微塑料联合MEHP抑制SIRT3/SOD2诱导肝细胞线粒体损伤和氧化应激

微塑料(microplastics,MPs)常与多种塑料相关产品共同暴露损害人体健康。邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)是常见的塑化剂,其主要代谢物为邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(mono-2-ethylhexyl phthalate,MEHP)。MPs与MEHP进入机体后均在肝脏蓄积,因此研究MPs与MEHP的联合暴露对肝脏的毒性效应及潜在机制具有重要意义。本研究采用聚苯乙烯微塑料(polystyrene microplastics,PS-MPs)和MEHP单独及二者联合处理HepG2细胞,检测细胞活力、活性氧水平、线粒体膜电位、COXⅠ、COXⅢ、SIRT3和SOD2的蛋白表达水平。结果表明,PS-MPs和MEHP单独暴露均引起活性氧生成增加、线粒体膜电位降低。PS-MPs单独暴露也导致COXⅠ与COXⅢ蛋白表达水平降低。两者联合暴露时上述有害作用更为显著,为协同效应。进一步的分子机制研究表明,PS-MPs下调了SIRT3和SOD2蛋白表达,MEHP下调了SIRT3蛋白表达,而PS-MPs和MEHP联合暴露对SIRT3和SOD2的蛋白表达的影响表现为协同效应。综上所述,PS-MPs和MEHP联合暴露导致HepG2细胞氧化应激和线粒体损伤,其分子机制与抑制SIRT3/SOD2信号通路有关。

MEHP对正常肝细胞脂肪酸分解代谢相关基因的影响

目的 探讨邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯(mono-(2-ethylhexyl) phthalate,MEHP)对正常肝细胞HL-7702脂肪酸分解代谢相关基因的影响。方法 将HL-7702细胞分别暴露于不同浓度MEHP(0,0.01,1,10,100μmol/L)和油酸(1 mmol/L OA)24 h以及48 h,未暴露MEHP的细胞作为阴性对照组,用MTT实验检测细胞活性,qRT-PCR法检测染毒后细胞内miRNA-34a的转录水平和细胞内脂肪酸分解代谢相关基因(SIRT1、PPARα和CPT1A)表达的转录水平。结果 与阴性对照组相比,油酸组染毒24 h细胞存活率降低(P<0.05),不同浓度MEHP组染毒24 h和48 h细胞存活率没有明显改变(P>0.05)。与阴性对照组相比,染毒24 h,10,100μmol/LMEHP组和油酸组miRNA-34a表达水平明显降低(P<0.05);染毒48 h,0.01μmol/L MEHP组miRNA-34a表达水平明显升高(P<0.05)。与阴性对照组相比,0.01,1,10,100μmol/L MEHP组和油酸组细胞内SIRT1、PPARα和CPT1A mRNA表达水平均无明显变化。结论 不同浓度MEHP均未对肝细胞的细胞活性产生影响,MEHP可降低miRNA-34a表达水平,但是并不能引起脂肪酸分解代谢相关基因mRNA水平改变。

DEHP、MEHP对小鼠胚胎干细胞细胞毒性的研究

目的分析不同浓度的邻苯二甲酸二乙基己酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]及其活性代谢产物邻苯二甲酸单乙基己基酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)对小鼠胚胎干细胞细胞毒性、增殖的影响。方法用含有不同浓度DEHP(1 000、100、10、1、0.1、0.01μmol/L)、MEHP(1 000、100、10、1、0.1、0.01μmol/L)的培养液,对胚胎干细胞进行培养,用CCK-8法检测细胞活性。结果染毒96 h后,高剂量(1 000μmol/L)DEHP、MEHP均对胚胎干细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),且染毒剂量与细胞抑制率之间存在明显的正相关性,相关系数分别为0.51、0.62(P<0.05)。结论在一定浓度范围内,DEHP及MEHP均对小鼠ESC具有细胞毒性,且有浓度依赖性。

