基于网络药理学和实验验证探讨参附汤对心源性休克的作用机制

目的基于网络药理学及动物实验探讨参附汤防治心源性休克的作用机制。方法通过网络药理学预测参附汤作用心源性休克的相关靶点和信号通路;以冠状动脉结扎法制造心源性休克大鼠模型,造模前大鼠根据分组给予相应剂量的参附汤或生理盐水灌胃14 d,建模成功后记录大鼠实时平均动脉压变化。HE法检测心源性休克大鼠心肌组织病理学改变;TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡程度;Western blot法测定大鼠心肌组织Bax、Bcl-2、caspase-3、cleaved caspase-3蛋白表达水平。结果网络药理学最终筛选出参附汤潜在活性成分51种,参附汤与心源性休克共同作用靶点80个,核心靶点43个,GO富集分析显示核心蛋白参与的生物途径(biology process,BP)涉及凋亡过程正调节,KEGG富集分析显示涉及动脉粥样硬化、凋亡相关信号通路。动物实验验证结果显示,参附汤能够升高心源性休克大鼠血压,减轻心肌组织病理学改变;减轻大鼠心肌细胞凋亡程度,降低大鼠心肌组织caspase-3、cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平,提高Bcl-2蛋白表达水平。结论参附汤的潜在活性成分可能通过作用靶点Bax、Bcl-2调控心肌细胞凋亡信号通路,从而起到对心源性休克大鼠的防治作用。

加味参附汤对吗啡依赖小鼠及大鼠戒断症状的影响

目的 :观察中药复方制剂加味参附汤 (MSFD)的戒毒治疗作用。方法 :剂量连续递增腹腔内给予吗啡造成小鼠及大鼠依赖模型 ,经MSFD及丁丙诺啡 (Bup)治疗后 ,对各组动物的纳洛酮 (Nal)催促戒断症状进行评估和综合评分。结果 :MSFD能明显抑制吗啡依赖小鼠及大鼠戒断后第 2天、第 6天Nal引起的催促戒断反应 ,能减轻戒断后小鼠及大鼠体重的下降 ,并促进体重的回升 ;MSFD联合Bup治疗 ,能协同抑制小鼠及大鼠的戒断反应。结论 :MSFD具有一定的戒毒治疗作用 ,MSFD联合Bup治疗 ,戒毒作用加强。

加味参附汤戒毒治疗作用的实验研究

目的观察中药复方制剂加味参附汤 (MSFD)的戒毒治疗作用并探讨其机理。方法连续剂量递增腹腔注射吗啡造成吗啡依赖小鼠及大鼠模型 ,灌胃给予不同剂量MSFD后观察上述模型动物在戒断后第 2d、第 6d由纳洛酮引起的催促戒断反应 ,测定吗啡依赖小鼠在戒断后第 6d的免疫功能指标及吗啡依赖大鼠在戒断后第 2d、第 6d下丘脑内NA、5 HT、DA的含量、戒断后第 6d下丘脑内 β 内啡肽 ( β End)、亮氨酸脑啡肽 (Leu Enk)和强啡肽 (Dyn)的含量及下丘脑弓状核中阿黑皮素原 (POMC)mRNA的表达情况。结果MSFD能明显抑制吗啡依赖小鼠及大鼠戒断后第 2d、第 6d的催促戒断反应 ,MSFD联合丁丙诺啡治疗疗效增强。戒断后第 6d ,吗啡依赖小鼠出现脾脏和胸腺萎缩 ,巨噬细胞功能、外周血T淋巴细胞总数及对PHA的增殖反应、脾T淋巴细胞CD+ 4百分率及CD+ 4/CD+ 8比值下降 ,MSFD能不同程度地减轻上述改变 ,丁丙诺啡治疗作用不显著。吗啡依赖大鼠戒断后第 2d、第 6d下丘脑内NA、5 HT含量增多 ,DA含量减少 ,戒断后第 6d下丘脑内β End、Leu Enk含量及弓状核内POMCmRNA表达减少 ,下丘脑内Dyn含量增多 ;MSFD能促进上述改变趋向正常 ,但对Dyn含量无显著影响 ;MSFD联合丁丙诺啡治疗 ,能减少丁丙诺啡对单胺类神经递质及内阿片肽的影响 ,加速?

基于网络药理学探究加味甘草附子汤治疗类风湿关节炎的作用机制

利用网络药理学方法预测加味甘草附子汤(modified Gan Cao Fu Zi Decoction, GCFZ)治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)的作用机制,通过动物实验验证分析结果并探讨GCFZ的药效学效果。首先利用TCMID、SymMap、HERB、STITCH和GEO数据库获取GCFZ治疗RA的靶基因,共筛选得到RA差异表达基因1 250个, GCFZ靶点基因534个,交集基因83个。随后通过GO和KEGG数据库对交集基因进行功能富集分析,发现GCFZ及其活性成分主要通过细胞因子通路发挥作用,其中趋化因子信号通路、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)信号通路富集基因数较多。接着使用Cytoscape3.8.0软件构建药物-靶点-疾病网络并筛选到TNF、趋化因子8 (C-X-C chemokine ligand 8, CXCL8)、趋化因子10 (C-X-C chemokine ligand 10, CXCL10)、趋化因子配体5(C-Cchemokineligand5,CCL5)、趋化因子2(C-X-Cchemokineligand2,CXCL2)、趋化因子受体4(C-X-C chemokine receptor type 4, CXCR4)等6个核心蛋白,并通过分子对接技术验证GCFZ主要活性成分与核心蛋白结合能力。通过构建胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis, CIA)大鼠模型探讨GCFZ低、中、高(4、8、16 g·kg^(-1))剂量组的治疗效果, X射线影像学方法、HE染色、番红O-固绿染色结果显示, GCFZ干预能显著改善CIA大鼠骨质破坏、滑膜增生和软骨损伤,免疫荧光结果显示GCFZ治疗能够调节TNF、CXCL8、CCL5的表达。综上,本研究结果表明GCFZ含有多种小分子药效物质,能够通过多靶点、多通路发挥治疗作用,明显减轻CIA大鼠的关节炎症状。本研究动物实验获得蚌埠医学院实验动物管理和伦理委员会批准。