蛋白染色法测定蛋白改性纤维蛋白含量的可行性研究

在分析现有含蛋白改性纤维产品蛋白含量检测方法的基础上,利用蛋白染色方法检测蛋白含量,分析了影响测试结果的各类因素。结果表明,酸、碱、有机溶剂等不适宜作为萃取试剂来进行蛋白提取;低浓度盐适宜用作萃取试剂,萃取条件为:室温、振荡萃取30 min、变色反应时间5 min。使用蛋白染色法测试含蛋白改性纤维产品蛋白含量操作简单,具有可行性。

胸腔镜下复杂肺段切除术吲哚菁绿荧光反染法与改良膨胀萎陷法的对比研究

目的比较吲哚菁绿(indocyanine green,ICG)荧光反染法与改良膨胀萎陷法在胸腔镜复杂肺段切除术中段间平面显露的效果。方法回顾性分析2020年1月~2021年8月我院108例胸腔镜下复杂肺段切除术的临床资料,其中43例采用ICG反向染色法(荧光染色组),65例采用改良膨胀萎陷法(改良膨胀萎陷组),比较2组术中和术后情况。结果与改良膨胀萎陷组相比,ICG荧光染色组段间平面形成时间[(9.1±1.4)s vs.(1724.3±309.1)s,t=44.736,P=0.000]、手术时间[(147.5±32.2)min vs.(174.2±57.7)min,t=3.077,P=0.003]、术后胸管留置时间[2(1,2)d vs.3(2,3)d,Z=-3.829,P=0.000]和术后住院时间[6.0(4.0,7.0)d vs.7.0(5.5,10.0)d,Z=-2.644,P=0.008]明显缩短。2组术中出血量、淋巴结采样数目、并发症发生率差异无统计学意义(均P>0.05)。结论对于胸腔镜下复杂肺段切除术的段间平面显露,相比改良膨胀萎陷法,ICG荧光染色法是安全、高效的。

血液肿瘤细胞凋亡形态学观察的改良荧光染色法

改良了观察血液肿瘤细胞凋亡形态学的荧光染色法。其程序包括细胞固定、、制片、染色、现察等步骤，简单易行；整个细胞凋亡检测过程在2h内即可完成，且检出率极高，甚至在细胞凋亡发生率仅为1％的情况下，仍可快速检出。因此，该染色法具有方便、快速、实用性强的特点。适用于常规实验室细胞凋亡形态学观察。

脂多糖快速银染检测方法的改良

为了建立一种快速、高效的脂多糖(LPS)银染检测方法,利用大肠杆菌(Escherichia coli 0111:B4)制备的LPS为研究对象,在传统LPS银染检测方法的基础上,通过调整凝胶的固定氧化试剂和银染试剂等措施,对LPS经SDS-PAGE电泳后的结果进行银染检测。结果表明,改良的LPS快速银染检测方法在保持传统方法灵敏度的基础上,操作过程更为简单,安全性、经济性和染色效果等方面也比传统的方法均有明显提高,是一种快速高效的LPS银染检测方法。

转基因植物快速检测方法的研究

本试验对转基因植物检测中的DNA提取和PCR扩增程序作了改进。经试验 ,本研究建立的DNA快速提取法与目前广泛使用的CTAB法相比更为简便、快速和经济 ,提取的DNA质量及扩增效果无明显差异 ,可用于多种转基因植物、多种植物组织的DNA提取。利用复合PCR法可在同一反应管中同步检测 35S、NOS及CP4-EPSPS基因 ,明显提高了检测效率。应用本试验建立的DNA快速提取 -复合PCR扩增 -银染检测技术可在 6小时内得出结果 ,达到了快速、简便、灵敏、可靠的检测目的。

改良抗酸染色法在检测痰结核分枝杆菌中的应用

目的比较痰涂片传统抗酸染色、改良抗酸染色、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术四种方法检测痰中结核分枝杆菌对于肺结核的诊断价值。方法 207例确诊结核患者和145例其他肺部感染患者的痰液,分别用痰涂片传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养及Xpert MTB/RIF技术检测抗酸杆菌,比较四种方法的灵敏度及特异性。结果痰涂片传统抗酸染色法、改良抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术检测痰中结核分枝杆菌的敏感度分别为20.3%、59.9%、55.6%和69.1%;特异性分别为99.3%、99.3%、100%和99.3%。结论与传统抗酸染色法、BACTEC MGIT 960培养和Xpert MTB/RIF技术相比,改良抗酸染色法具有简单、快速、敏感性高、特异性强和成本低廉等优点,是临床肺结核快速诊断的有效检测方法,值得基层实验室推广。