卵巢颗粒细胞体外培养体系的建立及DEHP、MEHP对其增殖功能的影响

目的：建立卵巢颗粒细胞的原代培养体系，探讨邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）及其活性中间产物邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯（MEHP）对原代培养的卵巢颗粒细胞增殖作用的影响。方法：选用21～25日龄未成年雌性Wistar大鼠，皮下注射孕马血清（PMSG），48h后断头处死，收集卵巢颗粒细胞，在DMEM—F12培养液中培养。卵巢颗粒细胞原代培养体系建立成功后分别将不同剂量的DEHP（1μM、5μM、25μM、50μM、100μM）和MEHP（1μM、5μM、25μM、50μM、100μM）作用细胞24h及48h，以CCK-8法检测细胞增殖情况。结果：DEHP作用卵巢颗粒细胞24h时，1μM DEHP和100μM DEHP均能明显抑制卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（P〈0．05）。DEHP作用卵巢颗粒细胞48h时，1μM DEHP和100μMDEHP均能明显促进卵巢颗粒细胞增殖，差异有统计学意义（P〈0.05）。而MEHP作用卵巢颗粒细胞24h及48h，MEHP各染毒剂量组均无统计学差异（P〉0．05）。结论：DEHP能促进卵巢颗粒细胞增殖，并且和作用时间长短有关。MEHP在观察剂量下，尚未显示有促进卵巢颗粒细胞增殖的作用。

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)和邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)长期暴露对海洋青鳉(Oryzias melastigma)内分泌干扰效应的评价

为探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)和邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)长期暴露对海水生物的内分泌干扰效应及机制,将孵化后1周的海洋青鳉(Oryzias melastigma)分别暴露于DEHP(0.1 mg·L-1和0.5 mg·L-1)和MEHP(0.1 mg·L-1和0.5 mg·L-1)6个月。结果显示:DEHP显著增加了雌性和雄性海洋青鳉的肝指数,而MEHP只在高剂量时显著增加雄性青鳉的肝指数。对于雌性青鳉,DEHP暴露后肝脏雌激素相关基因ERα、ERβ、ERγ、VTG1、VTG2、ChgH和ChgL的表达水平显著上调,而对于雄性青鳉,DEHP暴露后,只有肝脏ERβ的表达水平显著上调。相比之下,MEHP暴露对雌性和雄性青鳉肝VTG和Chg基因表达无显著影响。DEHP激活了雌性和雄性青鳉的肝过氧化物增殖激活受体PPARα和PPARγ,而MEHP只在低剂量时上调了雄性青鳉PPARγ的表达。在雌性和雄性青鳉体内,VTG和Chg的表达与ERα和ERγ的表达显著相关,并且ER与PPAR也显著相关。研究表明,DEHP长期暴露可通过激活肝性激素受体调控肝雌激素响应基因(VTG和Chg)和过氧化物增殖激活受体(PPARα和PPARγ)的表达而对海洋青鳉产生内分泌干扰效应,并且显示出性别特异性。MEHP对海洋青鳉的内分泌干扰效应弱于DEHP。

