泽泻提取物Alisol Monoacetate A和B对HepG2细胞株胆固醇代谢的影响

目的:考察泽泻有效成分Alisol Monoacetate A和B对人类肝癌细胞株(HepG2)胆固醇合成与代谢的影响。方法:以HepG2细胞为模型,Lipitor为阳性对照,加入不同浓度的Alisol Monoacetate A和B,培养24h后分别收集与测定培养液及细胞内的胆固醇含量。结果:Alisol Monoacetate A和B在10μM、20μM浓度时开始出现10%左右的细胞毒性,但线粒体代谢活性却增强约50%。而当浓度超过50μM时细胞毒性显著增强达70%以上。随着Alisol Monoacetate A和B浓度的增加(0、3、10、20μM),细胞内胆固醇含量也显著升高,分别为24.4、26.7、32.3、38.3μg/mg蛋白质,存在正量效关系;但培养液内的胆固醇含量无明显不同。结论:Alisol Monoac-etate A和B可能具有增强细胞的线粒体代谢活性而促进HepG2合成胆固醇的作用,其机制有待进一步研究。

豚鼠耳蜗外毛细胞的一氧化氮定量分析

目的:为了观察一氧化氮底物左旋精氨酸(L-arginie)和一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)对豚鼠耳蜗外毛细胞一氧化氮的影响。方法:应用新的荧光染料4,5二氨基乙酰乙酸荧光素(4,5-diaminofluorescein diacetate,DAF-2DA)测定豚鼠耳蜗外毛细胞内一氧化氮的含量。结果:发现加左旋精氨酸后外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值升高。而加左旋硝基精氨酸甲酯后,外毛细胞的荧光灰度值比正常外毛细胞的灰度值降低。结论:进一步证明豚鼠耳蜗外毛细胞内存在一氧化氮。