目的:探讨miR-149-5p对变应性鼻炎(AR)小鼠神经源性位点缺口同系物蛋白1(Notch1)表达和调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)失衡的影响。方法:12只BALB/c小鼠,3只为正常组,余9只小鼠采用卵清蛋白(OVA)和氢氧化铝[Al(OH)3]建立AR模型,再随机均分为模型组(仅造模)、miR-149-5p激动剂对照组(鼻内滴注miR-149-5p agomir阴性对照)及miR-149-5p激动剂组(鼻内滴注miR-149-5p agomir);采用行为学评分考察各组各组小鼠过敏症状、苏木精/伊红染色(HE)分析各组小鼠鼻黏膜病理学变化、实时荧光定量PCR(q PCR)检测各组小鼠鼻黏膜组织miR-149-5p,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析各组小鼠血清免疫球蛋白E(Ig E)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)水平,采用蛋白印迹法检测各组小鼠鼻黏膜组织Notch1、维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)及叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)蛋白表达;利用miRDB网站预测miR-149-5p与Notch1 3’-UTR结合位点,构建Notch1 3’-UTR区野生型(WT)和突变型(MUT)荧光素酶报告载体,转染293T细胞,设置NC+Notch1(MUT)组、miR-149-5p agomir+Notch1(MUT)组、NC+Notch1(WT)组及miR-149-5p agomir+Notch1(WT)组,采用双荧光素酶实验分析并计算荧光素酶相对活性。结果:与模型组比较,miR-149-5p激动剂组小鼠行为学评分明显下降,鼻黏膜炎症反应减轻,上皮结构趋于完整,miR-149-5p的表达显著增加,血清中Ig E、IL-6水平下降,IL-10水平升高,Foxp3蛋白的表达增加,Notch1和RORγt蛋白的表达减少(P <0. 05或P <0. 01);miRDB网站预测miR-149-5p与Notch1 3’-UTR存在互补位点,双荧光素酶实验结果显示,miR-149-5p agomir+Notch1(WT)组的荧光素酶相对活性较NC+Notch1(WT)组降低(P <0. 05)。结论:miR-149-5p可能通过靶向Notch1调节Foxp3和RORγt蛋白表达,影响Treg/Th17细胞平衡,从而改善AR小鼠鼻部过敏症状。 展开更多
关键词 变应性鼻炎 miR-149-5 p基因 神经源性位点缺口同系物蛋白1 辅助性T细胞17 调节性T细胞 叉头状螺旋转录因子3 维甲酸相关核孤儿受体γt
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微小RNA-149-5p在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达情况及作用机制 被引量:1
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作者 王战芳 张芳芳 +1 位作者 韩阳利 王敏芳 《癌症进展》 2020年第10期1039-1042,共4页
目的探讨微小RNA-149-5p(miRNA-149-5p)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达情况及作用机制。方法选择150例DLBCL患者和70例淋巴结反应性增生患者,分别作为观察组和对照组。采用逆转录聚合酶链法检测两组患者中miRNA-149-5p的相对表达量... 目的探讨微小RNA-149-5p(miRNA-149-5p)在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达情况及作用机制。方法选择150例DLBCL患者和70例淋巴结反应性增生患者,分别作为观察组和对照组。采用逆转录聚合酶链法检测两组患者中miRNA-149-5p的相对表达量,采用免疫组织化学染色法检测两组患者中核因子κB(NF-κB)/p65、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、胱天蛋白酶3(caspase 3)、Ki-67蛋白的表达情况。依据miRNA-149-5p表达水平,将DLBCL患者分为miRNA-149-5p高表达组和miRNA-149-5p低表达组,比较两组患者的3年生存率。结果观察组患者的miRNA-149-5p相对表达量明显低于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-149-5p表达情况可能与DLBCL患者的Hans分型有关(P﹤0.01)。观察组患者的NF-κB/p65、Bcl-2、Ki-67蛋白阳性率均明显高于对照组,caspase 3蛋白阳性率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。miRNA-149-5p高表达组患者的3年生存率为46.4%,明显高于miRNA-149-5p低表达组的17.5%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论 DLBCL患者中miRNA-149-5p表达下调,可能通过凋亡途径影响肿瘤的发生,miRNA-149-5p低表达可能与DLBCL患者预后不良有关。 展开更多
关键词 弥漫大B细胞淋巴瘤 微小RNA-149-5p B细胞淋巴瘤/白血病-2 胱天蛋白酶3 核因子ΚB KI-67
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MiR-149通过PHGDH对慢性髓系白血病细胞葡萄糖代谢的影响
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作者 尹石红 徐修才 《临床输血与检验》 CAS 2021年第3期294-300,共7页
目的探讨miR-149-5p,3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-Phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)与慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)伊马替尼(Imatinib,IM)耐药和糖酵解活性的相关性。方法检测CML细胞K562、伊马替尼耐药的CML细胞株K... 目的探讨miR-149-5p,3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-Phosphoglycerate dehydrogenase,PHGDH)与慢性髓细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)伊马替尼(Imatinib,IM)耐药和糖酵解活性的相关性。方法检测CML细胞K562、伊马替尼耐药的CML细胞株K562G中miR-149-5p、PHGDH的表达情况及葡萄糖摄取量。运用慢病毒转染技术在K562G细胞中获得过表达miR-149-5p的149G和对照组149N细胞。检测149G、149N细胞中miR-149-5p、PHGDH的表达情况及葡萄糖摄取量。基于液相-串联质谱联用(LC-MS/MS)技术进行靶向代谢组学分析。结果IM耐药的CML细胞株K562G中miR-149的表达水平明显低于IM敏感的CML细胞株K562(*P<0.05),而PHGDH的表达在K562G细胞中明显升高(*P<0.05)。与149N细胞相比,149G细胞中miR-149的表达水平明显升高(*P<0.05),而PHGDH的表达显著降低(*P<0.05)。同时,K562G细胞中葡萄糖摄取量较K562细胞明显升高(*P<0.05)。与149N细胞相比,149G细胞中葡萄糖摄取量明显降低(*P<0.05)。代谢组学分析,K562与K562G相比有9种代谢物水平有明显差异(*P<0.05)。结论miR-149-5p表达与CML细胞糖代谢重编程相关,过表达miR-149-5p可抑制下游靶基因PHGDH的表达。miR-149-5p靶向PHGDH通路可以抑制CML细胞的糖酵解活性。 展开更多
关键词 miR-149-5p 3-磷酸甘油酸脱氢酶 慢性髓细胞白血病 伊马替尼 液相-串联质谱联用
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