DEHP和MEHP对H295R细胞类固醇激素合成基因表达的影响

为探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯(mono-(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP)对H295R细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响,本实验将H295R细胞分别暴露于DEHP(0、1、10、100、1 000μmol·L-1)和MEHP(0、1、10、100、1 000μmol·L-1)24 h,用MTT法检测细胞活性,并应用荧光定量PCR法分析细胞类固醇激素合成过程中关键酶的基因表达水平。结果显示,1 000μmol·L-1DEHP和MEHP对H295R细胞染毒24 h显著降低H295R细胞活力,所以本研究采用了较低的染毒浓度(0、1、10和100μmol·L-1)对H295R细胞染毒24 h来评估DEHP和MEHP对H295R细胞类固醇激素合成通路的影响。1、10和100μmol·L-1DEHP显著增加醛固酮合成酶CYP11B2的基因表达水平。10μmol·L-1DEHP显著上调了3-β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD2)的基因表达水平。1、10和100μmol·L-1MEHP显著下调了3-β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD1和3β-HSD2)、17β羟基类固醇脱氢酶17β-HSD4、17α羟化酶/17,20裂解酶CYP17和芳香酶CYP19a的基因表达水平。10和100μmol·L-1MEHP染毒H295R 24 h显著下调了CYP21和STAR的基因表达水平,然而,10和100μmol·L-1MEHP显著上调了CYP11B2的基因表达水平。100μmol·L-1MEHP显著下调了17β-HSD1的基因表达水平。上述研究结果表明,DEHP、MEHP都可不同程度影响H295R细胞类固醇激素合成过程中关键基因的表达。MEHP可以通过抑制STAR基因的表达,从而将影响胆固醇在细胞内的转运;并能显著性抑制类固醇激素合成过程中CYP17、CYP19a、3β-HSD1、3β-HSD2、17β-HSD1、17β-HSD4、CYP21基因的表达,最终将抑制H295R细胞中类固醇激素的合成。与DEHP相比,MEHP对H295R细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响较明显。

DEHP及其代谢产物MEHP对MLTC-1细胞凋亡和类固醇激素合成基因表达的影响

目的实验测评DEHP及其主要代谢产物MEHP暴露对MLTC-1细胞类固醇激素合成关键基因表达的影响。方法将MLTC-1分别暴露于DEHP(0,1,10,100,1 000μmol/L)和MEHP(0,1,10,100,1 000μmol/L)24 h,采用Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡,并应用荧光定量PCR法分析细胞类固醇激素合成过程中涉及关键酶的基因表达水平。结果凋亡实验结果显示DEHP(100和1 000μmol/L)和MEHP(10和1 000μmol/L)显著诱导MLTC-1细胞晚期凋亡的发生,1 000μmol/L DEHP和MEHP显著降低了MLTC-1活力。所以本研究采用了较低的染毒浓度(1,10和100μmol/L)对MLTC-1染毒24 h来评估DEHP和MEHP对MLTC-1类固醇合成通路的影响。荧光定量结果显示1μmol/L DEHP显著增加MLTC-1 CYP17A1基因表达水平,而100μmol/L DEHP显著抑制MLTC-1 CYP17A1、CYP11A1和SF-1基因表达水平。10μmol/L DEHP显著增加MLTC-1外CYP1A1基因表达水平。100μmol/L DEHP显著抑制MLTC-1黄体激素受体LHR基因表达水平。1μmol/L MEHP显著增加MLTC-1 3β-HSD基因表达水平。然而MEHP对类固醇激素合成过程中一些酶如STAR、CYP17A1、CYP11A1、重要调节因子胰岛素样激素3 INSL-3、SF-1、关键受体AR和LHR基因表达水平均无显著影响。结论 DEHP和MEHP诱导MLTC-1凋亡,DEHP和MEHP都可影响MLTC-1细胞类固醇激素合成过程中关键基因的表达,从而引起内分泌干扰。

邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡的作用研究

目的研究邻苯二甲酸单(2-乙基己基)酯(MEHP)是否诱导人卵巢颗粒细胞系KGN细胞铁死亡并影响其增殖。方法取对数增长期的人卵巢颗粒细胞系KGN细胞,给予不同浓度(0、100、200、400、800、1600μmol/L)MEHP处理24 h。通过普通光镜观察不同浓度MEHP处理后KGN细胞形态的改变;用CCK-8检测MEHP对细胞活力和增殖能力的影响;采用蛋白免疫印迹(WB)观察铁死亡相关蛋白(ACSL4、GPX4、SLC7A11、FTH1)在KGN细胞中的表达情况;使用细胞铁含量检测试剂盒、丙二醛(MDA)含量检测试剂盒、活性氧(ROS)荧光探针(DCFH-DA)及超氧化物阴离子荧光探针(DHE)分别检测对照组和400μmol/L MEHP处理组细胞的铁含量、MDA、ROS和超氧化物阴离子水平。结果(1)光镜观察显示,400μmol/L及以上MEHP处理使KGN细胞皱缩变圆,形态异常。(2)CCK-8结果显示400μmol/L及以上MEHP处理抑制细胞增殖,且具有剂量依赖性(P<0.05)。(3)100、200μmol/L MEHP处理组KGN细胞铁死亡相关蛋白表达无显著改变(P>0.05);400μmol/L MEHP处理组KGN中ACSL4蛋白表达水平显著增加(P<0.05),而GPX4、SLC7A11、FTH1蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。(4)400μmol/L MEHP处理使得KGN细胞的铁含量、MDA水平显著上升(P<0.05),细胞ROS、超氧化物阴离子荧光染色强度明显增加。结论MEHP诱导KGN细胞铁死亡,抑制细胞增殖能力,但MEHP诱导铁死亡的具体作用机制还需进一步探讨。

果酒中邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯检测方法研究

邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯是使用最广泛的增塑剂邻苯二甲酸二-2-乙基己基酯在体内的主要代谢产物,对人体有一定的危害.建立了一种邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯的气相色谱-质谱联用检测方法,并采用该方法对荔枝酒中邻苯二甲酸单-2-乙基己基酯的含量进行了检测.

邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯对MCF-7细胞DNA的氧化损伤

目的:研究邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(mono-2-ethylexyl phthalate,MEHP)对人乳腺癌MCF-7细胞DNA氧化损伤的作用。方法:分别用不同浓度的MEHP(6.25、12.5、25、50和100μmol/L)和二甲基亚砜(溶剂对照,<0.1%)处理MCF-7细胞12和24 h后用MTT比色法检测细胞的存活率。再分别于染毒后1.5、3、6、12和24 h,测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)和细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OHdG)水平。结果:与对照组比较,MEHP染毒12 h,6.25和12.5μmol/L组细胞的存活率显著增加(P<0.05)。MEHP染毒24 h,在较高浓度处理组(≥25μmol/L)的细胞存活率显著降低(P<0.05);各处理组细胞的SOD活性有所增加,细胞MDA水平、GSH-Px活性以及8-OHdG生成量无显著变化(P>0.05)。当MEHP染毒MCF-7细胞较短时间(1.5、3和6 h)时,各处理组MDA水平和8-OHdG生成量均显著升高(P<0.05),而SOD和GSH-Px活性则显著性降低(P<0.05)。结论:一定浓度MEHP作用在短时间内(1.5、3和6 h)可引起MCF-7细胞的氧化应激反应,并触发细胞DNA的氧化性损伤,具体调控机制有待深入研究。

应用物种敏感性分布评估DEHP对区域水生生态风险

应用物种敏感性分布(Species Sensitivity Distribution,SSD)方法构建了邻苯二甲酸二辛酯(Diethylhexyl phthalate,DEHP)对淡水生物的SSD曲线。在此基础上,计算了DEHP对不同生物的5%危害浓度(HC5),分析比较DEHP对不同生物类别的毒性敏感性差异及其特征,并针对在不同污染物质量浓度下,评价了我国不同地区水体DEHP对不同生物类别的生态风险。结果表明,不同物种对DEHP污染物的耐受范围存在差异,从小到大依次为无脊椎动物<脊椎动物<藻类,这可能与各物种的组别多样性有关,耐受范围越大,表示随着质量浓度增加,风险增大的趋势较缓慢;DEHP对不同物种的HC5从小到大依次为藻类<无脊椎动物<脊椎动物。HC5越小,DEHP对该物种的生态风险越大,其中藻类对DEHP最敏感,其HC5为41.01μg·L-1,从总体上看,DEHP对淡水生物系统的HC5为4 521.46μg·L-1;不同质量浓度值得出的PAF值的大小,反映不同类别生物的损害程度。质量浓度在1 000μg·L-1以下,全部物种的PAF值几乎为0;当质量浓度达1 000μg·L-1时,藻类和无脊椎动物开始受到影响;当质量浓度达10 000μg·L-1时,61.85%和88.04%的藻类和无脊椎动物分别受到影响,全部物种有64.34%受到影响。我国不同地区河流湖库水体水生态风险评估表明其水生态风险极低,PAF接近于0。