改良Mallory’s三色法对牙胚矿化过程的观察

目的 :观察牙釉质和牙本质基质矿化过程的动态变化 ,为进一步阐明牙釉质和牙本质的形成机制提供依据。方法 :2 1和 3 2周自然流产的胎儿 2例。分离含有牙胚的上、下颌骨 ,固定脱钙 ,2 5 g/L火棉胶、石蜡双重包埋 ,常规组织学切片 ,分别用改良Mallory’s三色和HE染色 ,镜下观察。 结果 :在牙胚矿化过程中 ,不同时期、不同矿化层呈现不同的颜色变化。结论 :改良Mallory’s三色法较HE染色更为清楚的观察到牙胚发育中组织矿化过程的变化。

改良单宁酸-氯化铁法媒染子宫血管的实验研究

目的 :光镜下观察大鼠子宫各部位血管构筑。方法 :应用单宁酸 氯化铁法 (TA Fe法 )灌流固定大鼠 ,取子宫不同位置做冰冻切片 ,氯化铁显色 ,常规脱水、透明、封片 ,显微摄影。结果 :子宫壁出现类似电镜负染色效果 ,组织结构灰黑色 ,血管双线条状 ,分支明显 ,过管壁切面可见内皮细胞或平滑肌 ;子宫动脉进入肌层分支并形成一、二级血管网和多支环状动脉 ,环行动脉或二级血管网发出的微动脉和毛细血管进入粘膜 ,形成密集的三级毛细血管网。结论 :经灌流的子宫标本较长时间保存在媒染固定液内 ,导致血管外结构也被媒染 ;子宫壁有三级血管网 ;每个子宫有多支环状动脉 ;

-196℃奥氏体不锈钢母材与焊缝的动态断裂韧性

在-196℃对S30408奥氏体不锈钢的母材和焊缝进行了夏比摆锤冲击实验,采用改进的柔度变化率法得到了低温下不锈钢母材夏比试样的起裂点。结果表明,采用改进的柔度变化率法得到的结果比采用传统的柔度变化率法得到的结果更准确。根据实验得到的载荷-位移曲线,结合采用Schindler法和关键曲线法各自所得结果的优点,得到了不锈钢母材的动态裂纹扩展阻力曲线(动态J-R曲线)。依据不锈钢焊缝在低温动载下的载荷-位移曲线及其断裂特征,通过线弹性断裂力学计算获得其动态断裂韧性。

改良Masson染色法在慢性乙型肝炎及肝硬化病理学诊断中应用

目的研究一种改良的Masson染色方法用来显示肝组织中胶原纤维,作为慢性乙型肝炎、肝硬化纤维化程度的病理分期标准,为临床治疗提供帮助。方法方便选取2012年6月—2016年12月徐州市传染病医院病理室50例石蜡包埋肝组织切片,采用在传统Masson染色基础上进行改良的染色方法进行胶原纤维染色,根据染色结果显示慢性乙型肝炎及肝硬化肝组织中胶原纤维增生情况,作为病理诊断纤维化程度依据,染色结果与传统染色方法进行对比,并结合临床资料,判断病理诊断的分级、分期与临床诊断的分度是否一致,来评价其应用价值。结果根据患者HE染色结果和改良的Masson染色显示的胶原纤维染色结果,进行慢性肝炎病理分级、分期诊断及肝硬化诊断,50例患者中慢性乙型肝炎轻度有6例(G1-2,S1-2),慢性乙型肝炎轻-中度(G2-3、,S2-3)及中度(G3、,S3)有36例,慢性乙型肝炎重度2例(G4S2),早期肝硬化2例(G3S4),肝硬化4例,结合患者临床资料,根据染色结果作出的病理学诊断的分级、分期与患者的临床分度基本一致,有2例患者临床诊断为慢性乙型肝炎,经染色后病理诊断为肝硬化。结论改良Masson染色法与传统染色方法染色结果对比切片背景清晰,胶原纤维色泽鲜艳,对比度强,能够显示较细小的胶原纤维,染色效果更好,能满足临床病理学诊断的纤维化分期要求,具有重要的应用价值。

