0．5mol／L次氯酸钠法测定桑蚕丝／氨纶混纺织物纤维含量

为了分析桑蚕丝／氨纶混纺织物中氨纶含量的不确定性，提出了利用桑蚕丝、氨纶在次氯酸钠中溶解性能不同的原理，用次氯酸钠溶解已知混纺织物中桑蚕丝的方法。为了分析该方法的验证过程，通过与现有方法的比较探讨该方法的可行性与可操作性；验证了次氯酸钠法可代替现有方法，使桑蚕丝／氨纶混纺织物中氨纶含量具有可确定性；试验结果表明，氨纶在0．5mol／L次氯酸钠溶液中的d=1．OO，数值的绝对误差为0～0．42%，绝对误差小于1％，在标准规定的允差范围内。该试验表明，次氯酸钠法可以代替二甲基甲酰胺法、二甲基乙酰胺法和拆分法；采用次氯酸钠法快捷、方便，试验结果完全符合GB／T29862对纤维含量偏差的要求。该方法可作为一种对桑蚕丝／氨纶混纺产品进行定量化学分析的新方法。

HPLC法测定rhNDPK-a酶活性

目的:研究不同反应体系对NDPK酶活性测定结果的影响。方法:分别以(UTP+ADP)和(ATP+UDP)作为反应底物,加入自制的rhNDPK-A蛋白,以100mmol/L磷酸二氢钾、20mmol/L乙酸、5mmol/L四丁基溴化铵,pH 5 0作为流动相A液, A液+25%乙腈作为B液,等梯度混合,C18柱,柱温25℃,流速1 0ml/min,检测波长254nm。结果:以(UTP+ADP)和(ATP+UDP)作为反应底物测定的酶比活分别为210U/mg、860U/mg。结论:不同反应体系对HPLC法测定NDPK酶活性有显著差异。

高效液相色谱法测定色甘酸钠地塞米松滴鼻液含量

目的建立一种HPLC法同时测定地塞米松色甘酸钠滴鼻液中磷酸地塞米松和色甘酸钠含量.方法采用Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相:A:缓冲液(0.01 mol/L磷酸二氢钾,pH为4.7),B:甲醇,0～5 min:A-B(42:58),6 min后A-B(30:70),流速:1 mL/min,柱温:25℃,检测波长:240 nm.外标法计算含量.结果在该色谱条件下,磷酸地塞米松和色甘酸钠线性良好(r＞0.999,n=6),加样回收率为98%～102.55%(n=3),RSD＜2.0%(n=3).样品在8 h内稳定.测得样品含量合格,在97%～103%.结论经方法学实验验证,该方法简便,快速,结果准确,可靠,重现性好.

HPLC检测白血病细胞系CYP3A5活性方法的建立与应用

目的建立白血病(AL)细胞系CYP3A5活性检测方法,研究化疗药对其活性的调控。方法HPLC法检测药物干预后AL细胞系CYP3A5活性。结果以1×106细胞、氢化考的松终浓度100μmol/L、孵育24h为AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性检测的孵育条件。K562细胞CYP3A5活性显著高于HL-60、NB4和Jurkat细胞。柔红霉素作用24h后K562细胞CYP3A5活性增高,48h后活性显著增高;而NB4与Jurkat细胞在其作用后活性无改变。地塞米松作用24h后Jurkat细胞CYP3A5活性显著增高,48h后活性又显著增高。全反式维甲酸作用24h后NB4细胞CYP3A5活性显著增高,72h后活性又显著增高。结论HPLC检测AL细胞体外培养条件下氢化考的松6β-羟化活性方法的建立可用于研究AL细胞CYP3A5活性。柔红霉素、地塞米松、全反式维甲酸的应用可诱导某些AL细胞株CYP3A5活性。

HPLC法测定注射用络通冻干粉中芍药苷的含量

目的建立了注射用络通冻干粉中芍药苷含量测定的H PLC法。方法用W ater的C18反相色谱柱(4.6m m×150m m,5μm),以甲醇:0.03m ol/L的磷酸二氢钾:5%的庚烷磺酸钠(60:30:10)为流动相,流速为1.0m L·m in-1,用二极管阵列检测器检测,检测波长230nm,柱温30℃。结果方法的线性范围为:87.8～1756μg·m L-1(r=0.9997),精密度RSD为0.26%(n=7),重现性RSD为0.84%(n=5),芍药苷的平均回收率为99.19%,RSD为0.76%(n=6)。结论方法快速、简便,结果准确、可靠,可用于注射用络通冻干粉中芍药苷的含量测定。

嗜酸乳杆菌表层蛋白提取方法及影响因素的研究

对嗜酸乳杆菌S层蛋白的提取方法进行了改进.用酸性5mol/LLiCl法,中性5mol/LLiCl法和8mol/L尿素法提取嗜酸乳杆菌的表层蛋白,考马斯亮兰法测蛋白浓度,进行常规SDS-PAGE,用Gel-Pro软件进行数据分析,得出其中酸性5mol/LLiCl法提取表层蛋白百分含量最多.分析影响提取条件的因素,设置0、4、室温(25℃)3个温度梯度和10、15、20、25、30min5个时间梯度,进行常规SDS-PAGE,检测提取表层蛋白的效果.Sephadex G-100柱分离中性5mol/LLiCl法和8mol/L尿素法提取嗜酸乳杆菌的表层蛋白获得SA蛋白.酸性5mol/LLiCl法可用于分析各种表层蛋白;中性5mol/LLiCl法和8mol/L尿素法用于提取43kDa的SA蛋白.25℃处理15min得到最大量的表层蛋白.

