丙型肝炎病毒不同编码区重组抗原在抗体检测中的应用

目的 探讨丙型肝炎病毒 (HCV)不同编码区重组蛋白片段的免疫反应性及其在抗体检测中的应用。方法 分别以 4种HCV单片段抗原 (C、NS3、NS4或NS5 )检测抗 HCV抗体阳性血清 ;以 4种单片段抗原的混合物 (MIX)检测抗 HCV抗体阳性血清、大学生体检血清和抗 HCV抗体阴性质控血清。结果 90份抗 HCV抗体阳性血清中共有 75份可与一种或多种单片段抗原反应 ,阳性率分别为 70 .0 % (C)、6 1.1% (NS3)、5 2 .2 % (NS4 )、4 4 .4 % (NS5 ) ,其中仅与C、NS3、NS4和NS5一种抗原发生反应的分别有 8份、1份、2份和 3份血清标本 ;90份抗 HCV阳性血清经MIX抗原检测 ,阳性率为 83.3% (75 / 90 ) ;10 0份大学生血清和39份阴性质控血清经混合抗原检测均阴性。结论 HCV不同编码区重组蛋白片段有不同的免疫反应性 ,在发展抗 HCV抗体诊断试剂时 ,应采用各种不同编码区的混合抗原。

北方春大豆品系大豆花叶病的鉴定与抗原筛选

为了详细了解我国近几年来育成的北方春大豆品系对花叶病毒病的抗性表现,本研究通过分析2003～2007年的国家北方春大豆品种区域试验和生产试验病毒病2个流行株系(SMV1和SMV3)抗性鉴定数据,筛选兼抗SMV1号和SMV3号株系的抗原有19份,专抗SMV1号株系的抗原55份,专抗SMV3号株系的抗原20份,并发现辽宁省的新品系对2个株系的抗性表现都是最好的,尤其是表现抗病级别(R)的品系较多;而黑龙江省对2个株系的抗性表现都是最差的,尤其是对3号株系,大部分表现感病。建议黑龙江省今后要重视花叶病毒与抗性育种,可以考虑从辽宁和吉林两省引入抗原,进行品种选育和抗性改良。

用单克隆抗体作芜菁花叶病毒不同分离物外壳蛋白抗原结构的比较研究

用芜菁花叶病毒辽宁分离物（ＴｕＭＶ一ＬＮ）、山东分离物（ＴｕＭＶ一ＳＤ）和榨菜分离物（ＴｕＭＶ一ＺＣ）作抗原，分别免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，经脾细胞与ＳＰ２／Ｏ一Ａｇ１４骨髓细胞融合，共获得７个单克隆抗体分泌细胞株。为研究３个分离物的抗原差异，用胰蛋白酶消化ＴｕＭＶ的外壳蛋白（ＣＰ），分别形成４、２和１条降解带，经ＳＤＳ一１５％ＰＡＧＥ后，转移至硝酸纤维薄膜上，用３个分离物的抗血清和７种单隆抗体分别做Ｗｅｓｔｅｍ一ｂｌｏｔ，结果表明：多抗均能与降解带呈现不同程度的反应；２个单抗反应极弱或不反应；２个单抗与所有降解带反应；３个单抗与不同的降解带呈现的反应。３个ＴｕＭＶ分离物的病毒颗粒与多抗及单抗分别做ＥＬＩＳＡ，结果显示：同源抗血清与抗原的反应都高于与异源抗血清的反应，不同分离物作抗原制备的单抗有交叉反应，但与同源分离物的反应强度远远大于异源分离物。这些结果为ＴｕＭＶ分离物之间的鉴别提供了重要的抗原组成与结构信息。

单克隆抗体对小苍兰褪绿条纹花叶病毒及其决定簇的作用特性

采用杂交瘤技术，得到抗小苍兰褪绿色条纹花叶病毒（FCSMV）六个单克隆抗体P3、4A4，6B、，7A6，7D1和7DS。ELISA效价分别为1：1062－1：10^6。7A6攻7D1属于IgG1亚类，7D8和4A4分属IgG2a和IgG2b亚类，P3和6B1属于IgG2亚类。电镜观察单克隆抗体与病毒形成的复合物发现7D1能使病毒粒子发生严重裂断。6株单克隆抗体中P3，4A4、6B1对应于病毒外壳蛋白上的顺序决定簇。纯化的病毒外壳蛋白经酶裂解和改进的盘状电泳分离，得到八段与多克隆抗体反应的收集液。用顺序决定族的单克隆抗体检出P3对应的肽段22和4A4对应的肽段78。本文还讨论了7D1使病毒粒子发生断裂的原因和与病毒粒子表面结构的关系以及分离抗原决定族所在片段的意义。