ICG荧光染色法与改良膨胀萎陷法在胸腔镜肺段切除中的对比研究

本文对吲哚菁绿(ICG)荧光染色法及改良膨胀萎陷法在胸腔镜肺段切除中的应用进行对比分析。选取75例胸腔镜肺段切除术肺癌患者,依据数字表法随机分为对照组(35例)和研究组(40例)。对照组患者采用改良膨胀萎陷法,研究组患者采用吲哚菁绿荧光染色法。对比2组疗效、手术相关指标,行常规肺通气功能检测。与对照组相比,研究组患者引流时间、胸腔引流量、住院时间、最大呼气流量(PEF)、一秒用力呼气容积(FEV1)及用力呼气量(FVC)均降低(P<0.05);研究组患者比对照组患者的段间平面形成时间更早、手术时间更短(P<0.05);对照组并发症总发生率(25.71%)高于研究组(7.50%),差异具有统计学意义(P<0.05)。ICG荧光染色法与改良膨胀萎陷法在胸腔镜肺段切除中均会对患者肺功能产生影响,但ICG荧光染色法对肺功能影响较轻,并发症发生情况也较低,能够高度准确地识别段间交界线,安全性较高。

离心涂片法、Gene Xpert技术和改良抗酸染色法用于早期结核性脑膜炎诊断中的临床价值

目的探讨离心涂片法、Gene Xpert技术和改良抗酸染色法应用于早期结核性脑膜炎诊断中的临床价值。方法选择2018年1月至2020年9月就诊于我院的120例脑膜炎患者为研究对象,采用离心涂片法、Gene Xpert技术和改良抗酸染色法对其脑脊液标本中的结核分枝杆菌进行检测。以临床综合诊断结果为金标准,比较三种方法对结核性脑膜炎的诊断价值。结果改良抗酸染色法对结核性脑膜炎的诊断灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值均显著高于离心涂片法、Gene Xpert技术,且Gene Xpert技术显著高于离心涂片法,差异具有统计学意义(P<0.05)。改良抗酸染色法与临床综合诊断结果之间为高度一致性(Kappa值为0.829),Gene Xpert技术与临床综合诊断结果之间为中度一致性(Kappa值为0.634),离心涂片法与临床综合诊断结果之间为低度一致性(Kappa值为0.378)。三种方法对结核性脑膜炎Ⅰ期的诊断符合率从高至低依次为改良抗酸染色法、Gene Xpert技术、离心涂片法,两两比较,差异具有统计学意义(P<0.05);三种方法对结核性脑膜炎Ⅱ期、Ⅲ期的诊断符合率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论相比于离心涂片法、Gene Xpert技术,改良抗酸染色法可以更加灵敏、准确地诊断早期结核性脑膜炎,值得在临床上推广应用。

一种适用于微生物学实验教学的改良细菌革兰染色法

微生物学实验教学常规细菌革兰染色实验中,常因细菌培养物被反复使用而导致染色结果出现错误。为了提高革兰染色实验教学效果,我们建立了基于10%福尔马林固定菌液的改良革兰染色法。该法染色结果显示,4℃或室温放置5或30 d的福尔马林固定金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌菌液不仅具有100%染色正确率,同时还有菌体染色均匀、轮廓清晰、形态典型等优点,不仅提高了革兰染色实验教学效果,同时也明显减少了实验准备工作量及细菌培养基使用量,较好的改进了革兰染色实验教学中存在的问题。