山豆根中苦参碱的毛细管电泳高频电导法测定

目的:采用毛细管电泳高频电导法测定山豆根中苦参碱的含量.方法:以2 mmol/L磷酸盐缓冲体系(pH＝6.0)为分离介质,分离电压18.0 KV,利用高频非接触式电导检测器检测.结果:苦参碱的线性范围20～1000 μg/ml(r＝0.9993),加样回收率98.88%～101.4%,日内和日间的相对标准差均小于2%.结论:该法简便、快速、重复性好.

人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)抑制小鼠肝癌的血管生成和肿瘤生长

【目的】体内、体外实验观察人纤维蛋白溶酶原kringle5(K5)对肝癌血管生成和肿瘤生长的影响。【方法】大肠杆菌中表达,组氨酸结合柱亲和层析、纯化获得K5蛋白,SDS-PAGE和Westernblot方法鉴定K5蛋白的表达;MTT法分析K5对牛视网膜毛细血管内皮细胞(BRCEC)和肝癌细胞株Bel-7402、HepG2增殖的影响;建立皮下种植肝癌鼠模型,瘤内注射K5,检测抑瘤率及肝癌组织微血管密度(MVD)。【结果】SDS-PAGE及Westernblot鉴定获得K5纯化蛋白;K5特异性地抑制BRCEC的增殖,IC50=160nmol/L,而对肝癌细胞株Bel-7402、HepG2的增殖无抑制作用;K5显著抑制小鼠肝癌生长,治疗组肝癌组织MVD明显低于对照组。【结论】K5抑制移植性小鼠肝癌血管生成和肿瘤生长,特异性抑制血管内皮细胞的增殖可能是K5抑制肝癌血管生成的主要机制。K5具有治疗肝癌的潜在临床价值。

紫杉醇诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的 研究紫杉醇对人宫颈癌Hela细胞的作用。方法 将紫杉醇处理Hela细胞后,用MTT法测定宫颈癌Hela细胞的生长抑制率。光镜下观察细胞凋亡形态的改变。流式细胞仪和原位末端标记技术检测细胞周期及细胞凋亡率,流式细胞仪检测bcl- 2水平,TRAP法测定端粒酶活性的变化。结果 0 0 1～1μmol/L的紫杉醇能引起Hela细胞的凋亡。表现为Gz/M期阻滞,且呈时间依赖性及剂量依赖性。紫杉醇在诱导细胞凋亡的同时伴随端粒酶活性下调和bcl- 2表达水平下降。结论 紫杉醇诱导宫颈癌Hela细胞凋亡,并抑制端粒酶活性,bcl- 2参与了紫杉醇诱导的宫颈癌细胞凋亡过程中端粒酶活性的调控。这一机制将为临床治疗提供理论依据。

Isogoniotriol衍生物对肿瘤细胞DNA的损伤

目的:研究Isogoniotriol衍生物对肿瘤细胞DNA的损伤作用。方法:用Isogoniotriol衍生物处理体外培养白血病K562细胞,MTT法测定IC50,应用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞核DNA的损伤。结果:Isogoniotriol衍生物处理K562细胞IC50为4×10-5mol/L,不同浓度的Isogoniotriol衍生物处理细胞后可见彗星状拖尾。结论:Isogoniotriol衍生物可造成肿瘤细胞DNA损伤,抑制肿瘤细胞生长。

砷与氟单独及联合染毒对SGC-7901细胞基因组DNA损伤作用的SCGE法观察

目的 观察砷、氟及砷氟联合染毒对SGC 790 1细胞基因组DNA的损伤作用及特点。方法 砷、氟染毒剂量 10 μmol/L ,染毒后 4h应用单细胞凝胶电泳技术结合彗星图像分析系统检测DNA损伤。 结果 ①NaAsO2 组尾长和尾动量明显大于对照组 ,NaF组拖尾率显著高于对照组 ;②氟砷联合染毒组拖尾率、尾DNA含量、尾长和尾动量与对照组差异均有显著意义 ,但氟与砷引起的DNA损伤作用之间没有观察到交互作用。结论 NaAsO2 与NaF均可引起DNA损伤 ,但它们的损伤机理可能是不同的 ;