四种蔬菜对DBP和DEHP及其代谢物的吸收累积研究

以不同浓度DBP和DEHP处理的土壤对青菜、菠菜、莴苣和萝卜进行盆栽实验,采用加速溶剂萃取,Qu ECh ERS方法和硅烷衍生化对土壤和蔬菜样品进行前处理,结合气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)检测技术,分析了4种蔬菜中DBP、DEHP及其单酯代谢物MBP、MEHP从土壤中吸收的残留量分布规律和富集系数。结果表明,生长在高、低两个不同浓度DBP和DEHP土壤中的4种蔬菜都有DBP、DEHP及其代谢物MBP和MEHP的检出。萝卜中DBP和DEHP残留总量(Σ2PAEs)及其代谢物残留总量均明显高于其他3种蔬菜。4种蔬菜对土壤中的DEHP的生物富集因子BCF值都大于1,有明显的富集效应;而对于土壤中DBP有富集效应的则只有萝卜,其他3种蔬菜对DBP的BCF值都远小于1。相关研究结果表明,土壤中的DBP、DEHP能被蔬菜产品吸收富集,并且在体内代谢出毒性比母体更高的单酯产物。

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯和邻苯二甲酸单乙基己基酯对幼年期及青年期海洋青鳉(Oryzias melastigma)的内分泌干扰效应

本研究从邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)对幼鱼期及青年期海洋青鳉(Oryzias melastigma)的生殖发育毒性效应出发,从雌激素受体(ER)、过氧化物增殖激活受体(PPAR)及芳香烃受体(AhR)通路探讨DEHP和MEHP致毒机制.本实验将孵化后1周的幼鱼分别暴露于溶剂对照、低浓度DEHP(0.1 mg·L-1)、高浓度DEHP(0.5 mg·L-1)、低浓度MEHP(0.1 mg·L-1)和高浓度MEHP(0.5 mg·L-1)23 d、53 d,组织病理学结果显示,DEHP和MEHP导致雌性青鳉肝损伤,表现为肝糖原降低,肝细胞质水肿变性;DEHP和MEHP促进了性成熟,表现为促进雌性青鳉卵巢中卵细胞的发育.荧光定量PCR结果显示,DEHP和MEHP显著影响了ER、PPAR及AhR通路,并且对青年期的影响强于幼鱼期,DEHP对ER、PPAR及AhR通路的影响较MEHP强.所以DEHP及MEHP可能通过ER、PPAR和AhR通路影响了肝脏发育,造成了肝损伤,促进雌性青鳉卵巢发育,对ER、PPAR和AhR通路影响显示出发育阶段特异性.