改良Giemsa法和硼酸美蓝法检测幽门螺杆菌感染的临床比较

目的探讨改良Giemsa法和硼酸美蓝法在检测胃幽门螺杆菌(Hp)感染中的应用价值。方法收集80例慢性浅表性胃炎及胃溃疡患者,分别采用改良Giemsa法和硼酸美蓝法检测胃粘膜Hp,以Hp菌培养和C13呼气试验联合检测结果为Hp感染标准,比较两种检测方法对Hp检测的应用价值。结果以Hp菌培养和C13呼气试验联合检测结果为对照,改良Giemsa法检测Hp感染的特异性为100%,敏感性为96.2%(50/52),诊断符合率为97.5%(78/80);硼酸美蓝法检测Hp感染的特异性为100%,敏感性为88.5%(46/52),诊断符合率为92.5%(74/80)。两种方法检测Hp感染的特异性、敏感性及诊断符合率均较高,特异性和诊断符合率比较差异无显著意义(P>0.05),但改良Giemsa法的检测敏感性明显高于硼酸美蓝法(P<0.05)。结论改良Giemsa染色法和硼酸美蓝法具有较高的Hp感染检测特异性和诊断符合率,均为比较理想的常规Hp检测染色法。

改良复方KOH湿片法与荧光染色法在皮肤癣菌病涂片镜检中的应用

目的对传统KOH湿片法进行改良,探讨荧光染色法与改良复方KOH湿片法在皮肤癣菌病涂片镜检中的优势,为临床快速诊断真菌感染和保存示教片提供依据。方法选择2021年8—10月成都市第二人民医院收治的262例疑似皮肤癣菌病患者作为研究对象。所有患者于同一患处采样,将每份样本平均分成两份,分别进行改良复方KOH湿片法与荧光染色法真菌涂片检查,记录并比较两种方法的阳性率、制片时间、阅片时间及室温下不同放置时间的阳性保持率。结果共采集标本262份,采用荧光染色法的体癣阳性率和总阳性率均明显高于改良复方KOH湿片法(体藓阳性率:11.63%比4.65%,总阳性率:17.94%比10.31%,均P<0.05),采用两种方法的甲癣和头癣阳性率比较差异均无统计学意义。采用荧光染色法获得的阳性标本于室温条件下放置3 h和5 h的阳性保持率均明显高于改良复方KOH湿片法(3 h:93.59%比77.78%,5 h:87.23%比66.67%,均P<0.05)。采用荧光染色法的制片时间和阅片时间均明显少于改良复方KOH法〔制片时间(s):11.88±4.38比23.78±7.02,阅片时间(s):54.80±19.73比73.97±34.13,均P<0.05〕。结论荧光染色法检测皮肤癣菌病的总阳性率、中长时段阳性保持率、制片和阅片时间均优于改良复方KOH法,可将两种方法结合应用,以获得更好的检测效果。

改良Feulgen染色法检测标本细胞DNA的效果评估

目的探讨改良Feulgen染色法临床检测细胞DNA中的效果。方法收集宫颈癌普查检测样本300例(份),每例标本进行液基制片各3份,随机分成3组:标准组,实验组1,实验组2。另取标准片30片,随机分成3组:标准组,实验组1,实验组2,采用经典Feulgen染色法及改良Feulgen染色法分别对宫颈癌普查检测标本和标准片进行染色,分别测量二倍体细胞核变异系数(CV)、积分光密度(IOD)及DNA指数(DI),测量结果进行统计学分析。结果实验组宫颈检测样本二倍体细胞核IOD、DI、CV值与标准组比较,差异无统计学意义(P>0.1);改良Feulgen染色法显示细胞核染色深,结构清晰,背景着色淡;经典Feulgen染色法流程需要4 h,改良Feulgen染色法只需要30 min。结论改良Feulgen染色法与经典Feulgen染色法对检测细胞DNA结果高度一致,且改良Feulgen染色法效果良好,用时短,可以用于临床标本细胞DNA检测。

改良结核分枝杆菌L型检测方法在结核病早期诊断中的价值

目的探讨改良结核分枝杆菌L型检测方法在结核病早期诊断中的应用价值。方法选择2012年8月至2014年8月在武汉市第十一医院门诊确诊的120例活动性肺结核患者,分别采用荧光定量聚合酶链反应法(PCR)、MTB-L抗酸染色法、萋-尼抗酸染色法(Ziehl-Nelsen,Z-N)、改良IK抗酸染色法检测MTB-L的阳性感染率,以荧光定量PCR法作为金标准,评价各种检测方法对MTB-L结核病的诊断价值。结果荧光定量PCR法MTB-L阳性检出率为30.0%(36/120),Z-N法阳性检出率为14.2%(17/120),改良IK抗酸染色法阳性检出率为25.8%(27/120),MTB-L抗酸染色法阳性检出率为28.3%(34/120)。以荧光定量PCR法作为金标准,MTB-L抗酸染色法检测特异度为96.4%,灵敏度为86.1%,准确度为93.3%;与荧光定量PCR法结果比较,Z-N法检测Kappa值为0.509,改良IK抗酸染色法Kappa值为0.731,MTB-L抗酸染色法Kappa值为0.839,MTB-L抗酸染色法与荧光定量PCR法一致性最好。结论 MTB-L抗酸染色法检测MTB-L的特异度、准确度较高,与荧光定量PCR法一致性最好,且操作简单,对MTB-L早期诊断具有重要的参考价值。