中医补肾法提高男性血清睾酮水平的研究——基于7个临床对照试验的Meta分析

目的中医补肾法对男性血清睾酮水平影响的综合、定量分析。方法对1981年至2004年12月以前公开发表的、研究中医补肾法对男性血清睾酮水平影响的临床对照试验进行检索,并对符合纳入条件的文献进行Meta分析。选择血清睾酮浓度的组间差值为效应量,首先进行异质性检验,效应量的合并采用WMD法。结果入选文献共7篇。结果显示通过补肾治疗相对于对照组可以提高血清睾酮水平3.81nmol/L,且具有显著统计学意义。结论本研究结果显示中医补肾法相对于对照组可以提高男性血清睾酮水平,95%CI为(2.80,4.81),并具有显著统计学意义,可以认为中医药补肾理论的一个重要作用靶点是男性的睾酮水平。

固相萃取高效液相色谱法测定人血浆中齐多夫定浓度

目的 建立测定人血浆中齐多夫定浓度的固相萃取反相高效液相色谱测定法,为临床齐多夫定的药物浓度测定和药动学研究提供科学的分析技术。方法 采用ZORBAXODS色谱柱,以乙腈:2 0mmol/L的KH2 PO4缓冲液(含10mmol/L辛烷磺酸钠,pH 3.0 ) =2 5∶75为流动相,阿普比妥为内标,流速1ml/min ,检测波长2 6 5nm ,进样量:2 0 μl;血浆样品经固相萃取后直接进样。结果 该法线性范围为5 0～2 0 0 0ng/ml,回归方程为Y =196 .2X +12 .2 4 ,r=0 .9996 (n =6 ) ,最低检测浓度为12ng/ml,日内、日间相对标准差(Relativestandarddeviation ,RSD)均小于5 .0 %。结论 本法简便灵敏,专一性好。

改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。

木犀草素对人白血病HL-60细胞内蛋白激酶C的抑制作用

目的 观察木犀草素对HL- 60细胞内蛋白激酶C活性的影响。方法 采用台盼蓝拒染法,在不同条件下测定细胞增殖的抑制率。PKC活性通过测定转移到CK2 底物上的[γ 32P]ATP的32P的放射性活度来检测。结果 木犀草素能够显著地抑制HL- 60细胞内PKC的活性并呈剂量依赖性关系,其IC50为2.38μmol/L,作用效果强于阳性对照槲皮素(IC50=2.54μmol/L)。结论 木犀草素作为一种细胞内的PKC抑制剂具有潜在的抗肿瘤临床应用价值。

阳离子表面活性剂敏化的极谱催化波法测定螺内酯

目的:建立螺内酯含量测定的新方法。方法:应用阳离子表面活性剂CTMAB增敏的极谱催化波法。结果:在包含1 0 0mmol/LKIO3和8 0×1 0 - 8mol/LCTMAB的B -R缓冲液(pH =9 0 )条件下,螺内酯一阶导数峰高与其浓度在0 . 0 1～6 . 0 0 μmol/L范围内成线性,线性方程为Y =1 0 . 37(mm) +6 5 . 9X (r=0 .9997)。日内催化波峰高的精密度为2 . 6 %,平均回收率为1 0 1 3%。结论:该方法灵敏度高,操作简便,准确度好,可用于螺内酯片剂中螺内酯含量的测定。

银胶菊内酯对PGCL_3细胞uPA活性和表达的影响

目的:研究银胶菊内酯对人肺癌细胞PGCL_3尿酶型纤溶酶原激沾物(uPA)蛋白表达及活性的影响, 探讨其抗肿瘤的作用机制。方法:MTT法检测银胶菊内酯对PGCL_3细胞的增殖抑制作用;发色底物法检测银胶菊内酯对PGCL_3细胞分泌的uPA活性的影响;Western blot法检测银胶菊内酯对uPA表达的影响。结果:5-160 μmol/L的银胶菊内酯作用PGCL_3细胞24 h后,明显抑制PGCL_3细胞的增殖,IC_(50)值为17.6μmol/L;5、10、20μmol/ L银胶菊内酯明显降低PGCL_3细胞分泌的uPA活性;银胶菊内酯还能降低PGCL_3细胞uPA蛋白表达。结论:银胶菊内酯抗肿瘤活性与uPA蛋白表达及活性有关。

盐酸法定量化学分析羊毛/黏纤混纺产品纤维含量探讨

为了丰富定量化学分析羊毛/黏纤混纺产品纤维含量的试验方法,提高测试结果的准确性,探讨了用盐酸法定量化学分析羊毛/黏纤混纺产品纤维含量的可行性,并比对了1 mol/L次氯酸钠法与盐酸法定量化学分析羊毛/黏纤混纺产品纤维含量的试验结果。该试验结果表明,采用盐酸法定量化学分析羊毛/黏纤混纺产品的纤维含量时,试验结果最大误差为0.7%,误差在1%以内,符合GB/T 29862-2013中有关所得纤维含量偏差的要求。该试验表明,盐酸法用于定量化学分析羊毛/黏纤混纺产品的纤维含量是可行与可靠的。