邻苯二甲酸酯宫内暴露对子代小鼠致肥作用的研究

目的:研究围产期宫内暴露邻苯二甲酸酯(MEHP)对子代小鼠肥胖的程序化作用。方法:不同剂量MEHP(0.05、0.25、0.5mg/kg体重)灌胃处理孕鼠做为低中高剂量组,等体积橄榄油灌胃处理的孕鼠做为对照组。处理周期为孕鼠妊娠第12天直至新生鼠出生后第7天。每周监测仔鼠体重直至第8周,并检测8周龄仔鼠的肝重、脂肪垫质量、血脂和血糖水平。结果:3组剂量MEHP宫内暴露均引起新生仔鼠体重增加(P<0.001);成年后(8周龄)雌性仔鼠体重接近对照组,而低剂量组成年雄性仔鼠体重明显高于对照组(P<0.01),附睾和肾周脂肪垫质量明显增加(P<0.001和P<0.01),血清总胆固醇、甘油三酯和血糖水平明显上升(P<0.01、P<0.05、P<0.001)。中高剂量对成年雄性仔鼠的体重、体脂组成、血脂和血糖水平无明显影响。结论:MEHP可以增加子代雄鼠肥胖发生风险,它可能作为一种潜在的化学诱导因子诱发肥胖及相关疾病发生。

DEHP及MEHP对小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响

目的探讨邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)及其代谢产物邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯(MEHP)对小鼠睾丸间质细胞凋亡的影响。方法用不同浓度的DEHP(0、1、10、100μmol/L)及MEHP(0、1、10、100μmol/L)分别处理小鼠睾丸间质细胞48h,应用流式细胞仪AnnexinV FITC-PI双染法分析各组细胞凋亡情况。结果100μmol/L DEHP组及10,100μmol/L MEHP处理组与0μmol/L组比较,凋亡细胞比例明显增加(P<0.05);活细胞比例明显减少(P<0.05);10、100μmol/L MEHP处理组与0μmol/L组比较,继发坏死细胞比例明显增加(P<0.05)。结论一定浓度的DEHP及MEHP可诱导小鼠睾丸间质细胞早期凋亡。

MEHP对CHO细胞凋亡基因和癌基因表达水平的影响

目的探讨邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)对中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)的细胞毒性和对凋亡基因和癌基因表达水平的影响。方法采用4个不同剂量的MEHP对CHO细胞染毒24 h后,采用荧光定量PCR检测4个凋亡基因Bcl-2、caspase-3、caspase-9,Bax及癌基因p53表达水平的改变。结果 0.5 mmol/L MEHP染毒时caspase-3、caspase-9、Bax表达水平较对照组显著增加,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);凋亡基因Bcl-2表达水平在4个剂量组均比对照组显著降低(P<0.05或P<0.01),在0.25与0.5 mmol/L MEHP作用下,Bax与Bcl-2比值显著降低(P<0.05或P<0.01),p53在0.25和0.5 mmol/L MEHP浓度下表达下降。结论 MEHP可通过激活线粒体caspase凋亡信号通路引起CHO细胞凋亡,同时可引起抑癌基因表达水平下降。

MEHP对胚胎期海水青鳉(Oryzias melastigma)的内分泌干扰效应

为探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)的代谢产物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯(MEHP)对海水青鳉胚胎的内分泌干扰效应,本研究调查了海水青鳉胚胎受精后暴露于MEHP (0. 01,0. 1,和1 mg/L)直至胚胎发育晚期—受精后10 d(10 dpf),采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)分析MEHP对内分泌干扰标志通路雌激素受体(ER)、过氧化物增殖激活受体(PPAR)通路和芳香化酶(CYP19)基因的影响。结果显示:MEHP对海水青鳉胚胎存活和孵化没有显著影响,而各MEHP处理组显著诱导了编码雌激素受体(ERα)和PPAR受体(PPARα和PPARγ)的基因表达水平,0. 01和1 mg/L MEHP显著诱导了雌激素受体(ERγ)基因表达水平。MEHP暴露显著增加卵黄蛋白原(VTG)两个亚型—VTG1、VTG2,卵壳前体蛋白(Choriogenin,Chg)两个亚型—Chg H、Chg L,芳香化酶(CYP19)—CYP19a、CYP19b的基因表达水平。然而,MEHP暴露对海水青鳉胚胎编码雄激素受体的基因雄激素受体α亚型(androgen receptorα,ARα)的表达水平无显著影响。说明MEHP可通过上调芳香化酶CYP19的表达增加雄激素向雌激素的转化,增加的雌激素通过血液循环扩散进入靶组织和细胞结合雌激素受体ERs,导致ERs的上调(ERα和ERγ),使得雌激素受体激活、二聚化并结合大多数雌激素响应基因如VTG和Chg的雌激素响应元素(EREs),增加雌激素响应基因VTG和Chg的表达,增加VTG和Chg的合成从而产生内分泌干扰效应。