PCR-荧光探针法与RNA恒温扩增法对肺结核诊断的价值

目的探讨RNA恒温扩增法和PCR-荧光探针法在肺结核临床诊断中的价值及意义。方法以403例临床病原学确诊的肺结核病人为观察组,50例无肺部疾病病人为对照组,分别采用齐-尼痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、PCR-荧光探针法和RNA恒温扩增法检测痰标本中结核分枝杆菌,并将检测结果进行对比分析。结果齐-尼痰涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、PCR-荧光探针法和RNA恒温扩增法检测痰标本中结核分枝杆菌的灵敏度分别为37.5%、65.2%、68.7%、60.8%;特异度分别为100%、100%、98%、100%。结论PCR-荧光探针法与RNA恒温扩增法检测结核分枝杆菌快速、敏感、可靠,适合作为肺结核实验室辅助临床诊断的有效检测方法,可为肺结核的早期诊断和早期治疗提供重要依据。

安徽省局部地区人群隐孢子虫感染情况调查

目的了解安徽省人群隐孢子虫感染状况,探讨感染的危险因素,为隐孢子虫病防治提供科学依据。方法选择安徽省潜山县和灵璧县为调查点,于2014年9月-2015年1月,采用改良抗酸染色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法,分别检查调查对象粪便中隐孢子虫卵囊和血清中隐孢子虫特异性抗体Ig G,以确定隐孢子虫感染情况;同时对调查对象进行问卷调查,了解隐孢子虫感染的危险因素。结果共调查668人,其中病原学检查635人,阳性15人,阳性率为2.36%;血清学检查642人,阳性140人,阳性率为21.81%;有628人同时进行了病原学和血清学检查,两种检查方法均为阳性者12人(潜山县4人,灵璧县8人),阳性率为1.94%。潜山县与灵璧县人群隐孢子虫感染率分别为1.24%(4/322)和2.71%(8/295),差异无统计学意义(P>0.05)。单因素χ2分析发现,隐孢子虫感染率在儿童及腹泻人群较高;多因素Logistics回归分析表明,隐孢子虫感染率在饲养家禽人群及腹泻人群较高。结论安徽省局部地区人群隐孢子虫血清抗体阳性率较高,提示既往感染较为严重。人群隐孢子虫感染率与低龄、腹泻和家庭饲养家禽有关,在今后防治工作中值得关注。

五种检测方法在结核病诊断中的应用评价

目的评估涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF法、结核分枝杆菌RNA荧光定量PCR法、结核分枝杆菌DNA荧光定量PCR法在结核病诊断中的应用价值。方法对374例疑似肺结核病患者、120例肺结核患者及70例非结核病患者的痰液标本分别用涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNAPCR、TB-DNA PCR进行结核分枝杆菌检测,将检测结果进行分析和比较。结果涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法、XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测374例疑似肺结核病患者痰液标本阳性率分别为6.68%、13.37%、20.05%、19.25%、22.73%,其中XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR检测阳性率差异无统计学意义(χ2=1.51,P>0.05),TB-RNA PCR阳性率高于改良罗氏培养基培养法(χ2=4.75,P<0.05),改良罗氏培养基培养法高于涂片抗酸染色法(χ2=9.28,P<0.05)。五种方法检测120例肺结核患者及70例非结核病患者的敏感性分别为20.83%、35.00%、50.83%、47.50%、54.17%,特异性分别为100.00%、100.00%、98.57%、100.00%、98.57%。结论 XPert MTB/RIF、TB-RNA PCR、TB-DNA PCR与涂片抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法相比,具有敏感、快速、可定量的特点,可以作为结核病辅助诊断的有效检测方法。