甘蓝品系84025对芜菁花叶病毒11个分离物的抗性测定

室内人工接种表明,甘蓝品系84025对重庆地区芜菁花叶病毒的TuMV-1、TuMV-2、TuMV-6、TuMV-7和华北、东北、西北、华东地区的TuMV-3、TuMV-4、TuMV-5、TuMV-8、TuMV-9、TuMV-10、TuMV-11等11个分离物均表现抗病或高抗。该品系可作为我国十字花科蔬菜TuMV的抗源。

STUDIES ON MONOCLONAL ANTIBODIES OF TOBACCO MOSAIC VIRUS(Ⅲ)——THE RELATIONSHIP BETWEEN ANTIGENICITY AND GENOTYPE

Ten hybridomas were selected in 1984, which secreted monoclonal antibodies (McAb) specific to tobacco mosaic virus (TMV), and 14 TMV isolates were analysed by the 10 McAbs. Eight determinants were found in the coat protein of the isolates, they divided the 14 TMV isolates into 6 antigenic types. At the

慢性重型乙型肝炎患者的巨细胞病毒-pp65抗原与乙型肝炎病毒DNA、乙型肝炎e抗原及白细胞相关性研究

目的探讨慢性重型乙型肝炎患者CMV-pp65抗原与HBV DNA、HBe Ag及白细胞等因素的相关性。方法采用免疫组化二步法检测100例慢性重型乙型肝炎患者的CMV-pp65抗原,荧光定量PCR方法检测HBV DNA,酶联免疫吸附法测定HBe Ag,电阻抗法检测白细胞。结果 CMV-pp65抗原阳性组和阴性组HBV DNA病毒载量差异无统计学意义(Z=-1.185,P>0.05)。CMV-pp65抗原阳性组血清HBe Ag阳性14例,阴性组HBe Ag阳性31例,阳性组HBe Ag阳性率低于阴性组,差异有统计学意义(χ2=6.377,P<0.05)。CMV-pp65抗原阳性组血白细胞水平低于阴性组,差异有统计学意义(t=4.554,P<0.05)。结论 CMV-pp65抗原血症与血清HBe Ag阳性和白细胞水平呈负相关,与HBV DNA病毒载量无相关性。血清HBe Ag阴性和白细胞水平降低,可能是慢性重型乙型肝炎患者合并活动性CMV感染的危险因素之一。

利用马赛克策略设计靶向神经氨酸酶抗原的广谱流感疫苗

季节性流感病毒仍对全球公共卫生安全构成巨大威胁,对老人、儿童以及免疫功能低下人群的危害尤其严重。疫苗接种是目前应对季节性流感疫情重要手段,然而由于抗原转换和抗原漂移,常出现疫苗株与实际病毒流行株的不匹配现象,因此迫切需要开发一种安全高效的广谱流感疫苗来对抗季节性流感病毒和潜在的流感大流行。抗原设计是研发新型疫苗的关键前提,我们利用马赛克(mosaic)遗传算法设计研发了一种具有广谱抗原表位覆盖率的靶向流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)的新型抗原(Mosaic-NA)。该抗原在最大程度上涵盖了所有已报道甲型流感病毒的NA1蛋白与NA2蛋白序列中的细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocyte,CTL)抗原表位,并保留了天然蛋白空间构象。因此,这种新型抗原预期可有效诱导出靶向保守表位的CTL反应和抗体反应,从而为研发通用流感疫苗提供新思路和理论基础。

基因工程烟草花叶病毒在疫苗研发中的应用

烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV）是一种能感染植物的RNA病毒。因其基因组较小，易于进行遗传操作，且感染过程简单，适于改造成微小颗粒，故近年来已广泛用于疫苗研发。此文对TMV多肽表达及抗原展示系统的应用、疫苗开发中TMV操作的最新进展以及疫苗在动物模型中诱导体液和细胞免疫应答做一综述。