Extraction optimization of insecticidal compounds from Lysurus mokusin by response surface methodology

We optimized the extraction process of Lysurus mokusin(L.)Fr.insecticidal compound(LMIC)using response surface methodology with ultrasonic extraction(UE).The surface morphologies of maceration extract(ME)and UE residues were compared by scanning electron microscopy,and then the activity of LMIC on Lymantria dispar(Asian gypsy moths)larvae was determined.Results showed that the optimal condition of UE was followed by 80 min of extraction time,60%of ethanol concentration and 80 mL g^-1 of liquid–solid ratio.The surface morphologies of UE residue were looser and rougher than ME residue.The corrected mortalities of LMIC on L.dispar larvae was 59.77%.This result indicated that L.mokusin was a good candidate as pesticide for pest management.

五棱散尾鬼笔——陕西省新发现简报

在陕西省杜陵国家遗址公园发现1种鬼笔目真菌,经鉴定确认为五棱散尾鬼笔Lysurus mokusin(Cibot:Pers.)Fr.。查阅相关文献发现,此前该菌在陕西省内未有报道和文献记载,因此,本次调查发现增加了该菌在我国种质资源分布的地区。

基于ITS中华散尾鬼笔的分类及抑菌活性研究

为了研究中华散尾鬼笔的分类地位和抑菌活性,试验采用PCR产物直接测序的方法,将获得的中华散尾鬼笔内部转录间隔区(ITS)序列在NCBI上进行序列比对,并根据比对结果绘制N-J系统发育树;分别以正丁醇、乙醚、乙酸乙酯、石油醚、氯仿作为提取溶剂萃取中华散尾鬼笔的培养液,采用生长速率法进行抑菌活性试验并计算抑菌率。结果表明:中华散尾鬼笔属于笼头菌科,其亲缘关系更接近竹荪属真菌;培养液对尖孢镰刀菌、灰葡萄孢菌和拟盘多毛孢菌的抑菌率分别为47.53%、59.82%及50.26%;正丁醇的提取效果最好,其他4种提取溶剂的效果差异不明显;以正丁醇作为提取溶剂获得的粗提物对上述3种林木病原菌的抑菌率分别为45.35%、37.08%及15.58%。说明中华散尾鬼笔可作为新的研究对象用于微生物源农药的开发。

中华散尾鬼笔的液体培养条件优化及生物安全性测定

以中华散尾鬼笔为对象,以菌丝生物量为指标,通过单因素试验筛选了接种量、pH、温度、装液量等4种非营养因子对中华散尾鬼笔液体发酵的影响,优化了培养条件,并测定了中华散尾鬼笔正丁醇提取物水溶液对绿豆的他感作用及对斑马鱼的急性毒性。结果表明,中华散尾鬼笔液体发酵的优化培养条件为:培养温度25℃、pH中性、接种菌饼3片、装液量220 mL·瓶-1,在此培养条件下,中华散尾鬼笔菌丝干重为0.66 g,较未优化之前增加了1倍。同时,中华散尾鬼笔正丁醇提取物水溶液对绿豆种子的发芽和胚轴芽的伸长均产生抑制效果,且随着提取物浓度的升高,绿豆发芽率和胚轴芽长均趋于下降,抑芽率显著升高(P<0.05);对斑马鱼的急性毒性试验结果表明,中华散尾鬼笔正丁醇提取物水溶液对斑马鱼96 h的致死中浓度LC 50为426.54 mg·L-1,属于低毒。研究为中华散尾鬼笔的进一步研究和利用提供了参考和依据,为其作为微生物源农药提供了可能。

中华散尾鬼笔提取工艺响应面优化及其粗提物毒力测定

采用超声提取法,以超声时间、乙醇浓度、提取温度、料液比、超声功率5因素进行单因素提取试验,而后选择对中华散尾鬼笔粗提物提取率有显著影响的3因素进行响应面分析,优化出中华散尾鬼笔粗提物的最佳提取工艺。试验结果表明:在料液比1∶80、乙醇体积分数60%、超声时间80 min时,提取率最高,为31.21%;以舞毒蛾3龄幼虫为供试昆虫,用中华散尾鬼笔粗提物进行毒力测定,试验结果表明,中华散尾鬼笔粗提物对舞毒蛾3龄幼虫的校正死亡率为59.77%。

中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌的作用机制

为探究中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌的抑制作用及抑菌机理,通过抑菌试验、酶活试验、电导率试验及菌丝微观结构观测,确定中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌的抑制作用,分析提取物对相关酶活性、培养液电导率和菌丝结构变化的影响。结果表明:中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌菌丝生长的EC50为4. 428 mg/m L;提取物对灰葡萄孢霉菌的过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)、果胶酶(Pectinase)、纤维素酶(CL)活性均表现出抑制效果,其中第2天的SOD和PPO活性抑制率分别可达到65. 48%和53. 86%,POD的抑制效果在第4天达到峰值,抑制率为68. 65%;提取物对灰葡萄孢霉菌菌丝形态产生显著影响,导致菌丝生长异常、形态干瘪、菌丝分隔处出现内凹,并伴有菌丝破裂的现象产生。提取物处理的菌体细胞膜透性增强,致各时间点培养液电导率显著高于对照,其中提取物处理的第2天电导率为1 230. 579μS/cm,为对照电导率的1. 3倍。这表明中华散尾鬼笔提取物对灰葡萄孢霉菌有抑制作用,且提取物能抑制与菌丝生长及致病相关的几种酶的活性,影响细胞膜渗透性及菌丝体形态。