6-姜酚对MEHP致EA.hy926细胞DNA损伤的保护作用

目的研究邻苯二甲酸-单-乙基己酯(MEHP)是否通过氧化应激途径诱导EA.hy926细胞DNA损伤,探讨6-姜酚在DNA损伤中的作用和可能机制。方法应用MTT法检测MEHP(0、50、100、200和400μmol/L)所致EA.hy926细胞存活率的变化;按MEHP浓度分为4个组:0、50、100和200μmol/L;每组分为MEHP处理及MEHP与6-姜酚联合处理组。检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷酸(8-OHdG)水平的变化,观察细胞DNA的损伤程度、活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)水平及线粒体膜电位的改变情况。同时应用10μmol/L 6-姜酚预处理1 h,检测以上指标。结果用MEHP处理后的细胞存活率降低,ROS水平升高,线粒体膜电位降低,MDA、8-OHdG含量升高,DNA损伤明显;6-姜酚干预后可降低细胞死亡率,减轻DNA损伤及氧化应激程度。结论MEHP可引起EA.hy926细胞发生氧化性DNA损伤,6-姜酚可通过降低氧化应激保护EA.hy926细胞。

成年男性尿液邻苯二甲酸二乙基己酯代谢物与性腺激素关系的meta分析

目的采用meta分析评价成年男性尿液邻苯二甲酸二乙基己酯[di(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]代谢物邻苯二甲酸单-2-乙基己酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]与性腺激素的关系。方法通过国内外主要数据库,检索2016年3月以前发表的关于塑化剂与男性性腺激素包括雌二醇(E2)、睾酮(T)、游离睾酮(f T)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)及性激素结合球蛋白(SHBG)的文献,按照纳入排除标准筛选文献、提取资料并评价纳入研究的质量后,采用Rev Man 5.2软件进行meta分析。结果共纳入7篇英文文献,文献质量总体较好。meta分析结果显示,成年男性尿液MEHP暴露与E2、T、f T成负相关,合并rs及其95%CI分别为-0.09(-0.15^-0.03)、-0.11(-0.16^-0.06)、-0.16(-0.22^-0.10)。但经亚组分析发现,职业暴露男性的MEHP与E2成正相关,合并rs及其95%CI为0.18(0.02~0.34),均有统计学意义。结论 MEHP暴露在一定程度上可能会干扰成年男性性腺激素分泌,从而影响生殖功能。

塑料增塑剂DEHP环境污染水平、人体负荷及生物毒性的初步研究

目的为了初步研究邻苯二甲酸二乙基己酯(Di(2-ethylhexy1)phthalate,DEHP)的环境污染水平,采用气相色谱技术检测常用塑料容器浸提液中DEHP的含量,部分样品中检测出DEHP。方法为了初步调查DE-HP在人体中的负荷水平,运用高效液相色谱技术检测中学生尿液中DEHP主要代谢产物邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)的含量,其检出率达到60%。结果为了进一步探讨DEHP的生物毒性作用,以大鼠肝脏、肾脏细胞作为受试对象,以0、5、20、80μmol.L-1的DEHP溶液对其体外染毒1h,用丙二醛(malondia ldehyde,MDA)含量和DNA-蛋白质交联(DPC)系数的变化为测试指标。结论结果表明,随着DEHP浓度的升高,大鼠肝脏、肾脏细胞的MDA含量和DPC系数均上升,说明DEHP能够通过氧化损伤途径对大鼠肝脏、肾脏细胞造成损伤。